1、會(huì)計(jì)學(xué)1組織培養(yǎng)實(shí)用組織培養(yǎng)實(shí)用(shyng)第一頁，共25頁。1 1、植物、植物(zhw)(zhw)組織培養(yǎng)組織培養(yǎng)的過程的過程外植體外植體愈傷組織愈傷組織(zzh)胚狀體胚狀體或根、芽等或根、芽等植物體植物體脫分化脫分化(fnhu)再分再分化化愈愈傷傷組組織織一、基礎(chǔ)知識(shí)一、基礎(chǔ)知識(shí)第1頁/共25頁第二頁，共25頁。2、植物、植物(zhw)組織培養(yǎng)的組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基培養(yǎng)基v培養(yǎng)基的成分培養(yǎng)基的成分v礦質(zhì)元素礦質(zhì)元素 蔗糖蔗糖 植物激素植物激素(j s) (j s) 維生素維生素 有機(jī)添加物有機(jī)添加物 瓊脂等瓊脂等外植體外植體愈傷組織愈傷組織胚狀體胚狀體或根、芽或根、芽植物體植物體脫分化脫分

2、化再分化再分化培養(yǎng)基培養(yǎng)基培養(yǎng)基培養(yǎng)基第2頁/共25頁第三頁，共25頁。 Murashige Murashige和和SkoogSkoog于于19621962年為煙草細(xì)胞培養(yǎng)年為煙草細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)計(jì)的。能滿足植物細(xì)胞的營養(yǎng)和生理需要，適用設(shè)計(jì)的。能滿足植物細(xì)胞的營養(yǎng)和生理需要，適用范圍比較廣，多數(shù)植物組織培養(yǎng)快速范圍比較廣，多數(shù)植物組織培養(yǎng)快速(kui s)(kui s)繁繁殖用它作為培養(yǎng)基的基本培養(yǎng)基。殖用它作為培養(yǎng)基的基本培養(yǎng)基。 第3頁/共25頁第四頁，共25頁。第4頁/共25頁第五頁，共25頁。第5頁/共25頁第六頁，共25頁。3、植物激素、植物激素(j s)對植物組織培養(yǎng)對植物組織培養(yǎng)的影

3、響的影響外植體外植體愈傷組織愈傷組織胚狀體胚狀體或根、芽或根、芽植物體植物體脫分化脫分化再分化再分化無菌無菌培養(yǎng)基培養(yǎng)基無菌無菌培養(yǎng)基培養(yǎng)基v實(shí)驗(yàn)中使用實(shí)驗(yàn)中使用(shyng)(shyng)的生長的生長素是人工合成的萘乙酸（素是人工合成的萘乙酸（NAANAA），細(xì)胞分裂素也是人工合成），細(xì)胞分裂素也是人工合成的芐基腺嘌呤（的芐基腺嘌呤（BABA）第6頁/共25頁第七頁，共25頁。MS培養(yǎng)基培養(yǎng)基+相對相對(xingdu)較多的細(xì)胞分裂素（較多的細(xì)胞分裂素（BA）+相對相對(xingdu)較少的生長素（較少的生長素（NAA）發(fā)芽培養(yǎng)基（長叢狀苗）。發(fā)芽培養(yǎng)基（長叢狀苗）。MS培養(yǎng)基培養(yǎng)基+相對相

4、對(xingdu)較多的生長素（較多的生長素（NAA）生根培養(yǎng)基。生根培養(yǎng)基。 第7頁/共25頁第八頁，共25頁。配制培養(yǎng)基并滅菌配制培養(yǎng)基并滅菌取材并消毒取材并消毒接種至發(fā)芽培養(yǎng)基接種至發(fā)芽培養(yǎng)基轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基煉苗并移栽（至草煉苗并移栽（至草炭土或蛭石中）炭土或蛭石中）定植（栽培至土中）定植（栽培至土中）叢狀苗叢狀苗二、植物二、植物(zhw)組織培養(yǎng)的基組織培養(yǎng)的基本過程本過程外植體的消毒外植體的消毒(xio d)： 流水流水(lishu)沖洗沖洗20分鐘分鐘 放入放入70酒精浸泡酒精浸泡10min 在在5%的次氯酸鈉溶的次氯酸鈉溶液中浸泡液中浸泡5分鐘分鐘 在另一在另一5%的

5、次氯的次氯酸鈉溶液中浸泡酸鈉溶液中浸泡5分鐘分鐘無菌水沖洗無菌水沖洗23次，無次，無菌吸水紙吸干菌吸水紙吸干第8頁/共25頁第九頁，共25頁。配制培養(yǎng)基并滅菌配制培養(yǎng)基并滅菌取材并消毒取材并消毒接種至發(fā)芽培養(yǎng)基接種至發(fā)芽培養(yǎng)基轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基煉苗并移栽（至草煉苗并移栽（至草炭土或蛭石中）炭土或蛭石中）定植（栽培至土中）定植（栽培至土中）叢狀苗叢狀苗煉苗與移栽煉苗與移栽 煉苗：先在外界環(huán)境煉苗：先在外界環(huán)境(hunjng)閉瓶鍛煉閉瓶鍛煉3天，天，再開瓶鍛煉再開瓶鍛煉3天（以培養(yǎng)基天（以培養(yǎng)基上開始長出菌為宜）。上開始長出菌為宜）。 移栽：去凈培養(yǎng)基，可移栽：去凈培養(yǎng)基，可先在滅過菌

6、的草炭土或蛭先在滅過菌的草炭土或蛭石上培養(yǎng)使根系發(fā)達(dá)再轉(zhuǎn)石上培養(yǎng)使根系發(fā)達(dá)再轉(zhuǎn)移到土壤中。移到土壤中。第9頁/共25頁第十頁，共25頁。第10頁/共25頁第十一頁，共25頁。第11頁/共25頁第十二頁，共25頁。2.2.不同植物、不同組織的生根和生芽是否都可使用與本不同植物、不同組織的生根和生芽是否都可使用與本實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)(shyn)(shyn)相同的生長素和細(xì)胞分裂素濃度？相同的生長素和細(xì)胞分裂素濃度？ 不同植物、不同組織的生根和生芽對生長素不同植物、不同組織的生根和生芽對生長素和細(xì)胞分裂素濃度的需求是不一樣的。因此，不和細(xì)胞分裂素濃度的需求是不一樣的。因此，不可貿(mào)然使用與本實(shí)驗(yàn)可貿(mào)然使用與本實(shí)

7、驗(yàn)(shyn)(shyn)相同的生長素和細(xì)相同的生長素和細(xì)胞分裂素濃度。可以參考已發(fā)表文獻(xiàn)上成熟的經(jīng)胞分裂素濃度。可以參考已發(fā)表文獻(xiàn)上成熟的經(jīng)驗(yàn)，也可自己探索。驗(yàn)，也可自己探索。3.3.本實(shí)驗(yàn)本實(shí)驗(yàn)(shyn)(shyn)用人工合成的激素，而不用植物中存在的天用人工合成的激素，而不用植物中存在的天然激素，為什么？然激素，為什么？ 植物中存在的天然激素都有相應(yīng)的使之分解的酶，植物中存在的天然激素都有相應(yīng)的使之分解的酶，這樣，天然激素在植物體內(nèi)作用和存在的時(shí)間就較短，這樣，天然激素在植物體內(nèi)作用和存在的時(shí)間就較短，而人工合成激素在植物中沒有相應(yīng)的分解它的酶，所以而人工合成激素在植物中沒有相應(yīng)的分解

8、它的酶，所以作用和存在的時(shí)間長，作用效果明顯。作用和存在的時(shí)間長，作用效果明顯。第12頁/共25頁第十三頁，共25頁。切取切取第13頁/共25頁第十四頁，共25頁。接種接種(jizh(jizhng) ng) 第14頁/共25頁第十五頁，共25頁。形成形成(xngchng)(xngchng)愈傷組織愈傷組織第15頁/共25頁第十六頁，共25頁。形成形成(xngchng)(xngchng)試試管苗管苗第16頁/共25頁第十七頁，共25頁。試管試管(shgun)(shgun)苗大規(guī)苗大規(guī)模培養(yǎng)模培養(yǎng)第17頁/共25頁第十八頁，共25頁。移栽移栽(y (y zi)zi)第18頁/共25頁第十九頁，共2

9、5頁。 下面下面(xi mian)是有關(guān)食醋和泡菜制作的實(shí)驗(yàn)。請回答是有關(guān)食醋和泡菜制作的實(shí)驗(yàn)。請回答： (1)食醋可用大米為原料經(jīng)三步發(fā)酵來制作：食醋可用大米為原料經(jīng)三步發(fā)酵來制作： 第一步：大米經(jīng)蒸熟、冷卻后加入淀粉酶，將原料中的第一步：大米經(jīng)蒸熟、冷卻后加入淀粉酶，將原料中的淀粉分解成淀粉分解成 (填中間產(chǎn)物填中間產(chǎn)物)，然后進(jìn)一步分解成葡萄糖，然后進(jìn)一步分解成葡萄糖，這一過程可用，這一過程可用 (填淀粉指示劑填淀粉指示劑)來檢測，因?yàn)樵撛噭﹣頇z測，因?yàn)樵撛噭┯龅矸鄢仕{(lán)色，遇上述中間產(chǎn)物呈紅色。遇淀粉呈藍(lán)色，遇上述中間產(chǎn)物呈紅色。 第二步：用第二步：用 菌將葡萄糖轉(zhuǎn)化成乙醇，這一發(fā)酵過菌

10、將葡萄糖轉(zhuǎn)化成乙醇，這一發(fā)酵過程中，發(fā)酵瓶不應(yīng)完全密閉的主要原因是程中，發(fā)酵瓶不應(yīng)完全密閉的主要原因是 。 第三步：用第三步：用 菌將乙醇轉(zhuǎn)化成乙酸，這一過程菌將乙醇轉(zhuǎn)化成乙酸，這一過程 氧氣。氧氣。2009浙江浙江(zh jin)高考高考18選選6試題試題第19頁/共25頁第二十頁，共25頁。 (2)在泡菜發(fā)酵過程中，會(huì)產(chǎn)生多種酸，其中主要的在泡菜發(fā)酵過程中，會(huì)產(chǎn)生多種酸，其中主要的是是 ，還有少量的亞硝酸。對亞硝酸鹽的定量測定可，還有少量的亞硝酸。對亞硝酸鹽的定量測定可以用以用 法，因?yàn)榉ǎ驗(yàn)?yn wi)亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸的亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸的反應(yīng)產(chǎn)物能與反應(yīng)產(chǎn)物能與N-1-萘

11、基乙二胺偶聯(lián)成萘基乙二胺偶聯(lián)成 色化合物。進(jìn)色化合物。進(jìn)行樣品測定時(shí)，還要取等量水進(jìn)行同樣的測定，其目的是行樣品測定時(shí)，還要取等量水進(jìn)行同樣的測定，其目的是 。第20頁/共25頁第二十一頁，共25頁。2010年浙江高考年浙江高考(o ko)生物：生物：“生物技術(shù)實(shí)踐生物技術(shù)實(shí)踐”模塊（模塊（10分分）某同學(xué)進(jìn)行蘋果汁制作實(shí)驗(yàn)，工藝如下圖所示。某同學(xué)進(jìn)行蘋果汁制作實(shí)驗(yàn)，工藝如下圖所示。 請回答：請回答：(1)圖中用圖中用KMnO4溶液浸泡蘋果的目的是溶液浸泡蘋果的目的是 。黑曲霉提。黑曲霉提取液中含有的取液中含有的 可水解果膠，從而使果汁澄清。固定化可水解果膠，從而使果汁澄清。固定化柱中填充的石

12、英砂通過柱中填充的石英砂通過 方式將酶固定化，酶被固定后方式將酶固定化，酶被固定后用蒸餾水洗滌固定化柱是為了除去用蒸餾水洗滌固定化柱是為了除去 。第21頁/共25頁第二十二頁，共25頁。(2)實(shí)驗(yàn)中，操作流程實(shí)驗(yàn)中，操作流程A和和B的先后次序?yàn)榈南群蟠涡驗(yàn)?。在蘋果汁澄。在蘋果汁澄清過程中，應(yīng)關(guān)閉的流速調(diào)節(jié)閥是清過程中，應(yīng)關(guān)閉的流速調(diào)節(jié)閥是 。要測定從固定化柱。要測定從固定化柱流出的蘋果汁中是否還有果膠，可取一定量的果汁與等量的流出的蘋果汁中是否還有果膠，可取一定量的果汁與等量的 混合，如果出現(xiàn)混合，如果出現(xiàn) 現(xiàn)象說明果膠還沒有被完全水解現(xiàn)象說明果膠還沒有被完全水解。為使果膠完全水解，應(yīng)將流速

13、調(diào)。為使果膠完全水解，應(yīng)將流速調(diào) 。(3)實(shí)驗(yàn)后，將洗滌實(shí)驗(yàn)后，將洗滌(xd)過的固定化柱在低溫環(huán)境中保存若過的固定化柱在低溫環(huán)境中保存若干天。該固定化柱仍可用于蘋果汁制作實(shí)驗(yàn)，說明固定化酶干天。該固定化柱仍可用于蘋果汁制作實(shí)驗(yàn)，說明固定化酶可被可被 使用。使用。第22頁/共25頁第二十三頁，共25頁。 蛭石蛭石(zh sh)是云母類次生硅質(zhì)礦物，為鋁是云母類次生硅質(zhì)礦物，為鋁、鎂、鐵的含水硅酸鹽。蛭石、鎂、鐵的含水硅酸鹽。蛭石(zh sh)可向作物可向作物提供自身含有的提供自身含有的K、Mg、Ca、Fe以及微量的以及微量的Mn、Cu、Zn等元素。蛭石等元素。蛭石(zh sh)的吸水性、陽離的吸水性、陽離子交換性及化學(xué)成分特性，使其起著保肥、保水子交換性及化學(xué)成分特性，使其起著保肥、保水、儲(chǔ)水、透氣和礦物肥料等多重作用。、儲(chǔ)水、透氣和礦物肥料等多重作用。 草炭即泥炭，是沼澤發(fā)育過程中的產(chǎn)物。由沼草炭即泥炭，是沼澤發(fā)育過程中的產(chǎn)物。由沼澤植物的殘?bào)w，在多水缺氧條件下，澤植物的殘