1、目目 錄錄生 物 化 學(xué)biochemistry生生物物化化學(xué)學(xué)教教研研室室目目 錄錄目目 錄錄本學(xué)期教學(xué)安排本學(xué)期教學(xué)安排 計(jì)劃學(xué)時(shí)：計(jì)劃學(xué)時(shí)： 102/84（其中理論（其中理論 70/60 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)32/24） 目目 錄錄蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能第一章第一章structure and function of protein目目 錄錄whats protein?是由許多氨基酸是由許多氨基酸(amino acids)通過肽鍵通過肽鍵(peptide bond)相連形成的高分子含氮化合物相連形成的高分子含氮化合物。蛋白質(zhì)的生物學(xué)重要性蛋白質(zhì)的生物學(xué)重要性1.蛋白質(zhì)是生物體重要組成成分

2、蛋白質(zhì)是生物體重要組成成分 分布廣、含量高。分布廣、含量高。 2. 蛋白質(zhì)具有重要的生物學(xué)功能。蛋白質(zhì)具有重要的生物學(xué)功能。3. 氧化供能。氧化供能。目目 錄錄 組成蛋白質(zhì)的元素組成蛋白質(zhì)的元素 主要有主要有c c、h h、o o、n n和和s s。 有些蛋白質(zhì)含有少量磷或金屬元素鐵、銅、鋅、有些蛋白質(zhì)含有少量磷或金屬元素鐵、銅、鋅、 錳、鈷、鉬，個(gè)別蛋白質(zhì)還含有碘錳、鈷、鉬，個(gè)別蛋白質(zhì)還含有碘 。 蛋白質(zhì)元素組成的特點(diǎn)蛋白質(zhì)元素組成的特點(diǎn) 各種蛋白質(zhì)的含氮量很接近，平均為各種蛋白質(zhì)的含氮量很接近，平均為1616。 這是蛋白質(zhì)元素組成的這是蛋白質(zhì)元素組成的重要特點(diǎn)重要特點(diǎn)，也是蛋白質(zhì)定量測定，

3、也是蛋白質(zhì)定量測定的的依據(jù)依據(jù)。通常只要測定出生物樣品中的含氮量，就可用樣品。通常只要測定出生物樣品中的含氮量，就可用樣品中含氮的克數(shù)乘以中含氮的克數(shù)乘以6.25=樣品中蛋白質(zhì)的克數(shù)來計(jì)算蛋白質(zhì)樣品中蛋白質(zhì)的克數(shù)來計(jì)算蛋白質(zhì)的含量的含量。 100100克樣品中蛋白質(zhì)的含量克樣品中蛋白質(zhì)的含量 ( g % )( g % ) = = 每克樣品含氮克數(shù)每克樣品含氮克數(shù) 6.25 6.251001001/16%目目 錄錄一、組成人體蛋白質(zhì)的一、組成人體蛋白質(zhì)的20種氨基酸種氨基酸均屬于均屬于l- -氨基酸氨基酸 存在自然界中的氨基酸有存在自然界中的氨基酸有300300余種，余種，但組成人體蛋白質(zhì)的氨基

4、酸僅有但組成人體蛋白質(zhì)的氨基酸僅有2020種，種，且均屬且均屬 l-l-氨基酸氨基酸（甘氨酸除外）。（甘氨酸除外）。目目 錄錄h甘氨酸甘氨酸ch3丙氨酸丙氨酸l-l-氨基酸的通式氨基酸的通式rc+nh3coo-h目目 錄錄 l-甘油醛甘油醛 d-甘油醛甘油醛目目 錄錄 2020種種aaaa中除脯中除脯aaaa為環(huán)狀亞為環(huán)狀亞aaaa外，其余均符合外，其余均符合上述通式；上述通式； 除甘除甘aaaa外，其它外，其它aaaa的的-碳原子都是不對稱碳原子都是不對稱碳原子，均為碳原子，均為l-l-aa-aa 。 既有酸性的羧基既有酸性的羧基(-cooh)(-cooh)，也具有堿性的，也具有堿性的氨基氨

5、基(-nh(-nh2 2) )，故為，故為兩性電解質(zhì)兩性電解質(zhì)。不同不同aaaa的的r r基團(tuán)不同，其分子量、理化性質(zhì)基團(tuán)不同，其分子量、理化性質(zhì)各不相同。各不相同。目目 錄錄非極性脂肪族氨基酸非極性脂肪族氨基酸極性中性氨基酸極性中性氨基酸芳香族氨基酸芳香族氨基酸酸性氨基酸酸性氨基酸堿性氨基酸堿性氨基酸二、氨基酸二、氨基酸可根據(jù)側(cè)鏈結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)可根據(jù)側(cè)鏈結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)進(jìn)行分類進(jìn)行分類目目 錄錄( (一一) )側(cè)鏈含烴鏈的側(cè)鏈含烴鏈的aaaa屬于非極性脂肪族氨基酸屬于非極性脂肪族氨基酸目目 錄錄( (二二) )側(cè)鏈有極性但不帶電荷的側(cè)鏈有極性但不帶電荷的aaaa是極性中性氨基酸是極性中性氨基酸

6、目目 錄錄( (三三) )側(cè)鏈含芳香基團(tuán)的側(cè)鏈含芳香基團(tuán)的aaaa是芳香族氨基酸是芳香族氨基酸t(yī)yr目目 錄錄( (四四) )側(cè)鏈含負(fù)性解離基團(tuán)的側(cè)鏈含負(fù)性解離基團(tuán)的aaaa是酸性氨基酸是酸性氨基酸目目 錄錄天冬氨酸天冬氨酸 aspartic acid asp d 2.97谷氨酸谷氨酸 glutamic acid glu e 3.22賴氨酸賴氨酸 lysine lys k 9.74精氨酸精氨酸 arginine arg r 10.76組氨酸組氨酸 histidine his h 7.594. 堿性氨基酸堿性氨基酸目目 錄錄(五五)側(cè)鏈含正性解離基團(tuán)的側(cè)鏈含正性解離基團(tuán)的aa屬于堿性氨基酸屬于堿

7、性氨基酸 結(jié)構(gòu)式結(jié)構(gòu)式 中文名中文名 英文名英文名 三字三字 一字一字 等電點(diǎn)等電點(diǎn) 符號符號 符號符號 （pi）目目 錄錄n幾種特殊氨基酸幾種特殊氨基酸 脯氨酸脯氨酸（亞氨基酸）（亞氨基酸）ch2chcoo-nhch2ch2ch2chcoohnhch2ch2目目 錄錄 半胱氨酸半胱氨酸 +胱氨酸胱氨酸二硫鍵二硫鍵-hh-ooc-ch-ch2-s+nh3s-ch2-ch-coo-+nh3-ooc-ch-ch2-s+nh3s-ch2-ch-coo-+nh3-ooc-ch-ch2-sh+nh3-ooc-ch-ch2-sh+nh3hs-ch2-ch-coo-+nh3hs-ch2-ch-coo-+nh

8、3目目 錄錄三、三、20種氨基酸具有共同或特異的理化性質(zhì)種氨基酸具有共同或特異的理化性質(zhì)n兩性解離及等電點(diǎn)兩性解離及等電點(diǎn)氨基酸是兩性電解質(zhì)。氨基酸是兩性電解質(zhì)。通過改變?nèi)芤旱耐ㄟ^改變?nèi)芤旱膒h可使氨基酸分子的解離可使氨基酸分子的解離狀態(tài)發(fā)生改變。狀態(tài)發(fā)生改變。 等電點(diǎn)等電點(diǎn)(isoelectric point, pi) 在某一在某一ph的溶液中，的溶液中，氨基酸分子帶有相等正、氨基酸分子帶有相等正、負(fù)電荷時(shí)，此時(shí)溶液的負(fù)電荷時(shí)，此時(shí)溶液的ph值稱為該氨基酸的值稱為該氨基酸的等電等電點(diǎn)點(diǎn)（pi）。）。 （一）氨基酸具有兩性解離的性質(zhì)（一）氨基酸具有兩性解離的性質(zhì)目目 錄錄ph=pi+oh-ph

9、pi+h+oh-+h+phpi+h+oh-+h+phpi蛋白質(zhì)的兼性離子蛋白質(zhì)的兼性離子 陽離子陽離子陰離子陰離子procoohnh3procoonh3 procoonh2procoohnh2目目 錄錄二、蛋白質(zhì)具有膠體性質(zhì)二、蛋白質(zhì)具有膠體性質(zhì)蛋白質(zhì)屬于生物大分子之一，分子量可自蛋白質(zhì)屬于生物大分子之一，分子量可自1萬至萬至100萬之巨，其分子的直徑可達(dá)萬之巨，其分子的直徑可達(dá)1100nm，為膠粒范圍之內(nèi)。為膠粒范圍之內(nèi)。蛋白質(zhì)具有親水溶膠的性質(zhì)。蛋白質(zhì)具有親水溶膠的性質(zhì)。不能透過半透膜、擴(kuò)散速度慢、不易滲透。不能透過半透膜、擴(kuò)散速度慢、不易滲透。 顆粒表面電荷顆粒表面電荷 水化膜水化膜n蛋

10、白質(zhì)膠體穩(wěn)定的因素蛋白質(zhì)膠體穩(wěn)定的因素:目目 錄錄+帶正電荷的蛋白質(zhì)帶正電荷的蛋白質(zhì)帶負(fù)電荷的蛋白質(zhì)帶負(fù)電荷的蛋白質(zhì)在等電點(diǎn)的蛋白質(zhì)在等電點(diǎn)的蛋白質(zhì)水化膜水化膜+帶正電荷的蛋白質(zhì)帶正電荷的蛋白質(zhì)帶負(fù)電荷的蛋白質(zhì)帶負(fù)電荷的蛋白質(zhì)不穩(wěn)定的蛋白質(zhì)顆粒不穩(wěn)定的蛋白質(zhì)顆粒酸酸堿堿酸酸堿堿酸酸堿堿脫水作用脫水作用脫水作用脫水作用脫水作用脫水作用溶液中蛋白質(zhì)的聚沉溶液中蛋白質(zhì)的聚沉目目 錄錄三、蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)破壞而引起變性三、蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)破壞而引起變性* * 蛋白質(zhì)的變性蛋白質(zhì)的變性(denaturation)(denaturation)在某些物理和化學(xué)因素作用下，其特定的在某些物理和化學(xué)因素作用下，其特

11、定的空間構(gòu)象被破壞空間構(gòu)象被破壞（不包括肽鍵的斷裂）不包括肽鍵的斷裂），也即有序也即有序的空間結(jié)構(gòu)變成無序的空間結(jié)構(gòu)，從而導(dǎo)致其的空間結(jié)構(gòu)變成無序的空間結(jié)構(gòu)，從而導(dǎo)致其理化性質(zhì)改變和生物活性的喪失。理化性質(zhì)改變和生物活性的喪失。目目 錄錄 破壞非共價(jià)鍵和二硫鍵，不改變蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)破壞非共價(jià)鍵和二硫鍵，不改變蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)。目目 錄錄 應(yīng)用舉例應(yīng)用舉例臨床醫(yī)學(xué)上，變性因素常被應(yīng)用來消毒及臨床醫(yī)學(xué)上，變性因素常被應(yīng)用來消毒及滅菌。滅菌。此外此外, , 防止蛋白質(zhì)變性也是有效保存蛋白質(zhì)防止蛋白質(zhì)變性也是有效保存蛋白質(zhì)制劑（如疫苗等）的必要條件。制劑（如疫苗等）的必要條件。 若蛋白質(zhì)變性程度較輕

12、，去除變性因素后，蛋若蛋白質(zhì)變性程度較輕，去除變性因素后，蛋白質(zhì)仍可恢復(fù)或部分恢復(fù)其原有的構(gòu)象和功能，白質(zhì)仍可恢復(fù)或部分恢復(fù)其原有的構(gòu)象和功能，稱為稱為復(fù)性復(fù)性(renaturation) 。目目 錄錄。 目目 錄錄 在一定條件下，蛋白疏水側(cè)鏈暴露在外，肽鏈在一定條件下，蛋白疏水側(cè)鏈暴露在外，肽鏈融會相互纏繞繼而聚集，因而從溶液中析出。融會相互纏繞繼而聚集，因而從溶液中析出。變性的蛋白質(zhì)易于沉淀，有時(shí)蛋白質(zhì)發(fā)生沉淀，變性的蛋白質(zhì)易于沉淀，有時(shí)蛋白質(zhì)發(fā)生沉淀，但并不變性。但并不變性。 (protein coagulation) 蛋白質(zhì)變性后的絮狀物加熱可變成比較堅(jiān)固的蛋白質(zhì)變性后的絮狀物加熱可變

13、成比較堅(jiān)固的凝塊，此凝塊不易再溶于強(qiáng)酸和強(qiáng)堿中。凝塊，此凝塊不易再溶于強(qiáng)酸和強(qiáng)堿中。不一定不一定不一定不一定不一定不一定一定一定目目 錄錄四、蛋白質(zhì)四、蛋白質(zhì)在紫外光譜區(qū)有特征性吸收峰在紫外光譜區(qū)有特征性吸收峰由于蛋白質(zhì)分子中含有共軛雙鍵的酪氨酸由于蛋白質(zhì)分子中含有共軛雙鍵的酪氨酸和色氨酸，因此在和色氨酸，因此在280nm波長處有特征性吸收波長處有特征性吸收峰。蛋白質(zhì)的峰。蛋白質(zhì)的od280與其濃度呈正比關(guān)系，因與其濃度呈正比關(guān)系，因此可作蛋白質(zhì)定量測定。此可作蛋白質(zhì)定量測定。目目 錄錄蛋白質(zhì)經(jīng)水解后產(chǎn)生的氨基酸也可發(fā)生茚蛋白質(zhì)經(jīng)水解后產(chǎn)生的氨基酸也可發(fā)生茚三酮反應(yīng)。三酮反應(yīng)。 蛋白質(zhì)和多肽分

14、子中肽鍵在稀堿溶液中與蛋白質(zhì)和多肽分子中肽鍵在稀堿溶液中與硫酸銅共熱，呈現(xiàn)紫色或紅色，此反應(yīng)稱為硫酸銅共熱，呈現(xiàn)紫色或紅色，此反應(yīng)稱為雙雙縮脲反應(yīng)縮脲反應(yīng)，雙縮脲反應(yīng)可用來檢測蛋白質(zhì)水解，雙縮脲反應(yīng)可用來檢測蛋白質(zhì)水解程度。程度。五、應(yīng)用蛋白質(zhì)呈色反應(yīng)可測定蛋白質(zhì)五、應(yīng)用蛋白質(zhì)呈色反應(yīng)可測定蛋白質(zhì)溶液含量溶液含量1. 茚三酮反應(yīng)茚三酮反應(yīng)(ninhydrin reaction)2. 雙縮脲反應(yīng)雙縮脲反應(yīng)(biuret reaction)目目 錄錄第五節(jié)第五節(jié)蛋白質(zhì)的分離純化與結(jié)構(gòu)分析蛋白質(zhì)的分離純化與結(jié)構(gòu)分析the separation and purification and structu

15、re analysis of protein目目 錄錄一、一、透析及超濾法可去除蛋白質(zhì)溶液中的透析及超濾法可去除蛋白質(zhì)溶液中的小分子化合物小分子化合物超濾法是指液體或氣體超濾法是指液體或氣體混合物混合物在外界壓力驅(qū)在外界壓力驅(qū)動下，通過一種在其上布滿許多細(xì)動下，通過一種在其上布滿許多細(xì)微小孔微小孔的超濾的超濾膜獲得不同膜獲得不同分子量分子量的澄清液或的澄清液或濃縮液濃縮液的分離方法。的分離方法。n透析透析(dialysis)n超濾法超濾法利用透析袋把大分子蛋白質(zhì)與小分子化合利用透析袋把大分子蛋白質(zhì)與小分子化合物分開的方法物分開的方法。目目 錄錄二、丙酮沉淀、鹽析及免疫沉淀是常用的蛋二、丙酮沉淀

16、、鹽析及免疫沉淀是常用的蛋白質(zhì)沉淀方法白質(zhì)沉淀方法 *使用使用丙酮沉淀丙酮沉淀時(shí)時(shí) ：破壞水化膜破壞水化膜 脫水作用；脫水作用； 使水的介電常數(shù)降低，蛋白質(zhì)溶解度降低使水的介電常數(shù)降低，蛋白質(zhì)溶解度降低。*鹽析鹽析(salt precipitation)是將硫酸銨、硫酸鈉或氯是將硫酸銨、硫酸鈉或氯化鈉等加入蛋白質(zhì)溶液，使蛋白質(zhì)化鈉等加入蛋白質(zhì)溶液，使蛋白質(zhì)表面電荷被中表面電荷被中和以及水化膜被破壞和以及水化膜被破壞，導(dǎo)致蛋白質(zhì)沉淀。，導(dǎo)致蛋白質(zhì)沉淀。 * 免疫沉淀法：免疫沉淀法：將某一純化蛋白質(zhì)免疫動物可獲得將某一純化蛋白質(zhì)免疫動物可獲得抗該蛋白的特異抗體。利用特異抗體識別相應(yīng)的抗抗該蛋白的特

17、異抗體。利用特異抗體識別相應(yīng)的抗原蛋白，并形成抗原抗體復(fù)合物的性質(zhì)，可從蛋白原蛋白，并形成抗原抗體復(fù)合物的性質(zhì)，可從蛋白質(zhì)混合溶液中分離獲得抗原蛋白。質(zhì)混合溶液中分離獲得抗原蛋白。 目目 錄錄三、利用荷電性質(zhì)可用電泳法將三、利用荷電性質(zhì)可用電泳法將蛋白質(zhì)分離蛋白質(zhì)分離蛋白質(zhì)在高于或低于其蛋白質(zhì)在高于或低于其pipi的溶液中為帶電的的溶液中為帶電的顆粒，在電場中能向正極或負(fù)極移動。這種通過顆粒，在電場中能向正極或負(fù)極移動。這種通過蛋白質(zhì)在電場中泳動而達(dá)到分離各種蛋白質(zhì)的技蛋白質(zhì)在電場中泳動而達(dá)到分離各種蛋白質(zhì)的技術(shù)術(shù), , 稱為稱為電泳電泳(elctrophoresis) 。根據(jù)支撐物的不同，可

18、分為薄膜電泳、凝膠根據(jù)支撐物的不同，可分為薄膜電泳、凝膠電泳等。電泳等。 目目 錄錄sds-聚丙烯酰胺凝膠電泳聚丙烯酰胺凝膠電泳，常用于蛋白質(zhì)分，常用于蛋白質(zhì)分子量的測定。子量的測定。等電聚焦電泳等電聚焦電泳，通過蛋白質(zhì)等電點(diǎn)的差異而，通過蛋白質(zhì)等電點(diǎn)的差異而分離蛋白質(zhì)的電泳方法。分離蛋白質(zhì)的電泳方法。雙向凝膠電泳雙向凝膠電泳是蛋白質(zhì)組學(xué)研究的重要技術(shù)。是蛋白質(zhì)組學(xué)研究的重要技術(shù)。n幾種重要的蛋白質(zhì)電泳幾種重要的蛋白質(zhì)電泳:目目 錄錄四、四、應(yīng)用相分配或親和原理可將蛋白質(zhì)應(yīng)用相分配或親和原理可將蛋白質(zhì)進(jìn)行層析分離進(jìn)行層析分離根據(jù)根據(jù)蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)的形態(tài)、大小和電荷的不同而設(shè)計(jì)的物理分離的形態(tài)、大

19、小和電荷的不同而設(shè)計(jì)的物理分離方法。各種不同的層析方法都涉及共同的基本特點(diǎn)方法。各種不同的層析方法都涉及共同的基本特點(diǎn):有一個(gè)固定有一個(gè)固定相和流動相，當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)混合溶液相和流動相，當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)混合溶液(流動相流動相)通過裝有珠狀或基質(zhì)通過裝有珠狀或基質(zhì)材料的管或柱材料的管或柱(固定相固定相)時(shí)，由于混合物中各組份在物理化學(xué)性時(shí)，由于混合物中各組份在物理化學(xué)性質(zhì)質(zhì)(如吸引力、溶解度、分子的形狀與大小、分子的電荷性與親如吸引力、溶解度、分子的形狀與大小、分子的電荷性與親和力和力)等方面的差異使各組分在兩相間進(jìn)行反復(fù)多次的分配而得等方面的差異使各組分在兩相間進(jìn)行反復(fù)多次的分配而得以分開。流動相的流動取決

20、于引力和壓力，而不需要電流。以分開。流動相的流動取決于引力和壓力，而不需要電流。n層析層析(chromatography)分離蛋白質(zhì)的原理分離蛋白質(zhì)的原理目目 錄錄離子交換層析：離子交換層析：利用各蛋白質(zhì)的電荷量及利用各蛋白質(zhì)的電荷量及性質(zhì)不同進(jìn)行分離。性質(zhì)不同進(jìn)行分離。凝膠過濾凝膠過濾(gel filtration)又稱分子篩層析又稱分子篩層析，利用各蛋白質(zhì)分子大小不同分離。利用各蛋白質(zhì)分子大小不同分離。n蛋白質(zhì)分離常用的層析方法蛋白質(zhì)分離常用的層析方法目目 錄錄目目 錄錄目目 錄錄五、五、利用蛋白質(zhì)顆粒沉降行為不同利用蛋白質(zhì)顆粒沉降行為不同可進(jìn)行超速離心分離可進(jìn)行超速離心分離 超速離心法超

21、速離心法(ultracentrifugation)既可以用來分既可以用來分離純化蛋白質(zhì)也可以用作測定蛋白質(zhì)的分子量。離純化蛋白質(zhì)也可以用作測定蛋白質(zhì)的分子量。 蛋白質(zhì)在離心場中的行為用蛋白質(zhì)在離心場中的行為用沉降系數(shù)沉降系數(shù)(sedimentation coefficient, s)表示，表示，（s）等于）等于離子的沉降速度與離心加速度的比值。離子的沉降速度與離心加速度的比值。 沉降系數(shù)與蛋白質(zhì)的密度和形狀相關(guān)沉降系數(shù)與蛋白質(zhì)的密度和形狀相關(guān) 。因?yàn)槌两迪禂?shù)因?yàn)槌两迪禂?shù)s大體上和分子量成正比關(guān)系，故可應(yīng)用超大體上和分子量成正比關(guān)系，故可應(yīng)用超速離心法測定蛋白質(zhì)分子量，但對分子形狀的高度不對稱速

22、離心法測定蛋白質(zhì)分子量，但對分子形狀的高度不對稱的大多數(shù)纖維狀蛋白質(zhì)不適用。的大多數(shù)纖維狀蛋白質(zhì)不適用。目目 錄錄六、應(yīng)用化學(xué)或反向遺傳學(xué)方法可分析六、應(yīng)用化學(xué)或反向遺傳學(xué)方法可分析多肽鏈的氨基酸序列多肽鏈的氨基酸序列 （略）（略）分析已純化蛋白質(zhì)的氨基酸殘基組成分析已純化蛋白質(zhì)的氨基酸殘基組成測定多肽鏈的氨基末端與羧基末端為何種氨基酸殘基測定多肽鏈的氨基末端與羧基末端為何種氨基酸殘基把肽鏈水解成片段，分別進(jìn)行分析把肽鏈水解成片段，分別進(jìn)行分析測定各肽段的氨基酸排列順序，一般采用測定各肽段的氨基酸排列順序，一般采用edman降解法降解法一般需用數(shù)種水解法，并分析出各肽段中的氨基酸一般需用數(shù)種水

23、解法，并分析出各肽段中的氨基酸順序，然后經(jīng)過組合排列對比，最終得出完整肽鏈中氨順序，然后經(jīng)過組合排列對比，最終得出完整肽鏈中氨基酸順序的結(jié)果。基酸順序的結(jié)果。目目 錄錄胰蛋白酶（胰蛋白酶（trypsintrypsin) )的裂解作用的裂解作用目目 錄錄brcnbrcn的裂解作用的裂解作用目目 錄錄n通過核酸來推演蛋白質(zhì)中的氨基酸序列通過核酸來推演蛋白質(zhì)中的氨基酸序列按照三聯(lián)密碼的原則推演出氨基酸的序列按照三聯(lián)密碼的原則推演出氨基酸的序列分離編碼蛋白質(zhì)的基因分離編碼蛋白質(zhì)的基因測定測定dna序列序列排列出排列出mrna序列序列目目 錄錄 1 1、蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)有哪些？、蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)有哪些？

24、 2 2、模體與結(jié)構(gòu)域？分子伴侶？、模體與結(jié)構(gòu)域？分子伴侶？ 3 3、兩性電離與等電點(diǎn)？、兩性電離與等電點(diǎn)？ 4 4、蛋白質(zhì)變性與變構(gòu)的比較？、蛋白質(zhì)變性與變構(gòu)的比較？ 5 5、多肽和蛋白質(zhì)的區(qū)別？、多肽和蛋白質(zhì)的區(qū)別？ 6 6、維系蛋白質(zhì)一級和空間結(jié)構(gòu)的力量？、維系蛋白質(zhì)一級和空間結(jié)構(gòu)的力量？ 7 7、什么是蛋白質(zhì)的變構(gòu)作用？、什么是蛋白質(zhì)的變構(gòu)作用？ 8 8、蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系？、蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系？目目 錄錄本章重點(diǎn)內(nèi)容本章重點(diǎn)內(nèi)容酸性氨基酸酸性氨基酸asp、glu 堿性氨基酸堿性氨基酸lys、arg、his氨基酸或蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)（概念）氨基酸或蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)（概念）蛋白質(zhì)的紫外

25、吸收性質(zhì)蛋白質(zhì)的紫外吸收性質(zhì)tyr、trp蛋白質(zhì)的一、二、三、四級結(jié)構(gòu)（概念）蛋白質(zhì)的一、二、三、四級結(jié)構(gòu)（概念）肽單元、模體、結(jié)構(gòu)域、分子伴侶（概念）肽單元、模體、結(jié)構(gòu)域、分子伴侶（概念）二級結(jié)構(gòu)的形式二級結(jié)構(gòu)的形式變構(gòu)效應(yīng)（概念）變構(gòu)效應(yīng)（概念）蛋白質(zhì)的變性（概念）蛋白質(zhì)的變性（概念）鹽析（概念）鹽析（概念）蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系目目 錄錄七、應(yīng)用物理學(xué)、生物信息學(xué)原理七、應(yīng)用物理學(xué)、生物信息學(xué)原理可進(jìn)行蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)測定（略）可進(jìn)行蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)測定（略）n二級結(jié)構(gòu)測定二級結(jié)構(gòu)測定通常采用通常采用圓二色光譜圓二色光譜( (circular dichroism，cd) )測定溶液狀態(tài)下的蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)含量。測定溶液狀態(tài)下的蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)含量。 - -螺旋的螺旋的cdcd峰有峰有222nm222nm處的負(fù)峰、處的負(fù)峰、208nm208nm處的處的負(fù)峰和負(fù)峰和198 nm198 nm處的正峰三個(gè)成分；而處的正峰三個(gè)成分；而 - -折疊的折疊的cdcd譜不很固定。譜不很固定。 目目 錄錄n三級結(jié)構(gòu)測定三級結(jié)構(gòu)測定x射線衍射法射線衍射法(x-ray diffraction)和核磁共和核磁共振技術(shù)振技術(shù)(nuclear magnetic resonance, nmr)是是研