廣西地方標準《富硒蟲草生產技術規程》（征求意見稿）編制說明一、任務來源和起草單位根據廣西壯族自治區市場監督管理局《關于下達2017年第四批廣西地方標準制定（修訂）項目計劃的通知》的通知要求，《富硒蟲草生產技術規程》（編號：2017-0460）廣西地方標準于2017年6月獲得立項?！陡晃x草生產技術規程》標準由廣西壯族自治區農業科學院提出，廣西壯族自治區農業科學院微生物研究所、廣西宜州市農科所負責起草。其中廣西壯族自治區農業科學院微生物研究所負責標準研究方案制定及具體編制，廣西宜州市農科所協助實施部分試驗，收集數據及相關資料等工作。二、制定標準的必要性蟲草是傳統名貴中藥，具有抗癌、抗菌、調節免疫、降血脂、降血糖等廣泛的藥理作用，是一類十分重要的藥用真菌，傳統上和鹿茸、人參并稱三大珍貴補品。硒是人體必需的微量元素，被稱為微量元素中的“生命奇效元素”。眾多研究表明，硒具有調節免疫、抗腫瘤、抗HIV等病毒、保護大腦、增強男性生殖功能等作用。硒的生理活性取決于它的化學形態，自然界的硒分為有機硒和無機硒兩大類，有機硒的生物活性要好于無機硒，生物體內主要以有機硒的形式存在。無機硒毒性強、在體內不易吸收，有機硒吸收率高、毒性小。因而科學補硒應補有機硒，而非無機硒。蟲草菌具有較強的元素有機轉化能力，以蟲草為載體將無機硒轉化為蟲草有機硒，將傳統名貴中藥“蟲草”與奇效元素“硒”有機結合起來，發揮蟲草菌和硒固有的以及協同的生理作用，生產功能更好的富硒蟲草無論是作為藥品、保健品以及補硒功能食品均具有重要意義。富硒蟲草研究從20世紀90年代興起，已有二十多年，有關富硒蟲草的研究報道眾多，僅富硒蟲草生產的相關專利就多達51件，其中關于富硒蟲草的培養方法就有18個。但是，目前國內并沒有富硒蟲草的的生產技術規范，且硒的食用量的安全標準較窄，市場上各類富硒蟲草及相關產品中的硒含量也各不相同。因此，健全富硒蟲草相關的生產技術規范和保障體系顯尤為重要。通過本標準的制定實施，可指導富硒蟲草生產企業、合作社和農戶規范生產，保障富硒蟲草的品質和安全，對我國富硒蟲草相關產品的開發以及產業的發展具有重要意義。課題研究工作和標準征求意見稿的起草經過1、研究工作基礎（1）培養基、培養條件的規范研究關于蟲草富硒培養基的優化研究相對較多，培養條件的優化相對較少，在參考蟲草優化培養基礎上對蟲草富硒進行了研究，但研究尚不夠系統。蟲草的富硒培養方式可分為固體培養和液體培養，目前以液體優化富硒培養相對較多，專利中以固體培養較多；硒源一般采用亞硒酸鈉、動植物硒、硒泉水、硒酵母等。本標準計劃綜合考察富硒蟲草不同培養原料、硒源等栽培試驗及研究進展，確定富硒蟲草適宜的培養原料；（2）富硒蟲草菌種規范研究目前的富硒蟲草研究中，所涉及的蟲草種類僅見蛹蟲草和冬蟲夏草兩種，其它蟲草都還沒有涉及。傳統中藥群眾認可度很高，蛹蟲草作為衛生部認定的新資源食品和藥品應用非常廣泛。本標準綜合研究蛹蟲草的富硒生產規程，制定相關標準。（3）富硒蟲草培養條件規范研究幾乎所有研究都表明低濃度硒促進蟲草的生長，而高濃度硒對蟲草生長產生抑制作用。然而對于何種濃度的硒對蟲草生長起最佳作用，何種濃度的硒對蟲草生長起抑制，各研究者結果不完全相同。此外研究表明硒不會改變蟲草營養成分類別，但可以改變其各營養成分含量。本標準計劃開展蟲草富硒穩定性研究，考察原料種類、培養條件、硒添加量等對蟲草富硒率、硒含量的影響，確定富硒蟲草培養技術規范；2、標準征求意見稿的起草經過2017年5月至12月按照廣西壯族自治區質量技術監督局《關于下達2017年第四批廣西地方標準制定（修訂）項目計劃的通知》精神，為做好標準的編制工作，我單位成立標準起草工作小組；部署了制標工作方案和小組成員分工負責標準起草工作時間安排表，全面開展《富硒蟲草生產技術規程》廣西地方標準的編制工作。2018年1月至12月，課題組對多年來的研究資料進行了匯合、分析和總結，并查閱了大量的國內文獻資料，確定了《富硒蟲草生產技術規程》廣西地方標準的基本內容和思路。經過反復研討，形成了標準的編制原則及綱要。2019年1月至12月，課題組對南丹縣壽菌種植專業合作社、融水縣鼎農生態有限公司、融水苗坪嶺藥材種植專業合作社等從事食藥用菌生產加工的企業進行了調研。2020年1月至4月經廣西農業科學院微生物研究所、廣西宜州市農科所編制小組成員的反復討論和寫作、修改，完成了《富硒蟲草生產技術規程》廣西地方標準的征求意見稿。四、標準編制原則及技術依據1、編制原則課題編制遵循“科學、適度、可行”原則，考慮標準前瞻性又顧及生產實際，確保標準可以作為政府部門監督、指導生產的依據，在生產上切實可行。（1）科學性標準的制定過程中采用文案調查法、專家座談法、現場調查實驗等多種研究方法，科學的研究方法為標準內容的科學性提供了有力保障。（2）客觀性因各地不同原料、不同品種富硒水平具有一定的差異性，因此在標準制定過程中研究小組充分考慮不同原料來源、不同生產方式和不同品種等實際情況，盡量做到標準內容切合大多數生產企業富硒蟲草生產實際，在保證安全和產品質量的基礎上，不對富硒蟲草所采用的具體工藝方法和設備做過多要求。（3）可操作性標準中所涉及的操作流程清晰，量化指標科學合理，提出的方法、要求易于操作，對于富硒蟲草企業能夠起到一定的引導和規范作用。2、技術依據本標準按照GB/T1.1－2009給出的規則要求編制，并依據前期研究成果及應用資料，符合國家產業可持續發展的有關規定。關鍵數據如下。（1）蛹蟲草對亞硒酸鈉的耐受性評價蟲草基礎培養基配方為：馬鈴薯200g，蛋白胨10g，葡萄糖10g，磷酸二氫鉀2g，硫酸鎂1g，蛹蟲草富硒營養添加劑1號5g，瓊脂粉12個，自來水1000mL，pH6.0～6.5。在基礎培養基中添加一定量亞硒酸鈉制成平板培養基，使培養基中亞硒酸鈉質量濃度分別為0，50，100，150，200，250，300，350，400和450mg/L，在無菌條件下接種直徑5mm的蛹蟲草菌餅不同質量濃度亞硒酸鈉對蛹蟲草菌落特征的影響見表１。由表１及圖１可見，當亞硒酸鈉質量濃度為0～450mg/L時，蛹蟲草菌絲均能生長，但其菌落形態與直徑有明顯差異。隨著亞硒酸鈉質量濃度的增大，蛹蟲草菌落直徑逐漸減小，當培養基中亞硒酸鈉質量濃度為50mg/L時，菌落直徑是對照的98.1％，氣生菌絲較為稀疏，同心圓不太明顯；當亞硒酸鈉質量濃度為100mg/L時，菌落直徑是對照的97％，氣生菌絲稀疏，同心圓多且清晰，菌落呈淡黃色，邊緣整齊，表明此時蛹蟲草的菌落生長基本正常；當亞硒酸鈉質量濃度≧150mg/L時，菌落已不能正常轉色，且菌落邊緣呈鋸齒形，表明蛹蟲草的菌絲生長受到了較大的影響。因此，從生產富硒蛹蟲草的角度考慮，培養基中亞硒酸鈉的質量濃度應低于100mg/L。表１不同質量濃度亞硒酸鈉對蛹蟲草菌落特征的影響圖1不同濃度亞硒酸鈉對蛹蟲草菌落形態的影響（2）亞硒酸鈉對蛹蟲草長勢、子座產量及硒含量的影響蛹蟲草的長勢評分綜合了蛹蟲草子座的生長密度、長度、子座形態及其健壯程度等指標，能反映亞硒酸鈉對蛹蟲草生長、轉色、子座分化及生長的綜合效應。不同質量濃度亞硒酸鈉對蛹蟲草長勢評分的影響見圖2。隨著亞硒酸鈉質量濃度的增大，蛹蟲草的長勢評分呈先增加后減小趨勢，其中當亞硒酸鈉質量濃度小于100mg/L時，蛹蟲草長勢變化幅度較??；當亞硒酸鈉質量濃度大于100mg/L時，蛹蟲草長勢評分下降幅度較大，表明過量的添加亞硒酸鈉會影響蛹蟲草的生長，表現出一定的毒害作用。圖2不同質量濃度亞硒酸鈉對蛹蟲草長勢評分的影響不同質量濃度亞硒酸鈉對蛹蟲草子座產量的影響見圖3。適量添加亞硒酸鈉有利于子座產量的提高，過量的添加則會使其子座產量下降。在栽培營養液中亞硒酸鈉質量濃度＜100mg/L時，蛹蟲草的子座產量較高。當栽培營養液中亞硒酸鈉質量濃度為58.17mg/L時，蛹蟲草的子座產量最高，為22.4g/瓶。不同質量濃度亞硒酸鈉對蛹蟲草子座硒含量的影響見圖4。在栽培營養液中添加不同質量濃度的亞硒酸鈉，對蛹蟲草子座硒含量影響較大。當栽培營養液中亞硒酸鈉質量濃度較低時（＜50mg/L），蛹蟲草子座硒含量增長幅度較小；當亞硒酸鈉質量濃度在50～150mg/L時，子座硒含量隨著亞硒酸鈉質量濃度的增加迅速增大；當亞硒酸鈉質量濃度在150～200mg/L時，子座含硒量增加幅度不明顯；當亞硒酸鈉質量濃度≥200mg/L時，子座硒含量趨于穩定，表明蛹蟲草對硒的富集量有一定限度。經計算亞硒酸鈉質量濃度為200mg/L時，子座中硒含量最大，為92.68mg／kg。表明蛹蟲草是人工生產富硒產品的優良載體，同時也說明蛹蟲草菌株CM-003有較強的富硒能力。圖４亞硒酸鈉濃度對蛹蟲草圖５亞硒酸鈉濃度對蛹蟲草子座產量的影響