DNA和蛋白質技術 基礎對點知識點一DNA粗提與鑒定的基礎知識1.在混合物中提取DNA分子的基本思路是()A根據(jù)各種大分子的理化性質的差異B根據(jù)各種大分子的理化性質的共性C根據(jù)各種大分子在細胞內的功能D根據(jù)各種大分子的結構和在細胞內的位置答案A解析提取生物大分子的基本思路是：選用一定的物理或化學方法分離具有不同物理或化學性質的生物大分子。DNA分子的粗提取是利用DNA與蛋白質等其他成分在物理和化學性質方面的差異進行分離的。2下圖中能正確反映DNA溶解度與NaCl溶液濃度之間關系的是()答案C解析DNA在NaCl溶液中的溶解度隨著NaCl溶液濃度的升高先減小后增大，在NaCl溶液濃度為0.14 mol/L時DNA溶解度最小，故選C。3下列有關DNA的特性的描述，錯誤的是()A蛋白酶不能水解DNA，這體現(xiàn)了酶的專一性B大多數(shù)DNA不能忍受6080 的高溫C洗滌劑能夠瓦解細胞膜，但對DNA沒有影響DDNA不溶于酒精溶液答案B解析蛋白酶能水解蛋白質，但對DNA沒有影響，這體現(xiàn)了酶的專一性，A正確；大多數(shù)蛋白質不能忍受6080 的高溫，而DNA在80 以上才會變性，B錯誤；洗滌劑不會影響DNA，但能夠瓦解細胞膜，C正確；DNA不溶于酒精溶液，但是細胞中的某些蛋白質則溶于酒精溶液，利用這一原理，可以將DNA與蛋白質進一步分離，D正確。4DNA遇二苯胺(沸水浴)會呈現(xiàn)()A磚紅色 B橘黃色C紫色 D藍色答案D解析DNA遇二苯胺(沸水浴)會呈現(xiàn)藍色，D正確。知識點二DNA粗提與鑒定的實驗設計5.下列不宜選作DNA粗提取材料的是()A洋蔥表皮細胞 B鮮豌豆種子C人成熟的紅細胞 D豬肝答案C解析用于DNA粗提取的材料應具備的條件是細胞中要含有DNA，且DNA的含量要豐富，A、B、D三項都符合要求。人成熟的紅細胞無細胞核，不含DNA，所以不宜選作實驗材料。6下列有關“DNA的粗提取與鑒定”實驗的敘述，錯誤的是()ADNA既溶于2 mol/L的NaCl溶液也溶于蒸餾水B向雞血細胞液中加蒸餾水是為了釋放出DNAC向溶解DNA的濃鹽溶液中加蒸餾水是為了析出DNAD用菜花替代雞血作為實驗材料，其實驗操作步驟不變答案D解析菜花是植物，用菜花細胞提取DNA時首先對植物組織進行預處理，然后用洗滌劑溶解細胞膜，因此實驗操作步驟與以雞血為材料時不同，D錯誤。7為了純化提取的DNA，可直接在濾液中加入下列哪種物質，反應1015 min，以達到實驗目的()A嫩肉粉 B蒸餾水C2 molL1 NaCl溶液 D酒精答案A解析嫩肉粉中含有木瓜蛋白酶，能催化蛋白質水解，從而去除濾液中的部分雜質。8下表是關于DNA的粗提取與鑒定實驗中所使用的材料、操作及其作用的表述，正確的是()選項試劑操作作用A檸檬酸鈉溶液與雞血混合有利于血液凝固B蒸餾水與雞血細胞混合保持細胞形狀C蒸餾水加入溶解有DNA的NaCl溶液中析出DNA絲狀物D冷卻的酒精加入過濾后的NaCl溶液中產生特定的顏色反應答案C解析在DNA的粗提取與鑒定實驗中，檸檬酸鈉可以防止血液凝固；雞血中加入蒸餾水可以使細胞膜和核膜破裂；DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，在物質的量濃度為0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最低，有利于DNA析出；DNA不溶于酒精，而蛋白質溶于冷卻的酒精可以獲得較純的DNA，DNA遇二苯胺(沸水浴加熱)呈藍色。9與析出DNA黏稠物有關的敘述，不正確的是()A操作時緩緩滴加蒸餾水，降低DNA的溶解度B在操作時，用玻璃棒輕緩攪拌，以保證DNA分子完整C加蒸餾水可同時降低DNA和蛋白質的溶解度，兩者均可析出D當絲狀黏稠物不再增加時，此時NaCl溶液的濃度為0.14 mol/L答案C解析向含有DNA的溶液中加入蒸餾水后，NaCl溶液的濃度會變小，當NaCl溶液的濃度為0.14 mol/L時，DNA的溶解度最小而析出，而蛋白質此時則仍溶解在NaCl溶液中。10DNA的粗提取與鑒定實驗中的三次過濾：(1)過濾用蒸餾水稀釋過的雞血細胞液；(2)過濾含黏稠物的0.14 mol/L的NaCl溶液；(3)過濾溶解有DNA的2 mol/L的NaCl溶液。以上三次過濾分別為了獲得()A含核物質的濾液、紗布上的黏稠物、含DNA的濾液B含核物質的濾液、濾液中的DNA黏稠物、含DNA的濾液C含核物質的濾液、濾液中的DNA黏稠物、紗布上的DNAD含較純的DNA濾液、紗布上的黏稠物、含DNA的濾液答案A解析用蒸餾水稀釋雞血細胞液，使血細胞的細胞膜、核膜破裂，釋放出核物質，此時過濾可得到含核物質的濾液；第二次過濾是因DNA在0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最小，DNA析出成絲狀黏稠物，經過濾留在紗布上；第三次過濾，是將第二次獲得的黏稠物溶解在2 mol/L的NaCl溶液中，過濾除去雜質獲得含DNA的濾液。能力提升11下列關于DNA的粗提取和鑒定的實驗過程的敘述，不正確的是()A操作步驟為：制備雞血細胞破碎細胞，獲取含DNA的濾液溶解核內的DNA并過濾析出并濾取含DNA的黏稠物DNA的再溶解并過濾提取較純凈的DNA鑒定DNAB實驗過程中第一次所用NaCl溶液的濃度是2 mol/L，目的是溶解細胞核內的DNAC實驗過程中，過濾含黏稠物的0.14 mol/L的NaCl溶液和過濾溶解有DNA的2 mol/L的NaCl溶液的目的分別是得到紗布上的黏稠物和含DNA的濾液D向溶有DNA的2 mol/L的NaCl溶液中加入二苯胺試劑即可出現(xiàn)藍色變化答案D解析DNA的粗提取和鑒定的實驗步驟包括：制備雞血細胞破碎細胞，獲取含DNA的濾液溶解核內的DNA并過濾析出并濾取含DNA的黏稠物DNA的再溶解和過濾提取較純凈的DNA鑒定DNA，A正確；實驗過程中第一次所用NaCl溶液的濃度是2 mol/L，目的是溶解細胞核內的DNA，B正確；過濾含黏稠物的0.14 mol/L的NaCl溶液的目的是去除溶于0.14 mol/L的NaCl溶液中的雜質，得到含有DNA的黏稠物，過濾溶解有DNA的2 mol/L的NaCl溶液的目的是得到含DNA的濾液，C正確；只有在沸水浴條件下，DNA才能與二苯胺反應呈現(xiàn)藍色，D錯誤。12.在“DNA的粗提取和鑒定”實驗中，A、B、C、D四個小組分別選擇不同材料進行實驗，表中表示不同的操作，請分析回答：組別材料選擇提取核物質純化DNA鑒定DNAA雞血B洋蔥C豬血D豬肝(1)實驗材料選擇錯誤的組別是_，其原因是_。雞血是理想的實驗材料，理由是_。(2)簡要說明操作的基本過程： _。(3)下列是操作的兩個方案，請分析其原理。方案一：直接在濾液中加入嫩肉粉，反應1015 min。原理：_。方案二：將濾液放在6075 的恒溫水浴箱中保溫1015 min，注意嚴格控制溫度范圍。原理：_。(4)過程需要用到的試劑是_。答案(1)C哺乳動物成熟的紅細胞中沒有細胞核和細胞器，不含DNA雞血細胞中DNA含量豐富，材料易得；雞血細胞極易吸水漲破(2)先加入一定量的蒸餾水，同時用玻璃棒攪拌，過濾后收集濾液即可(3)嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能分解蛋白質，而對DNA無影響，從而除去蛋白質雜質DNA和蛋白質對高溫耐受性不同，6075 的高溫使蛋白質變性，而DNA不受影響，從而將DNA與蛋白質分開(4)二苯胺試劑解析(1)哺乳動物成熟的紅細胞中沒有細胞核和細胞器，不含DNA，不適合作為本實驗的材料；雞血細胞中DNA含量豐富，材料易得，雞血細胞極易吸水漲破，是理想的實驗材料。(2)采用雞血提取核物質的基本操作是：先加入一定量的蒸餾水，同時用玻璃棒攪拌，讓紅細胞吸水漲破，再過濾收集濾液即可。(3)嫩肉粉中含蛋白酶，能分解蛋白質，不分解DNA，從而純化DNA; DNA和蛋白質對高溫耐受性不同，在6075 的條件下，蛋白質變性，而DNA不受影響，從而將蛋白質與DNA分開。(4)在沸水浴條件下，DNA與二苯胺反應呈現(xiàn)藍色，因此，二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。13實驗中對DNA進行鑒定時，進行如下操作：試管序號AB1加2 mol/L NaCl溶液5 mL加2 mol/L NaCl溶液5 mL2不加加入提取的DNA絲狀物并攪拌3加入4 mL 二苯胺，混勻加4 mL二苯胺，混勻4沸水浴5分鐘沸水浴5分鐘實驗現(xiàn)象實驗結論(1)根據(jù)右圖，完成表格空白處的實驗內容。(2)對B試管，完成1、2、3的操作后溶液顏色如何？_。(3)在沸水中加熱的目的是_，同時說明DNA對高溫有較強的_。(4)A試管在實驗中的作用是_。(5)B試管中溶液顏色的變化程度主要與_有關。答案(1)實驗現(xiàn)象：A.溶液不變藍色B溶液逐漸變藍色實驗結論：DNA在沸水浴的條件下遇二苯胺反應呈現(xiàn)藍色(2)溶液顏色基本不變(或不呈淺藍色)(3)加快顏色反應速度 耐受性(4)對照(5)DNA(或絲狀物)的多少解析A、B兩試管形成對照，B試管中含DNA絲狀物，A試管中不含，起對照作用，其他條件均完全相同。本實驗強調反應條件是沸水浴加熱5 min，加快顏色反應的速度，觀察對比兩試管的顏色時要等到冷卻以后。根據(jù)實驗現(xiàn)象A溶液不變色，B溶液逐漸變藍，可知DNA在沸水浴條件下遇二苯胺變藍。14某生物興趣小組開展DNA粗提取的相關探究活動。具體步驟如下：材料處理：稱取新鮮的花菜、辣椒和蒜黃各2份，每份10 g。剪碎后分成兩組，一組置于20 、另一組置于20 條件下保存24 h。DNA粗提取：第一步：將上述材料分別放入研缽中，各加入15 mL研磨液，充分研磨。用兩層紗布過濾，取濾液備用。第二步：先向6只小燒杯中分別注入10 mL濾液，再加入20 mL體積分數(shù)為95%的冷酒精溶液，然后用玻璃棒緩緩地向一個方向攪拌，使絮狀物纏繞在玻璃棒上。第三步：取6支試管，分別加入等量的2 mol/L NaCl溶液溶解上述絮狀物。DNA檢測：在上述試管中各加入4 mL二苯胺試劑，混合均勻后，置于沸水中加熱5 min，待試管冷卻后比較溶液顏色的深淺，結果如表。材料保存溫度花菜辣椒蒜黃20 20 注：“”越多表示藍色越深。分析上述實驗過程，回答下列問題：(1)該探究性實驗課題的名稱是_。(2)第二步中“緩緩地”攪拌，這是為了減少_。(3)根據(jù)實驗結果，得出結論并分析。結論1：與20 相比，相同實驗材料在20 條件下保存，DNA的提取量較多。 結論2：_。針對結論1，請?zhí)岢龊侠淼慕忉專篲。(4)氯仿密度大于水，能使蛋白質變性沉淀，與水和DNA均不相溶，且對DNA影響極小。為了進一步提高DNA純度，依據(jù)氯仿的特性，在DNA粗提取第三步的基礎上繼續(xù)操作的步驟：_。然后用體積分數(shù)為95%的冷酒精溶液使DNA析出。答案(1)探究不同材料和不同保存溫度對DNA提取量的影響(2)DNA分子的斷裂(3)等質量的不同實驗材料，在相同的保存溫度下，從蒜黃中提取的DNA量最多低溫抑制了相關酶的活性，DNA降解速度慢(4)將第三步獲得的溶液與等量的氯仿充分混合，靜置一段時間，吸取上清液解析(1)據(jù)題意，該探究實驗的自變量有實驗材料的種類和保存溫度，