1、資料常用pH緩沖溶液的配制和pH值常用pH緩沖溶液的配制和pH值常用pH緩沖溶液的配制和 pH值序號溶液名稱配制方法pH值1氯化鉀-鹽酸13.0 ml 0.2 mol/L HCl與 25.0 ml 0.2mol/L KCl混合均勻后，加水稀釋至100ml1.72氨基乙酸-鹽酸在500 ml水中溶解氨基乙酸 150 g,加480 ml濃鹽酸，再加水稀釋至1L2.33一氯乙酸-氫氧化鈉在200 ml水中溶解2 g 一氯乙酸后，加40 g NaOH ,溶解完全后再加水稀釋至1 L2.84鄰苯二甲酸氫鉀-鹽酸把25.0 ml 0.2 mol/L的鄰苯二甲酸氫鉀溶液與6.0 ml 0.1 mol/L H

2、Cl混合均勻，加水稀釋至 100 ml3.65鄰苯二甲酸氫鉀-氫氧化鈉把25.0 ml 0.2 mol/L的鄰苯二甲酸氫鉀溶液與17.5 ml 0.1 mol/L NaOH 混合均勻，加水稀釋至 100 ml4.86六亞甲基四胺-鹽酸在200 ml水中溶解六亞甲基四胺40 g ,加濃HCl 10 ml，再加水稀釋至 1 L5.47磷酸二氫鉀-氫氧化鈉把25.0 ml 0.2 mol/L的磷酸二氫鉀與23.6 ml 0.1 mol/L NaOH混合均勻，加水稀釋至 100 ml6.88硼酸-氯化鉀-氫氧化鈉把25.0 ml 0.2 mol/L 的硼酸-氯化鉀與4.0 ml 0.1 mol/L N

3、aOH混合均勻，加水稀釋至 100 ml8.09氯化鉉-氨水把0.1 mol/L 氯化鉉與0.1 mol/L氨水以2 : 1比例混合均勻9.110硼酸-氯化鉀-氫氧化鈉把25.0 ml 0.2 mol/L的硼酸-氯化鉀與 43.9 ml 0.1 mol/L NaOH混合均勻，加水稀釋至 100 ml10.011氨基乙酸-氯化鈉-氫氧化把49.0 ml 0.1 mol/L氨基乙酸-氯化鈉與51.0 ml 0.1 mol/L NaOH 混合均勻11.6鈉12磷酸氫二鈉-氫氧化鈉把 50.0 ml 0.05 mol/L Na2HPO與 26.9ml 0.1 mol/L NaOH 混合均勻，加水稀釋至

4、100 ml12.013氯化鉀-氫氧化鈉把 25.0 ml 0.2 mol/L KCl與 66.0 ml0.2 mol/L NaOH 混合均勻，加水稀釋至100 ml13.0一、常用溶液的配制(一) 溶液配制注意事項1. 藥品要有較好的質(zhì)量試劑分為優(yōu)級純(保證試劑，Guaranteed reagent ,G. R.)、分析試劑(Antalytical reagent , A. R.)化學(xué)純(Chemical pure ,C. P.)和實驗試劑(Laboratory reagent , L. R.)等等。工業(yè)用的化學(xué)試劑， 雜質(zhì)較多，只在個別情況下應(yīng)用，如配洗液用的硫酸、配干燥劑的氯化鈣等。2.

5、 藥品稱量要精確。3. 配制試劑用水應(yīng)用新鮮的去離子水或雙蒸儲水，比電阻值在50萬歐姆以上， pH在5.57.0之間才可應(yīng)用，在組織培養(yǎng)等特殊用途時應(yīng)注意此項要求，配制一般化驗用溶液只要求用雙蒸偏水或去離子水。4 .配好后的溶液，應(yīng)立即除菌處理(如高壓滅菌、抽濾或加抑菌物質(zhì))，以防 雜菌生長。(二) 0.067 (1/15 ) Mol/L 磷酸緩沖液1. 1/15Mol/L磷酸二氫鉀溶液的配制：稱取磷酸二氫鉀 (KHPQ, A. R. ) 9.08g ,用蒸儲水溶解后，傾入1 000ml容量瓶內(nèi)，再稀釋至刻度(1 000ml )。2. 1/15Mol/L磷酸二氫鈉溶液的配制：稱取無水磷酸氫二鈉

6、( N&HPO, A.R.) 9.47g (或者N&HPO 2H2O 11.87g )用蒸儲水溶解后，放入 1 000ml容量瓶內(nèi)， 再加蒸儲水稀釋至刻度(1 000ml )。3. 按附表的比例，配制成不同pH值的緩沖溶液。附表1磷酸鹽緩沖液配制法(單位：毫升)pH1/15Mol/L Na 2HPO1/15Mol/L KH 2POpH1/15Mol/L NaHPC1/15Mol/L KH 2PO5.88.092.07.166.623.45.99.990.17.272.028.06.012.287.87.376.823.26.115.384.77.380.819.26.218.6

7、81.47.584.115.96.322.477.67.687.013.06.426.773.37.789.410.66.531.868.27.891.58.56.637.562.57.993.26.86.743.556.58.894.75.36.849.650.48.195.84.26.955.444.68.297.03.07.061.138.98.498.02.0(三) 0.15Mol/L PB 液附表2 0.15Mol/LPB 液配制法pH0.15Mol/L Na 2HPO (ml)0.15Mol/L NaH 2PQ (ml)6.426.573.56.637.562.56.849.051

8、.07.061.039.07.272.028.07.481.019.07.687.013.0NaHPO 2H2O分子量=175.05 0.15Mol/L 溶液含 26.7g/L 。N&HPO 12H2O分子量=358.22 0.15Mol/L 溶液含 53.7g/L 。NaHPO H2O分子量=138.00 0.15Mol/L溶液含 20.7g/L 。NaHPO - 2H2O分子量=156.03 0.15Mol/L 溶液含 23.4g/L 。(四) 0.2Mol/L PB 緩沖液附表3 0.2mol/L PB 緩沖液配制法pH0.2 Mol/L Na 2HPO (ml)0.2Mol/L

9、 NaH 2PO (ml)5.88.092.06.012.387.76.218.581.56.426.573.56.637.562.56.849.051.07.061.039.07.272.028.07.481.019.07.687.013.07.891.58.58.094.75.30.2Mol/L Na 2HPO 2 H2O溶液 35.61g/LNaHPO 12 H2O溶液含 71.64g/L0.2Mol/LNaH 2PO H 2O溶液含 27.60g/LNaHPQ 2 H2O溶液含 31.21g/L欲配0.1Mol/L PB緩沖液則在0.2Mol/L PB緩沖液的基礎(chǔ)上加 H2O稀釋1倍即

10、可。欲配制PBS液時，則在溶液中加 0.85 %的NaCl溶液即可。（五）無鈣鎂離子磷酸緩沖鹽水（ PBS（0.15Mol/L PH 7.2 ）NaCl 8.0gKCl 0.2gN&HPO 1.15g（如為 NaHPO 12HO,則為 2.89g ）KHPQ 0.2g將上述試劑依次溶于1 000ml去離子水中，完全溶解后，115C高壓滅菌10min15min，存在4C冰箱中備用。此液可用于配制和稀釋細胞分散劑以及洗 滌細胞培養(yǎng)物。（六）硼酸鹽緩沖液（ Borate saline buffer ）1 .硼酸（H 3BO）0.2Mol/L 硼酸：硼酸 12.37g 加水至 1 000ml。

11、2. 硼砂（NaBO）0.05Mol/L 硼砂：硼砂 19.07g 加水至 1 000ml。附表4不同pH的0.2Mol/L硼酸緩沖液配制法pH0.05Mol/L 硼砂(ml)0.2Mol/L 硼酸(ml)pH0.05Mol/L 硼砂(ml)0.2Mol/L 硼酸(ml)7.41.09.08.23.56.57.61.58.58.44.55.57.82.08.08.76.04.08.03.07.09.08.02.0（七）巴比妥緩沖液1. pH8.2離子強度0.05MO1/L巴比妥緩沖液巴比妥鈉47.6g蒸儲水3 000ml1.17N HC1 55.0ml（1.17 N HC1=193m1 濃 H

12、C1 加 1 807ml 蒸（水）將4.76g巴比妥鈉溶于 3 000ml蒸儲水。 加 1.17 N HC1 55ml 。用HC1調(diào)節(jié)pH到8.2，并加蒸儲水至 4 265ml。2. pH8.4 0.06MO1/L 巴比妥緩沖液巴比妥1.84g巴比妥鈉10.30g加蒸儲水至1 000.00ml3. pH8.6 0.06MO1/L 巴比妥緩沖液巴比妥1.66g巴比妥鈉12.76g加蒸儲水1 000.00ml（八）0.2MO1/L醋酸鹽緩沖液見表附表5附表5 0.2MO1/L醋酸鹽緩沖液配制法pH0.2MO1/LTris (ml)0.1MO1/LHC1 (ml)pH0.2MO1/LTris (ml

13、)0.1MO1/LHC1 (ml)23 C37 C23 C37 C9.108.952558.067.902527.58.928.76257.57.967.822530.08.758.602510.57.877.732532.58.628.482512.57.777.632535.08.508.372515.57.667.522537.58.408.272517.57.547.402540.08.328.182520.07.367.222542.5（九）三羥甲基甲烷一鹽酸緩沖液（ Tris HC1緩沖液）不同 pH, 0.05MO1/L25m10.2Mo1/L三羥甲基氨基甲烷加x m10.1NH

14、C1，加水稀釋至100ml （見下表）附表6 Tris HC1緩沖液配制法pH0.2MO1/LTris(ml)0.1NHC1(ml)pH0.2MO1/LTris(ml)0.1NHC1(ml)23 C37 C23 C37 C9.108.962558.057.902527.58.928.78257.57.967.822530.08.748.602510.07.877.732532.58.628.482512.57.777.632535.08.508.372515.07.667.522537.58.408.272517.57.547.402540.08.328.182520.07.367.22254

15、2.58.238.102522.57.207.052545.08.148.002525.025三羥甲基氨基甲烷（Tris ）分子量=121.140.2Mol/L 三羥甲基氨基甲烷：Tris24.23g，加水至1 000ml。0.1NHC1:取 HCl8.6ml ,加水至 1 000ml。（十）0.5Mol/L pH9.5 碳酸鹽緩沖液NaHCO3.70gN&CO 0.60g溶于600.00ml蒸儲水中即得。不用時塞緊瓶塞，以免吸收空氣中二氧化碳使PH下降。最好小量配制。（一）甘油磷酸緩沖液1 .配制pH8.0磷酸緩沖液0.1Mol/L Na 2HPO 94.50ml0.1N NaH2P

16、O 5.50ml混合即可2. 9份甘油與1份pH8.0磷酸緩沖液混合，即為甘油磷酸緩沖液。用途：用于免疫熒光試驗。（十二）Hank' s 液1.貯存液NaCl 80.00gKCl 4.00gN&HPO 12 H2O 1.52gKHPO 0.60g葡萄糖4.00g0.4 %酚紅液 50.00ml雙儲水加至100.00ml115C高壓滅菌15min,冰凍保存。2.工作液貯存液1份雙儲水9份115C高壓滅菌15min。臨用時用滅菌的 5.6 %NaHC宓夜調(diào)pH值至7.2左右（溶 液呈橙紅色）。（十三）荼（鈉）氏試劑（Nessler ' s reagent ）配方1:氯化汞6

17、.0g碘化鉀12.4g20% NaOH 30ml加蒸儲水至100ml配方2：碘化汞11.5g碘化鉀8g蒸儲水50ml（完全溶解后）過濾，加 20% NaOH 50mE用途：檢測溶液中氨離子。（十四）阿氏（Alsever ' s）液葡萄糖2.05g檸檬酸鈉0.80g氯化鈉0.42g蒸儲水100ml溶解后，以10%寧檬酸調(diào)節(jié)pH至6.1，過濾，分裝，10磅10min滅菌，4C保存。（十五）青、鏈霉素混合液（簡稱 S. P.液或雙抗液）青霉素（40萬U） 5支鏈霉素（ 200萬g） 1支分別溶于100ml滅菌無離子水中或共同溶于200ml滅菌無離子水中，混合后分裝小瓶，置-10C-20C冰箱保存?zhèn)溆茫?萬單位g/ml ）。臨用時，按1%勺量加入營養(yǎng)液或其他溶液中，最后濃度是青霉素100U/ml,鏈霉素 100ug/ml 。（十六）洗液（清潔液）配方1:重銘酸鉀150g蒸儲水300ml濃硫酸3 000ml將重銘酸鉀加入蒸儲水中，使之自然溶解或水浴溶解， 亦可在大塔蝸中加熱溶解