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文檔簡介

1、.countstar rigel全自動細胞熒光分析儀對pbmc細胞精確計數及活力分析一、pbmc細胞濃度與活力分析的重要性外周血單個核細胞（peripheral blood mononuclear cell,pbmc) 即外周血中具有單個核的細胞，主要包括淋巴細胞、單核細胞、吞噬細胞、樹突狀細胞和其他少量細胞類型，是機體免疫應答功能的重要細胞組成。pbmc 是免疫學、抗體藥物研發、傳染病、惡性血液腫瘤疾病、干細胞移植、疫苗開發以及移植免疫等領域學者經常需要的研究原材料。pbmc的濃度、活力、免疫細胞亞型分布及細胞因子等都是監測機體免疫狀態及其他領域研究的重要指標。所以如何精確計數pbmc細胞在

2、科研和臨床上都有重要的意義。二、目前pbmc細胞分離、計數的方法與痛點1、根據外周血各種血細胞的密度不相同，pbmc細胞分離方法主要密度梯度離心法，然后根據實際情況添加紅細胞裂解液除去部分殘留紅細胞。2、由于個體及分離效果差異，導致分離后的pbmc樣本中紅細胞和血小板的殘留程度不同。用血球計數板在顯微鏡下計數是最常見的一種計數方法，由于顯微鏡下觀察紅細胞與pbmc細胞大小差異不大，肉眼很難辨別，經驗豐富的操作者需通過不停調節焦距觀察紅細胞的雙凹狀的形態來區分。這個過程無疑造成了非常大的工作量及誤差。3、目前常用的計數方法包括血球計數板臺盼藍染色計數法、庫爾特法及熒光細胞計數法。其中臺盼藍染色法

3、與庫爾特法均無法很好的區分紅細胞與白細胞。三、countstar rigel細胞熒光分析儀對pbmc細胞精確計數及活力分析 原理：利用ao/pi雙熒光染色法進行pbmc死活細胞精確計數。吖啶橙（acridine orange,ao）和碘化丙啶（propidiumiodide,pi）都可以對死、活細胞核中的dna進行染色。所以該方法可以排除無核的細胞碎片、成熟的血小板及紅細胞干擾，從而更準確計數pbmc細胞。（1） countstar rigel 對pbmc的計數結果精品.figure 1分離后pbmc細胞計數圖片figure 2分離后pbmc細胞梯度稀釋后線性結果精品.（2） countsta

4、r rigel對全血樣本中pbmc細胞濃度及活率進行分析table 1全血樣本濃度及活率重復性檢測結果全血a樣本活率總pbmc細胞濃度活pbmc細胞濃度199.871.24e+061.24e+06299.741.23e+061.23e+06399.751.18e+061.18e+06499.11.18e+061.17e+06599.741.19e+061.19e+06cv%0.28%2.14%2.32%figure 3全血pbmc細胞計數圖片四、總結countstar rigel：1、快速、精確計數和活率檢測；2、 高重復性；精品.3、ccd的相機，可以有效排除背景雜信號干擾；4、同時拍攝明場和熒光場的圖片，相結合起來驗證熒光結果；5、

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