1、延胡索酸泰妙菌素掩味微囊的制備及其性質(zhì)的研究 作者：韓靜 李智 劉長波 禮彤 岑琴 潘岳峰【摘要】 目的 利用噴霧干燥法制備延胡索酸泰妙菌素掩味微囊，并對微囊的性質(zhì)進行研究，為工業(yè)化生產(chǎn)提供最優(yōu)的處方條件。方法 以包封率為考察指標(biāo)，通過正交設(shè)計篩選出最優(yōu)處方，并且對微囊的掩味效果、吸濕性、流動性等性質(zhì)做了研究。本研究還以包封率、吸濕性、流動性等因素為指標(biāo)，比較了噴霧干燥掩味法與傳統(tǒng)溶劑法的掩味效果。結(jié)果 明膠與原料藥質(zhì)量比21時微囊的掩味效果最佳，并在乳液中加入2% 環(huán)糊精和1%蓖麻油改善其流動性。通過正交實驗考察在特定的噴霧干燥設(shè)備條件下的最佳掩味工藝為進風(fēng)溫度170、霧化壓力0.5Mpa、

2、進料速度600ml/h，并測得最佳處方的臨界相對濕度為55%60%。結(jié)論 利用以上實驗方法可以掩蓋延胡索酸泰妙菌素的難聞性氣味，提高動物服藥順應(yīng)性，給服用帶來便利。 【關(guān)鍵詞】 噴霧干燥； 掩味； 泰妙菌素 ABSTRACT Objective To prepare tiamulinfumarate masking microcapsule by spray drying, and study the characterization of microcapsule, and supply optima formula for industrialization. Methods The op

3、timal formulation was selected by orthogonal design with entrapment efficiency as indicatrix. The hydroscopicity and flowability of the microcapsule were investigated carefully. The masking effect was investigated by comparing the spray drying to solvent method for the entrapment efficiency, hydrosc

4、opicity and flowability as indicatrix. Results The smell can be masked when the gelatin compared with drug was 21. The fluidity was improved by adding 2% of CD and 1% of castor oil. The optimal process is as follows: inlet airflow 170; atomization pressure 0.5Mpa; feed material speed 600ml/h. The cr

5、itical relative humidity of the best formulation is 55%60%. Conclusion The method can mask the smell of tiamulinfumarate, raise the complaiance of animal for taking medicine and provide convenience for disease. KEY WORDS Spray drying; Masking smell; Tiamulin 泰妙菌素(tiamulin，thiamutin，dynamutilin)結(jié)構(gòu)式見F

6、ig.1，又稱硫姆林、泰妙霉素、泰妙靈、枝原凈、泰牧霉素，實際使用多為泰妙菌素延胡索酸鹽。泰妙菌素為動物專用抗生素，其抗菌作用為抑制感受性細菌蛋白質(zhì)的合成，作用于細菌體內(nèi)的核糖體，主要表現(xiàn)為抑菌作用，在高濃度下才有殺菌作用。泰妙菌素對多種革蘭陽性菌及支原體(Mycoplasma)有特效，特別是對金葡菌、鏈球菌、多種霉及某些螺旋體具有較強的作用1。泰妙菌素可有效預(yù)防和治療豬的地方流行性肺炎(氣喘病)、支原體關(guān)節(jié)炎、防線桿菌胸膜炎、豬痢疾、回腸炎、結(jié)腸炎、水腫病等疾病24。延胡索酸泰妙菌素有難聞性氣味，影響動物服藥順應(yīng)性，給疾病防治帶來很大不便。 掩蓋藥品不良氣味的技術(shù)包括添加矯味劑和麻痹劑、包衣

7、、結(jié)合吸附和包合、改變藥物結(jié)構(gòu)等5，6。本研究通過噴霧干燥技術(shù)將延胡索酸泰妙菌素包合成微Fig.1 Constitutional formula of tiamulin囊，以達到掩味，改變流動性的目的，并且將此法與傳統(tǒng)溶劑矯味法7比較，測試其優(yōu)越性。當(dāng)噴霧干燥后的粉體粒徑達到微米級別后，更容易與食物混合而不影響動物的口感，而且微囊制劑可以使藥物在動物體內(nèi)緩慢釋放，達到持續(xù)抗菌的目的。 1 儀器與試藥 1.1 儀器 噴霧干燥(WPG220濟南奧諾能源科技有限公司)，電子天平(ALC210.3北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司)，電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱(DHG9070A上海精宏實驗設(shè)備有限公司)，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器

8、(ZFQ85A上海)。 1.2 試藥 延胡索酸泰妙菌素(河北威遠動物藥業(yè)有限公司)，明膠、環(huán)糊精(天津市博迪化工有限公司)。 2 方法與結(jié)果 2.1 含量測定 空白微囊溶液的制備 精密量取噴霧干燥法制備的不載藥微粉20mg，加入20ml水并加熱，使輔料充分溶解進而破壞微囊，并用流動相容至100ml容量瓶中備用。 載藥微囊溶液的制備 精密量取載藥微粉20mg，加入20ml水并加熱，使輔料充分溶解，藥物溶出，并用流動相定容至100ml容量瓶中備用。 (1)色譜條件 色譜柱為DiamonsilTM C18色譜柱(200mm×4.6mm，5m，Dikma公司)；流動相為碳酸銨緩沖液(取碳酸銨

9、10g，加水800ml溶解，加6%的高氯酸水溶液24ml，用水稀釋至1000ml)乙腈甲醇(282349)；柱溫30；流速1.0ml/min；紫外檢測波長212nm；進樣量20l。取空白溶液和樣品溶液，在上述色譜條件下進樣。雜質(zhì)峰與主成分峰分離良好，輔料和試劑對藥物測定無干擾，延胡索酸泰妙菌素的保留時間約為24.38min。 (2)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 精密稱取延胡索酸泰妙菌素對照品5mg，用甲醇溶解配制成濃度為1mg/ml的對照品貯備液溶液。分別量取延胡索酸泰妙菌素對照品貯備液0.1、0.2、0.4、0.6和0.8ml至5個10ml容量瓶中，用甲醇定容至刻度，搖勻，0.45m濾膜過濾，量取20l，

10、注入色譜儀，記錄色譜峰面積，在(1080)g/ml范圍內(nèi)濃度(C)與峰面積(A)呈良好線性關(guān)系： A=431410C-21221 R2=0.9998 (3)準(zhǔn)確度實驗(加樣回收率%) 精密稱取空白微囊溶液5ml，加入延胡索酸泰妙菌素對照品適量，用甲醇定容至高、中、低三種濃度，延胡索酸泰妙菌素含量分別為0.6、1.2和2.6mg，進樣20l，計算回收率，結(jié)果見Tab.1。 2.2 乳劑的制備及乳化劑用量的確定 精密秤取處方量延胡索酸泰妙菌素溶于定量乙醇中，以此作為有機相，將乳化劑Tween80及處方量囊材溶解于水中，在(65±5)下磁力攪拌形成水相，再將有機相溶液逐滴加入水相中，繼續(xù)攪

11、拌得到乳化液。 本研究選擇Tween80作為水包油型乳化劑，其用量以成乳現(xiàn)象、噴霧干燥結(jié)果、包封率為指標(biāo)做單因素考察。按照水相的2%、3%、5%、7%、9%(W/V)加入Tween80，結(jié)果發(fā)現(xiàn)當(dāng)乳化劑用量為2%、3%時成乳現(xiàn)象不好，包封率較低；5%時水溶液pH68，HLB值為15，符和形成水包油型乳濁液條件(HLB值在816的乳化劑適于制備O/W型乳濁液)。當(dāng)乳化劑用量大于5%時，噴霧干燥后有殘留Tween80沒有干燥完全，粉末成糊狀，造成干燥器粘壁，難以收集到成品。所以本實驗最終選擇Tween80(5%)為乳化劑用量。 2.3 微囊包封率的測定 精密量取微粉0.1g，用50ml無水乙醇洗滌

12、4次，使表面延胡索酸泰妙菌素溶解，然后真空抽濾，收集濾液并定容于250ml容量瓶中，用上述HPLC方法測定未被裝載的藥物。藥物總含量測定同2.1。 微囊包封率=(總藥量-未被裝載的藥量)總藥量×100% 2.4 微囊的制備 (1)輔料的選擇 考慮到藥品的生產(chǎn)成本，本研究以價格便宜的明膠作為主要輔料，適當(dāng)添加環(huán)糊精、蓖麻油增加其流動性。輔料的用量以噴霧干燥后微囊性質(zhì)(吸濕性、含水量、流動性等)、掩味效果、生產(chǎn)成本為指標(biāo)做單因素考察。按照輔料與原料藥質(zhì)量比12、11、21、31、41投料，結(jié)果處方用量在21時綜合指標(biāo)最優(yōu)，并在乳液中加入2%環(huán)糊精和1%蓖麻油。 (2)掩味指標(biāo) 通過測定掩

13、味后的延胡索酸泰妙菌素微囊的氣味評價掩味效果的優(yōu)劣。分別取掩味后粉末適量，以10名健康志愿者的嗅覺敏感度(無氣味、無刺激性、低刺激性、強刺激性氣味)為指標(biāo)評價延胡索酸泰妙菌素微囊的掩味效果。結(jié)果，志愿者對微囊的氣味評價均為無明顯氣味及無刺激性氣味，與延胡索酸泰妙菌素原料藥的強刺激性氣味形成鮮明對比。本研究將志愿者的反應(yīng)及微粉性質(zhì)相結(jié)合，發(fā)現(xiàn)包封率越高，掩味效果越好，所以進一步實驗均以包封率為指標(biāo)來代替掩味效果。微囊的包封率不僅取決于輔料用量，而且與噴霧干燥條件(如進風(fēng)溫度、霧化壓力、進料速度)密切相關(guān)。根據(jù)以上結(jié)果，本實驗以進風(fēng)溫度、霧化壓力、進料速度為考察因素，以包封率(%)為指標(biāo)，選取正交

14、表L9(34)作正交分析，通過正交實驗直觀分析得出最佳工藝為：進風(fēng)溫度170、霧化壓力0.5Mpa、進料速度600ml/h。由方差分析知，這3個因素的影響程度依次為進風(fēng)溫度>進料速度>霧化壓力。其中進風(fēng)溫度對噴霧干燥工藝有顯著性影響，應(yīng)作為工藝的關(guān)鍵因素。 2.5 微粉的粉體學(xué)性質(zhì) (1)含水量 根據(jù)正交實驗確定最佳干燥工藝為A2B2C3，利用烘干法8測定此工藝干燥后干粉的含水量為0.63%。 (2)流動性 將漏斗固定在鐵架臺上，粉體自漏斗上自由落下，在半徑為r的圓盤上形成堆集體，直到粉體堆積層斜邊物料沿圓盤邊緣自動流出為止，粉體停止注入，測定堆集體的高度為h，休止

15、角計算公式為： tg=hr 利用此方法測得最佳工藝粉體休止角為54.7°。 (3)最佳處方的臨界相對濕度 將8個已恒重的扁型稱量瓶底部分別放入等量的微粉，然后分別置于Tab.2所列的8種不同鹽的過飽和溶液的干燥器中，于25保存24h，測定吸濕百分率，結(jié)果以吸濕量為縱坐標(biāo)，相對濕度為橫坐標(biāo)作圖，分別在曲線兩端做切線，兩切線交點的橫坐標(biāo)即為臨界相對濕度(CRH)，得Fig.2，最佳處方的臨界相對濕度為55%60%。 (4)與傳統(tǒng)矯味法比較 傳統(tǒng)溶劑法是按質(zhì)量比(12)分別稱取延胡索酸泰妙菌素和明膠，分別溶于少量無水乙醇中，溶解明膠需要加熱，緩慢將延胡索酸泰妙菌素溶液加入明膠溶液中，攪拌均

16、勻，揮干乙醇，得共沉淀物，粉碎后過(250±9.9)mm目篩9。一般還要加入矯味劑，但為了與噴霧干燥實驗對比，所以本研究中并未加入矯味劑。 同前述，由自愿者評定，結(jié)果傳統(tǒng)溶劑法制備的掩味劑仍有低刺激性氣味，與噴霧干燥制備的微粉形成鮮明對比，說明本研究工藝可靠，在掩味效果上有更大的優(yōu)越性。 3 討論 (1)乳劑的制備是噴霧干燥制備微囊的關(guān)鍵技術(shù)之一，在實驗中發(fā)現(xiàn)除了乳化劑用量、油水體積比會對乳劑的形成產(chǎn)生影響外，乳化溫度同樣起著至關(guān)重要的作用。乳化溫度會影響乳化劑的乳化能力，溫度過高會破壞乳化效果，本研究通過單因素試驗對乳化溫度做了深入研究，結(jié)果在(65±5)時乳化效果最好。 (2)進風(fēng)溫度對噴霧干燥工藝有顯著性影響，應(yīng)作為工藝的關(guān)鍵因素。出風(fēng)溫度不宜過高，6080為宜，雖然此藥熔點較高為143149，但出風(fēng)溫度高會造成更嚴(yán)重的粘壁現(xiàn)象；出風(fēng)溫度也不宜過低，否則會造成物料干燥不完全。但出風(fēng)溫度很難控制，希望研制出更好的冷