第44講植物組織培養及植物有效成份提取第十二單元生物技術實踐第1頁[考綱點擊]1.植物組織培養2.從生物材料中提取一些特定成份第十二單元生物技術實踐第2頁一、植物組織培養1．培養基(1)成份：大量元素、微量元素、有機成份、____________和瓊脂。(2)類型：_______________、發芽培養基和生根培養基。(3)作用：為植物組織或器官生長和發育提供___________。(4)制備：配制各種母液→配制培養基→__________。激素MS培養基營養條件滅菌第3頁2．組織培養(1)含義：在無菌和人工控制條件下，將離體植物器官、組織、細胞，培養在人工配制培養基上，給予適宜培養條件，誘導其產生愈傷組織、叢芽，最終形成____________。(2)原理：植物細胞含有全能性。(3)過程：完整植株脫分化再分化第4頁二、植物有效成份提取1．植物芳香油提取(1)植物芳香油主要化學成份：萜類化合物及其衍生物，含有很強_______性。提取方法有蒸餾、______和萃取等。揮發壓榨第5頁水蒸氣蒸餾法NaCl無水Na2SO4過濾第6頁壓榨壓榨第7頁水萃取紙層析法石油醚第8頁1.(·江西南昌市統考)制備好MS培養基用于植物組織培養時，需要加入植物激素。(

)2.被子植物花粉發育要經過小孢子四分體時期、單核期和雙核期等階段。(

)3.二倍體植株花粉經脫分化與再分化后可得到穩定遺傳植株。(

)4.培育草莓脫毒苗所采取主要技術是組織培養。(

)×√×√第9頁5.萃取是利用了芳香油易溶于有機溶劑特征進行提取一個方法。(

)6.蒸餾法試驗原理是利用水將芳香油溶解下來，再把水蒸發掉，剩下就是芳香油。(

)7.水溶性和水不溶性有機溶劑都能夠用于提取胡蘿卜素。(

)8.(·南師大附中期末)影響萃取效率原因除了萃取劑性質和使用量之外，還有原料顆粒大小、緊密程度、含水量、萃取溫度和時間等。(

)√××√第10頁考點一植物組織培養成份作用微量元素和大量元素蔗糖甘氨酸、維生素、煙酸、肌醇提供植物細胞生活所必需無機鹽提供碳源，維持細胞滲透壓滿足離體植物細胞在正常代謝路徑受一定影響后所產生特殊營養需求第11頁2.脫分化和再分化比較過程特點條件脫分化再分化外植體成為愈傷組織排列疏松、高度液泡化薄壁細胞團愈傷組織成為叢芽或胚狀體結構有根、芽或有生根、發芽能力離體、營養物質、植物激素和其它適宜條件第12頁使用次序試驗結果先生長素，后細胞分裂素先細胞分裂素，后生長素同時使用有利于細胞分裂，但細胞不分化細胞既分裂也分化分化頻率提升第13頁生長素/細胞分裂素結果比值高時比值低時比值適中促進根分化，抑制芽形成促進芽分化，抑制根形成促進愈傷組織形成第14頁第15頁第16頁第17頁新萌生側枝(或生長旺盛嫩枝)母液滅菌(高壓蒸汽滅菌)單核靠邊第18頁abc全能性適中生長素第19頁外植體消毒時間太短第20頁解析:(1)未開花植株莖上新萌生側枝比較幼嫩，分裂能力強，輕易誘導脫分化、再分化；配制培養基時，要先配制培養基所需成份母液，接種前要對培養基進行高壓蒸汽滅菌處理。(2)由高度分化植物組織或細胞產生愈傷組織過程叫脫分化；脫分化產生愈傷組織繼續培養，又能夠重新分化出根或芽等器官，叫再分化。(3)愈傷組織分化是否及產生根或芽，取決于生長素和細胞分裂素濃度比值及使用先后次序，當細胞分裂素/生長素比值低時，誘導根分化；二者比值處于中間水平，愈傷組織只生長不分化；二者比值高時，誘導芽形成。第21頁(4)隨滅菌時間推移、培養基pH增大、溫度升高，污染率在一定范圍內波動，而外植體消毒時間越長，污染率越低，說明污染主要是由外植體消毒時間短造成。第22頁考點二植物有效成份提取提取方法水蒸氣蒸餾法壓榨法萃取法試驗原理利用水蒸氣將揮發性較強植物芳香油攜帶出來經過機械加壓,壓榨出果皮中芳香油使芳香油溶解在有機溶劑中,蒸發溶劑后就可取得芳香油第23頁提取方法水蒸氣蒸餾法壓榨法萃取法方法步驟適用范圍(1)水蒸氣蒸餾;(2)分離油層;(3)除水過濾(1)石灰水浸泡、漂洗;(2)壓榨、過濾靜置;(3)再次過濾(1)粉碎、干燥;(2)萃取、過濾;(3)濃縮

適合用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發性強芳香油適合用于柑橘、檸檬等易焦糊原料提取適用范圍廣,要求原料顆粒要盡可能細小,能充分浸泡在有機溶劑中第24頁提取方法水蒸氣蒸餾法壓榨法萃取法優點不足簡單易行，便于分離生產成本低,易保持原料原有結構和功效出油率高,易分離水中蒸餾會造成原料焦糊和有效成份水解等問題分離較為困難,出油率相對較低使用有機溶劑處理不妥會影響芳香油質量第25頁第26頁影響原因處理方法萃取劑性質原料顆粒大小、緊密程度材料含水量萃取溫度萃取時間用水不溶性有機溶劑粉碎干燥探索最正確萃取溫度，嚴格控制溫度適當延長萃取時間第27頁第28頁第29頁第30頁水蒸氣不是橘黃萃取水浴負第31頁溶有胡蘿卜素萃取劑去除萃取劑A和C胡蘿卜素其它色素和雜質第32頁解析:(1)圖1中裝置為蒸餾裝置，提取玫瑰精油可用水蒸氣蒸餾法。蒸餾時，玫瑰精油和水蒸氣一起蒸餾出來,經冷凝后得到是油水混合物,不是純玫瑰精油。(2)胡蘿卜素是橘黃色結晶。提取胡蘿卜素慣用萃取法。因為有機溶劑易燃易爆,所以為了加緊胡蘿卜素溶解,常采取水浴加熱。提取效率與原料顆粒含水量呈負相關。(3)萃取、過濾得到液體是溶有胡蘿卜素萃取劑,因為胡蘿卜素不易揮發,而萃取劑易揮發,所以能夠利用蒸餾裝置蒸發掉萃取劑。(4)因為標準胡蘿卜