第一章總論第一節(jié)緒論1.什么是中藥化學(xué)？（中藥化學(xué)的概念）中藥化學(xué)是運(yùn)用現(xiàn)代科學(xué)理論與措施研究中藥中化學(xué)成分的一門學(xué)科。2.中藥化學(xué)研究什么？中藥化學(xué)研究?jī)?nèi)容包括各類中藥的化學(xué)成分（重要是生理活性成分或藥效成分）的構(gòu)造特點(diǎn)、物理化學(xué)性質(zhì)、提取分離措施以及重要類型化學(xué)成分的構(gòu)造鑒定等。此外，還波及重要類型化學(xué)成分的生物合成途徑等內(nèi)容。中藥化學(xué)是專業(yè)基礎(chǔ)課，中藥化學(xué)的研究，在中醫(yī)藥現(xiàn)代化和中藥產(chǎn)業(yè)化中發(fā)揮著極其關(guān)鍵的作用。3.中藥化學(xué)研究的意義（注：本內(nèi)容為第四節(jié)中藥化學(xué)在中藥質(zhì)量控制中的意義）（1）闡明中藥的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，探索中藥防治疾病的原理（2）闡明中藥發(fā)放配伍的原理（3）改善中藥制劑劑型、提高臨床療效（4）控制中藥及其制劑的質(zhì)量（5）提供中藥炮制的現(xiàn)代科學(xué)根據(jù)（6）開(kāi)發(fā)新藥、擴(kuò)大藥源（7）構(gòu)造修飾、合成新藥重要考試內(nèi)容：1.中藥有效成分的提取與分離措施，尤其是某些較為先進(jìn)且應(yīng)用較廣的措施。2.各類化合物的構(gòu)造特性與分類。3.各類化合物的理化性質(zhì)及常用的提取分離與鑒別措施。4.常用重要化合物的構(gòu)造測(cè)定措施。5.常用中藥材中所含的化學(xué)成分及其提取分離、構(gòu)造測(cè)定措施和重要生物活性。6.常用中藥材使用時(shí)的注意事項(xiàng)和有關(guān)的質(zhì)量控制成分。課程重要內(nèi)容：內(nèi)容總論緒論中藥化學(xué)成分的一般研究措施**各論生物堿**糖和苷*醌類**香豆素和木脂素*黃酮**萜類和揮發(fā)油*皂苷**強(qiáng)心苷*重要?jiǎng)游锼幓瘜W(xué)成分*其他成分各論學(xué)習(xí)思緒：學(xué)習(xí)措施：1.以總論為指導(dǎo)學(xué)習(xí)各論。2.注意總結(jié)歸納，在掌握基本共同點(diǎn)的狀況下，分類記憶特殊點(diǎn)。3.注意理論聯(lián)絡(luò)實(shí)際，并以《藥典》作為基本學(xué)習(xí)指導(dǎo)。4.發(fā)揮想象力進(jìn)行聯(lián)想記憶。第二節(jié)中藥有效成分的提取與分離一、中藥有效成分的提取注意：在提取前，應(yīng)對(duì)所用材料的基源（如動(dòng)、植物的學(xué)名）、產(chǎn)地、藥用部位、采集時(shí)間與加工措施等進(jìn)行考察，并系統(tǒng)查閱文獻(xiàn)，以充足理解和運(yùn)用前人的經(jīng)驗(yàn)。（一）溶劑提取法注意：一般如無(wú)特殊規(guī)定，藥材須經(jīng)干燥并合適粉碎，以利于增大與溶劑的接觸表面，提高提取效率。補(bǔ)充：溶劑提取法的原理根據(jù)中藥化學(xué)成分與溶劑間“極性相似相溶”的原理，根據(jù)各類成分溶解度的差異，選擇對(duì)所提成分溶解度大、對(duì)雜質(zhì)溶解度小的溶劑，根據(jù)“濃度差”原理，將所提成分從藥材中溶解出來(lái)的措施。作用原理：溶劑穿透入藥材原料的細(xì)胞膜，溶解可溶性物質(zhì)，形成細(xì)胞內(nèi)外的濃度差，將其滲出細(xì)胞膜，到達(dá)提取目的。一般提取規(guī)律：①萜類、甾體等脂環(huán)類及芳香類化合物由于極性較小，易溶于三氯甲烷、乙醚等親脂性溶劑中；②糖苷、氨基酸等類成分則極性較大，易溶于水及含水醇中；③酸性、堿性及兩性化合物，由于存在狀態(tài)（分子或離子形式）隨溶液而異，故溶解度將隨pH而變化，可用不一樣pH的堿或酸提取。補(bǔ)充：溶劑的選擇。1）常見(jiàn)溶劑類型石油醚＜四氯化碳＜苯＜二氯甲烷＜氯仿＜乙醚＜乙酸乙酯＜正丁醇＜丙酮＜甲醇（乙醇）＜水。2）溶劑選擇的原則（1）相似相溶，能最大程度地提取所需要的化學(xué)成分（2）不與有效成分反應(yīng)（3）不溶共存雜質(zhì)（4）節(jié)省成本：價(jià)廉、安全、易得、濃縮以便。常用親水性提取溶劑溶劑長(zhǎng)處缺陷水對(duì)細(xì)胞穿透力強(qiáng)，提取效率高安全、價(jià)廉、易得水雜質(zhì)多、易變對(duì)含淀粉、粘液質(zhì)多的藥材不易過(guò)濾乙醇對(duì)藥材組織穿透力強(qiáng)，效率高有選擇性，不一樣濃度極性不一樣可防腐、沸點(diǎn)低，易除去、較廉價(jià)可克制酶活性、大部分可回收運(yùn)用脂溶性雜質(zhì)較多有揮發(fā)性、易燃燒甲醇效率高于乙醇毒性大、較貴提取措施a、煎煮b、浸漬法c、滲漉法d、回流e、持續(xù)回流（索氏提?。┱莆詹灰粯犹崛〈胧┰?、特點(diǎn)及合用的成分類型。1.煎煮法定義：中藥材加水浸泡後加熱煮沸。長(zhǎng)處：簡(jiǎn)便。缺陷：①需加熱，含揮發(fā)性成分及加熱易破壞的成分不適宜使用。②多糖類成分含量較高的中藥，用水煎煮後藥液黏度較大，過(guò)濾困難，不適宜使用。③對(duì)親脂性成分提取不完全。2.浸漬法定義：在常溫或溫?zé)幔?0～80℃）條件下用合適的溶劑浸漬藥材，以溶出其中的有效成分的措施。長(zhǎng)處：簡(jiǎn)便，合用于遇熱不穩(wěn)定的成分，或含大量淀粉、樹(shù)膠、果膠、黏液質(zhì)的中藥。缺陷：①出膏率低；②以水為溶劑時(shí)，提取液易發(fā)霉變質(zhì)。3.滲漉法定義：不停向粉碎的中藥材中添加新鮮浸出溶劑，使其滲過(guò)藥材，從滲漉筒下端出口流出滲漉液的措施?；具^(guò)程：藥材浸潤(rùn)→裝筒→浸漬→滲漉。長(zhǎng)處：合用于遇熱不穩(wěn)定的成分，或含大量淀粉、樹(shù)膠、果膠、黏液質(zhì)的中藥。（似浸漬法，但提取效率高于浸漬法）缺陷：①溶劑消耗量大；②耗時(shí)長(zhǎng)，操作麻煩。4.回流法與持續(xù)回流法定義：使用易揮發(fā)的溶劑加熱回流或持續(xù)回流提取中藥成分的措施.長(zhǎng)處：效率較高。缺陷：①對(duì)熱不穩(wěn)定成分不適宜使用；②溶劑消耗量大、操作麻煩；③耗時(shí)長(zhǎng)。總結(jié)：措施操作長(zhǎng)處缺陷合用藥物煎煮浸漬滲漉回流持續(xù)回流5.水蒸氣蒸餾法水蒸氣蒸餾法用于提取具有揮發(fā)性的、能隨水蒸氣蒸餾而不被破壞，且難溶或不溶于水的成分。合用成分：揮發(fā)性（100℃有一定蒸汽壓）；對(duì)水穩(wěn)定；不溶于水；耐熱。（如：中藥中揮發(fā)油的提取常采用此法。）6.升華法固體物質(zhì)在受熱時(shí)不通過(guò)熔融而直接轉(zhuǎn)化為蒸氣，蒸氣遇冷又凝結(jié)成固體的現(xiàn)象叫做升華。合用成分：游離羥基蒽醌類成分，某些小分子香豆素類，有機(jī)酸類成分等。（如：樟木中的樟腦，茶葉中的咖啡因）7.超聲提取法定義：采用超聲波輔助溶劑提取的措施。超聲波是一種強(qiáng)烈機(jī)械振動(dòng)波，它是指?jìng)鞑サ恼駝?dòng)頻率在彈性介質(zhì)中高達(dá)20kHz的一種機(jī)械波。提取原理：超聲波可產(chǎn)生高速、強(qiáng)烈的空化效和攪拌作用，能破壞藥材的細(xì)胞，使提取溶劑滲透到藥材的細(xì)胞中，從而加速藥材中有效成分溶解于溶媒中，提高有效成分的提取率。特點(diǎn)：①不會(huì)變化有效成分的化學(xué)構(gòu)造；②可縮短提取時(shí)間，提高提取效率。8.超臨界流體萃取法定義：采用超臨界流體為溶劑對(duì)中藥材進(jìn)行萃取的措施。超臨界流體（SF）：指處在臨界溫度（Tc）和臨界壓力（Pc）以上，介于氣體和液體之間的、以流動(dòng)形式存在的單一相態(tài)物質(zhì)。密度與液體相近，而黏度與氣體相近，擴(kuò)散能力強(qiáng)。萃取選擇性的決定原因：溫度、壓力、夾帶劑的種類及含量。常用的提取物質(zhì)：C02、NH3、C2H6、C7H16、CCl2F2、N2O、SF6等，實(shí)際最常用的為C02。（1）C02超臨界流體萃取的特點(diǎn)：①簡(jiǎn)便、高效、無(wú)有機(jī)溶劑殘留；②安全，無(wú)污染；③因萃取溫度低，合用于對(duì)熱不穩(wěn)定物質(zhì)的提?。虎茌腿〗橘|(zhì)的溶解特性輕易變化，在一定溫度下只需變化其壓力；⑤還可加入夾帶劑，變化萃取介質(zhì)的極性來(lái)提取極性物質(zhì)；⑥適于極性較大和分子量較大物質(zhì)的萃取；⑦萃取介質(zhì)可循環(huán)運(yùn)用，成本低；⑧可與其他色譜技術(shù)聯(lián)用及IR、MS聯(lián)用，可高效迅速地分析中藥及其制劑中的有效成分。（2）局限性①對(duì)脂溶性成分溶解能力強(qiáng)，而對(duì)水溶性成分溶解能力弱——合用成分為脂溶性成分；②設(shè)備造價(jià)高，成本高；③更換產(chǎn)品時(shí)設(shè)備清洗困難。（3）夾帶劑的作用夾帶劑（entrainer）作為亞臨界組分,揮發(fā)度介于超臨界流體與被萃取溶質(zhì)之間，以液體形式和相對(duì)小的量加入超臨界流體中。作用：①改善或維持選擇性；②提高難揮發(fā)溶質(zhì)的溶解度。常用夾帶劑：甲醇、乙醇、丙酮、乙腈等（對(duì)溶質(zhì)具有很好溶解性的溶劑也往往是很好的挾帶）練習(xí)題最佳選擇題對(duì)具有大量淀粉、樹(shù)膠、果膠、黏液質(zhì)中藥的有效成分常選用的提取措施是A.浸漬法B.水蒸氣蒸餾法C.煎煮法D.回流提取法E.升華法[答疑編號(hào)]【對(duì)的答案】A最佳選擇題最常用的超臨界流體是A.水B.甲醇C.二氧化碳D.三氧化二鋁E.二氧化硅[答疑編號(hào)]【對(duì)的答案】C二、中藥有效成分的分離與精制（一）根據(jù)物質(zhì)溶解度差異進(jìn)行分離1.運(yùn)用溫度不一樣引起溶解度的變化進(jìn)行分離重要包括：結(jié)晶與重結(jié)晶。結(jié)晶：將不是結(jié)晶狀態(tài)的固體物質(zhì)處理成結(jié)晶狀態(tài)的操作。重結(jié)晶：從不純的結(jié)晶通過(guò)深入精制處理得到較純結(jié)晶的過(guò)程。原理：要分離物質(zhì)在熱的溶劑中溶解到達(dá)飽和，冷卻時(shí)由于溶解度的減少，溶液因過(guò)飽和而析出晶體。結(jié)晶與重結(jié)晶操作結(jié)晶用溶劑的選擇：①不與被結(jié)晶物質(zhì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)；②對(duì)被結(jié)晶成分熱時(shí)溶解度大、冷時(shí)溶解度??；③對(duì)雜質(zhì)或冷熱時(shí)都溶解（留在母液中），或冷熱時(shí)都不溶解（過(guò)濾除去）；④溶劑沸點(diǎn)較低，易揮發(fā)除去；⑤無(wú)毒或毒性較小，便于操作。常用的重結(jié)晶溶劑：水、冰醋酸、甲醇、乙醇、丙酮、乙醚、三氯甲烷、苯、四氯化碳、石油醚和二硫化碳等。（單用或混用）注意：用于重結(jié)晶溶劑用量需合適，用量太大會(huì)增長(zhǎng)溶解，析出晶體量少；用量太小在熱過(guò)濾時(shí)會(huì)提早析出結(jié)晶導(dǎo)致?lián)p失。一般可比需要量多加20%左右。結(jié)晶純度的鑒定措施：（1）結(jié)晶形態(tài)和色澤：一種純的化合物一般均有一定的晶形和均勻的色澤。（2）熔點(diǎn)和熔距：?jiǎn)我换衔镆话憔幸欢ǖ娜埸c(diǎn)和較小的熔距（1～2℃）。（3）色譜法：?jiǎn)我换衔镉脙煞N以上溶劑系統(tǒng)或色譜條件進(jìn)行檢測(cè)，均顯示單一的斑點(diǎn)。常用的有紙色譜、紙上電泳和薄層色譜。（4）高效液相色譜法（HPLC）：純的化合物顯示單一的譜峰。（5）其他措施：質(zhì)譜、核磁共振等。單峰表達(dá)純化合物，雙峰表達(dá)不純的化合物。2.運(yùn)用兩種以上不一樣溶劑的極性和溶解性差異進(jìn)行分離在溶液中加入另一種溶劑以變化混合物的極性，使一部分物質(zhì)沉淀析出，從而實(shí)現(xiàn)分離。水提醇沉法：在藥材濃縮的水提液中加入數(shù)倍量的乙醇稀釋。（沉淀除去多糖、蛋白質(zhì)等水溶性雜質(zhì)。）醇提水沉法：在藥材濃縮的水提液中加入數(shù)倍量的乙醇稀釋。（沉淀除去樹(shù)脂、葉綠素等水不溶性雜質(zhì)。）另：醇/醚法、醇/丙酮法。（可使皂苷沉淀析出，而脂溶性的樹(shù)脂等雜質(zhì)留在母液中）3.運(yùn)用酸堿性（不一樣）進(jìn)行分離對(duì)酸性、堿性或兩性有機(jī)化合物來(lái)說(shuō)，加入酸、堿以調(diào)整溶液的pH，變化分子的存在狀態(tài)，從而變化溶解度實(shí)現(xiàn)分離。酸提堿沉：生物堿等堿性成分。堿提酸沉：黃酮、蒽醌類等酸性成分。內(nèi)酯或內(nèi)酰胺構(gòu)造的成分可被皂化溶于水，借此與其他難溶于水的成分分離。4.運(yùn)用沉淀試劑進(jìn)行分離酸性或堿性化合物可通過(guò)加入某種沉淀試劑，使之生成水不溶性的鹽類等沉淀析出。酸性化合物+鈣鹽、鋇鹽、鉛鹽→沉淀→H2S氣體→純品堿性化合物+苦味酸鹽、苦酮酸鹽等（有機(jī)酸鹽）→先加入無(wú)機(jī)酸，再堿化→純品磷鉬酸鹽、磷鎢酸鹽、雷氏銨鹽等（無(wú)機(jī)酸鹽）（二）根據(jù)物質(zhì)在兩相溶劑中的分派比（分派系數(shù)）不一樣進(jìn)行分離常見(jiàn)的措施有簡(jiǎn)樸的液-液萃取法和液-液分派色譜（LC或LLC）等。液—液萃取法的原理：1.分派系數(shù)K值溶質(zhì)在任意不相混溶的兩溶劑中的分派系數(shù)K：K=CU/CLK：分派系數(shù)；CU：溶質(zhì)在上相溶劑中的濃度；CL：溶質(zhì)在下相溶劑中的濃度（K在一定的溫度及壓力下為一常數(shù)）例：假定A、B兩種溶質(zhì)用三氯甲烷及水進(jìn)行分派，A、B均為1.0g，KA=10，KB=0.1，兩相溶劑體積比VCHCl3/VH2O=1，則一次振搖分派平衡後：水的密度不不小于三氯甲烷，故水為上相，三氯甲烷為下相A：KA=CH20/CCHCl3=10則90%以上的溶質(zhì)A將分派到水中，不到10%分派到三氯甲烷中B：KB=CH20/CCHCl3=0.1則不到10%的溶質(zhì)B將分派到水中，90%以上的分派到三氯甲烷中2.分離因子分離因子β表達(dá)分離的難易β=KA/KB（注：KA﹥KB）分離難易鑒定：β≥100，僅作一次簡(jiǎn)樸萃取就可實(shí)現(xiàn)基本分離（如上例）；100＞β≥10，一般需萃取10～12次；β≤2，需萃取100次以上；β≌1,即KA/KB≌1，則無(wú)法分離3.分派比與pH以酸性物質(zhì)（HA）為例，其在水中的解離平衡及解離常數(shù)K可用下式表達(dá)：酸性越強(qiáng)，Ka越大，pKa值越小。堿性越強(qiáng)，Ka越小，pKa值越大。一般酚類化合物的pKa值一般為9.2～10.8，羧酸類化合物的pKa值約為5若使該酸性物質(zhì)完全解離，雖然HA均轉(zhuǎn)變?yōu)锳-，則pH≌pKa+2若使該酸性物質(zhì)完全游離，雖然A-均轉(zhuǎn)變?yōu)镠A，則pH≌pKa-2（游離型極性小，易溶于小極性的有機(jī)溶劑；解離型極性大，易溶于水或親水性有機(jī)溶劑）①若pH﹤3（酸性條件）酸性物質(zhì)游離態(tài)（HA），極性小堿性物質(zhì)則呈離狀態(tài)（BH+），極性大②若pH﹥12（堿性條件）酸性物質(zhì)解離形式（A-），極性大堿性物質(zhì)游離狀態(tài)（B），極性小4.液-液萃取與紙色譜5.液-液分派柱色譜將兩相中的一相涂覆在硅膠等多孔載體上作為固定相，填充在色譜管中，然後加入與固定相不相混溶的另一相溶劑作為流動(dòng)相來(lái)沖洗色譜柱。常用載體：硅膠、硅藻土及纖維素粉等。常用反相硅膠填料有：RP-2（-C2H5）、RP-8（-C8H17）、RP-18（-C18H37）（1）正相色譜：固定性極性>流動(dòng)相極性被分離物質(zhì)極性越大（親水性越強(qiáng)），越不易洗脫。固定相：強(qiáng)極性溶劑，如水、緩沖溶液等。流動(dòng)相：弱極性有機(jī)溶劑，三氯甲烷、乙酸乙酯、丁醇等。合用物質(zhì)：水溶性或極性較大的成分，如生物堿、苷類、糖類、有機(jī)酸等化合物。（2）反相色譜：固定性極性<流動(dòng)相極性被分離物質(zhì)極性越?。ㄓH脂性越強(qiáng)），越不易洗脫。固定相：可用石蠟油。流動(dòng)相：水或甲醇等強(qiáng)極性溶劑合用物質(zhì)：脂溶性化合物，如高級(jí)脂肪酸、油脂、游離甾體等。（3）加壓液相柱色譜（理解，不做重點(diǎn)掌握）載體：多為顆粒直徑較小、機(jī)械強(qiáng)度及比表面積均大的球形硅膠微粒，如Zipax類薄殼型或表面多孔型硅球以及Zorbax類全多孔硅膠微球。迅速色譜（flashchromatography，約2.02×105Pa）、低壓液相色譜（LPLC，<5.05×105Pa）、中壓液相色譜（MPLC，5.05×105～20.2×105Pa）及高壓液相色譜（HPLC，>20.2×105Pa）等。多種加壓液相柱色譜的大體分離規(guī)模（三）根據(jù)物質(zhì)的吸附性差異進(jìn)行分離物理吸附：靠分子間力吸附。無(wú)選擇性，吸附與解吸附過(guò)程可逆，迅速。如硅膠、氧化鋁、活性炭吸附。化學(xué)吸附：靠化學(xué)反應(yīng)吸附。有選擇性，吸附牢固，部分不可逆。如堿性氧化鋁吸附黃酮等酚酸性物質(zhì)。半化學(xué)吸附：介于物理吸附與化學(xué)吸附之間，力量較弱。如聚酰胺對(duì)黃酮類、醌類等化合物之間的氫鍵吸附。1.物理吸附規(guī)律——極性相似者易于吸附硅膠、氧化鋁為極性吸附劑，特點(diǎn)：（1）對(duì)極性物質(zhì)具有較強(qiáng)的親和能力。故同為溶質(zhì)，極性強(qiáng)者將被優(yōu)先吸附。（2）溶劑極性越弱，則吸附劑對(duì)溶質(zhì)將體現(xiàn)出越強(qiáng)的吸附能力；溶劑極性增強(qiáng)，則吸附劑對(duì)溶質(zhì)的吸附能力即隨之減弱。（3）溶質(zhì)雖然被硅膠、氧化鋁吸附，但一旦加入極性較強(qiáng)的溶劑時(shí)，又可被後者置換洗脫下來(lái)?；钚蕴坑捎谑欠菢O性吸附劑，故與硅膠、氧化鋁相反，特點(diǎn)為：（1）對(duì)非極性物質(zhì)具有較強(qiáng)的親和能力，在水中對(duì)溶質(zhì)體現(xiàn)出強(qiáng)的吸附能力。（2）溶劑極性減少，則活性炭對(duì)溶質(zhì)的吸附能力也隨之減少。故從活性炭上洗脫被吸附物質(zhì)時(shí)，洗脫溶劑的洗脫能力將隨溶劑極性的減少而增強(qiáng)。2.極性及其強(qiáng)弱判斷所謂極性乃是一種抽象概念，用以表達(dá)分子中電荷不對(duì)稱（assymmetry）的程度，并大體上與偶極矩（dipolemoment）、極化度（polarizability）及介電常數(shù)（dielectrieconstant）等概念相對(duì)應(yīng)。（1）化合物構(gòu)造中官能團(tuán)的極性強(qiáng)弱：官能團(tuán)的極性（2）含官能團(tuán)的種類、數(shù)目及排列方式等綜合原因?qū)衔飿O性的影響①化合物中所含正電或負(fù)電等電性基團(tuán)越多，極性越強(qiáng)（如氨基酸強(qiáng)極性）。②化合物所含的極性基團(tuán)數(shù)目越多，極性越強(qiáng)（葡萄糖極性強(qiáng)于鼠李糖）。③所含極性基團(tuán)相似時(shí)，非極性基團(tuán)越多，極性越弱（如高級(jí)脂肪酸極性弱）。④酸、堿及兩性化合物，游離型極性弱，解離型極性強(qiáng)，存在狀態(tài)可隨pH變化。（3）化合物極性與介電常數(shù)化合物極性大體可根據(jù)介電常數(shù)（ε）的大小判斷，ε越大，極性越強(qiáng)。3.簡(jiǎn)樸吸附法的應(yīng)用（1）用于化合物的精制：結(jié)晶與重結(jié)晶過(guò)程中加入活性炭脫色、脫臭。注意：有時(shí)擬除去的色素不一定是親脂性的，故活性炭脫色不一定總能收到良好的效果。一般須根據(jù)預(yù)試成果先判斷色素的類型，再?zèng)Q定選用什么吸附劑處理為宜。（2）用于化合物的濃縮：如活性炭吸附濃縮一葉萩堿。4.吸附柱色譜法用于物質(zhì)的分離（1）吸附劑及用量重要吸附劑：硅膠、氧化鋁。用量：一般為樣品量的30～60倍。樣品極性較小、難以分離者，吸附劑用量可合適提高至樣品量的l00～200倍。規(guī)格：一般為100目左右。如采用加壓柱色譜，還可以采用更細(xì)的顆粒，或甚至直接采用薄層色譜用規(guī)格。（2）拌樣及裝樣硅膠、氧化鋁吸附柱色譜，應(yīng)盡量選用極性小的溶劑裝柱和溶解樣品，以利樣品在吸附劑柱上形成狹窄的原始譜帶。如樣品在所選裝柱溶劑中不易溶解，則可將樣品用少許極性稍大溶劑溶解後,再用少許吸附劑拌勻,并在60℃下加熱揮盡溶劑，置P205真空干燥器中減壓干燥、研粉後再小心鋪在吸附劑柱上。（3）洗脫洗脫溶劑宜逐漸增長(zhǎng)，但跳躍不能太大。實(shí)踐中多用混合溶劑，并通過(guò)巧妙調(diào)整比例以變化極性，到達(dá)梯度洗脫分離物質(zhì)的目的。注意：一般，混合溶劑中強(qiáng)極性溶劑的影響比較突出，故不可隨意將極性差異很大的兩種溶劑混合在一起使用。試驗(yàn)室中最常應(yīng)用的混合溶劑組合如表所示：吸附柱色譜常用混合洗脫溶劑（4）添加溶劑的選擇分離酸性物質(zhì)：選用硅膠（顯酸性），洗脫溶劑加入適量乙酸，防止拖尾。分離堿性物質(zhì)：選用氧化鋁（顯弱堿性），洗脫溶劑加入適量氨、吡啶、二乙胺，防止拖尾。（5）洗脫劑的選擇與優(yōu)化通過(guò)薄層色譜法（TLC）進(jìn)行篩選一般TLC展開(kāi)時(shí)使組分Rf值到達(dá)0.2～O.3的溶劑系統(tǒng)可選用為柱色譜分離該對(duì)應(yīng)組分的最佳溶劑系統(tǒng)。5.聚酰胺吸附色譜基本原理：氫鍵吸附。合用化合物類型：酚類、醌類、黃酮類。（1）聚酰胺的性質(zhì)及吸附原理性質(zhì)：商品聚酰胺均為高分子聚合物質(zhì)，不溶于水、甲醇、乙醇、乙醚、三氯甲烷及丙酮等常用有機(jī)溶劑。對(duì)堿較穩(wěn)定，對(duì)酸尤其是無(wú)機(jī)酸穩(wěn)定性較差，可溶于濃鹽酸、冰乙酸及甲酸。聚酰胺色譜的分離機(jī)理：一般認(rèn)為是“氫鍵吸附”，即聚酰胺的吸附作用是通過(guò)其酰胺羰基與酚類、黃酮類化合物的酚羥基，或酰胺鍵上的游離胺基與醌類、脂肪羧酸上的羰基形成氫鍵締合而產(chǎn)生吸附。至于吸附強(qiáng)弱則取決于多種化合物與之形成氫鍵締合的能力。固定相移動(dòng)相氫鍵：氫原子與電負(fù)性的原子X(jué)共價(jià)結(jié)合時(shí)，共用的電子對(duì)強(qiáng)烈地偏向X的一邊，使氫原子帶有部分正電荷，能再與另一種電負(fù)性高而半徑較小的原子Y結(jié)合，形成的X—H┅Y型的鍵。X、Y為氧（O）、氮（N）、氟（F）等電負(fù)性較大，且半徑較小的原子。吸附強(qiáng)弱一般在含水溶劑中大體有下列規(guī)律：①形成氫鍵的基團(tuán)數(shù)目越多，則吸附能力越強(qiáng)②成鍵位置對(duì)吸附力也有影響。易形成分子內(nèi)氫鍵者，其在聚酰胺上的吸附即對(duì)應(yīng)減弱。如：③分子中芳香化程度高者，則吸附性增強(qiáng)；反之，則減弱。如：④洗脫溶劑的影響洗脫能力由弱到強(qiáng)的次序?yàn)椋核技状蓟蛞掖迹舛扔傻偷礁撸急枷溲趸c水溶液或氨水＜甲酰胺＜二甲基甲酰胺（DMF）＜尿素水溶液（2）聚酰胺色譜的應(yīng)用①對(duì)酚類、黃酮類等含酚羥基化合物可逆吸附，分離效果好，吸附容量大，適于制備分離。②可用于生物堿、萜類、甾體、糖類、氨基酸等其他極性與非極性化合物的分離。③對(duì)鞣質(zhì)的吸附特強(qiáng)，近乎不可逆，故用于植物粗提取物的脫鞣處理。6.大孔吸附樹(shù)脂性質(zhì)：一般為白色球形顆粒狀，一般分為非極性和極性兩類，對(duì)酸、堿均穩(wěn)定。優(yōu)勢(shì)：①操作簡(jiǎn)便，樹(shù)脂可再生；②可反復(fù)操作，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，收率恒定；③既能選擇性吸附，又便于溶媒洗脫，且不受無(wú)機(jī)鹽干擾；④一般不用有機(jī)溶媒，既保持老式的中醫(yī)理論用藥特色，又最大程度的保留了其有效成分。（1）吸附原理：①選擇性吸附（由于范德華引力或產(chǎn)生氫鍵的成果）②分子篩性能（由其自身的多孔性網(wǎng)狀構(gòu)造決定）（2）影響吸附的原因：①大孔樹(shù)脂自身的性質(zhì)（比表面積、表面電性、極性、能否形成氫鍵等）。②洗脫溶劑的性質(zhì)（極性、酸堿性）。③被分離化合物的性質(zhì)（分子量、極性、能否形成氫鍵）。注：大孔樹(shù)脂的色譜行為具有反相的性質(zhì)，被分離物質(zhì)的極性越大，其Rf值越大，越輕易洗脫。（3）大孔吸附樹(shù)脂的應(yīng)用：重要用于天然化合物的分離和富集預(yù)處理措施：用高濃度乙醇濕法裝柱，繼續(xù)用乙醇在柱上流動(dòng)清洗，不時(shí)檢查流出的乙醇液，至流出的乙醇液與水混合不展現(xiàn)白色乳濁現(xiàn)象，然後以大量的蒸餾水洗去乙醇即可。（4）洗脫液的選擇：洗脫液可選擇水、甲醇、乙醇、丙酮、不一樣濃度的酸堿液等。一般措施如下：①用適量水洗，洗下單糖、鞣質(zhì)、低聚糖、多糖等極性物質(zhì)，用薄層色譜檢識(shí)，防止極性大的皂苷被洗下；②7O%乙醇洗，洗脫液中重要為皂苷，但也具有酚性物質(zhì)、糖類及少許黃酮，試驗(yàn)證明30%乙醇不會(huì)洗下大量的黃酮類化合物；③3%～5%堿溶液洗，可洗下黃酮、有機(jī)酸、酚性物質(zhì)和氨基酸；④10%酸溶液洗，可洗下生物堿、氨基酸；⑤丙酮洗，可洗下中性親脂性成分注：研究表明，對(duì)吸附量真正起作用的是體積比表面積，即每毫升濕樹(shù)脂所具有的比表面積。（5）大孔樹(shù)脂應(yīng)用的安全性問(wèn)題：規(guī)格影響中藥提取液的質(zhì)量大孔吸附樹(shù)脂規(guī)格內(nèi)容包括：名稱、牌（型）號(hào)、構(gòu)造（包括交聯(lián)劑）、外觀、極性，以及粒徑范圍、含水量、濕密度（真密度、視密度）、干密度（表觀密度、骨架密度）、比表面、平均孔徑、孔隙率、孔容等物理常數(shù)；此外尚有未聚合單體、交聯(lián)劑、致孔劑等添加劑殘留量程度等參數(shù)。練習(xí)題最佳選擇題大孔吸附樹(shù)脂吸附的物質(zhì)用水充足洗脫後，再用丙酮洗脫，被丙酮洗下的物質(zhì)是A.單糖B.鞣質(zhì)C.多糖D.中性親脂性成分E.氨基酸[答疑編號(hào)]【對(duì)的答案】D（四）根據(jù)物質(zhì)分子大小差異進(jìn)行分離超濾法——運(yùn)用不一樣分子量化合物擴(kuò)散速度不一樣而分離超速離心法——離心作用1.凝膠過(guò)濾法（凝膠過(guò)濾色譜、分子篩過(guò)濾、排阻色譜）（1）分離原理：分子篩作用，根據(jù)凝膠的孔徑和被分離化合物分子的大小而到達(dá)分離的目的。當(dāng)混合物溶液通過(guò)凝膠柱時(shí)，比凝膠孔隙小的分子可以自由進(jìn)入凝膠內(nèi)部，而比凝膠孔隙大的分子不能進(jìn)入凝膠內(nèi)部，只能通過(guò)凝膠顆粒間隙。（2）凝膠的種類與性質(zhì)葡聚糖凝膠（Sephadex）：只適于在水中應(yīng)用，且不一樣規(guī)格適合分離不一樣分子量的物質(zhì)。羥丙基葡聚糖凝膠（SephadexLH-20）：除具有分子篩特性外，在由極性與非極性溶劑構(gòu)成的混合溶劑中常常起到反相色譜效果。2.膜分離法運(yùn)用一種用天然或人工合成的膜，以外界能量或化學(xué)位差為推進(jìn)力，對(duì)雙組分或多組分的溶質(zhì)和溶劑進(jìn)行分離、分級(jí)、提純和富集的措施。膜過(guò)濾技術(shù)重要包括：滲透、反滲透、超濾、電滲析和液膜技術(shù)等。透析法：根據(jù)溶液中分子的大小和形態(tài)，在微米（μm）數(shù)量級(jí)下選擇性過(guò)濾的技術(shù)。常壓下，小分子可通過(guò)，大分子不能通過(guò)。按照孔徑大小，可將透析膜分為：微濾膜（0.025～14μm）；超濾膜（0.001～0.02μm）；反滲透膜（0.0001～0.001μm）；納米膜（約2nm）應(yīng)用：精制藥用酶時(shí)，用透析法脫無(wú)機(jī)鹽。（五）根據(jù)物質(zhì)解離程度不一樣進(jìn)行分離1.離子互換法原理基于混合物中各成分解離度差異進(jìn)行分離。2.離子互換樹(shù)脂的構(gòu)造與性質(zhì)性質(zhì)：球形顆粒，不溶于水，但可在水中膨脹。構(gòu)造：（1）母核部分：由苯乙烯通過(guò)二乙烯苯（DVB）交聯(lián)而成的大分子網(wǎng)狀構(gòu)造。網(wǎng)孔大小用交聯(lián)度（即加入交聯(lián)劑的比例）表達(dá)，交聯(lián)度越大，則網(wǎng)孔越小，質(zhì)地越緊密，在水中越不易膨脹；交聯(lián)度越小，則網(wǎng)孔越大，質(zhì)地疏松，在水中易于膨脹。（2）離子互換基團(tuán)3.離子互換法的應(yīng)用（1）用于不一樣電荷離子的分離：天然藥物水提取物中的酸性、堿性及兩性化合物的分離。例子互換樹(shù)脂法分離物質(zhì)的模型（2）用于相似電荷離子的分離：根據(jù)酸性或堿性的強(qiáng)弱不一樣分離例：堿性強(qiáng)弱：Ⅲ＞Ⅱ＞Ⅰ——弱酸性樹(shù)脂吸附強(qiáng)弱：Ⅲ＞Ⅱ＞Ⅰ（六）根據(jù)物質(zhì)的沸點(diǎn)進(jìn)行分離分餾法：運(yùn)用中藥中各成分沸點(diǎn)的差異進(jìn)行分離的措施。一般來(lái)說(shuō)，液體混合物各成分沸點(diǎn)相差在100℃以上時(shí)，可用反復(fù)蒸餾法到達(dá)分離的目的；如沸點(diǎn)相差在25℃如下，則需要采用分餾柱；沸點(diǎn)相差越小，則需要的分餾裝置越精細(xì)。如揮發(fā)油和某些液體生物堿的提取分離常采用分餾法。原理措施特點(diǎn)及應(yīng)用根據(jù)物質(zhì)溶解度差異進(jìn)行分離結(jié)晶與重結(jié)晶醇提水沉法或水提醇沉法酸堿法沉淀法根據(jù)物質(zhì)分派比不一樣進(jìn)行分離萃取法分派柱色譜根據(jù)物質(zhì)吸附性差異進(jìn)行分離簡(jiǎn)樸吸附（活性炭）吸附柱色譜（硅膠、氧化鋁、聚酰胺、大孔樹(shù)脂色譜）根據(jù)物質(zhì)分子大小差異進(jìn)行分離凝膠過(guò)濾法膜分離法根據(jù)物質(zhì)解離程度不一樣進(jìn)行分離離子互換法根據(jù)物質(zhì)沸點(diǎn)差異進(jìn)行分離分餾法配伍選擇題A.聚酰胺B.離子互換樹(shù)脂C.硅膠D.大孔吸附樹(shù)脂E.膜1.具有氫鍵吸附性能的吸附劑是[答疑編號(hào)]【對(duì)的答案】A2.在酸性條件下不穩(wěn)定的、吸附劑是[答疑編號(hào)]【對(duì)的答案】A3.對(duì)酸、堿均穩(wěn)定的極性吸附劑是[答疑編號(hào)]【對(duì)的答案】D4.同步具有吸附性能和分子篩性能的吸附劑是[答疑編號(hào)]【對(duì)的答案】DA.陽(yáng)離子互換樹(shù)脂B.透析膜C.活性炭D.硅膠E.氧化鋁1.在水中可膨脹的是[答疑編號(hào)]【對(duì)的答案】A2.常用于吸附水溶液中非極性色素的是[答疑編號(hào)]【對(duì)的答案】C3.不適合分離酸性物質(zhì)的是[答疑編號(hào)]【對(duì)的答案】E4.適合分離酸性物質(zhì)的常用極性吸附劑是[答疑編號(hào)]【對(duì)的答案】D第三節(jié)中藥化學(xué)成分的構(gòu)造研究措施一、化合物的純度測(cè)定（1）結(jié)晶形態(tài)和色澤：一種純的化合物一般均有一定的晶形和均勻的色澤。（2）熔點(diǎn)和熔距：?jiǎn)我换衔镆话憔幸欢ǖ娜埸c(diǎn)和較小的熔距（1～2℃）。（3）色譜法：?jiǎn)我换衔镉脙煞N以上溶劑系統(tǒng)或色譜條件進(jìn)行檢測(cè)，均顯示單一的斑點(diǎn)。常用的有紙色譜（PC）、紙上電泳和薄層色譜（TLC）。（4）氣相色譜法（GC）和高效液相色譜法（HPLC）：純的化合物顯示單一的譜峰。（5）其他措施：質(zhì)譜、核磁共振等。最佳選擇題鑒定單體化合物純度的措施是A.膜過(guò)濾法B.比旋光度測(cè)定法C.高效液相色譜法D.溶解度測(cè)定法E.液-液萃取法[答疑編號(hào)]【對(duì)的答案】C二、構(gòu)造研究的重要程序三、構(gòu)造研究中采用的重要措施（一）確定分子式并計(jì)算不飽和度分子式的測(cè)定目前重要有如下幾種措施，可因地制宜加以選用（1）元素定量分析配合分子量測(cè)定（2）同位素豐度比法（3）高辨別質(zhì)譜（HR—MS）法質(zhì)譜（MS）可用于確定分子量和求算分子式，及提供其他構(gòu)造信息。高辨別質(zhì)譜（HR-MS）可將物質(zhì)的質(zhì)量精確到小數(shù)點(diǎn)後第3位（一般質(zhì)譜只精確到小數(shù)點(diǎn)後第1位），這可為確定化合物分子構(gòu)成的重要根據(jù)。根據(jù)采用的離子源不一樣分類：（1）電子轟擊質(zhì)譜（EI-MS）當(dāng)樣品相對(duì)分子質(zhì)量較大難于氣