1、冠心病患者血漿氧化修飾低密度脂蛋白與血清一氧化氮的變化及相關(guān)性研究摘要目的：探討冠心病(CHD)患者血漿氧化修飾低密度脂蛋白(OX-LDL)與血清一氧化氯(NO)的變化及相關(guān)關(guān)系。方法：測(cè)定60例CHD患者及40例正常對(duì)照者血漿OX-LDL及血清NO水平，分析二者變化的關(guān)系。結(jié)果：CHD患者血漿OX-LDL水平顯著高于正常對(duì)照組，血清NO水平顯著低于正常對(duì)照組(均P0.001)，二者呈顯著負(fù)相關(guān)。結(jié)論：CHD患者OX-LDL水平升高，NO分泌減少，二者相互影響，共同參與CHD的發(fā)生發(fā)展過(guò)程。關(guān)鍵詞冠心病氧化修飾低密度脂蛋白一氧化氮 Relationship between changes of

2、 the levels of plasma oxidizedlow density lipoprotein and serum nitric oxide in patientswith coronary heart diseaseChen Xueyun*Ma XingyiLiu Chuanminet al(*Dingtao County Peoples Hospital,Shandong 274100)AbstractObjective:To investigate the relationship between changes of the le-vels of plasma oxidiz

3、ed low density lipoprotein (OX-LDL) and serum nitric oxide (NO) in patients with coronary heart disease (CHD).Method:The levels of plasma OX-LDL and serum NO weremeasured in 60 patients with CHD and 40 normal control subjects (NS).Relationship between changes of the levels of OX-LDL and NO was studi

4、ed by analysis of linear correlation.Result:The level of plasma OX-LDL was significantly higher,while the level of serum NO wasmarkedly lower in patients with CHD than those of controls.The analysis of linear correlation showed the level of plasma OX-LDL was negatively correlated with that of serum

5、NO (P0.01).Conclusion:The results suggest that the level of plasma OX-LDL is higher and basil release of NO is lower in patients with CHD.Both higher OX-LDL and lower NOmay play an important role in the progression of CHD.Key wordsCoronary hear diseaseOxidized low density lipoproteinNitric oxide 氧化修

6、飾低密度脂蛋白(OX-LDL)在動(dòng)脈粥樣硬化性心腦血管疾病發(fā)生發(fā)展過(guò)程中起著十分重要的作用。內(nèi)皮細(xì)胞損傷被認(rèn)為是動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生的始動(dòng)環(huán)節(jié)，OX-LDL對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞具有毒性作用，且可直接滅活內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生的一氧化氮(NO)。本文旨在探討冠心病(CHD)患者血OX-LDL與NO水平的變化及其相關(guān)關(guān)系。1對(duì)象和方法1.1對(duì)象CHD組：60例，男34例，女26例，年齡4072(平均60.5)歲，均符合1979年WHO CHD的診斷標(biāo)準(zhǔn)，其中心絞痛24例19例行冠狀動(dòng)脈(冠脈)造影檢查證實(shí)至少有1支冠脈狹窄50%，陳舊性心肌梗死21例，急性心肌梗死15例，均除外高血壓病、糖尿病及其它肝、腦、腎臟疾病。對(duì)照

7、組：40例，男22例，女18例，年齡4467(平均61.7)歲，為本院健康體檢隨機(jī)抽樣，經(jīng)詢(xún)問(wèn)病史、體檢、心電及其它實(shí)驗(yàn)室檢查，除外心、腦、肝、腎等疾病者。兩組受試者兩周內(nèi)未服用抗氧化劑。1.2方法所有受試者均空腹12 h以上，于早晨69時(shí)采肝靜脈血12ml，立即加入備有抗氧化及抗凝的試管中，搖勻，分離血漿，4冰箱保存2周內(nèi)或-30冰箱保存2個(gè)月內(nèi)測(cè)定OX-LDL；另取肘靜脈自凝血3ml，分離血清，-30冰箱保存6個(gè)月內(nèi)測(cè)定NO。OX-LDL檢測(cè)采用雙抗體夾心法(ELISA)1。抗OX-LDL單抗包被酶標(biāo)板，與待測(cè)血漿中OX-LDL結(jié)合，加酶標(biāo)抗體，孵育，洗去過(guò)量酶結(jié)合物，加底物顯色，用酶標(biāo)儀

8、在492 nm波長(zhǎng)下比色，讀取A(舊稱(chēng)OD)值，查標(biāo)準(zhǔn)曲線得待測(cè)血漿OX-LDL濃度。試劑盒由上海榮盛生物試劑廠提供，批內(nèi)變異系數(shù)5.4%，批間變異系數(shù)8.2%。血清NO微量測(cè)定參照文獻(xiàn)2，3進(jìn)行，并略加改進(jìn)。取血清500l4、10000r/min離心15min，取上清液100l，加Griess試劑和4mol/L鹽酸各100l，室溫反應(yīng)10min，用酶標(biāo)儀在570nm處讀取光密度，同時(shí)以亞硝酸鹽作標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果以NO轉(zhuǎn)變?yōu)閬喯跛猁}表示，單位為mg/L。1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理數(shù)據(jù)以s表示，兩均數(shù)比較用檢驗(yàn)，OX-LDL與NO行直線相關(guān)分析。2結(jié)果CHD組及正常對(duì)照組血OX-LDL及NO測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1。

9、以O(shè)X-LDL為因變量，NO為自變量行直線相關(guān)分析，結(jié)果顯示OX-LDL與NO呈顯著負(fù)相關(guān)(r=-0.5728，P0.001)。表1兩組與OX-LDL及NO測(cè)定值mg/L組別OX-LDLNOCHD組0.6920.241*7.443.17*對(duì)照組0.4510.14915.284.55與對(duì)照組比較*P0.001 3討論本文結(jié)果顯示，CHD患者血清NO水平顯著降低，提示其存在內(nèi)皮功能失調(diào)。已有報(bào)道，動(dòng)脈粥樣硬化或高脂血癥患者冠脈對(duì)內(nèi)皮依賴(lài)性血管擴(kuò)張劑乙酰膽堿反應(yīng)異常，本文結(jié)果與此相符。本文結(jié)果還顯示，正常人及CHD患者血漿中均存在OX-LDL，而CHD組OX-LDL水平則顯著升高，與Bui等4報(bào)道一

10、致。OX-LDL可顯著抑制內(nèi)皮細(xì)胞NO合成酶的基因表達(dá)，抑制內(nèi)皮細(xì)胞NO的合成，且可直接滅活內(nèi)皮細(xì)胞生成的NO，表明OX-LDL較未氧化的低密度脂蛋白(LDL)更能破壞血管對(duì)乙酰膽堿的舒縮反應(yīng)。Anderson等報(bào)道，內(nèi)皮依賴(lài)的冠狀血管舒縮反應(yīng)性與LDL對(duì)氧化的敏感性有關(guān)，氧化應(yīng)激致LDL發(fā)生氧化修飾形成OX-LDL是動(dòng)脈粥樣硬化及高脂血癥患者內(nèi)皮功能失調(diào)的一項(xiàng)重要因素，與本文觀點(diǎn)一致。本文結(jié)果亦顯示，CHD患者血清NO水平與OX-LDL水平呈顯著負(fù)相關(guān)，提示OX-LDL與NO可能共同參與CHD的發(fā)病過(guò)程，CHD患者內(nèi)皮功能失調(diào)可能與OX-LDL水平升高有關(guān)。因此，在CHD治療過(guò)程中適當(dāng)應(yīng)用抗

11、氧化劑增加機(jī)體抗氧化能力、抑制LDL的氧化，可能對(duì)保護(hù)CHD患者內(nèi)皮功能具有重要意義。作者單位：田慶印：定陶縣人民醫(yī)院(山東荷澤，274100)陳雪云馬興義劉傳民：山東醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院心內(nèi)科參考文獻(xiàn)1王華粱，陳思聰，張國(guó)元，等.雙抗夾心法檢測(cè)血漿氧化修飾型低密度脂蛋白.上海醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志，1994，9：1351392Termin A,Hoffmanm,Bing RJ.A simplifiedmethod for the determination of nitric oxide in biological solutions.Life Science,1992,51:162116293Green LC,Wagner DA,Glogowski J,et al.Analysis of nitrate,nitite and 15N nitrate in biolo-gical fluids.Anal Biohem,1979,9