1、臨床免疫學與檢驗第2章抗原抗體反應多媒體1第二章第二章 抗原抗體反抗原抗體反應應臨床免疫學與檢驗第2章抗原抗體反應多媒體2 第一節第一節 抗原抗體反應的原理抗原抗體反應的原理一、抗原抗體結合力一、抗原抗體結合力二、抗原抗體的親和性和親和力二、抗原抗體的親和性和親和力三、親水膠體轉化為疏水膠體三、親水膠體轉化為疏水膠體第二節第二節 抗原抗體反應的特點抗原抗體反應的特點 一、特異性一、特異性 二、可逆性二、可逆性 三、比例性三、比例性 四、階段性四、階段性臨床免疫學與檢驗第2章抗原抗體反應多媒體3第三節第三節 影響抗原抗體反應的因素影響抗原抗體反應的因素 一、反應物自身因素一、反應物自身因素 二、

2、環境因素二、環境因素第四節第四節 免疫學檢測技術的類型免疫學檢測技術的類型思考題思考題小結小結臨床免疫學與檢驗第2章抗原抗體反應多媒體4第一節第一節 抗原抗體反應的原理抗原抗體反應的原理 抗原抗體反應抗原抗體反應: :指抗原與相應抗體之間所發生指抗原與相應抗體之間所發生的特異性結合反應。的特異性結合反應。 物質基礎物質基礎: : 抗原表位與抗體高變區間的互補結合抗原表位與抗體高變區間的互補結合 抗原表位與抗體高變區的溝槽分子表面的結合抗原表位與抗體高變區的溝槽分子表面的結合 抗原抗體之間的結合力抗原抗體之間的結合力 親水膠體轉化為疏水膠體親水膠體轉化為疏水膠體臨床免疫學與檢驗第2章抗原抗體反應

3、多媒體5靜電引力靜電引力（electrostatic forces）范德華引力范德華引力:作用最小作用最小（van der Waals interactions）氫鍵氫鍵:最具特異性最具特異性（hydrogen bond ）疏水作用力疏水作用力:作用最大作用最大 （hydrophobic interactions） 抗原抗體結合力示意圖抗原抗體結合力示意圖一、抗原抗體結合力一、抗原抗體結合力臨床免疫學與檢驗第2章抗原抗體反應多媒體6抗體分子上一個抗抗體分子上一個抗原結合點與對應的原結合點與對應的抗原決定簇之間相抗原決定簇之間相適應而存在著的引適應而存在著的引力，是抗原抗體間力，是抗原抗體間固有

4、的結合力固有的結合力親和力親和力( (affinity)抗原抗體親和力示意圖抗原抗體親和力示意圖二、抗原抗體的親和力和親合力二、抗原抗體的親和力和親合力臨床免疫學與檢驗第2章抗原抗體反應多媒體7抗體結合部位抗體結合部位與抗原表位之與抗原表位之間結合的強度間結合的強度親合力親合力( (avidity)抗原抗體親合力示意圖抗原抗體親合力示意圖臨床免疫學與檢驗第2章抗原抗體反應多媒體8 可見反應可見反應抗原抗體復合物抗原抗體復合物 ( (疏水膠體疏水膠體) )電解質電解質 抗原抗原( (親水膠體親水膠體) ) 抗體抗體( (親水膠體親水膠體) ) + +三、親水膠體轉化為疏水膠體三、親水膠體轉化為疏

5、水膠體臨床免疫學與檢驗第2章抗原抗體反應多媒體9第二節第二節 抗原抗體反應的特點抗原抗體反應的特點特異性特異性 可逆性可逆性比例性比例性 階段性階段性臨床免疫學與檢驗第2章抗原抗體反應多媒體10特異性：特異性：抗原與抗抗原與抗體結合反應的專一體結合反應的專一性性抗原抗體反應特異性示意圖抗原抗體反應特異性示意圖分子基礎分子基礎: :抗原表位與抗體抗原表位與抗體分子高變區之間空間構型的分子高變區之間空間構型的互補性互補性一、特異性一、特異性臨床免疫學與檢驗第2章抗原抗體反應多媒體11兩種不同的抗原兩種不同的抗原分子具有部分相分子具有部分相同或類似結構的同或類似結構的抗原表位，可與抗原表位，可與彼此

6、相應的抗血彼此相應的抗血清發生反應清發生反應交叉反應交叉反應（cross reactions）抗原抗體交叉反應示意圖抗原抗體交叉反應示意圖臨床免疫學與檢驗第2章抗原抗體反應多媒體12二、可逆性二、可逆性可逆性：可逆性：抗原與相應抗體結合成復合物后，在一定抗原與相應抗體結合成復合物后，在一定條件下又可解離為游離抗原與抗體的特性條件下又可解離為游離抗原與抗體的特性 影響因素：影響因素： 抗體對相應抗原的親合力抗體對相應抗原的親合力親合力越高，結親合力越高，結合越牢固，越不易解離合越牢固，越不易解離 環境因素對復合物的影響環境因素對復合物的影響pHpH、離子強度、離子強度 臨床免疫學與檢驗第2章抗原

7、抗體反應多媒體13前帶前帶(prezone)：抗體過量：抗體過量后帶后帶(postzone)：抗原過量：抗原過量等價帶等價帶(equivalence zone)(equivalence zone)： 抗原抗體比例合適抗原抗體比例合適 抗原抗體反應比例性示意圖抗原抗體反應比例性示意圖比例性：比例性：抗原與抗體發生抗原與抗體發生可見反應需遵循一定的量可見反應需遵循一定的量比關系比關系三、比例性三、比例性臨床免疫學與檢驗第2章抗原抗體反應多媒體14第一階段：特異性結合階段，反應快，不可見第一階段：特異性結合階段，反應快，不可見 第二階段：反應可見階段，反應慢，出現凝集、第二階段：反應可見階段，反應慢

8、，出現凝集、 沉淀和細胞溶解等現象沉淀和細胞溶解等現象 四、階段性四、階段性臨床免疫學與檢驗第2章抗原抗體反應多媒體15第三節第三節 影響抗原抗體反應的因素影響抗原抗體反應的因素抗原、抗體反應物的自身因素抗原、抗體反應物的自身因素環境因素環境因素臨床免疫學與檢驗第2章抗原抗體反應多媒體16一、反應物自身因素一、反應物自身因素抗原抗原: :理化性狀、表位種類和數目理化性狀、表位種類和數目抗體抗體: :來源、特異性、親和性、效價來源、特異性、親和性、效價臨床免疫學與檢驗第2章抗原抗體反應多媒體17電解質電解質: : 生理鹽水或緩沖液生理鹽水或緩沖液酸堿度酸堿度: pH6pH9溫溫 度度: 1540

9、，37最適最適二、環境因素二、環境因素臨床免疫學與檢驗第2章抗原抗體反應多媒體18反應類型反應類型實驗技術實驗技術結果判斷結果判斷凝集反應凝集反應 直接凝集試驗直接凝集試驗觀察凝集現象觀察凝集現象間接凝集試驗間接凝集試驗同上同上抗球蛋白試驗抗球蛋白試驗同上同上沉淀反應沉淀反應 液相沉淀試驗液相沉淀試驗觀察沉淀，檢測濁度觀察沉淀，檢測濁度免疫電泳技術免疫電泳技術觀察掃描沉淀峰、沉淀弧觀察掃描沉淀峰、沉淀弧補體參與補體參與的反應的反應補體溶血試驗補體溶血試驗觀察測定溶血現象觀察測定溶血現象補體結合試驗補體結合試驗同上同上第四節第四節 免疫學檢測技術的類型免疫學檢測技術的類型臨床免疫學與檢驗第2章抗

10、原抗體反應多媒體19反應類型反應類型實驗技術實驗技術結果判斷結果判斷中和反應中和反應病毒中和試驗病毒中和試驗檢測病毒感染性檢測病毒感染性毒素中和試驗毒素中和試驗檢測外毒素毒性檢測外毒素毒性標記免疫反應標記免疫反應熒光免疫技術熒光免疫技術檢測熒光現象檢測熒光現象放射免疫技術放射免疫技術檢測放射性強度檢測放射性強度酶免疫技術酶免疫技術檢測酶底物顯色檢測酶底物顯色發光免疫技術發光免疫技術檢測發光強度檢測發光強度金免疫技術金免疫技術檢測金顆粒沉淀檢測金顆粒沉淀臨床免疫學與檢驗第2章抗原抗體反應多媒體20按實際用途分為按實際用途分為: :免疫組織化學技術免疫組織化學技術(immunohistochemi

11、stry technique,IHCT)免疫測定免疫測定(immunoassay)按檢測現象分為按檢測現象分為: : 放射免疫技術放射免疫技術 熒光免疫技術熒光免疫技術酶免疫技術酶免疫技術 化學發光免疫技術化學發光免疫技術金免疫技術金免疫技術按測定反應體系的物理狀態分為按測定反應體系的物理狀態分為: : 均相免疫測定均相免疫測定(homogenous immunoassay）非均相免疫測定非均相免疫測定(heterogenous immunoassay) 標記免疫技術：標記免疫技術：用熒光物質、放射性核素、酶或化學發光用熒光物質、放射性核素、酶或化學發光物質等標記抗原或抗體，進行抗原抗體反應后

12、，通過檢測物質等標記抗原或抗體，進行抗原抗體反應后，通過檢測標記物對抗原或抗體進行定性、定位或定量分析標記物對抗原或抗體進行定性、定位或定量分析臨床免疫學與檢驗第2章抗原抗體反應多媒體211 1什么是抗原抗體反應？什么是抗原抗體反應？ 抗原抗體反應的原理是什么？抗原抗體反應的原理是什么？ 2 2抗原抗體的結合力有哪些？抗原抗體的結合力有哪些？3 3抗原抗體反應有哪些特點？抗原抗體反應有哪些特點？ 4 4如何理解抗原抗體反應的特異性和交叉反應？如何理解抗原抗體反應的特異性和交叉反應？5 5什么是抗原抗體反應的可逆性？有何應用？什么是抗原抗體反應的可逆性？有何應用？6 6如何理解抗原抗體反應的親和

13、力和親合力？如何理解抗原抗體反應的親和力和親合力？7 7抗原抗體反應體系中為何要確定抗原、抗體的最適比例？抗原抗體反應體系中為何要確定抗原、抗體的最適比例？ 8 8抗原抗體反應有哪些影響因素？抗原抗體反應有哪些影響因素？9 9基于抗原抗體反應的免疫學檢測技術有哪些？基于抗原抗體反應的免疫學檢測技術有哪些？1010什么是標記免疫技術？標記免疫技術有哪些類型？什么是標記免疫技術？標記免疫技術有哪些類型？思考題思考題臨床免疫學與檢驗第2章抗原抗體反應多媒體22小結小結 抗原抗體反應是指抗原與相應抗體之間所發抗原抗體反應是指抗原與相應抗體之間所發生的特異性結合反應。生的特異性結合反應。 抗原抗體之間的結合力涉及靜電引力、范德抗原抗體之間的結合力涉及靜電引力、范德華引力、氫鍵和疏水作用力。華引力、氫鍵和疏水作用力。 抗原抗體反應的特點是特異性、可