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文檔簡介

實驗七劍蘭花藥培養（一）實驗目的掌握花藥培養基本過程，熟悉花藥培養的基本原理和主要應用。（二）實驗原理花藥培養是指將發育到一定階段的花藥接種到人工培養基上，誘導其花粉粒改變發育進程，形成花粉胚或愈傷組織，進而分化為苗的技術。最適宜的誘導時期是單核小孢子時期。不同的激素配比會影響小孢子的發育途徑，使其形成花粉胚或愈傷組織。花粉培養可獲得單倍體植株，通過秋水仙堿或再生技術可進一步獲得同型純合二倍體。

（三）實驗材料和用具

實驗材料：劍蘭花蕾實驗藥品：燈用酒精、70％酒精、2％次氯酸鈉、無菌水。滅菌培養基：MS8：MS+2.0mg/LNAAMS9：MS+3.0mg/L2,4-D+3.0mg/LKT實驗用具：無菌室、無菌濾紙、無菌培養皿、燒杯、解剖刀、鑷子、剪刀、酒精燈、酒精棉花、滴管、記號筆、廢液罐、火柴、光照培養箱。（四）實驗步驟

進入無菌室，用70％乙醇擦洗雙手和工作臺面，點燃酒精燈。劍蘭花蕾70％乙醇浸泡30s，2％次氯酸鈉浸泡15min，無菌水沖洗3～5次，無菌濾紙吸干。小心剝取花藥（盡量防止觸傷花藥壁，盡量除盡花絲），每瓶接種3粒。每組每種培養基4瓶。光照培養箱27℃、光照14h/d培養。作業1周后觀察培養體系有無污染，計算每個三角瓶內染菌花藥數和外植體外的菌落數，分析染菌原因。1周后計算每種培養基的愈傷組織誘導率（形成愈傷組織的花蕾數/

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