1、微生物的營養與培養基5.1 微生物的營養物質及其功能微生物的營養物質及其功能5.2 微生物的營養類型微生物的營養類型5.3 營養物質進入微生物細胞營養物質進入微生物細胞5.4 培養基培養基主要內容主要內容微生物的營養與培養基主要元素：主要元素：碳碳、氫、氧、氫、氧、氮氮、磷、硫、磷、硫、鉀、鎂、鈣等、鉀、鎂、鈣等微量元素：鋅、錳、氯、鉬、硒、鈷、銅等微量元素：鋅、錳、氯、鉬、硒、鈷、銅等 占細胞干重的占細胞干重的97%97%v營養：營養：生物體從外部環境中攝取化學物質，使生物體從外部環境中攝取化學物質，使其生長過程中獲取生命活動需的能量及其結構其生長過程中獲取生命活動需的能量及其結構物質的生理

2、過程。物質的生理過程。 廣義地說，廣義地說，營養是微生物獲得和利用營養物的營養是微生物獲得和利用營養物的過程，是微生物維持和延續其生命形式的一種過程，是微生物維持和延續其生命形式的一種基本生理過程?；旧磉^程。v營養物：營養物：具有營養功能的物質和能量具有營養功能的物質和能量v微生物細胞的化學物質組成微生物細胞的化學物質組成（表（表5-15-1）微生物的營養與培養基碳源、氮源、能源、生長因子、無機鹽和水碳源、氮源、能源、生長因子、無機鹽和水按照營養物質在菌體中的生理作用的不同，可以將按照營養物質在菌體中的生理作用的不同，可以將它們分成六大類：它們分成六大類：無論從元素水平還是營養要素水平，微

3、生物的營養無論從元素水平還是營養要素水平，微生物的營養要求與攝食型的動物（含人類）和光合自養型的植要求與攝食型的動物（含人類）和光合自養型的植物都十分接近。物都十分接近。生物之間存在生物之間存在“營養上的統一性營養上的統一性”5.1 微生物的營養物質及其功能微生物的營養物質及其功能微生物的營養與培養基一、一、 碳源碳源在微生物生長繁殖過程中，能為其提供在微生物生長繁殖過程中，能為其提供碳素營養碳素營養來來源的物質稱碳源。即，是源的物質稱碳源。即，是用來構建菌體物質中或代用來構建菌體物質中或代謝產物中的碳素骨架的營養物質。謝產物中的碳素骨架的營養物質。碳源譜碳源譜有機碳有機碳C.H.OC.H.O

4、無機碳無機碳C.O,C.O.XC.O,C.O.X異養微生物異養微生物自養微生物自養微生物微生物利用的碳源物質主要有糖類、有機酸、醇類、微生物利用的碳源物質主要有糖類、有機酸、醇類、脂類、烴類、蛋白質、氨基酸、核酸以及脂類、烴類、蛋白質、氨基酸、核酸以及COCO2 2、碳酸鹽等。碳酸鹽等。 從微生物的整體來看，可利用的碳源物質的范圍稱從微生物的整體來看，可利用的碳源物質的范圍稱碳源譜碳源譜。微生物的營養與培養基可以可以無機碳源無機碳源提供主要碳素營養的提供主要碳素營養的自養微生自養微生物（較少）物（較少）自然界中，利用有機碳源的微生物種類占絕大多自然界中，利用有機碳源的微生物種類占絕大多數。其中

5、必須以數。其中必須以有機碳源有機碳源提供碳素營養的提供碳素營養的異養異養微生物（絕大多數）；微生物（絕大多數）；從整體上看，微生物是自然界中碳源譜最廣的生從整體上看，微生物是自然界中碳源譜最廣的生命形式。命形式。從某種角度來說，世界上存在的所有有機物，幾從某種角度來說，世界上存在的所有有機物，幾乎沒有微生物不能利用的！乎沒有微生物不能利用的！ 微生物的生物多樣性微生物的生物多樣性微生物的營養與培養基v對大多數異養菌來說，其最適碳源是對大多數異養菌來說，其最適碳源是“C.H.O”C.H.O”型碳源，其中：型碳源，其中： 糖類糖類最廣泛、最經濟；酸醇脂類最廣泛、最經濟；酸醇脂類次要次要 糖類中：糖

6、類中： 單糖單糖 雙糖、多糖雙糖、多糖 己糖己糖 戊糖戊糖 葡萄糖、果糖葡萄糖、果糖 半乳糖、甘露糖等半乳糖、甘露糖等 淀粉淀粉 纖維素、幾丁質等纖維素、幾丁質等一般不把含蛋白質、氨基酸的牛肉膏、蛋白胨一般不把含蛋白質、氨基酸的牛肉膏、蛋白胨等原料降格做碳源使用。等原料降格做碳源使用。目前在微生物發酵工業所利用的碳源物質主目前在微生物發酵工業所利用的碳源物質主要有要有單糖、蔗糖、淀粉、糖蜜、麩皮、米糠單糖、蔗糖、淀粉、糖蜜、麩皮、米糠. .微生物的營養與培養基注意：注意：v“碳源譜廣泛碳源譜廣泛”是針對整個微生物界來說的，對是針對整個微生物界來說的，對某一具體微生物來說，差異很大。某一具體微生

7、物來說，差異很大。v對一切異養菌來說，其對一切異養菌來說，其碳源碳源可同時兼作可同時兼作能源能源，因，因此碳源是它們的此碳源是它們的雙功能營養物雙功能營養物。v對天然來源的碳源營養物（如糖蜜、淀粉質原料）對天然來源的碳源營養物（如糖蜜、淀粉質原料）來說，除主要提供碳源營養外，其中還含有氨基來說，除主要提供碳源營養外，其中還含有氨基酸、無機鹽等多種營養成分。酸、無機鹽等多種營養成分。微生物的營養與培養基二、能源二、能源能為微生物的生命活動提供最初能量來源的能為微生物的生命活動提供最初能量來源的營養物營養物或或輻射能輻射能，稱能源。，稱能源。能源譜能源譜化學物質化學物質輻射能輻射能化能異養微生物的

8、能源化能異養微生物的能源有機物有機物無機物無機物化能自養微生物的能源化能自養微生物的能源光能自養和光能異養微生物的能源光能自養和光能異養微生物的能源單功能營養物：如光能單功能營養物：如光能多功能營養物：如銨鹽、氨基酸等多功能營養物：如銨鹽、氨基酸等微生物的營養與培養基在微生物生長繁殖過程中，能為其提供在微生物生長繁殖過程中，能為其提供氮素營養氮素營養來源的物質稱氮源。即，是用來滿足菌體物質中來源的物質稱氮源。即，是用來滿足菌體物質中或代謝產物中的氮素需要的營養物質?；虼x產物中的氮素需要的營養物質。三、氮源三、氮源氮源譜氮源譜有機氮有機氮N.C.H.ON.C.H.O無機氮無機氮N.HN.H，N

9、.ON.ONHNH3 3銨鹽（銨鹽（NHNH4 4+ +）PHPH硝酸鹽（硝酸鹽（NONO3 3- -）PHPHN N2 2蛋白質蛋白質核酸核酸氨基酸氨基酸尿素尿素固氮菌能固氮菌能利用游離利用游離的氮的氮大多病原菌大多病原菌需要有機含需要有機含氮化合物氮化合物微生物的營養與培養基一般而言，能利用有機氮的也可以利用無機氮一般而言，能利用有機氮的也可以利用無機氮但是，能利用無機氮的不一定能利用有機氮。但是，能利用無機氮的不一定能利用有機氮。微生物的營養與培養基氨基酸自養型生物氨基酸自養型生物：不需要氨基酸做氮源，：不需要氨基酸做氮源，能利用尿素、銨鹽、硝酸鹽甚至氮氣等自行能利用尿素、銨鹽、硝酸鹽甚

10、至氮氣等自行合成所需氨基酸的生物。合成所需氨基酸的生物。氨基酸異養型生物氨基酸異養型生物：需要從外界吸收現成的氨：需要從外界吸收現成的氨基酸做氮源才能滿足需要的?；嶙龅床拍軡M足需要的。按對氨基酸的需要的不同，可將微生物生物分為：按對氨基酸的需要的不同，可將微生物生物分為：微生物的營養與培養基四、無機鹽四、無機鹽參與微生物中氨基酸和酶活性集團的組成參與微生物中氨基酸和酶活性集團的組成調節滲透壓、調節滲透壓、pHpH值、氧化還原電位等值、氧化還原電位等作為自養菌的能源作為自養菌的能源除除C C、H H、O O外的元素，又稱無機鹽，其基本作用：外的元素，又稱無機鹽，其基本作用：構成菌體成分構成菌

11、體成分微生物的營養與培養基 配制培養基時，大量元素一般首選配制培養基時，大量元素一般首選K2HPO4、MgSO4等，等，可同時提供可同時提供4種大量元素。種大量元素。P一般需要一般需要0.0050.01 mol/L， 無機合成培養基中，無機合成培養基中，S的來源常來自硫酸鎂、硫酸亞鐵、的來源常來自硫酸鎂、硫酸亞鐵、硫酸錳，濃度硫酸錳，濃度0.001 mol/L 。 常用天然水、自來水來配制培養基以提供各種微量元素常用天然水、自來水來配制培養基以提供各種微量元素.微量元素微量元素在微生物生長過程中起重要作用，而機體對在微生物生長過程中起重要作用，而機體對這些元素的需要量極其微小的元素，需要量通常

12、在這些元素的需要量極其微小的元素，需要量通常在1010-6-61010-8-8mol/Lmol/L，如：鋅、錳、鈉、氯、鉬、硒、鈷、銅、鎢、，如：鋅、錳、鈉、氯、鉬、硒、鈷、銅、鎢、鎳、硼等。鎳、硼等。 根據微生物對礦質元素需要量的大小，可分為：根據微生物對礦質元素需要量的大小，可分為： 大量元素：大量元素：NaNa、K K、MgMg、CaCa、S S、P P、FeFe。 需要量通常在需要量通常在1010- -4 4 1010-3-3mol/Lmol/L。微生物的營養與培養基一些無機鹽離子的功能一些無機鹽離子的功能vP P，平衡代謝，提高葡萄糖的利用率。，平衡代謝，提高葡萄糖的利用率。vS S

13、，合成含硫氨基酸（如胱氨酸）、輔酶的活性基，合成含硫氨基酸（如胱氨酸）、輔酶的活性基（如輔酶（如輔酶A A、谷胱甘肽）以及一些維生素（硫胺素、谷胱甘肽）以及一些維生素（硫胺素、生物素等）。生物素等）。vMgMg，維持某些酶的活性（如磷酸化酶）。，維持某些酶的活性（如磷酸化酶）。vK K、NaNa，酶的激活劑，促進碳水化合物代謝，維持，酶的激活劑，促進碳水化合物代謝，維持細胞質的膠體狀態及細胞滲透壓。細胞質的膠體狀態及細胞滲透壓。vFeFe，參與細胞色素氧化酶的活性基鐵卟啉的組成。，參與細胞色素氧化酶的活性基鐵卟啉的組成。微生物的營養與培養基無機元素（除碳、氮源外）的來源和功能無機元素（除碳、氮

14、源外）的來源和功能 元素元素人為提供形式人為提供形式生理功能生理功能大量元素大量元素PKH2PO4K2HPO4核酸、磷酸和輔酶的成分核酸、磷酸和輔酶的成分SMgSO4含硫氨基酸（半胱氨酸、甲硫氨酸等）和含硫氨基酸（半胱氨酸、甲硫氨酸等）和含硫維生素（生物素、硫胺素等）的成分含硫維生素（生物素、硫胺素等）的成分KKH2PO4K2HPO4某些酶（果糖激酶、磷酸丙酮酸轉磷酸酶某些酶（果糖激酶、磷酸丙酮酸轉磷酸酶等）輔因子；維持電位差和滲透壓等）輔因子；維持電位差和滲透壓NaNaCl維持滲透壓；某些細菌和藍細菌所需維持滲透壓；某些細菌和藍細菌所需CaCa（NO3）2、CaCl2某些胞外酶的穩定劑、蛋白

15、酶等的輔因子某些胞外酶的穩定劑、蛋白酶等的輔因子；細菌形成芽孢和某些真菌形成孢子所需；細菌形成芽孢和某些真菌形成孢子所需MgMgSO4固氮酶等的輔因子；葉綠素等的成分固氮酶等的輔因子；葉綠素等的成分FeFeSO4細胞色素的成分；合成葉綠素、白喉毒素細胞色素的成分；合成葉綠素、白喉毒素和氧高鐵血紅素所需和氧高鐵血紅素所需微生物的營養與培養基無機元素（除碳、氮源外）的來源和功能無機元素（除碳、氮源外）的來源和功能 元素元素人為提供形式人為提供形式生理功能生理功能微量元素微量元素MnMnSO4超氧化物歧化酶、氨肽酶和超氧化物歧化酶、氨肽酶和L-阿拉伯阿拉伯糖異構酶等的輔因子糖異構酶等的輔因子CuCu

16、SO4氧化酶、酪氨酸酶的輔因子氧化酶、酪氨酸酶的輔因子CoCoSO4維生素維生素B12復合物的成分；肽酶的輔復合物的成分；肽酶的輔因子因子ZnZnSO4堿性磷酸酶以及多種脫氫酶、肽酶和堿性磷酸酶以及多種脫氫酶、肽酶和脫羧酶的輔因子脫羧酶的輔因子Mo（NH4）6MO7O24固氮酶和同化型及異化型硝酸鹽還原固氮酶和同化型及異化型硝酸鹽還原酶的成分酶的成分微生物的營養與培養基五、生長因子五、生長因子微生物生長所微生物生長所必需的必需的、但其自身不能合成或合成、但其自身不能合成或合成量不足以滿足機體生長需要的、需要量很小的量不足以滿足機體生長需要的、需要量很小的有有機化合物，如維生素、氨基酸、堿基、菑

17、醇等機化合物，如維生素、氨基酸、堿基、菑醇等. . 微微 生生 物物 生長因子生長因子 需要量（需要量（ /ml/ml）IIIIII型肺炎鏈球菌型肺炎鏈球菌 膽堿膽堿 6 6 ugug金黃色葡萄球菌金黃色葡萄球菌 硫胺素硫胺素 0.5 0.5ngng白喉棒桿菌白喉棒桿菌 B-B-丙氨酸丙氨酸 1.5 1.5ugug破傷風梭狀芽孢桿菌破傷風梭狀芽孢桿菌 尿嘧啶尿嘧啶 0-4 0-4ugug腸膜狀串珠菌腸膜狀串珠菌 吡哆醛吡哆醛 0.025 0.025ugug微生物的營養與培養基v廣義的生長因子廣義的生長因子 維生素、生物堿、卟啉、甾醇、短鏈的分支維生素、生物堿、卟啉、甾醇、短鏈的分支或直鏈脂肪酸

18、、氨基酸等或直鏈脂肪酸、氨基酸等v狹義的生長因子狹義的生長因子僅指維生素僅指維生素生長因子自養型微生物：生長因子自養型微生物：多數真菌、放線菌和細多數真菌、放線菌和細菌。菌。生長因子異養型微生物：生長因子異養型微生物：乳酸菌、營養缺陷型突乳酸菌、營養缺陷型突變株及致病菌等。變株及致病菌等。生長因子過量合成的微生物：生長因子過量合成的微生物：可用其生產有關的可用其生產有關的生長因子（如維生素），如阿舒假囊酵母生產生長因子（如維生素），如阿舒假囊酵母生產B2B2，謝氏丙桿菌、有些鏈霉菌生產，謝氏丙桿菌、有些鏈霉菌生產B12B12等。等。微生物的營養與培養基v配制培養基時，常使用生長因子豐富的配制培

19、養基時，常使用生長因子豐富的天天然物質制備物然物質制備物作為補充生長因子的培養基作為補充生長因子的培養基成分。成分。如：酵母膏、玉米漿、麥芽汁、肝浸液等。如：酵母膏、玉米漿、麥芽汁、肝浸液等。微生物的營養與培養基六、水六、水生理功能主要有：生理功能主要有：起到溶劑與運輸介質的作用；起到溶劑與運輸介質的作用；參與細胞內一系列化學反應；參與細胞內一系列化學反應；維持蛋白質、核酸等生物大分子穩定的天然構象；維持蛋白質、核酸等生物大分子穩定的天然構象；高比熱、高汽化熱等，以保證微生物的生命活動；高比熱、高汽化熱等，以保證微生物的生命活動；通過水合作用與脫水作用控制由多亞基組成的結構通過水合作用與脫水作

20、用控制由多亞基組成的結構.微生物細胞含水量很高，細菌、酵母和霉菌菌體分別微生物細胞含水量很高，細菌、酵母和霉菌菌體分別是是80%80%、75%75%和和85%85%，而霉菌孢子含水，而霉菌孢子含水39%39%，細菌芽孢含，細菌芽孢含水很低，約為水很低，約為30%30%左右。左右。微生物的營養與培養基水分活度水分活度a aww表示天然或人為環境中微生物表示天然或人為環境中微生物可實際利用的游離水的含量?？蓪嶋H利用的游離水的含量。v同溫同壓下，某溶液的蒸氣壓（同溫同壓下，某溶液的蒸氣壓（P P）與純水蒸氣壓）與純水蒸氣壓（P P0 0）之比：）之比：aw= P/ P0純水的純水的a aw w=1=

21、1無水產品，水蒸氣壓為零，無水產品，水蒸氣壓為零， a aw w=0=0各類微生物各類微生物aw范圍：范圍：0.6000.6000.9980.998微生物的營養與培養基營養物質能否進入細胞取決于三個方面的因素：營養物質能否進入細胞取決于三個方面的因素：營養物質本身的性質（相對分子量、質量、溶營養物質本身的性質（相對分子量、質量、溶解性、電負性等解性、電負性等; ;微生物所處的環境（溫度、微生物所處的環境（溫度、pHpH等）；等）；微生物細胞的透過屏障（原生質膜、細胞壁、微生物細胞的透過屏障（原生質膜、細胞壁、莢膜等）。莢膜等）。 除原生動物外，各種微生物都是通過除原生動物外，各種微生物都是通過

22、細胞膜的細胞膜的滲透和選擇性吸收作用滲透和選擇性吸收作用而從外界吸收營養物質的。而從外界吸收營養物質的。5.3 營養物質進入微生物細胞營養物質進入微生物細胞微生物的營養與培養基微生物營養物質的運輸方式分為：微生物營養物質的運輸方式分為： 單純擴散單純擴散 促進擴散促進擴散 主動運輸主動運輸 基團轉移基團轉移不耗能運輸不耗能運輸耗能運輸耗能運輸 呼吸作用轉運呼吸作用轉運微生物的營養與培養基1 1單純擴散（自由擴散、簡單擴散）單純擴散（自由擴散、簡單擴散） 原生質膜是一種半透性膜，營養物質通過原生質原生質膜是一種半透性膜，營養物質通過原生質膜上的小孔膜上的小孔，通過物理擴散方式由高濃度的胞外環，通

23、過物理擴散方式由高濃度的胞外環境向低濃度的胞內進行擴散。境向低濃度的胞內進行擴散。微生物的營養與培養基 特點特點不消耗能量不消耗能量；不需要載體；不需要載體；不能逆濃度運輸；運輸速率與膜內外不能逆濃度運輸；運輸速率與膜內外物質的濃度差成正比；物質的濃度差成正比；物質在擴散過程中沒有發生任何變化；物質在擴散過程中沒有發生任何變化；水水是唯一可以通過自由擴散穿過原生質膜的分子；是唯一可以通過自由擴散穿過原生質膜的分子；脂肪脂肪酸、乳酸、乙醇、甘油、戊糖分子、一些氣體（酸、乳酸、乙醇、甘油、戊糖分子、一些氣體（O O2 2、COCO2 2）及某些氨基酸分子及某些氨基酸分子在一定程度上也可通過自由擴散

24、進在一定程度上也可通過自由擴散進出細胞。出細胞。 8埃埃8埃埃微生物的營養與培養基2 2促進擴散促進擴散 特特點點 不消耗能量不消耗能量需需要要載體載體參與參與不不能進行能進行逆濃度逆濃度運輸運輸運輸速率與膜內外物質的濃度差成正比運輸速率與膜內外物質的濃度差成正比參與參與運輸的物質的運輸的物質的分子結構分子結構不發生本身不發生本身變化，但運輸速度加快變化，但運輸速度加快細胞外溶質借助于細胞膜上的細胞外溶質借助于細胞膜上的載體蛋白（酶）載體蛋白（酶）的協的協助，向胞內運送的方式。助，向胞內運送的方式。微生物的營養與培養基 通過促進擴散進入細胞的營養物質主要有通過促進擴散進入細胞的營養物質主要有氨

25、氨基酸、單糖、維生素及無機鹽基酸、單糖、維生素及無機鹽等。一般微生物通過等。一般微生物通過專一專一的載體蛋白運輸相應的物質，但也有微生物對的載體蛋白運輸相應的物質，但也有微生物對同一物質的運輸由一種以上的載體蛋白來完成。同一物質的運輸由一種以上的載體蛋白來完成。 微生物的營養與培養基3 3主動運輸（主動運輸（ ATP運輸運輸）重要特點：運輸過程中需要重要特點：運輸過程中需要消耗能量和載體消耗能量和載體，而且可，而且可以進行以進行逆濃度運輸逆濃度運輸。用于各種。用于各種離子離子和和一些糖類一些糖類的運輸。的運輸。廣泛存在于微生物中的一種主要的物質運輸方式。廣泛存在于微生物中的一種主要的物質運輸方

26、式。微生物的營養與培養基運輸方向：運輸方向：v同向運輸同向運輸(symport)(symport)v逆向運輸逆向運輸(antiport)(antiport)v單向運輸單向運輸(uniport)(uniport)微生物的營養與培養基鈉鉀泵的主動運輸鈉鉀泵的主動運輸Mg2+32膜內膜內膜外膜外微生物的營養與培養基主動運輸有何重要意義主動運輸有何重要意義? ?v最關鍵的是，微生物通過主動運輸可以從最關鍵的是，微生物通過主動運輸可以從各種環境中吸收到營養物質，從而對提高各種環境中吸收到營養物質，從而對提高其環境的適應性，具有重要作用。其環境的適應性，具有重要作用。微生物的營養與培養基4 4基團轉位基團

27、轉位基團轉位基團轉位依靠烯醇式磷酸丙酮酸高能鍵基團的轉運作用，依靠烯醇式磷酸丙酮酸高能鍵基團的轉運作用，是另一種類型的主動運輸，它與主動運輸的不同之處在于是另一種類型的主動運輸，它與主動運輸的不同之處在于它有一個復雜的運輸系統它有一個復雜的運輸系統( (酶系統酶系統) )來完成物質的運輸。來完成物質的運輸。 其特點是：需要能量，需要載體，可以逆濃度運輸，而其特點是：需要能量，需要載體，可以逆濃度運輸，而且物質結構在運輸過程中會發生化學變化。且物質結構在運輸過程中會發生化學變化。依靠烯醇式磷酸丙酮酸高能鍵基團的轉運作用依靠烯醇式磷酸丙酮酸高能鍵基團的轉運作用微生物的營養與培養基基團移位主要存在于

28、厭氧型和兼性厭氧型細胞基團移位主要存在于厭氧型和兼性厭氧型細胞中，主要用于中，主要用于各種糖類各種糖類的運輸，脂肪酸、核苷酸、的運輸，脂肪酸、核苷酸、堿基等也可以通過這種方式運輸。堿基等也可以通過這種方式運輸。磷酸載體組蛋白磷酸載體組蛋白轉磷酸酶系轉磷酸酶系E-、E-微生物的營養與培養基v電子傳遞體系中產生電子流，電子傳遞體系中產生電子流，膜內外產生電位差，引起載體膜內外產生電位差，引起載體蛋白變構，推動物質從細胞外蛋白變構，推動物質從細胞外轉運至細胞內。轉運至細胞內。5 5呼吸作用轉運呼吸作用轉運轉運能量：轉運能量：D-D-乳酸鹽脫氫氧化過程。乳酸鹽脫氫氧化過程。轉運蛋白：轉運蛋白：膜上的乳

29、酸脫氫酶膜上的乳酸脫氫酶偶聯部位：偶聯部位：乳酸脫氫酶與細胞色素乳酸脫氫酶與細胞色素B B1 1之間。之間。大腸桿菌依靠這種方式轉運：大腸桿菌依靠這種方式轉運：- -半乳糖苷、半乳糖、阿半乳糖苷、半乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸、拉伯糖、葡萄糖醛酸、6-6-磷酸己糖、氨基酸、丙酮酸、磷酸己糖、氨基酸、丙酮酸、二羧酸、核苷酸等。二羧酸、核苷酸等。微生物的營養與培養基四種運送營養方式的比較四種運送營養方式的比較比較項目比較項目單純擴散單純擴散促進擴散促進擴散主動運輸主動運輸基團移位基團移位特異載體蛋白特異載體蛋白無無有有有有有有運送速度運送速度慢慢快快快快快快運送方向運送方向濃濃稀稀濃濃稀稀稀稀濃濃稀

30、稀濃濃膜內外濃度膜內外濃度內內= =外外內內= =外外內高外低內高外低內高外低內高外低運送分子運送分子無特異性無特異性特異性特異性特異性特異性特異性特異性能量消耗能量消耗不需要不需要需要需要需要需要需要需要運送后的溶質分子運送后的溶質分子不變不變不變不變不變不變改變改變載體飽和效應載體飽和效應無無有有有有有有與溶質類似物與溶質類似物無競爭無競爭有競爭有競爭有競爭有競爭有競爭有競爭運送抑制劑運送抑制劑無無有有有有有有運送對象運送對象水水,O,O22糖、糖、SOSO4 42-2-氨基酸、乳糖氨基酸、乳糖葡萄糖、嘌呤葡萄糖、嘌呤微生物的營養與培養基不同微生物攝取葡萄糖的方式不同微生物攝取葡萄糖的方式

31、基團轉位基團轉位主動運輸主動運輸 促進擴散促進擴散大腸桿菌大腸桿菌銅綠假單胞菌銅綠假單胞菌 酵母菌酵母菌枯草桿菌枯草桿菌維涅蘭德固氮菌維涅蘭德固氮菌巴氏芽孢梭菌巴氏芽孢梭菌藤黃微球菌藤黃微球菌金黃色葡萄球菌金黃色葡萄球菌恥垢分支桿菌恥垢分支桿菌不同微生物其物質運輸方式不同，對于同不同微生物其物質運輸方式不同，對于同一物質，不同微生物的攝取方式也不同。一物質，不同微生物的攝取方式也不同。微生物的營養與培養基異養異養型生物型生物自養自養型生物型生物生長所需要的營養物質生長所需要的營養物質生長過程中能量的來源生長過程中能量的來源光能光能營養型營養型化能化能營養型營養型根據微生物生長所需要的主要營養要

32、素即根據微生物生長所需要的主要營養要素即碳源碳源和能源和能源的不同，可以將微生物劃分為不同的營的不同，可以將微生物劃分為不同的營養類型：養類型：5.2 微生物的營養類型微生物的營養類型微生物的營養與培養基根據碳源、能源及電子供體性質的不同根據碳源、能源及電子供體性質的不同，可將微生物分為：可將微生物分為：光能光能無機無機自養型自養型( (photolithoautotrophy)photolithoautotrophy)光能光能有機有機異養型異養型( (photoorganoheterotrophy)photoorganoheterotrophy)化能化能無機無機自養型自養型( (chemol

33、ithoautotrophy)chemolithoautotrophy)化能化能有機有機異養型異養型( (chemoorganoheterotrophy)chemoorganoheterotrophy)微生物的營養與培養基一、光能無機自養型（光能自養型）一、光能無機自養型（光能自養型）能以能以COCO2 2為唯一或主要碳源；為唯一或主要碳源；進行光合作用獲取生長所需要的能量；進行光合作用獲取生長所需要的能量；以無機物如以無機物如H H2 2、H H2 2S S、S S等作為供氫體或電子供體，等作為供氫體或電子供體，使使COCO2 2還原為構成細胞物質的有機物；還原為構成細胞物質的有機物；微生物

34、的營養與培養基 藻類及藍細菌等和植物一樣，以水藻類及藍細菌等和植物一樣，以水為電子供體（供氫體），進行產氧型為電子供體（供氫體），進行產氧型的光合作用，合成細胞物質。的光合作用，合成細胞物質。CO2+ 2H2S光能光能光合色素光合色素 CH2O + 2S+ H2OCO2+ H2O光能光能菌紫素菌紫素 CH2O + O2 綠硫細菌、紫硫細菌，以綠硫細菌、紫硫細菌，以H H2 2S S、S S、 NaNa2 2S S2 2O O3 3為電為電子供體，產生細胞物質，并伴隨硫元素的產生。子供體，產生細胞物質，并伴隨硫元素的產生。微生物的營養與培養基2 2光能有機異養型（光能異養型）光能有機異養型（光能

35、異養型）不能以不能以COCO2 2為主要或唯一的碳源；為主要或唯一的碳源；以有機物（以有機物（甲酸、乙酸、甲醇、異丙醇等甲酸、乙酸、甲醇、異丙醇等 ）作為）作為供氫體，利用光能將供氫體，利用光能將COCO2 2還原為細胞物質；還原為細胞物質；在生長時大多數需要外源的生長因子；在生長時大多數需要外源的生長因子；例如，紅螺菌屬中的一些細菌能利用異丙醇作為供例如，紅螺菌屬中的一些細菌能利用異丙醇作為供氫體，將氫體，將COCO2 2還原成細胞物質，同時積累丙酮。還原成細胞物質，同時積累丙酮。2CH2CH3 3CHOHCHCHOHCH3 3 + + CO2光能光能 光合色素光合色素2 2 CHCH3 3

36、C0CHC0CH3 3 + + CH2O + + H2O微生物的營養與培養基3 3化能無機自養型化能無機自養型 以以COCO2 2或碳酸鹽或碳酸鹽作為唯一或主要碳源進行生長時，利用作為唯一或主要碳源進行生長時，利用H H2 2、H H2 2S S、FeFe2+2+、NHNH3 3或或NONO2 2- -等等無機化合物無機化合物作為電子供體使作為電子供體使COCO2 2還原成還原成細胞物質?；軣o機自養型只存在于微生物中，可在完全無細胞物質。化能無機自養型只存在于微生物中，可在完全無機及無光的環境中生長，如硫細菌、硝化細菌、鐵細菌等。機及無光的環境中生長，如硫細菌、硝化細菌、鐵細菌等。 產甲烷菌

37、產甲烷菌 利用無機化合物（如銨、亞硝酸鹽、硫化氫、鐵離子等）氧利用無機化合物（如銨、亞硝酸鹽、硫化氫、鐵離子等）氧化過程中釋放出的化學能，以化過程中釋放出的化學能，以COCO2 2為碳源生長。為碳源生長。微生物的營養與培養基4 4化能有機異養型（化能異養型）化能有機異養型（化能異養型）生長所需要的碳源主要是一些有機化合生長所需要的碳源主要是一些有機化合物，如淀粉、糖類、纖維素、有機酸等。物，如淀粉、糖類、纖維素、有機酸等。有機物有機物既是碳源、能源又是供氫體。既是碳源、能源又是供氫體。大多數細菌、真菌、原生動物都是化能有機異養型微大多數細菌、真菌、原生動物都是化能有機異養型微生物；生物；所有致

38、病微生物均為化能有機異養型微生物所有致病微生物均為化能有機異養型微生物. 腐生型：引起食物腐敗變質的細菌、部分霉菌腐生型：引起食物腐敗變質的細菌、部分霉菌 寄生型：病源微生物寄生型：病源微生物結核桿菌 微生物的營養與培養基不同營養類型之間的界限并非絕對的不同營養類型之間的界限并非絕對的異養型微生物并非絕對不能利用異養型微生物并非絕對不能利用CO2；自養型微生物也并非不能利用有機物進行生長；自養型微生物也并非不能利用有機物進行生長；有些微生物在不同生長條件下生長時有些微生物在不同生長條件下生長時, ,其營養類型也會發生改變其營養類型也會發生改變: :例如紫色非硫細菌例如紫色非硫細菌(purple

39、 nonsulphur bacteria)：沒有有機物時，同化沒有有機物時，同化CO2， 為為自養型微生物；自養型微生物；有機物存在時，利用有機物進行生長，為有機物存在時，利用有機物進行生長，為異養型微生物異養型微生物；光照和厭氧條件下，利用光能生長，為光照和厭氧條件下，利用光能生長，為光能營養型微生物光能營養型微生物；黑暗與有氧條件下，依靠有機物氧化產生的化學能生長，為黑暗與有氧條件下，依靠有機物氧化產生的化學能生長，為化能化能營養型微生物。營養型微生物。微生物營養類型的可變性有利于提高其對環境變化的適應能力微生物營養類型的可變性有利于提高其對環境變化的適應能力微生物的營養與培養基微生物的營

40、養類型微生物的營養類型 營養類型營養類型能源能源氫的供體氫的供體基本碳源基本碳源微生物舉例微生物舉例光能無機營養光能無機營養（光能自養型）（光能自養型）光光無機物無機物二氧化碳二氧化碳藍細菌，綠色硫藍細菌，綠色硫細菌，藻類細菌，藻類光能有機營養光能有機營養（光能異養型）（光能異養型）光光有機物有機物二氧化碳及二氧化碳及簡單有機物簡單有機物紫色非硫細菌紫色非硫細菌化能無機營養化能無機營養（化能自養型）（化能自養型）無機物無機物無機物無機物二氧化碳二氧化碳硝化細菌，硝化細菌，氫細菌氫細菌化能有機營養化能有機營養（化能異養型）（化能異養型）有機物有機物有機物有機物有機物有機物大多數細菌和全大多數細菌

41、和全部真核微生物部真核微生物微生物的營養與培養基: : 為人工培養微生物而制備的、提供微生物以為人工培養微生物而制備的、提供微生物以合適的營養條件的物質。合適的營養條件的物質。培養基幾乎是一切對微生物進行研究和利用工作的基礎培養基幾乎是一切對微生物進行研究和利用工作的基礎需要六大營養要素需要六大營養要素（碳源、氮源、無機鹽、能源、碳源、氮源、無機鹽、能源、生長因子、水生長因子、水）且比例適當。且比例適當。任何培養基一旦配成，必須任何培養基一旦配成，必須立即立即進行滅菌處理進行滅菌處理: :常用高壓蒸汽滅菌：常用高壓蒸汽滅菌： 1.05kg/cm2, 121.3, 15-20min； 0.56k

42、g/cm2, 112.6, 15-30min;5.4 微生物的微生物的培養基培養基微生物的營養與培養基根據培養菌種、用途選擇（根據培養菌種、用途選擇（有的放矢有的放矢）營養物的濃度與比例應恰當（營養物的濃度與比例應恰當（營養協調營養協調：H2OC+能源能源 N源源 P、S K、Mg 生長因子）生長因子）物理化學條件適宜（物理化學條件適宜（條件適宜條件適宜：pH、氧化還原電位、氧化還原電位Eh、水分活度、水分活度aw等）等）根據培養目的來選擇不同來源的原料（根據培養目的來選擇不同來源的原料（經濟節約經濟節約）無菌狀態無菌狀態一、制備培養基的基本原則一、制備培養基的基本原則微生物的營養與培養基1.

43、1.培養基組分應適合微生物營養特點（有的放矢）培養基組分應適合微生物營養特點（有的放矢）自養型自養型微生物的培養基應該由簡單的無機物質組成。微生物的培養基應該由簡單的無機物質組成。異養型異養型微生物的培養基至少含有一種有機物質，但有機微生物的培養基至少含有一種有機物質，但有機物的種類需適應所培養菌的特點。物的種類需適應所培養菌的特點。 微生物的不同類群，它們所需要的培養基成分也不同微生物的不同類群，它們所需要的培養基成分也不同:細菌：牛肉膏蛋白胨培養基、細菌：牛肉膏蛋白胨培養基、LB 培養基培養基放線菌：高氏一號培養基放線菌：高氏一號培養基真菌：查氏合成培養基、真菌：查氏合成培養基、PDA 培

44、養基培養基 酵母菌：酵母菌： 麥芽汁培養基麥芽汁培養基當對當對“試驗菌試驗菌”營養需求特點不清楚的時候，可以采用營養需求特點不清楚的時候，可以采用生長譜法生長譜法進行測定。進行測定。微生物的營養與培養基討論：如何利用生長譜法測知微生物對某一討論：如何利用生長譜法測知微生物對某一類營養素中各種物質的利用情況？類營養素中各種物質的利用情況？v有把試驗菌的有把試驗菌的懸浮液懸浮液與與不含這一類營養素不含這一類營養素但含有但含有其它所有營養成分的固體培養基混合后，在培養其它所有營養成分的固體培養基混合后，在培養皿上倒成平板，然后在平板上劃分區，每一小區皿上倒成平板，然后在平板上劃分區，每一小區上放上少

45、量欲測營養素中的一種物質。經培養后，上放上少量欲測營養素中的一種物質。經培養后，凡在其周圍出現生長圈的，證明微生物可以利用凡在其周圍出現生長圈的，證明微生物可以利用這種物質作為營養素。這種物質作為營養素。微生物的營養與培養基 2. 營養物的濃度與比例應恰當（營養協調）營養物的濃度與比例應恰當（營養協調）濃度過高濃度過高微生物的生長受到抑制；微生物的生長受到抑制； 濃度過小濃度過小不能滿足微生物生長的需要；不能滿足微生物生長的需要；碳氮比（碳氮比（C/NC/N）直接影響微生物生長與繁殖及代謝產物的形直接影響微生物生長與繁殖及代謝產物的形成與積累，故常作為考察培養基組成時的一個重要指標成與積累，故

46、常作為考察培養基組成時的一個重要指標 碳源中所含碳原子的碳源中所含碳原子的molmol數數 氮源中所含氮原子的氮源中所含氮原子的molmol數數C/NC/N比值比值= =例：谷氨酸生產中例：谷氨酸生產中 C/N 4/1時，菌體大量繁殖，谷氨酸積累少；時，菌體大量繁殖，谷氨酸積累少；C/N3/1 時，菌體生長受抑制，而谷氨酸大量增加。時，菌體生長受抑制，而谷氨酸大量增加。注：注：C/NC/N比有時也指培養基中比有時也指培養基中還原糖與粗蛋白還原糖與粗蛋白含量之比）含量之比）營養物的濃度與比例應恰當：營養物的濃度與比例應恰當：H2OC+能源能源 N源源 P、S K、Mg 生長因子）生長因子）微生物

47、的營養與培養基 3. 3. 物理化學條件適宜（條件適宜）物理化學條件適宜（條件適宜）（1）pH: 各類微生物的最適生長各類微生物的最適生長pH值各不相同值各不相同： 細細 菌：菌：7.08.0 放線菌：放線菌：7.58.5 酵母菌：酵母菌：3.86.0 霉霉 菌：菌：4.05.8 微生物的生長和代謝過程中，營養物質的利用和代謝微生物的生長和代謝過程中，營養物質的利用和代謝產物的形成與積累，培養基初始產物的形成與積累，培養基初始pH值會發生改變，為維值會發生改變，為維持培養基持培養基pH值相對恒定，通常采用下列兩種方式：值相對恒定，通常采用下列兩種方式：內源調節內源調節：在培養基里加一些在培養基

48、里加一些緩沖劑或不溶性的碳酸鹽緩沖劑或不溶性的碳酸鹽；調節培養基合適的調節培養基合適的碳氮比碳氮比。外源調節外源調節：按實際需要不斷向發酵液中按實際需要不斷向發酵液中流加流加酸液或堿液。酸液或堿液。微生物的營養與培養基 磷酸緩沖液：磷酸緩沖液：pH值從值從6.07.6之間之間K2HPO4+HCl KH2PO4+KClKH2PO4+KOH K2HPO4+H2O加入加入CaCO3： CO32 HCO3 H2CO3 CO2+H2O+H+H+H+H培養基中所含氨基酸、肽、蛋白質等物質也可起培養基中所含氨基酸、肽、蛋白質等物質也可起到一定的緩沖作用。到一定的緩沖作用。微生物的營養與培養基磷酸二氫鉀磷酸二

49、氫鉀氫氧化鈉緩沖液（氫氧化鈉緩沖液（0.05M0.05M） X毫升毫升 0.2M K2PO4 + Y毫升毫升 0.2M NaOH加水稀釋至加水稀釋至29毫升毫升 pH(20)pH(20)X mLX mLY mLY mLpH(20)pH(20)X mLX mLY mLY mL5.85.86.06.06.26.26.46.46.66.66.86.85 55 55 55 55 55 50.3720.3720.5700.5700.8600.8601.2601.2601.7801.7802.3652.3657.07.07.27.27.47.47.67.67.87.88.08.05 55 55 55 55

50、 55 52.9632.9633.5003.5003.9503.9504.2804.2804.5204.5204.6804.680微生物的營養與培養基3. 物理化學條件適宜物理化學條件適宜滲透壓滲透壓：由溶液中所含分子或離子的質點數決：由溶液中所含分子或離子的質點數決定的，由定的，由2 2種不同濃度的溶液產生的。溶液的質種不同濃度的溶液產生的。溶液的質點數越多，產生的滲透壓就越大。點數越多，產生的滲透壓就越大。 等滲溶液等滲溶液 適宜微生物生長適宜微生物生長( (大部分微生物大部分微生物) ) 高滲溶液高滲溶液 細胞發生質壁分離細胞發生質壁分離 低滲溶液低滲溶液 細胞吸水膨脹，直至破裂細胞吸水

51、膨脹，直至破裂而有的細菌如而有的細菌如金黃色釀膿葡萄球金黃色釀膿葡萄球 則能在則能在3mol/L NaCl的高滲溶液中生長。的高滲溶液中生長。能在高鹽環境（能在高鹽環境（2.86.2g/L NaCl）生長的微生物常）生長的微生物常被稱為嗜鹽微生物（被稱為嗜鹽微生物（Halophiles）。）。微生物的營養與培養基水活度水活度在在人為或人為或天然環境中，微生物可實際利用的自由水或游離水天然環境中，微生物可實際利用的自由水或游離水的含量的含量. 一般用：在一定的溫度和壓力條件下一般用：在一定的溫度和壓力條件下,溶液的蒸汽壓力與同樣條溶液的蒸汽壓力與同樣條件下純水蒸汽壓力之比表示，即：件下純水蒸汽壓

52、力之比表示，即： aw=Pw/PowPw代表溶液蒸汽壓力代表溶液蒸汽壓力, P0w代表純水蒸汽壓力。代表純水蒸汽壓力。純水純水aw為為1.00。 溶液中溶質越多溶液中溶質越多, aw越小。越小。微生物一般在微生物一般在aw為為0.600.99的條件下生長的條件下生長aw過低時過低時,微生物生長的遲緩期延長微生物生長的遲緩期延長,比生長速率和總生長量減少比生長速率和總生長量減少微生物不同，其生長的最適微生物不同，其生長的最適aw不同。不同。微生物的營養與培養基aw：水分活度（水分活度（ water activity ）各種微生物生長的水分活度：各種微生物生長的水分活度：0.60.99 之間之間a

53、w=PP0細菌細菌酵母菌酵母菌霉菌霉菌微生物微生物生長的生長的最低最低 aw一般：一般： 0.900.98嗜鹽菌：嗜鹽菌： 0.75（約（約 5.5mol/LNaCl ）一般一般 ：0.870.91高滲酵母：高滲酵母： 0.610.65 （0.1V以上的環以上的環境中均能生長境中均能生長)厭氧微生物：厭氧微生物：只能在只能在+0.1V以下生長以下生長兼性厭氧微生物兼性厭氧微生物：+0.1V以上呼吸、以上呼吸、+0.1V以以下發酵下發酵微生物的營養與培養基vEh 指以氫電極為標準時某氧化還原系統的電極電位指以氫電極為標準時某氧化還原系統的電極電位值。標準氫電極是一個半電池，它由值。標準氫電極是一

54、個半電池，它由pH為零的為零的HCl溶溶液、涂滿鉑黑的鉑箔電極和壓力為液、涂滿鉑黑的鉑箔電極和壓力為1個大氣壓的氫所組個大氣壓的氫所組成的。在這種條件下，此標準氫電極的電極電位等于成的。在這種條件下，此標準氫電極的電極電位等于零。零。v在溶液中的某氧化還原偶，當其氧化型和還原型的濃在溶液中的某氧化還原偶，當其氧化型和還原型的濃度相等時，所產生的氧化還原勢可用度相等時，所產生的氧化還原勢可用E0表示。任何氧表示。任何氧化還原系統所產生的氧化還原勢明顯地化還原系統所產生的氧化還原勢明顯地受受pH的影響的影響。v在生物體系中，常用在生物體系中，常用E表示表示pH為為7時某氧化還原偶的時某氧化還原偶的

55、氧化還原勢。氫電極氧化還原勢。氫電極E的上限是的上限是+0.82V，它出現在高，它出現在高氧且沒有氧消耗的環境中，下限為氧且沒有氧消耗的環境中，下限為-0.42V，出現在富，出現在富含氫的環境中。含氫的環境中。微生物的營養與培養基v除測定電極電位外，培養基中的除測定電極電位外，培養基中的Eh值還可使用氧化還值還可使用氧化還原指示劑如刃天青原指示劑如刃天青(resazurin)等來測定。刃天青在培養等來測定。刃天青在培養基中的加入量一般為基中的加入量一般為1mg/L(1ppm)。它在無氧條件下。它在無氧條件下呈無色狀態，這時的呈無色狀態，這時的Eh值相當于值相當于40mV左右；在有左右；在有氧條

56、件下，其顏色與溶液的氧條件下，其顏色與溶液的pH有關有關(中性時呈紫色，堿中性時呈紫色，堿性時呈藍色，酸性時呈紅色；在微量氧時，它呈粉紅性時呈藍色，酸性時呈紅色；在微量氧時，它呈粉紅色。刃天青的變色反應機理是：色。刃天青的變色反應機理是：微生物的營養與培養基 微生物的培養基常常是一個具有多對氧化還原偶的微生物的培養基常常是一個具有多對氧化還原偶的復雜電化學系統，這時所能測出的復雜電化學系統，這時所能測出的Eh值僅代表了它們值僅代表了它們的綜合結果。的綜合結果。 在各對氧化還原偶中，對微生物生長繁殖影響最大在各對氧化還原偶中，對微生物生長繁殖影響最大的是的是分子氧與分子氫分子氧與分子氫的濃度，這

57、對嚴格厭氧菌的影響的濃度，這對嚴格厭氧菌的影響尤為重大。尤為重大。 配制培養基、滅菌、接種和培養等一切操作過程中配制培養基、滅菌、接種和培養等一切操作過程中必須采用嚴格厭氧技術以去除氧氣外，還要在培養基必須采用嚴格厭氧技術以去除氧氣外，還要在培養基中加入一定量的還原劑，例如可用巰基乙酸中加入一定量的還原劑，例如可用巰基乙酸(0.010.20)、抗壞血酸、抗壞血酸(0.1)、硫化鈉、硫化鈉(0.025)、半胱氨、半胱氨酸酸(0.05)、葡萄糖、葡萄糖(0.11.0)、鐵屑、谷胱甘肽、鐵屑、谷胱甘肽、氯化高鐵血紅素、二硫蘇糖醇或庖肉氯化高鐵血紅素、二硫蘇糖醇或庖肉(瘦牛肉小塊瘦牛肉小塊)等來等來降

58、低它的氧化還原勢值。據測定，加了鐵屑的培養基，降低它的氧化還原勢值。據測定，加了鐵屑的培養基，其其Eh值可降到值可降到0.40V的水平。的水平。微生物的營養與培養基4. 根據應用目的選擇原料及來源（經濟節約）根據應用目的選擇原料及來源（經濟節約）該培養基的應用目的是：培養菌體還是積累代謝產物？該培養基的應用目的是：培養菌體還是積累代謝產物？ 代謝產物是初級代謝產物還是次級代謝產物？實驗室種代謝產物是初級代謝產物還是次級代謝產物？實驗室種子培養還是大規模發酵？子培養還是大規模發酵？ 用于用于培養菌體、種子培養菌體、種子的培養基營養應豐富，氮源含量的培養基營養應豐富，氮源含量宜高（碳氮比低）；宜高

59、（碳氮比低）；用于大量用于大量生產代謝產物生產代謝產物的培養基其氮源一般應比種子的培養基其氮源一般應比種子培養基稍低，（但若發酵產物是含氮化合物時，有時還培養基稍低，（但若發酵產物是含氮化合物時，有時還應提高培養基的氮源含量）；若代謝產物是應提高培養基的氮源含量）；若代謝產物是次級代謝產次級代謝產物物時要考慮是否加入特殊元素或特定的代謝產物；時要考慮是否加入特殊元素或特定的代謝產物；當所設計的是當所設計的是大規模發酵用大規模發酵用的培養基時，應重視培養的培養基時，應重視培養基中各成份的來源和價格，應選擇來源廣泛、價格低廉基中各成份的來源和價格，應選擇來源廣泛、價格低廉 的原料，提倡以粗代精，以

60、廢代好。的原料，提倡以粗代精，以廢代好。微生物的營養與培養基經濟節約原則經濟節約原則以粗（糧）代精（糧）以粗（糧）代精（糧）以野（生）代家（種）以野（生）代家（種）以廢（棄物）代好（材料）以廢（棄物）代好（材料）以國（產）代進（口）以國（產）代進（口）以簡代繁以簡代繁以氮代朊以氮代朊以烴代糧以烴代糧以纖（維素）代糖（類）以纖（維素）代糖（類）微生物的營養與培養基培養基配制時應注意的幾個問題：培養基配制時應注意的幾個問題：1 1、沉淀、沉淀2 2、瓊脂膠體強度的破壞、瓊脂膠體強度的破壞3 3、褐色物質的形成、褐色物質的形成4 4、pHpH發生變化發生變化微生物的營養與培養基高壓蒸氣滅菌高壓蒸氣滅