1、第1講微生物的培養(yǎng)與利用考綱要求1.微生物的分離和培養(yǎng)。2.某種微生物數量的測定。3.培養(yǎng)基對微生物的選擇 作用。4.利用微生物進行發(fā)酵來生產特定的產物以及微生物在其他方面的應用。5.運用發(fā)酵加工食品的基本方法。6.測定食品加工中可能產生的有害物質。£干磔I而謔)網絡構建n基礎必備1 .培養(yǎng)基營養(yǎng)成分的分析方法(i)雖然各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽。(2)在微生物所需要的化合物中需要量最大的是碳源，新陳代謝同化作用類型的劃分也是以是否能合成含碳有機物為依據，能合成含碳有機物的是自養(yǎng)型，反之則為異養(yǎng)型。(3)對異養(yǎng)微生物來說，含 C H、Q N的有機化合

2、物既是碳源又是氮源。2 .微生物的培養(yǎng)和純化(1)為了確定培養(yǎng)基的滅菌是否合格，微生物學實驗一般會設置空白對照：隨機取若干滅菌后的空白平板培養(yǎng)基在適宜條件下培養(yǎng)一段時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落生成。(2)觀察菌落需用固體培養(yǎng)基，因此培養(yǎng)基要添加瓊脂。(3)倒平板的溫度一般在 50c左右較為適宜，溫度過高會燙手，溫度過低培養(yǎng)基又會凝固。(4)平板需倒置，這樣既可減少培養(yǎng)基表面的水分揮發(fā)，又可防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基， 造成培養(yǎng)基污染。（5）平板劃線法只適用于微生物的提純，不適合進行計數，并且在最后一次劃線的末端處的菌種最純。（6）利用稀釋涂布平板法的計算公式估算水樣中的活菌數： （C + V）

3、XM其中 C代表某一稀釋 度下平板上生長的平均菌落數，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積 （mL）, M代表稀釋倍數。 （7）菌種可采用甘油管藏法長期保存。3 .利用微生物加工食品的誤區(qū)（1）誤認為泡菜制作過程中乳酸和亞硝酸鹽的含量都是先增加后減少。實際上，泡菜制作過程中乳酸的含量是先增加后保持穩(wěn)定。（2）誤認為果酒、果醋制作過程中都需要無氧條件。果醋制作過程中，利用醋酸菌的有氧呼吸， 因此需要有氧條件。易錯辨析1 .可以用血細胞計數板直接統(tǒng)計自來水中的大腸桿菌數（）2 .高壓蒸汽滅菌加熱結束時，打開放氣閥使壓力表指針回到零后，再開啟鍋蓋（）3 .腐乳制作中，控制發(fā)酵溫度的主要目的是調味（）4

4、 .腐乳制作后期加入香辛料和料酒有防腐作用（）5 .果酒發(fā)酵中期通入氮氣，酵母菌將從有氧呼吸轉變?yōu)闊o氧呼吸（）6 .果醋的發(fā)酵周期與實驗設定的溫度密切相關（）7 .通常使用液體培養(yǎng)基分離獲得細菌單菌落（）8 .在制作果酒的實驗中，將葡萄汁裝滿整個發(fā)酵裝置（）9 .泡菜制作的過程中，乳酸菌能在缺氧條件下產生乳酸（）答案 1.X 2. X 3. X 4. V 5. V 6. V 7. X 8. X 9. VB長句默寫1 .吃腐乳時，你會發(fā)現腐乳外部有一層致密的“皮”。這層“皮”是前期發(fā)酵時在豆腐表面上生長白菌絲（匍匐菌絲），它能形成腐乳的“體”，使腐乳成形。2 .無菌技術除了用來防止實驗室的培養(yǎng)物

5、被其他外來微生物污染外，還能有效避免操作者自身被微生物感染。3 .在平板劃線操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)的目的：操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死 上次劃線結束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時，接種環(huán)上的菌種直接來源于上次 劃線的末端。;核心考點突破'考點一微生物的培養(yǎng)、分離與計數要點整合1 .無菌操作技術 (1)常用的3種消毒方法一一煮沸消毒法、巴氏消毒法及化學藥劑消毒法。(2)常用的3種滅菌方法灼燒滅菌一一接種環(huán)、接種針等金屬器具；干熱滅菌一一主要針對玻璃器皿(吸管、培養(yǎng)皿)和金屬用具等；高壓蒸汽滅

6、菌一一主要針對培養(yǎng)基等。2 .平板劃線法、稀釋涂布平板法及顯微鏡直接計數法的區(qū)別(1)平板劃線法適用于微生物的純化，但不能用于微生物的計數。(2)稀釋涂布平板法常用于活菌計數，而顯微鏡直接計數法不能區(qū)分菌體的死活。(3)用稀釋涂布平板法進行計數時，為了保證結果準確，一般選擇菌落數在 30300間的平板進行計數。3 .選擇培養(yǎng)基及鑒別培養(yǎng)基的使用方法且生用胤尿素為唯一洞1源的培養(yǎng)基培養(yǎng) 外解尿素的細菌蜃上上述培養(yǎng)基中加入的紅指示劑，指 示劑變紅.則該細菌能分解尿素警-用富含外雄素的培岸基培奔纖維素外潴雨上述培養(yǎng)基中加入剛果紅一紅色鑒別亞合物；纖維素分解菌分解纖維素因其含纖維素酶)一紅色消失.出現

7、透明園(1)分離纖維素分解菌的實驗中先用選擇培養(yǎng)基，再用鑒別培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基中無凝固劑， 為液體培養(yǎng)基，以纖維素作為碳源的微生物可以正常生長，而其他絕大多數微生物不能正常 生長；利用液體培養(yǎng)基能使營養(yǎng)成分充分利用，以增加纖維素分解菌的濃度。(2)鑒別培養(yǎng)基含瓊脂， 為固體培養(yǎng)基，可在培養(yǎng)基上形成肉眼可見的菌落。剛果紅染色法就是應用的此類培養(yǎng)基。4 .微生物計數的“兩”種方法(1)直接計數法：顯微鏡直接計數法。(2)間接計數法：稀釋涂布平板法 (活菌計數法)，統(tǒng)計的菌落數往往比活菌的實際數目低。考向設計考向一 微生物的分離和培養(yǎng)技術1 . （2019 全國出，37）回答下列與細菌培養(yǎng)相關的問題

8、。（1）在細菌培養(yǎng)時，培養(yǎng)基中能同時提供碳源、氮源的成分是 （填“蛋白月東” “葡萄 糖”或“NaNQ”）。通常，制備培養(yǎng)基時要根據所培養(yǎng)細菌的不同來調節(jié)培養(yǎng)基的pH,其原因是。硝化細菌在沒有碳源的培養(yǎng)基上 （填“能夠”或“不能”）生長，原因是（2）用平板培養(yǎng)細菌時一般需要將平板 （填“倒置”或“正置”）。（3）單個細菌在平板上會形成菌落，研究人員通常可根據菌落的形狀、大小、顏色等特征來初步區(qū)分不同種的微生物，原因是（4）有些使用后的培養(yǎng)基在丟棄前需要經過 處理，這種處理可以殺死丟棄物中所有的 微生物。答案（1）蛋白臍 不同細菌生長繁殖所需的最適 pH不同 能夠 硝化細菌可以利用空氣中 的CO

9、作為碳源 （2）倒置（3）在一定的培養(yǎng)條件下，不同種微生物表現出各自穩(wěn)定的菌落 特征 （4）滅菌解析（1）細菌培養(yǎng)時常用牛肉膏蛋白月東培養(yǎng)基，牛肉膏能提供碳源、 氮源、磷酸鹽、維生素，蛋白陳能提供碳源、氮源、維生素，而葡萄糖不能提供氮源，NaNO不能為微生物提供碳源。不同細菌生長繁殖所需要的最適pH是不同的，應該根據培養(yǎng)細菌的不同來調節(jié)培養(yǎng)基的pH硝化細菌是化能自養(yǎng)型細菌，可以空氣中的CO為碳源，因此在沒有碳源的培養(yǎng)基上能夠生長。（2）在平板培養(yǎng)基上培養(yǎng)細菌時，一般需將平板倒置，這樣可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基。（3）不同種類的細菌所形成的菌落，在大小、形狀、光澤度、顏色、硬度、透明度等方

10、面具有一定的特征，不同種細菌在一定培養(yǎng)條件下表現出各自穩(wěn)定的菌落特征，可以作為菌 種鑒定的重要依據。（4）使用后的培養(yǎng)基在丟棄前需進行滅菌處理，以免污染環(huán)境。2. （2019 泉州市3月質檢）研究人員從大熊貓糞便中分離纖維素分解菌的實驗流程如下圖。 請據圖回答下列問題：(大旗貓誕便兩體闔生， 接種培養(yǎng)工養(yǎng)基aJ接種培芹進行步驟的目的是液體培養(yǎng)基A應含有纖維素粉，其作用是 （答出兩點）。 （2）步驟的操作是 , 以讓纖維素分解菌被。 （3）鑒定纖維素分解菌時，培養(yǎng)基用 染色。根據, 評定菌株的產酶能力。 答案（1）增加纖維素分解菌的濃度提供碳源、對纖維素分解菌有篩選作用（2）梯度稀釋（或“系列倍

11、數稀釋”）分散成單個細胞（3）剛果紅菌落產生的透明圈直徑大小解析（1）題圖中步驟是將大熊貓糞便接種到液體培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)，是為了增加纖維素分解菌的濃度；纖維素分解菌需要碳源，故要加入纖維素，另外只以纖維素為碳源可以作為篩 選纖維素分解菌的指標。 （2）題圖中步驟是對纖維素分解菌進行梯度稀釋處理，是為了讓纖維素分解菌分散成單個細胞。 （3）可以采用剛果紅染色法來鑒定纖維素分解菌，培養(yǎng)基需要用剛果紅染色。剛果紅會與纖維素形成紅色復合物，若纖維素被分解，則在菌落周圍會形成透明圈，故可以根據菌落產生的 透明圈直徑大小，評定菌株的產酶能力。 考向二運用培養(yǎng)基進行微生物的篩選和純化3. （2019 全國I

12、, 37）已知一種有機物 X（僅含有C、H兩種元素）不易降解，會造成環(huán)境污 染。某小組用三種培養(yǎng)基篩選土壤中能高效降解X的細菌（目標菌）。I號培養(yǎng)基：在牛肉膏蛋白月東培養(yǎng)基中加入X（5g/L）。n號培養(yǎng)基：氯化鈉（5g/L）,硝酸俊（3 g/L）,其他無機鹽（適量），X（15g/L）。 出號培養(yǎng)基：氯化鈉（5g/L）,硝酸俊（3 g/L）,其他無機鹽（適量），X（45g/L）。 回答下列問題：（1）在I號培養(yǎng)基中，為微生物提供氮源的是 。 n、出號培養(yǎng)基中為微生 物提供碳源的有機物是 。（2）若將土壤懸浮液接種在n號液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)一段時間后，不能降解X的細菌比例會，其原因是（3） n號培養(yǎng)

13、基加入瓊脂后可以制成固體培養(yǎng)基，若要以該固體培養(yǎng)基培養(yǎng)目標菌并對菌落進行計數，接種時，應采用的方法是 。（4）假設從出號培養(yǎng)基中得到了能高效降解X的細菌，且該菌能將X代謝為丙酮酸，則在有氧條件下，丙酮酸可為該菌的生長提供 和。答案（1）牛肉膏、蛋白陳 X （2）下降 不能BI解X的細菌因缺乏碳源不能增殖，而能降解X的細菌能夠增殖（3）稀釋涂布平板法（4）能量 合成其他物質的原料解析（1）牛肉膏蛋白臍培養(yǎng)基中， 牛肉膏、蛋白臍為微生物生長提供了氮源， 而n號、出號 培養(yǎng)基中除X外的其他物質均不含碳， 所以能為微生物提供碳源的有機物是 X。（2）因為n號培養(yǎng)基中碳源只有 X,屬于選擇培養(yǎng)基，只有能

14、降解 X的細菌才能增殖，而不能降解 X的細 菌因缺乏碳源不能增殖。（3）要對菌落進行計數，應采用稀釋涂布平板法進行接種。（4）在有氧條件下，丙酮酸參與細菌的有氧呼吸，可以為該菌的生長提供能量和合成其他物質的原料。4. （2019 福州質檢）研究表明，香菇含有多種有效藥用成分，其提取物有抗菌、 抗腫瘤等多種功能。為研究香菇中的酚類物質對不同菌種的抑菌活性，科研人員進行了如下實驗：（1）根據香菇中酚類物質具有 的特點，可采用萃取法提取。（2）制備大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、黑曲霉菌的菌液。（3）用 法將3種菌液分別接種在固體培養(yǎng)基上，使其均勻生長。（4）將浸透 的無菌圓紙片分別貼在各個平板上。（5）

15、將完成步驟（4）的平板置于恒溫培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)，不同平板的培養(yǎng)溫度不一定相同，原因是（6）測量抑菌圈直徑，結果如下:項目抑菌圈直徑（mm）大腸桿菌金黃色葡萄球菌黑曲霉菌香菇酚類物質7.798.930實驗結果說明香菇酚類物質對 沒有明顯的抑制作用，通過抑菌圈直徑可以判斷香菇酚類物質的抑菌活性高低的原理是 為使實驗更具說服力，應如何設計對照組？ 答案（1）易溶于有機溶劑（3）稀釋涂布平板（4）香菇酚類物質（5）不同微生物的最適生長溫度可能不同（6）黑曲霉菌 香菇酚類物質在平板上擴散使周圍的微生物生長受到抑制，抑菌能力越強，抑菌圈直徑越大同時將用無菌水浸泡的相同大小的無菌圓紙片分別貼于接種了 3種菌

16、液的培養(yǎng)基上解析（1）根據香菇酚類物質易溶于有機溶劑的特點，可采用萃取法提取。（3）微生物常見的接種方法包括平板劃線法和稀釋涂布平板法。用稀釋涂布平板法將 3種菌液分別接種在固體培養(yǎng)基上，使其均勻生長。（4）將浸透香菇酚類物質的無菌圓紙片分別貼在各個平板上。（5）將貼有浸透香菇酚類物質的無菌圓紙片的各個平板置于恒溫培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)，由于不同微生物的最適生長溫度可能不同，因此不同平板的培養(yǎng)溫度不一定相同。（6）從實驗數據看出，黑曲霉菌的抑菌圈直徑為0,說明香菇酚類物質對黑曲霉菌沒有明顯的抑制作用。通過抑菌圈直徑可以判斷香菇酚類物質抑菌活性高低的原理是香菇酚類物質在平 板上擴散使周圍的微生物生長受

17、到抑制，抑菌能力越強，抑菌圈直徑越大。為使實驗更具說 服力，應設計對照組，即同時將用無菌水浸泡的相同大小的無菌圓紙片分別貼于接種了3種菌液的培養(yǎng)基上。考向三微生物的計數5. （2019 廣東汕頭質檢）某生物興趣小組的同學計劃調查某快餐店的冰塊中大腸桿菌的含 量。具體實驗步驟如下：第一步：配制培養(yǎng)基（成分：蛋白月東、氯化鈉、乳糖、水、X和Y）。第二步：制作無菌平板。第三步：設置空白對照組和實驗組，對照組接種，實驗組接種。第四步：將各組平板置于 37c恒溫箱中培養(yǎng)一段時間，統(tǒng)計各組平板上菌落的平均數。 回答下列問題：（1）培養(yǎng)基中的乳糖可以為大腸桿菌提供 。 為了方便大腸桿菌的鑒定，需要在培養(yǎng)基中

18、添加成分 X,在該培養(yǎng)基表面，大腸桿菌的菌落呈現 （填顏色）。為了完成步驟二，該培養(yǎng)基中的成分丫通常是 O（2）完善步驟三是 ; 是 O （3）在純化大腸桿菌前， 將滅菌后的空平板先培養(yǎng)一段時間，目的是。劃線的某個平板培養(yǎng)后，第一劃線區(qū)域的劃線長滿了菌落，第二劃線區(qū)域卻無菌落產生，可能的 原因是（4）該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進行靜置培養(yǎng)， 另一部分進行振蕩培養(yǎng)。結果發(fā)現：振蕩培養(yǎng)的細菌比靜置培養(yǎng)的細菌生長速度快。分析其原因是振蕩培養(yǎng) 能提高培養(yǎng)液中 的含量和 的利用率。答案（1）碳源 伊紅美藍 黑色 瓊脂（2）適量無菌水取自該快餐店的等量冰塊水（3）檢測培養(yǎng)基平板滅菌

19、是否合格接種環(huán)灼燒后未冷卻便進行劃線（或劃線未從第一區(qū)域末端開始）（4）氧氣營養(yǎng)物質解析（1）乳糖是糖類物質，不含氮元素，所以培養(yǎng)基中的乳糖可為大腸桿菌提供碳源。鑒定大腸桿菌時，在培養(yǎng)基中添加的成分X是伊紅美藍，大腸桿菌的菌落呈現黑色。制作無菌平板是制作固體培養(yǎng)基，所以該培養(yǎng)基中還應加入瓊脂，即成分 Y是瓊脂。（2）本實驗的目的是調查某快餐店的冰塊中大腸桿菌的含量，故實驗中對照組應接種適量無菌水，實驗組應接種取自該快餐店的等量冰塊水。（3）為了檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格，常在純化大腸桿菌前，將滅菌后的空平板先培養(yǎng)一段時間，若平板上有菌落生長，說明滅菌不合格。接種環(huán)在平板內的每一次劃線前，都要先

20、灼 燒滅菌，待冷卻后劃線，而且要從上一次劃線末端而非空白處劃線，若不冷卻會燙死上次劃 線末端的菌株，使以后的劃線處沒有菌落生長，若從空白處劃線也是不會有菌落生長。所以 劃線的某個平板培養(yǎng)后，第一劃線區(qū)域的劃線長滿了菌落，第二劃線區(qū)域卻無菌落產生，可 能的原因是接種環(huán)灼燒后未冷卻便進行劃線（或劃線未從第一區(qū)域末端開始 ）。（4）振蕩培養(yǎng)可增加溶液中氧氣的含量以及增強菌體與營養(yǎng)物質的接觸，提高營養(yǎng)物質的利用率，從而使振蕩培養(yǎng)的細菌比靜置培養(yǎng)的細菌生長速度快。6. 手機上的細菌真的比馬桶還多嗎？就此問題，甲、乙兩位同學進行了下列實驗 （如圖）。請回答下列相關問題:固定面枳，用比曲棉點樣一（1）該實驗

21、需制備培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中一般都含有水、碳源、 。（2）據圖，兩位同學均采用 法接種，該方法需要 （多選）。A.接種環(huán)B.酒精燈C.移?葭管D.涂布器E.無菌水（3）通過觀察菌落的 ，可知手機屏幕和馬桶按鈕上都存在多種微生物。兩位同學的實驗操作均正確且完全一致，但實驗結果卻截然不同，你認為原因是 （4）按圖操作取樣面積，實驗員測定某手機屏幕的細菌數量，將10mL菌懸液進行梯度稀釋,分別取0.1mL稀釋倍數為102的樣品液接種到三個培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時間后，統(tǒng)計菌落數 分別為48、50、52,則該手機屏幕的細菌數為 個/cm2。該實驗對照組該如何設置？答案（1）氮源和無機鹽（2）稀釋涂布平板BCDE

22、 （3）形態(tài)、大小 手機的取樣和馬桶的取樣都不相同（4）2X10 4取培養(yǎng)基涂布0.1mL無菌水進行培養(yǎng)解析（1）微生物培養(yǎng)基的成分一般包括水、碳源、氮源和無機鹽。（2）根據題圖分析，該實驗的接種方法為稀釋涂布平板法，選項中該方法用到的工具有酒精燈、移液管、涂布器、無菌水。（3）不同的菌落形態(tài)、大小不同，圖示兩位同學調查的手機屏幕和馬桶按鈕上都有多種 形態(tài)的菌落，即存在多種微生物。兩位同學實驗操作均正確且完全一致，但實驗結果截然不同，可能是因為手機的取樣和馬桶的取樣都不相同。(4)根據提供的數據進行計算，某手機屏幕的細菌數=(48 + 50+52)+3X 10 2+0.1 X 10+(5 X5

23、)=2X 10 4(個/cm2)。考點二微生物的利用要點整合1 .理清“4”種傳統(tǒng)發(fā)酵食品的技術食品菌種呼吸類型原理溫度果酒酵母菌兼性厭氧有氧呼吸大量繁殖，無氧呼吸產生酒精18 25 c果醋醋酸菌有氧糖(酒精)一醋酸30 35 c腐乳毛霉等有氧蛋白酶、脂肪酶水解蛋白質、脂肪15 18 c泡菜乳酸菌無氧無氧呼吸產生乳酸一2 .控制雜菌的“四大措施”(1)通過發(fā)酵條件控制雜菌無氧發(fā)酵時的無氧環(huán)境可以抑制好氧菌。乳酸菌發(fā)酵、酒精發(fā)酵形成的酸性環(huán)境抑制雜菌繁殖。(2)利用鹽控制雜菌：如腐乳的制作。(3)利用酒精控制雜菌：如果酒、腐乳的制作。(4)利用香辛料控制雜菌：如腐乳、泡菜的制作。3 .乳酸菌數量

24、、乳酸含量、亞硝酸鹽含量隨發(fā)酵時間變化的曲線乳酸菌數量 乳酸含尿加硝酸鹽含量EL LZ Ez口 發(fā)醉時間 口 發(fā)醒時間 ° 發(fā)醉時間考向設計考向 利用微生物進行發(fā)酵生產食品7 . (2017 全國n , 37)豆豉是大豆經過發(fā)酵制成的一種食品。為了研究影響豆豉發(fā)酵效果的因素，某小組將等量的甲、乙兩菌種分別接入等量的 A、B兩桶煮熟大豆中并混勻，再將兩者置于適宜條件下進行發(fā)酵，并在32h內定期取樣觀測發(fā)酵效果。回答下列問題：(1)該實驗的自變量是、。(2)如果發(fā)現發(fā)酵容器內上層大豆的發(fā)酵效果比底層的好，說明該發(fā)酵菌是 （3）如果在實驗后，發(fā)現32h內的發(fā)酵效果越來越好，且隨發(fā)酵時間呈直

25、線上升關系，則無法確定發(fā)酵的最佳時間；若要確定最佳發(fā)酵時間，還需要做的事情是 （4）從大豆到豆豉，大豆中的成分會發(fā)生一定的變化，其中，蛋白質轉變?yōu)?,脂肪轉變?yōu)椤４鸢福?）菌種 發(fā)酵時間（2）好氧菌 （3）延長發(fā)酵時間，觀測發(fā)酵效果，最好的發(fā)酵效果所對應的時間即為最佳發(fā)酵時間（4）氨基酸和肽 脂肪酸和甘油解析（1）由題意可知該實驗的自變量是菌種和發(fā)酵時間。（2）如果發(fā)現發(fā)酵容器內上層大豆的發(fā)酵效果比底層的好，說明該發(fā)酵菌是好氧菌。（3）如果在實驗后，發(fā)現32h內的發(fā)酵效果越來越好，且隨發(fā)酵時間呈直線上升關系，則無法確定發(fā)酵的最佳時間；若要確定最佳發(fā)酵 時間，還需要做的事情是延長發(fā)酵時間，觀測發(fā)

26、酵效果，最好的發(fā)酵效果所對應的時間即為最佳發(fā)酵時間。（4）從大豆到豆豉，大豆中的成分會發(fā)生一定的變化，其中，蛋白質轉變?yōu)榘被岷碗模巨D變?yōu)橹舅岷透视汀? .請回答與釀酒和制醋有關的問題：（1）紅曲主要含有紅曲霉菌和酵母菌等微生物， 具有糖化和發(fā)酵的雙重作用，為了獲得優(yōu)良的 釀酒紅曲，將紅曲制成較稀濃度的懸液后，可通過 或 法分離出單菌落。（2）大米經蒸煮、紅曲霉菌糖化后，用食用酵母進行發(fā)酵，發(fā)酵完畢后得到新鮮紅曲酒，酒中乙醇濃度不超過15%其主要原因是當發(fā)酵液中的乙醇濃度超過16%時，（3）影響紅曲酒風味的主要因素有 等環(huán)境因素。（4）在紅曲醋生產工藝中，將適量的紅曲酒、水、醋酸菌等混合

27、，醋酸生產過程的反應式是。醋酸發(fā) 酵時要始終保持有氧狀態(tài)，原因是 。答案（1）稀釋涂布平板法平板劃線 （2）會對酵母菌產生毒害作用（3）溫度、pH、氧氣含量（4）C 2H5OF+ QfCHCOOH H2O 醋酸菌是好氧菌解析（1）據試題分析可知，為了獲得優(yōu)良的釀酒紅曲，將紅曲制成較稀濃度的懸液后，可通過稀釋涂布平板法或平板劃線法分離出單菌落。（2）酵母菌發(fā)酵的產物是乙醇和二氧化碳，其中較高濃度的乙醇（乙醇濃度超過16%）對酵母菌有毒害作用，因此用食用酵母進行發(fā)酵，發(fā) 酵完畢后得到新鮮紅曲酒，酒中乙醇濃度不超過15% （3）紅曲霉菌屬于真菌，用紅曲霉菌發(fā)酵可得到紅曲酒，影響紅曲霉菌生長繁殖的環(huán)境

28、因素都會影響紅曲酒的風味，其發(fā)酵需要適 宜的溫度、pH氧氣含量等環(huán)境因素。（4）在紅曲醋生產工藝中，將適量的紅曲酒、水、醋酸菌等混合，醋酸生產過程的反應式是GHOH QfCHCOOH HO。因為醋酸菌是好氧菌，因此醋酸發(fā)酵時要始終保持有氧狀態(tài)。9 .請回答下列有關發(fā)酵食品制作的問題：（1）在泡菜腌制的過程中， 要注意控制腌制的時間、 和食鹽的用量；最后要向壇蓋邊沿的水槽中注滿水，這一操作的目的是 （2）在傳統(tǒng)腐乳制作過程中，所需的微生物來源于;而現代的腐乳生產是在嚴格 的條件下，將優(yōu) 良的毛霉菌種直接接種在豆腐上，這樣可以避免其他菌種的污染。（3）某同學制作藍莓果醋時，定時通過充氣口充氣，原因

29、是另一位同學在藍莓果汁中直接加入某品牌活性酵母，之后先向發(fā)酵罐中通入一段時間的無菌空氣，這一做法的目的是（4）若制作失敗，則在變酸的酒的表面觀察到的菌膜是由 大量繁殖而形成的， 其可在缺少糖源時將乙醇變?yōu)?,然后變?yōu)榇姿帷４鸢?（1）溫度保證壇內乳酸菌發(fā)酵所需的無氧環(huán)境（2）空氣中的毛霉抱子無菌（3）醋酸菌是好氧菌，生產醋酸時需要氧氣參與在有氧條件下，使酵母菌迅速繁殖，數量增加（4）醋酸菌乙醛解析（1）在泡菜腌制的過程中， 要注意控制腌制的時間、 溫度和食鹽的用量； 最后要向壇蓋 邊沿的水槽中注滿水，其目的是保證壇內乳酸菌發(fā)酵所需的無氧環(huán)境。（2）在傳統(tǒng)腐乳制作過程中，所需的微生物來源于空氣中

30、的毛霉抱子；現代的腐乳生產是在嚴格無菌的條件下接種優(yōu)良的毛霉菌種。（3）制作藍莓果醋時，定時通過充氣口充氣的原因是醋酸菌是好氧菌，生產醋酸時需要氧氣參與。在藍莓果汁中直接加入某品牌活性酵母后，先向發(fā)酵罐中通入一段時 間的無菌空氣，其目的是在有氧條件下，使酵母菌迅速繁殖，數量增加。（4）若制作失敗，在變酸的酒的表面觀察到的菌膜是由醋酸菌大量繁殖而形成的，其可在缺少糖源時將乙醇變?yōu)?乙醛，然后變?yōu)榇姿帷?0 .太源井曬醋是自貢市的名優(yōu)土特產品，該產品面市已有150多年的歷史。中草藥制曲和天然發(fā)酵是太源井曬醋與其他食醋的區(qū)別。下表表示太源井曬醋不同陳釀方法下的一些理化 指標。據表回答下列問題：項目自

31、然陳釀恒溫陳釀總酸（以乙酸計）,（g/100mL） >6.504.20可溶性無鹽固形物，（g/100mL） >20.005.00不揮發(fā)酸（以乳酸計）,（g/100mL） >3.502.00還原糖(以葡萄糖計),(g/100mL) >3.002.00(1)醋的制作需要以 作為菌種，請寫出一個表示制醋原理的反應式 從生態(tài)系統(tǒng)的成分看，該微生物屬于生態(tài)系統(tǒng)中的 。(2)傳統(tǒng)釀醋工藝中，主要是依靠自然界中的菌種，其生產性能不穩(wěn)定且出醋率低，因而要對菌種進行純化培養(yǎng)。純化菌種可用 法或稀釋涂布平板法將樣本接種于固體培養(yǎng)基 表面，經過選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得。接種前需隨機選取若干滅

32、菌后的空白平板先行培養(yǎng)一段時間，其目的是。(3)恒溫陳釀時，需將溫度控制在 范圍內；由表中數據可知 法可提高曬醋質量。(4)用一定的方法進行脫色處理后， 食醋中的還原糖可用 試劑檢測，在水浴加 熱的條件下，該試劑與還原糖發(fā)生反應產生的現象是 。答案 (1)醋酸菌 QHOH O>CH3COOH H2O或(CH2O) + Q>CH3COOH 分解者(2)平板劃線檢測培養(yǎng)基平板是否已徹底滅菌(3)3035c自然陳釀(4)斐林 出現科紅色沉淀解析(1)醋的制作使用的微生物是醋酸菌。當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將糖分解成醋酸，其反應式為(CH2O)+Q-CHCOOH當氧氣充足、缺少糖源時，醋

33、酸菌可以先將乙醇變?yōu)橐胰?再將乙醛變?yōu)榇姿幔浞磻綖?QH5OM Q-CHCOOHH2Q醋酸菌屬于生態(tài)系統(tǒng)中的分解者。 (2)分離純化菌種，常用固體培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，采用平板劃線法或稀釋涂布平板法進行接種。為檢測培養(yǎng)基平板是否已徹底滅菌，接種前需隨機選取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)一段時間。(3)醋酸菌的最適生長溫度為3035C,因此在恒溫陳釀時，需將溫度控制在 3035c范圍內。表中信息顯示：自然陳釀的相應數值均高于恒溫陳釀，說明自然陳釀法可提高曬醋質量。(4)還原糖與斐林試劑發(fā)生作用，在水浴加熱的條件下會生成磚紅色沉淀，據此可用斐林試劑檢測食醋中的還原糖。:備考技能提升1. (2019

34、全國H, 37)物質 W是一種含氮有機物，會污染土壤。W在培養(yǎng)基中達到一定量時培養(yǎng)基表現為不透明。某研究小組欲從土壤中篩選出能降解W勺細菌(目標菌)。回答下列問題：(1)要從土壤中分離目標菌，所用選擇培養(yǎng)基中的氮源應該是 。(2)在從土壤中分離目標菌的過程中，發(fā)現培養(yǎng)基上甲、乙兩種細菌都能生長并形成菌落(如圖所示）。如果要得到目標菌， 應該選擇 菌落進一步純化，選擇的依據是（3） 土壤中的某些微生物可以利用空氣中的氮氣作為氮源。若要設計實驗進一步確定甲、乙菌能否利用空氣中的氮氣作為氮源，請簡要寫出實驗思路、預期結果和結論，即（4）該小組將人工合成的一段 DNA專入大腸桿菌，使大腸桿菌產生能降解

35、 W的酶（酶E）。為了 比較酶E與天然酶降解 WT歸力的差異，該小組擬進行如下實驗，請完善相關內容。在含有一定濃度 W的固體培養(yǎng)基上，A處滴加含有酶E的緩沖液，B處滴加含有相同濃度天 然酶的緩沖液，C處滴加,三處滴加量相同。一段時間后，測量透明圈的直徑。若 C處沒有出現透明圈，說明 ; 若A、B處形成的透明圈直徑大小相近， 說明。答案（1）W （2）乙 乙菌落周圍出現透明圈，說明乙菌能降解W （3）將甲、乙菌分別接種在無氮源培養(yǎng)基上，若細菌能生長，則說明該細菌能利用空氣中的氮氣作為氮源（4）緩沖液緩沖液不能降解 W酶E與天然酶降解W的能力相近解析（1）要從土壤中分離出能降解含氮有機物W的目標菌

36、，所用選擇培養(yǎng)基應以該特定物質W為氮源。（2）題圖信息顯示，在乙菌落周圍出現透明圈，說明乙菌能降解 W若要得到目標 菌，應該選擇乙菌落進一步純化。（3）若要通過設計實驗確定甲、乙兩種細菌能否利用空氣中的氮氣作為氮源，需將甲、乙菌分別接種在無氮源培養(yǎng)基上，若某細菌能生長，則說明該細菌能利用空氣中的氮氣作為氮源。 （4）實驗應遵循單一變量原則， 故C處應滴加緩沖液。 一段時間后，測量透明圈的直徑。若 C處沒有出現透明圈，說明緩沖液不能降解 vy若A、B 處形成的透明圈大小相近，說明酶 E與天然酶降解 W的能力相近。2. （2019 遼寧葫蘆島一模）在冬季部分城市出現嚴重霧霾，這與野外焚燒秸稈有一定

37、關系。 微生物學家試圖通過微生物降解技術使秸稈盡快腐爛，以增加土壤肥力并緩解環(huán)境污染。請 回答下列有關問題： 專家研制的降解秸稈的“催腐劑”是十余種能分解纖維素的霉菌、細菌和酵母菌的組合。其中 在細胞結構上與其他兩者不同。（2）纖維素酶是一種復合酶， 其中 可以將纖維素分解為二糖， 可以將二糖分解為葡萄糖。（3）微生物學家為從發(fā)黑的樹干上分離出有分解纖維素能力的高產菌株而制備了選擇培養(yǎng)基， 將菌液進行一系列 ,并涂布到選擇培養(yǎng)基上，從而得到單個菌落，再采用法進行鑒定，得到下圖所示菌落。那么，圖中降解纖維素能力最強的菌株是(填圖中序號)。(4)為確定得到的是纖維素分解菌，還需要進行發(fā)酵產纖維素酶的實驗，其發(fā)酵方法有 和 兩種。答案 細菌(2)Ci酶、CX酶