文件類別文件編號文件標題發(fā)酵罐操作規(guī)程頁碼第 1 頁 共6 頁發(fā)放部門起草人/日期審核/日期批準/日期執(zhí)行日期1 目的: 制定發(fā)酵罐的正確使用清潔保養(yǎng)方法，規(guī)范生產(chǎn)部對發(fā)酵罐的清潔操作。嚴格按照本操作規(guī)程操作，不得隨意更改操作規(guī)程。2 范圍: 發(fā)酵罐滅菌.3. 職責(zé): 所有使用發(fā)酵罐的人員對本制度的執(zhí)行負責(zé)。4. 程序：4.1 發(fā)酵罐滅菌操作步驟4.1.1 準備工作4.1.1.1空氣源的檢查4.1.1.1.1主要檢查空氣壓力在0.20.25MPa之間。 4.1.1.2管道，閥門的檢查4.1.1.2.1檢查管道，閥門是否有泄漏。如有泄漏，應(yīng)進行調(diào)整。4.1.1.3電氣儀表的檢查4.1.1.3.1檢查發(fā)酵罐溫度顯示是否準確;檢查壓力表,安全閥。4.1.1.4 pH、DO值的校正4.1.1.4.1校正pH、DO電極(詳見pH、DO電極使用操作)。4.1.1.4.2將校正好的pH、DO電極插入安裝孔內(nèi),并用螺母旋緊,可靠固定。4.1.1.5純蒸汽的檢查4.1.1.5.1檢查管道是否已有純蒸汽4.1.2 精過濾器滅菌4.1.2.1 調(diào)節(jié)蒸汽總過濾器前總蒸汽閥，使其壓力在0.12-0.13Mpa之間。4.1.2.2 調(diào)節(jié)壓縮空氣總閥，使其壓力在0.2Mpa。4.1.2.3 打開流量計壓縮空氣閥，使預(yù)過濾器壓力在0.2Mpa。4.1.2.4 關(guān)閉預(yù)過濾器與精過濾器中間的MDV39閥，慢慢打開MDV38閥，微開MDV43閥，打開MDV41，讓純蒸汽通過精過濾器。打開MDV46；MDV45；MDV44；有氣冒出。打PPV06排氣。保證精過濾器壓力在0.1Mpa以上，保持20分鐘。4.1.2.5 精過濾器滅菌結(jié)束，依次關(guān)閉MDV43閥和MDV38閥。打開預(yù)過濾器與精過濾器中間的MDV39閥，在屏幕按下壓縮空氣恒流自動“關(guān)”顯示為“開”，把MBV02打開。并用壓縮空氣吹干精過濾器。4.1.2.6用壓縮空氣吹精過濾器30分鐘，關(guān)閉PPVO6,MDV40閥。4.1.2.5 精過濾器滅菌結(jié)束。4.1.3 發(fā)酵罐空罐滅菌4.1.3.1將發(fā)酵罐四周內(nèi)表面用抹布擦洗干凈,表面無污物.4.1.3.2打開左夾套MBV14閥，排空發(fā)酵罐在夾套中的冷卻水，排完后關(guān)閉MBV14閥，打開MBV15閥。并檢查與罐體相連的閥門是否全部關(guān)閉。4.1.3.3微開MDV46，PPV07，MDV45，MDV44，MDV04有氣冒出，進行參數(shù)設(shè)置，設(shè)置完以后在屏幕按下發(fā)酵罐空消滅菌關(guān)顯示為開，打開疏水閥，對夾套進行加熱，當罐體溫度達到90，4.1.3.3打開罐底MDV52閥與MDV51, 通過控制PPV07氣動開關(guān)閥。4.1.3.4在發(fā)酵罐空消過程中,罐內(nèi)壓力應(yīng)控制在0.110.12MPa之間，嚴禁超壓。罐內(nèi)壓力的控制通過調(diào)節(jié)PPVO7閥的開度來實現(xiàn)。4.1.3.5 發(fā)酵罐于121滅菌60分鐘,滅菌完畢,依次關(guān)閉MDV52, 把屏幕的發(fā)酵罐空消滅菌開顯示為關(guān)。打開MDV51和排污閥排進水關(guān)閉。打開左夾套MBV14閥，排空發(fā)酵罐在夾套中的冷卻水，排完后關(guān)閉MBV14閥.4.1.3.6 空消結(jié)束，插入校正好的pH、DO電極。4.1.4 發(fā)酵培養(yǎng)基滅菌（實消）4.1.4.1 檢查與罐體相連的閥門是否全部關(guān)閉。4.1.4.2按工藝要求配制發(fā)酵培養(yǎng)基。4.1.4.3打開灌頂上的加料蓋,將培養(yǎng)基緩慢加入罐內(nèi)后擰緊加料蓋。4.1.4.4開啟攪拌器對培養(yǎng)基進行低速攪拌。打開出氣閥，在屏幕按下發(fā)酵罐實消滅菌關(guān)顯示為開，對夾套進行加熱，當罐體溫度達到90時，關(guān)閉進罐夾套蒸汽閥及關(guān)小出汽閥。4.1.4.5打開罐底MDV52閥與MDV51閥。4.1.4.6罐內(nèi)壓力的控制通過PPV07閥的開度來實現(xiàn)。4.1.4.7 培養(yǎng)基于121滅菌20分鐘,滅菌完畢后依次關(guān)閉MDV51閥、MDV52.；把屏幕的發(fā)酵罐實消滅菌開顯示為關(guān)。打開MDV41閥MDV43，將MDV46閥開至適當開度，保持罐內(nèi)壓力在0.030.05MPa之間。通過PPV07控制。4.1.4.8關(guān)閉左夾套MBV14.MBV15閥，依次打開右夾套手動進水閥、在屏幕按下發(fā)酵罐自動降溫關(guān)顯示為開，對罐體進行降溫,進行攪拌通氣冷卻,加快冷卻速度，降至402，罐內(nèi)壓力保持在0.030.05MPa之間。在降溫過程中罐內(nèi)壓力應(yīng)始終保持正壓，壓力控制由PPV07的開度來實現(xiàn)。4.1.4.9在屏幕按下“發(fā)酵罐自動恒溫關(guān)”顯示為開，“恒溫水箱自行補水關(guān)”顯示為開，“恒溫水箱自動升溫關(guān)”顯示為開，對發(fā)酵罐進行控溫371。4.1.4.10發(fā)酵培養(yǎng)基滅菌結(jié)束，保壓等待接種。4.1.5. 發(fā)酵培養(yǎng)4.1.5.1菌種接入發(fā)酵罐開始發(fā)酵培養(yǎng)，罐壓一般控制在0.02-0.04MPa之間，攪拌速度根據(jù)菌種特性和工藝要求確定4.1.5.2發(fā)酵溫度根據(jù)工藝要求確定，在觸摸屏上設(shè)定溫度，在屏幕按下“發(fā)酵罐自動恒溫關(guān)”顯示為開，“恒溫水箱自行補水關(guān)”顯示為開，“恒溫水箱自動升溫關(guān)”顯示為開，發(fā)酵過程中將自動控制罐溫。4.1.5.3發(fā)酵過程中，發(fā)酵液因菌種和工藝要求對PH的變化有所控制要求，需要流加堿調(diào)PH時，點擊觸摸屏上“堿”按鈕，調(diào)節(jié)上下限，當PH低于設(shè)定值時，蠕動泵將自動流加堿。4.1.6.4發(fā)酵過程中取樣檢測時，可以通過取樣口取樣，取樣前管道閥門需要蒸汽滅菌。取樣結(jié)束后，必須用蒸汽沖洗取樣閥門管道。4.1.5.5發(fā)酵結(jié)束出料時，