中藥注射劑超濾工藝技術規范2022-01-11發布2022-03-11實施I前言 Ⅲ 1 13術語和定義 14超濾膜選擇 34.1材質選擇 3 34.3溶出物測試 3 44.5標準水通量測定 44.6完整性測試 45超濾前流體性質要求 45.1分子量分布 45.2澄清度 45.3黏度 4 4 56超濾工藝參數選擇 56.1超濾工藝關鍵參數 56.2流體預處理 56.3切割分子量 56.4流速參數 56.5黏度范圍 56.6溫度范圍 56.7超濾工藝驗證 57超濾效果的判定 67.1溶液澄清度 67.2溶液顏色 67.3蛋白質 67.4樹脂 67.5鞣質 67.6高分子物質 67.7細菌內毒素 6 77.9主要成分含量 77.10指紋圖譜 78超濾膜清洗維護 78.1清洗維護方法 78.2清洗操作步驟 78.3清洗效果確認 88.4保存 88.5廢棄及更換 8附錄A(規范性)技術路線示意圖 9附錄B(規范性)模型溶劑選擇 附錄C(規范性)標準水通量計算 附錄D(規范性)完整性測試 參考文獻 本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規則》的規定起草。請注意本文件中的某些內容可能涉及專利。本文件的發布機構不承擔識別專利的責任。本文件由創新天然藥物與中藥注射劑國家重點實驗室、南京中醫藥大學共同提出。本文件由中華中醫藥學會歸口。本文件起草單位：創新天然藥物與中藥注射劑國家重點實驗室、南京中醫藥大學、江西青峰藥業有限公司、上海中醫藥大學、暨南大學、中國中醫科學院中藥研究所、神威藥業集團有限公司、廣西梧州中恒集團股份有限公司、天津天士力之驕藥業有限公司、山東丹紅制藥有限公司、無錫濟煜山禾藥業股份有限公司、麗珠集團利民制藥廠、上海凱寶藥業股份有限公司、華潤三九(雅安)藥業有限公司、安徽華潤金蟾藥業股份有限公司、默克化工技術(上海)有限公司、杭州科百特過濾器材有限公司。本文件主要起草人：謝寧、彭國平、劉堯奇、張衛東、葉文才、劉地發、鄧雙炳、李存玉、王章偉、姜國志、陳明、李德坤、王臣臣、黃冰峰、王云、朱音、黃文華、劉紹勇、董禮、羅川、王立志、龔玲莉、嚴永武、王振、方禮、劉芳芳。為貫徹落實《國務院關于加快培育和發展戰略性新興產業的決定》等文件指示精神，全面提高中藥注射劑質量，更好滿足人民群眾的健康需求，推進中藥注射劑產業鏈標準體系建設，引領中藥注射劑產業整體提質增效，特編制本文件。中藥注射劑大多由植物藥或動物藥提取精制而成，存在蛋白質、多糖、鞣質等高分子物質，高分子物質給中藥注射劑帶來過敏反應/類過敏反應等不良反應風險(注：部分小分子物質也會帶來不良反應風險，不在本文件技術范圍),采用溶劑沉淀、萃取技術、樹脂純化等傳統工藝很難將高分子物質徹底去除。國食藥監辦[2010]395號頒布的《中藥注射劑安全性再評價生產工藝評價技術原則(試行)》中要求“中藥注射劑生產工藝過程中應對高分子雜質進行控制”,并對超濾工藝方法去除注射劑中高分子雜質明確了基本技術要求。超濾技術自20世紀80年代以來越來越多地應用于中藥注射劑的生產，對中藥注射劑高分子物質、熱原或細菌內毒素、可見異物等安全性質量控制起到了關鍵作用，顯示出獨特的技術優勢。但是超濾工藝基礎研究薄弱，沒有統一的技術標準與超濾工藝技術規范，指導行業的推廣應用。本文件規定了超濾工藝中超濾膜的選擇、超濾工藝參數選擇、超濾膜的清洗及維護等關鍵工藝參數，并結合中藥注射劑關鍵質量控制項(澄清度、溶液顏色、樹脂、鞣質、高分子物質、熱原或細菌內毒素、主要成分含量、指紋圖譜)規范超濾效果判定，為超濾技術在中藥注射劑領域的應用提供技術規范。1本文件界定了超濾法制備中藥注射劑工藝過程中的術語和定義，規定了超濾膜選擇、超濾前流體本文件適用于科研單位、藥品生產及研發企業、設備制造企業，采用超濾技術去除中藥注射劑中下列文件中的內容通過文中的規范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注明日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)GB/T20103—2006膜分離技術術語中華人民共和國藥典(2020年版二部)中華人民共和國藥典(2020年版四部)中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(2012版)GB/T20103—2006界定2溶質在超濾膜中達到吸附平衡時，根據溶液中溶質濃度變化，按公式(1)計算吸附率：A=(Co-C')/Co×100%………C'——平衡液中溶質濃度。溶質在超濾膜中達到吸附平衡時，根據溶液中溶質在超濾起始階段、中間階段、結束階段成分濃度變化，按公式(2)計算透過率：T=(C1濾液/C?+C2濾液/C?+C3濾液/C?)/3分離過程中，料液中的溶液在壓力驅動下透過膜，溶質(離子或不同分子量溶質)被截留，在膜與本體溶液界面或臨近膜界面區域濃度越來越高；在濃度梯度作用下，溶質又會由膜面向本體溶液擴注1:減少濃差極化的方法有粗濾或離心。注2:超濾的濃差極化會影響成分透過率的準確性，在測定膜分子量及成分透過率時，操作上應盡量避免濃差極化影響。在單位面積、單位時間、單位跨膜壓力(TransmembranePressure,TMP)在標準溫度下水通過膜注：單位為升每平方米每小時每巴(L/m2/h/bar)。3因膜或組件的產水量隨水溫度變化而變化，為把不同溫度下的產水量校正到以25℃為基礎的標稱等)的超濾膜，超濾膜材質包括但不限于聚砜(PS)、聚醚砜(PES)、改性聚醚砜(mPES)、聚偏氟乙用的超濾膜應對中藥注射劑主要成分無顯著影響，對主要成分的吸附率應小于10%。技術路線示意圖見附錄A。按照GB/T32360—2015超濾膜測試方法，如：聚乙二醇法、卵清蛋白法、牛血清白蛋白法或葡聚4.3溶出物測試根據待超濾流體溶液的乙醇濃度及pH值，選擇合適的模型溶劑(見附錄B),按第4章4.3.2的方件下靜態提取至少24h;e)當提取完全時，超濾膜包內的提取溶液再循環約5min,以確保提取溶液的均一性；按照《中華人民共和國藥典》2020年版二部純化水的質量標準，檢測提取溶液的不揮發物。按照《中華人民共和國藥典》2020年版四部通則“0682制藥用水中總有機碳測定法”,檢測提取4參照《中華人民共和國藥典》2020年版四部通則“0402紅外分光光度法”,檢測提取溶液。參照《中華人民共和國藥典》2020年版四部通則“0512高效液相色譜法”,檢測提取溶液。4.4.1溶出物超濾膜在待超濾流體溶液環境中，按照第4章4.3.3的方法進行檢測，不得檢出超濾膜組成材料根據各品種含量測定的方法進行檢測，超濾膜對中藥注射劑主要成分吸附率應小于10%。按照附錄C的方法測定標準水通量。初次清洗后的標準水通量記為NWP?,第n次清洗后的標準水按照附錄D的方法，對超濾膜的完整性進行測試，應完整。參照《中華人民共和國藥典》2020年版四部通則“0514分子排阻色譜法”,對超濾前的流體進行參照《中華人民共和國藥典》2020年版四部“0902澄清度檢查法”(第一法),對超濾前的流體進行檢測，應不超過3號濁度標準液的濁度。參照《中華人民共和國藥典》2020年版四部“0633黏度測定法”,對超濾前的流體進行檢測，黏超濾前流體pH值應在超濾膜耐受的范圍內，耐受范圍應參照超濾膜的使用說明書。5超濾膜耐受溫度一般在4℃~50℃,流體在不同溫度下應無明顯渾濁，若有明顯渾濁應按照第6章6.2進行預處理。超濾工藝關鍵參數應包括(但不限于)超濾膜的切割分子量、流速、流體的黏度、溫度、跨膜壓力等。應根據具體品種選擇性對比超濾前后流體的蛋白質、樹脂、鞣質、高分子物質、熱原、細菌內預處理方法包括過濾、水提醇沉、醇提水沉、高速離心等。預處理后流體澄清度應達到的標準見第5章5.2。根據第5章5.1測定的流體分子量分布情況，選取超濾膜孔徑一般應為擬去除物質最小分子量的1/5～1/3;選取一定的流速、跨膜壓力、溫度及黏度的條件下進行預超濾，參照附錄C的方法計算單位面積、單位時間下流體的通量；按照第7章中7.6、7.9及7.10檢測超濾前流體、回流液及透過液，考察高分子物質去除情況、主要成分截留情況及指紋圖譜相似度情況，選取適宜切割分子量的膜進行根據待超濾流體的批量及超濾時間，并結合超濾膜推薦的進液流速，選擇合適的初始流速，調節回流閥和透過液閥門，參照附錄C的方法計算單位面積、單位時間下流體的通量，確定合適的流速、根據上述確定流速、跨膜壓力參數，對不同黏度的流體進行考量，參照《中華人民共和國藥典》2020年版四部“0633黏度測定法”對超濾前的流體進行檢測，記錄透過液流量、壓力等參數，計算單根據上述確定的工藝參數，推薦采用中試以上批量，對流體的預處理、切割分子量、流速、黏度及溫度等關鍵工藝參數進行三批驗證，確認超濾工藝穩定性及超濾后流體的質量情況。超濾工藝參數6T/CACM13應穩定可控，超濾后流體的質量應穩定均一，應滿足第7章超濾效果的判定標準。參照《中華人民共和國藥典》2020年版四部通則“0902澄清度檢查法(第一法)”進行檢測，超濾后流體應不超過2號濁度標準液的濁度。除另有規定外，參照《中華人民共和國藥典》2020年版四部通則“0901溶液顏色檢查法(第一法)”除另有規定外，參照《中華人民共和國藥典》2020年版四部“2400注射劑有關物質檢查法”進行除另有規定外，參照《中華人民共和國藥典》2020年版四部“2400注射劑有關物質檢查法”進行除另有規定外，參照《中華人民共和國藥典》2020年版四部“2400注射劑有關物質檢查法”進行除另有規定外，參照《中華人民共和國藥典》2020年版四部通則“0514分子排阻色譜法”下測定法(3)高分子雜質測定法③限量法，需進行相應方法學驗證。推薦測定方法如下：以凝膠為填充劑(TSKG2000SWx1凝膠色譜柱，7.8mm×300mm,5μm);以乙腈-0.03%三氟乙酸溶液(30:70)為流動相；檢測波長為214nm。采用生長抑素作為對照品，分子量為1638;在凝膠色譜柱上，理論上分子量越大保留時間越小。除另有規定外，不應在生長抑素峰之前檢出分子量大于超濾后流體每1mL含細菌內毒素的量不應大于0.50EU或單次給藥劑量含細菌內毒素應不得大于257細菌內毒素檢查法如不適用，除另有規定外，參照《中華人民共和國藥典》2020年版四部“1142根據各品種項下的含量測定方法進行檢測，超濾后流體主要成分含量應不低于超濾前流體主要成分含量的90%。除另有規定外，根據各品種項下指紋圖譜的檢測方法進行測定，采用國家藥典委員會發布的《中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統》(2012版),以超濾前流體的指紋圖譜為對照圖譜，超濾后流體的指紋圖譜相似度應不低于0.90,各主成分峰面積的相應比值應不低于0.90。先用純化水或注射用水進行沖洗，關閉透過端閥門，完全開放回流端閥門，循環清洗至符合第8章8.3的要求；如無效，達不到第4章4.5標準水通量的要求時，可參照表1推薦清洗試劑進行清洗。清洗用的純化水或注射用水應符合《中華人民共和國藥典》2020年版二部純化水或注射用水的質污染物質1%以下0.1N5000mg/L以下a)按照第8章8.1先用純化水或注射用水沖洗整個超濾系統，清洗時間一般為15min～60min,溫度不宜超過50℃,再用清洗試劑進行清洗，具體品種的清洗時間、次數、溫度及清洗試劑b)測定標準水通量，若達到第4章4.5的要求，則可按照第8章8.4的方法進行保存；c)若標準水通量未達到第4章4.5的要求，則需更換清洗試劑進行清洗；e)再次測定標準水通量，若達到第4章4.5的要求，則可按照第8章8.4的方法進行保存。8按照第4章4.5測定超濾膜清洗后的標準水通量值，應符合要求。8.3.2完整性確認按照第4章4.6選擇合適的方法測定超濾膜的完整性，應符合要求。除另有規定外，參照《中華人民共和國藥典》2020年版四部“0682制藥用水中總有機碳測定法”,取清洗后回流端和透過端的水檢測總有機碳，推薦應不大于0.5mg/mL。除另有規定外，參照《中華人民共和國藥典》2020年版四部“0681制藥用水電導率測定法”,取清洗后回流端和透過端的水檢測電導率，宜符合純化水或注射用水的限度值。8.3.5其他項目確認應根據選用的不同清洗試劑，建立相應的方法，規定其殘留限度值。其他項目根據不同品種而定，但應進行方法學研究。超濾膜長時間不用或在生產間隙期間的保存，選擇超濾膜可耐受的保存試劑見表2,浸泡在保存試劑溶液中，推薦在2℃~18℃(但注意不能結冰)進行保存。表2保存試劑0.1N6個月0.1N26個月2個月8.5廢棄及更換按照第8章8.2的清洗操作步驟進行清洗，若標準水通量及完整性達不到第4章4.5及4.6條的要求，應更換新的超濾膜。9(規范性)技術路線示意圖技術路線示意圖見圖A.1。材質、切割分子量、溶出物、兼容性、標準水通量、完整性澄清度高分子物質、主要成分、指紋圖譜不同流速不同粘度不同溫度預處理、切割分子量、流速、黏度及溫度溶液澄清度、顏色，等吸附率、生物毒性、溶出物小于等于3號濁度標準液的濁度去除情況、截留情況、相似度工藝參數應穩定可控、質量應穩定均一小于等于2號濁度標準液的濁度、色差應不超過±2說明：—判定——主要指標圖A.1技術路線示意圖(規范性)模型溶劑選擇見表B.1。表B.1模型溶劑選擇鹽酸或氫氧化鈉調pH=6.0～8.0的注：水：為純化水或注射用水；乙醇：達到分析級以上要求；鹽酸：達到分析級以上要求；(規范性)標準水通量的計算見公式(C.1)。NWP=R×TCF/A/TMP……TCF——溫度校正系數(通常以25℃為標準溫度，溫度校準系數為1)見表C.1;其中TMP的計算見公式(C.2)。TMP=(Pin+Pout)/2-P…………………P。——透過端壓力，單位為巴(bar)(如果透過端完全開放，則為0bar)。表C.1溫度校正系數TCF(以25℃為基準)表C.1溫度校正系數TCF(以25℃為基準)(續)98765b)新超濾膜第1次使用之后且按照清洗規程完成清洗后測定的標準水通量值。c)新超濾膜前2次至4次使用之后且按照清洗規程完成清洗后測定的標準水通量值的平均值。超濾膜第n次清洗后測定的標準水通量記為NWPn,應當與上一次清洗后測定的標準水通量記為NWP.應為NWP-1的80%～120%,若低于80%,清洗效果未達到要求，需進一步處理；若超過120%,NWP,應為NWP?的50%以上，若NWP.低于NWP的50%,則推薦更換超濾膜。 (規范性)完整性測試D.1完整性測試方法D.1.1擴散空氣流法可在跨膜壓力在2.1bar(30psi)條件下用水循環