1、武漢生物工程學(xué)院高等教育自學(xué)考試本科論文（設(shè)計(jì)） 武漢生物工程學(xué)院高等教育自學(xué)考試畢 業(yè) 論 文論文題目：香菇多糖生物活性的作用與研究進(jìn)展指導(dǎo)老師：專 業(yè)：準(zhǔn)考證號(hào)：作者姓名：答辯時(shí)間：2015年 12月 23日目錄 摘 要II 關(guān)鍵詞II 前 言III1. 香菇多糖的簡(jiǎn)介12. 香菇多糖的理化性質(zhì)13. 香菇多糖的生物活性1 3.1香菇多糖的免疫調(diào)節(jié)1 3.2香菇多糖的抗腫瘤活性1 3.3香菇多糖抗感染作用2 3.4香菇多糖的抗病毒活性24. 香菇多糖的應(yīng)用3 4.1醫(yī)藥領(lǐng)域應(yīng)用3 4.2食品鄰域應(yīng)用35. 展望36. 小結(jié)3參考文獻(xiàn)4致 謝4摘 要 香菇多糖是從食用香菇香菇子實(shí)體分離提取的

2、一種結(jié)構(gòu)復(fù)雜的高分子化合物，它能激活調(diào)節(jié)人類的免疫系統(tǒng)因而具有很強(qiáng)的抗癌生物活性。但是由于其分離純化技術(shù)中不成熟以及缺乏透徹的了解香菇多糖分子結(jié)構(gòu)和功能的關(guān)系，使其廣泛的藥效受限制從而不能有效被人類提取利用。本文通過(guò)簡(jiǎn)明扼要的敘述和經(jīng)典實(shí)例旨在探討不同研究領(lǐng)域?qū)ο愎蕉嗵堑恼J(rèn)識(shí)，以及調(diào)節(jié)人體的生命活動(dòng)的作用。文章系統(tǒng)地闡述了近年來(lái)香菇多糖的研究進(jìn)展，并展望今后的研究方向。關(guān)鍵詞香菇多糖；生物活性；應(yīng)用；發(fā)展前 言 糖類的研究已有百余年的歷史，近20多年來(lái)，隨著膜的化學(xué)功能，免疫物質(zhì)的化學(xué)研究的進(jìn)展以及探尋新藥物資源的不斷拓展和研究的深入，發(fā)現(xiàn)糖類在生物體中的作用不僅是作為能量資源或結(jié)構(gòu)材料，更重

3、要的是還參與了生命現(xiàn)象中細(xì)胞的各種活動(dòng)，具有多種多樣的生物學(xué)功能。多糖一般由十個(gè)分子以上的單糖通過(guò)糖苷鍵連接而成的高分子多聚物。多糖按來(lái)源大致可分為植物多糖、動(dòng)物多糖、海藻多糖、微生物多糖即細(xì)菌多糖和真菌多糖等。其中，具有很強(qiáng)生物活性的真菌多糖的研究日益受到重視，真菌多糖從真菌子實(shí)體、菌絲體、發(fā)酵液中分離，是一類可以控制細(xì)胞分裂分化、調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)和衰老的活性多糖1。真菌多糖作為藥物研究始于20世紀(jì)50年代，在60年代以后成為免疫促進(jìn)劑受到廣泛關(guān)注，其中香菇多糖(1entinan，LNT)是研究得較透徹的多糖之一香菇Lentinus edodes(Berk)Sing為擔(dān)子菌綱傘形科真菌，是世界名

4、貴食用菌兼藥用菌之一。70年代初，Shida等用三氯醋酸浸提、甲醇等沉淀從香菇中提取得到三種-葡聚糖水溶性多糖，首次報(bào)道了香菇中含有抗腫瘤的活性物質(zhì)，并認(rèn)為一種分子量在16000的香菇多糖也具有抗腫瘤活性2。80年代以來(lái)，香菇多糖的研究更為深入，香菇多糖的提取由子實(shí)體發(fā)展到從深層發(fā)酵香菇菌絲體，對(duì)香菇多糖的研究大量轉(zhuǎn)向藥理和臨床實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明香菇多糖具有廣泛的抗腫瘤作用，尤其對(duì)慢性粒細(xì)胞白血病、胃癌、鼻煙癌、直腸癌和乳腺癌等有抑制作用和防止手術(shù)后轉(zhuǎn)移的效果，適用于病后機(jī)體康復(fù)，是目前已知較強(qiáng)的免疫增強(qiáng)劑。此外，香菇多糖還是治療各種肝炎，特別是慢性遷移肝炎的良好藥物。隨著經(jīng)濟(jì)社會(huì)的不斷發(fā)展，香菇

5、多糖行業(yè)將越來(lái)越受到人們的關(guān)注，而作為生藥學(xué)和藥理學(xué)發(fā)展的相關(guān)產(chǎn)業(yè)，香菇多糖也倍受中醫(yī)藥學(xué)者和科研人青睞 III1.香菇多糖的簡(jiǎn)介 香菇多糖（Lentinan 簡(jiǎn)稱LNT）是從傘菌科香菇屬的天然香菇子實(shí)體中提取得到的一種(1-3）葡聚糖5。它是一類具有調(diào)節(jié)人體生理機(jī)能、增強(qiáng)人體免疫力、預(yù)防和治療多種慢性疾病作用的物質(zhì)，尤其是它具有顯著的、獨(dú)特的抗腫瘤活性，并減輕放療和化療的毒副作用，其抗腫瘤的藥理作用并非直接殺死致病源，而是通過(guò)刺激免疫細(xì)胞成熟、分化，增強(qiáng)和改善人體機(jī)能平衡，恢復(fù)和提高人體細(xì)胞對(duì)淋巴分子、激素及其它生理活性因子的反應(yīng)。該多糖的一級(jí)結(jié)構(gòu)具有-(13)連接的吡喃葡聚糖主鏈，在主鏈中

6、葡萄糖的c6位上含有支點(diǎn)(每5個(gè)葡萄糖有2個(gè)支點(diǎn))，其側(cè)鏈?zhǔn)怯?(16)鍵和-(13)鍵相連的葡萄糖聚合體組成，在側(cè)鏈上也含有少數(shù)內(nèi)部-(16)鍵。x射線衍射分析證明，其立體結(jié)構(gòu)為右旋三重螺旋的六方晶系，晶格常數(shù)a=b=15 nm，c=06 nm。采用高分辨13C-核磁共振(13CNMR)研究表明，其二級(jí)結(jié)構(gòu)為凝結(jié)型的單螺旋構(gòu)象。Sureniav3j等從4種香菇中分離出的4種高分子抗腫瘤活性多糖，經(jīng)檢測(cè)都是(13)-D-葡聚糖，并含有46152的蛋白質(zhì)。但4種多糖分別被破壞了三螺旋(13)-D-構(gòu)型、被超聲波打成碎片、被除去結(jié)合蛋白質(zhì)后，檢測(cè)它們的抗腫瘤活性，發(fā)現(xiàn)比天然物質(zhì)有所降低。這就表明，

7、多糖的構(gòu)型、相對(duì)分子質(zhì)量及結(jié)合蛋白質(zhì)也可能影響其抗腫瘤活性。2.香菇多糖的理化性質(zhì) 香菇多糖以一種-D|1-3|葡萄糖殘基為主鏈,側(cè)鏈?zhǔn)且环N(1-6)葡萄糖殘基的葡萄糖。重復(fù)結(jié)構(gòu)單位一般含有7個(gè)葡萄糖殘基，其中2個(gè)殘基在側(cè)鏈上。有文獻(xiàn)報(bào)道，香菇中的多糖結(jié)構(gòu)有利于誘生干擾素的活性，因此在治療肝炎方面具有積極的意義。通過(guò)采用凝膠濾過(guò)法(HPLC)激光拉曼散射法測(cè)得香菇多糖的相對(duì)分子量為4105 81054。香菇多糖為白色粉末狀固體，對(duì)光和熱穩(wěn)定，在水中最大溶解度為3mg/ml，能溶解于0.5mol/LNaOH溶液中，溶解度可達(dá)50-100mg/ml，不溶于甲醇、乙醇、丙酮等有機(jī)溶劑。目前有人正在研

8、究，在香菇多糖原有的結(jié)構(gòu)上接硫酸根基團(tuán)，在不改變藥品功效的基礎(chǔ)上，可大大提高水溶性。香菇多糖具有吸濕性，在相對(duì)濕度為92.5%的25室溫環(huán)境中放置15天，吸水量可達(dá)40%，因此，香菇多糖應(yīng)保存在干燥狀態(tài)下3。香菇加水煮沸3次（3小時(shí)，2小時(shí)，1小時(shí)），濾過(guò)、濃縮、除蛋白，離子交換或透析除雜質(zhì)，加3倍量乙醇沉淀，用無(wú)水乙醇、丙酮、乙醚洗滌，真空干燥，得到微黃白色粉末。將粉末溶于水，經(jīng)DEAE纖維柱色譜和分級(jí)沉淀法分離、濃縮，加乙醇沉淀，再用無(wú)水乙醇、丙酮、乙醚洗滌后放入盛有五氧化二磷的真空干燥中干燥，得白色粉末。另有用超濾法提取香菇多糖，純度可達(dá)74.4%6。3.香菇多糖的生物活性 3.1香菇多

9、糖的免疫調(diào)節(jié)香菇多糖（LNT）是T細(xì)胞的免疫佐劑，其抗腫瘤作用依賴于由胸腺或T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)；輔助性T（Th）細(xì)胞可能是其主要的厚發(fā)刺激細(xì)胞。在周愛(ài)武的香菇多糖的免疫調(diào)節(jié)實(shí)驗(yàn)中。LNT對(duì)Cy誘導(dǎo)免疫功能低下小鼠脾細(xì)胞溶血素抗體（lgM）生成的影響。實(shí)驗(yàn)表明國(guó)產(chǎn)LNT3個(gè)劑量和日本產(chǎn)LNT均可顯著促進(jìn)Cy誘導(dǎo)免疫功能低下小鼠IgM抗體的生成，其中以每天1mg/kgLNT的作用最顯著。 LNT對(duì)ConA誘導(dǎo)小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)的影響。其中LNT在1125mg/L濃度范圍內(nèi)可明顯促進(jìn)ConA誘導(dǎo)的T細(xì)胞增殖反應(yīng)，量效曲線呈現(xiàn)濃度依賴性雙向作用8。 3.2香菇多糖的抗腫瘤活性 香菇含有多種有效藥

10、用成分，尤其是香菇多糖（Lentinan,LNT)是一種重要的生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑，它可以通過(guò)刺激免疫細(xì)胞成熟，分化和增殖，改善機(jī)體，達(dá)到恢復(fù)和提高宿主細(xì)胞對(duì)淋巴因子、激素和其它生理活性因子的反應(yīng)性，由于是間接作用，所以毒副作用小。我國(guó)于1998年引進(jìn)LNT加工技術(shù)并實(shí)現(xiàn)國(guó)產(chǎn)化，結(jié)合化療，廣泛應(yīng)用于臨床。下面為L(zhǎng)NT在幾個(gè)方面的應(yīng)用。 首先，對(duì)各時(shí)期的胃腸癌顯示了良好的化學(xué)輔助治療作用。由郭成業(yè)對(duì)22例胃癌患者研究發(fā)現(xiàn)；患者化療前3天開(kāi)始使用LNT（用量為1mg/次，靜脈注射，每周2次全療程6-8周）總有效率CR（完全緩解）+PR（部分緩解）為60%，而單化療療程的觀察組有效率CR+PR僅為33.3

11、%。劉伯宇的實(shí)驗(yàn)中化療過(guò)程中不良反應(yīng)的發(fā)生率，實(shí)驗(yàn)組也明顯低于對(duì)照組。另外，楊樹(shù)軍、符幼莉等在進(jìn)行胃癌治療中結(jié)合化療和LNT輔助治療都得到相似的結(jié)果7。另外，LNT對(duì)惡生淋巴癌、鼻咽癌、肝癌和白血病都有顯著的輔助的治療效果。 3.3香菇多糖抗感染作用 據(jù)報(bào)道香菇多糖可抑制抗菌藥的耐藥性:香菇多糖可顯著抑制用鏈霉素、雷米封和利福平聯(lián)合治療結(jié)核的復(fù)發(fā)。可用于治療結(jié)核桿菌感染,產(chǎn)生耐藥性的肺結(jié)核病人,用香菇多糖治療一段時(shí)間后,病人痰菌轉(zhuǎn)陰性,中性粒細(xì)胞吞噬性增加。香菇多糖還具有抗寄生蟲(chóng)作用，可延長(zhǎng)李斯特菌感染小鼠的生存期,可能與香菇多糖提高巨噬細(xì)胞功能有關(guān)。香菇多糖對(duì)利曼化等原蟲(chóng)也有作用。說(shuō)明香菇多

12、糖抗寄生蟲(chóng)作用與T細(xì)胞功能有關(guān)。香菇多糖對(duì)泡狀口炎病毒感染引起的小鼠腦炎有顯著的治療和預(yù)防作用,治療組100%存活而對(duì)照組全部死亡。香菇多糖對(duì)Abelson病毒、A2(H2N2)病毒、12型腺病毒及流感病毒感染均有抑制作用,是治療各種肝炎特別是慢性遷移型肝炎的良好藥物6。香菇多糖抗病毒作用與其誘生IFN和提高NK細(xì)胞活性有關(guān)11。香菇多糖抗感染的機(jī)制與多糖本身的特性有關(guān)。病原體表面的糖蛋白識(shí)別正常細(xì)胞表面的糖分子并發(fā)生黏附作用,是引起感染的必要前提。體液中游離的糖分子可以與病毒結(jié)合起到屏蔽作用,因此糖分子的干擾也是其抗感染的機(jī)制之一。HIV是目前最難對(duì)付的病毒之一。硫酸化香菇多糖具有顯著抗HI

13、V作用,體外10mg/L就完全抑制HIV抗原的表達(dá),干擾HIV對(duì)MT4細(xì)胞的侵染,抑制合胞體形成;臨床使用能協(xié)同疊氮胸苷(AZT)更好地抑制HIV抗原的表達(dá)12。 3.4香菇多糖的抗病毒活性 香菇含有大量生物活性物質(zhì),其中主要活性成分是香菇多糖。通過(guò)近30年的研究,香菇多糖具有抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫功能和刺激干擾素形成等功能,已逐步開(kāi)發(fā)成新藥應(yīng)用于臨床,并取得一定的效果。但是香菇多糖活性和臨床療效并不突出,特別是抗病毒活性很低。目前病毒感染人群相當(dāng)龐大,抗病毒藥物短缺,經(jīng)結(jié)構(gòu)修飾的香菇多糖具有較強(qiáng)的抗病毒活性,為提高香菇多糖的生物活性,多糖的分子修飾和結(jié)構(gòu)改造具有重要意義。已有的試驗(yàn)證明,經(jīng)過(guò)修飾的

14、香菇多糖都具有較好的生物活性,其中酯化是一種很有效的結(jié)構(gòu)修飾方法,經(jīng)酯化后的香菇多糖都具有較好的抗病毒活性。酯化的方法有硫酸酯化、磷酸酯化等,研究最多的是硫酸、研究最多的是硫酸酯化多糖。現(xiàn)有的經(jīng)酯化后的多糖雖然在抗病毒活性上有了很大的改善,但是這些酯化方法都有一個(gè)共同特點(diǎn)修飾反應(yīng)過(guò)于激烈,這勢(shì)必對(duì)多糖結(jié)構(gòu)產(chǎn)生不同程度的破壞,進(jìn)而影響其活性;連續(xù)用藥又會(huì)出現(xiàn)抗凝血和血小板減少等癥狀;而且硫酸酯化多糖體內(nèi)療效不明顯。為此,本研究采用香菇多糖和丙酸在酶催化下酯化,得到香菇多糖酯,以提高抗病毒活性9。日本石田博士研究認(rèn)為，香菇含有一種雙鏈核糖核酸，能刺激人體網(wǎng)狀細(xì)胞及白血球釋放干擾素，而干擾素具有抗病

15、毒作用。因此，適當(dāng)多吃香菇，對(duì)人體大有裨益。香菇菌絲體提取物可抑制細(xì)胞的吸附皰疹病毒，從而防治單純皰疹病毒、巨細(xì)胞病毒引起的各類疾病。英國(guó)從培養(yǎng)的香菇菌絲體中提取到一種物質(zhì)，可使因艾滋病病毒感染的T 淋巴細(xì)胞復(fù)原，刺激巨噬細(xì)胞，有助于產(chǎn)生抗體治療艾滋病，且安全無(wú)副作用10。4.香菇多糖的應(yīng)用 4.1醫(yī)藥領(lǐng)域應(yīng)用 隨著對(duì)多糖研究的深入,已發(fā)現(xiàn)越來(lái)越多的多糖在抗癌、提高免疫、抗病毒、抗炎、降血糖、降血脂、抗氧化作用、抗衰老、抗凝血、抗血栓等方面呈現(xiàn)出較強(qiáng)的活性13。 香菇多糖與化療劑聯(lián)合使用，有減毒、增效作用。化療藥物殺傷腫瘤細(xì)胞的選擇性差，對(duì)正常細(xì)胞也有殺傷力，產(chǎn)生毒副作用。在化療過(guò)程中服用香菇

16、多糖，可也增強(qiáng)化療的療效，并減輕化療的毒副作用；同時(shí)，化療過(guò)程中患者的白細(xì)胞下降的發(fā)生率、腸胃毒性、肝功能損害的發(fā)生明顯下降。 大多數(shù)的抗癌藥物在殺死癌細(xì)胞的同時(shí)也會(huì)損傷正常的細(xì)胞，對(duì)患者免疫系統(tǒng)造成損害，臨床上表現(xiàn)很多副作用。而香菇多糖作為抗腫瘤藥物的最大優(yōu)點(diǎn)在于毒副作用小，與一些化療藥物有協(xié)同作用。香菇多糖通過(guò)激活體細(xì)胞免疫和體液免疫系統(tǒng)，增強(qiáng)宿主抗病毒，抗細(xì)菌感染力。臨床上可提高自身免疫能力。還可以用于慢性病毒性肝炎、肝中毒、肝硬化等病的治療14。 4.2食品鄰域應(yīng)用 香菇(Lentinus edodes)是一種重要的食藥用栽培真菌,素有“山珍”之稱。香菇多糖是香菇中重要的有效成分,有研

17、究證明,香菇多糖具有提高機(jī)體免疫力、抗腫瘤、抗病毒、降血糖血脂等功能15,并幾乎無(wú)副作用,是一種比較理想的藥物,也是一類重要的保健食品功能因子。香菇多糖是選用優(yōu)質(zhì)香菇子實(shí)體經(jīng)工藝發(fā)酵提取。香菇提取物中最主要的成分是香菇多糖，其中含有的10余種氨基酸，其中有異亮氨酸、賴氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸、纈氨酸等7種人體必需的氨基酸及維生素B1、B2及礦物鹽和粗纖維等。香菇多糖有抗血脂、抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫、抗血小板凝集、護(hù)肝、抗基因突變、抗肝炎病毒等功效。5.展望香菇多糖作為一種免疫增強(qiáng)劑具有免疫調(diào)節(jié)作用,增強(qiáng)NK細(xì)胞、T細(xì)胞功能,以及誘導(dǎo)干擾素血中濃度增高,具有抗腫瘤、抗病毒等作用。用于治療惡性腫瘤

18、和慢性乙肝等病毒性疾病,在與手術(shù)、放療、化療和惡性胸腹水等相結(jié)合的輔助治療中,取得很好的療效,值得臨床推廣使用。 廣東省科學(xué)院微生物研究所研制成功的新型飲料“香菇樂(lè)”投放市場(chǎng)后,頗受消費(fèi)者的歡迎。該廣的“香菇樂(lè)”,不但以其獨(dú)特的天然香菇風(fēng)味取悅消費(fèi)者,而且以其誘人的發(fā)展前景吸引了投資者。最近,香港振華國(guó)際貿(mào)易公司已和該廠達(dá)成合資合作的協(xié)議,計(jì)劃擴(kuò)充設(shè)備,擴(kuò)大“香菇樂(lè)”的生產(chǎn)并開(kāi)拓國(guó)際市場(chǎng)。“香菇樂(lè)”內(nèi)含豐富的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),具有滋補(bǔ)養(yǎng)顏、抗衰老、提高機(jī)體免疫力功能等作用。香菇的抑抗癌及愛(ài)滋病的功能更令它增加了吸引力。我國(guó)是食用菌生產(chǎn)大國(guó)，其中香菇的產(chǎn)量在世界居首位，香菇資源非常豐富，亟待人們?nèi)フJ(rèn)識(shí)與

19、開(kāi)發(fā)。由于香菇多糖具有抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、抗病毒等方面的生物活性，因此對(duì)香菇多糖的研究已成為一個(gè)熱點(diǎn)。目前，國(guó)內(nèi)外學(xué)者在香菇多糖的分離提取、化學(xué)組成、結(jié)構(gòu)分析、生物活性等方面做了大量的研究工作。因此，香菇多糖將在食品工業(yè)、發(fā)酵工業(yè)、醫(yī)療保健等領(lǐng)域得到更加廣泛地應(yīng)用。在科學(xué)技術(shù)高度發(fā)達(dá)的21 世紀(jì)，香菇多糖的研究必將有更廣闊的發(fā)展前景.6.小結(jié)隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的不斷發(fā)展和人類生活水平的提高，人類對(duì)于健康的追求正在逐步上升，人類與疾病抗?fàn)?不斷探索療效好、毒性低的新藥成為健康發(fā)展的長(zhǎng)期目標(biāo)。努力尋找具有調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)功能的免疫活性物質(zhì)和抗癌新藥也成為時(shí)尚潮流,但化學(xué)新藥開(kāi)發(fā)費(fèi)用高、周期長(zhǎng),近年來(lái)醫(yī)藥界更關(guān)

20、注從天然產(chǎn)物中發(fā)掘目標(biāo)。香菇多糖的獨(dú)特優(yōu)勢(shì)和生理活性直接用于臨床醫(yī)藥搶占市場(chǎng)先機(jī),通過(guò)將其主結(jié)構(gòu)作為先導(dǎo)化合物,進(jìn)一步研究其各種衍生物,使其盡快發(fā)揮相應(yīng)功能。因此大力發(fā)展香菇多糖產(chǎn)業(yè)鏈將贏得21世紀(jì)醫(yī)藥行業(yè)的契機(jī)。參考文獻(xiàn)1 蘆殿榮，祝彼得，劉嘯等，香菇多糖的免疫調(diào)節(jié)及臨床應(yīng)用研究進(jìn)展j中華臨床醫(yī)學(xué)雜2004， 7(5):63 2 曲章義 香菇多糖抗腫瘤作用機(jī)理j 中國(guó)食用藥，1997，16（5）：3.3 景軍，香菇多糖對(duì)人體作用研究與應(yīng)用j.廣西壯族自治區(qū)食品衛(wèi)生監(jiān)督研究所，廣西南寧4 景軍，香菇多糖對(duì)人體作用研究與應(yīng)用j中國(guó)食品衛(wèi)生雜志，2001，2（13）：465 陳孜，薄層板色譜方法鑒別香菇多糖的研究J.廣州醫(yī)藥.19966 趙繼明，蒲艷春，香菇多糖的研究進(jìn)展J.中外健康文摘.2011，38：7 季宇彬，中藥多糖的化學(xué)與藥理M.2005年6月第一版：2762778 劉棟，錢建亞，卜敏.香菇多糖抗腫瘤作用研究現(xiàn)狀J.食用菌. 2003, 25, (2): 71-949 周愛(ài)武，葛志東等，香菇多糖的免疫調(diào)節(jié)作用J.中國(guó)藥理學(xué)通報(bào).1995,11(2):15715810 楊勝利,劉敏,錢俊青，香菇多糖酶催化酯化技術(shù)及其抗病毒活性研究J.生物質(zhì)化學(xué)工 程.2009，4