高中生物選修畢生物技術(shù)實(shí)踐知識(shí)點(diǎn)總結(jié)專題一老式發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用課題一果酒和果醋的制作1、發(fā)酵：通過微生物技術(shù)的培養(yǎng)來生產(chǎn)大量代謝產(chǎn)物的過程。2、有氧發(fā)酵：醋酸發(fā)酵谷氨酸發(fā)酵無氧發(fā)酵：酒精發(fā)酵乳酸發(fā)酵酶3、酵母菌是兼性厭氧菌型微生物真菌酵母菌的生殖方式：出芽生殖(重要)分裂生殖孢子生殖酶酶4、在有氧條件下，酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，大量繁殖。C6H12O6＋6O2→6CO2＋6H2O酶5、在無氧條件下，酵母菌能進(jìn)行酒精發(fā)酵。C6H12O6→2C2H5OH＋2CO26、20℃左右最合適酵母菌繁殖酒精發(fā)酵時(shí)一般將溫度控制在18℃-25℃7、在葡萄酒自然發(fā)酵的過程中,起重要作用的是附著在葡萄皮表面的野生型酵母菌。在發(fā)酵過程中,伴隨酒精濃度的提高,紅葡萄皮的色素也進(jìn)入發(fā)酵液,使葡萄酒展現(xiàn)深紅色。在缺氧呈酸性的發(fā)酵液中，酵母菌可以生長(zhǎng)繁殖，而絕大多數(shù)其他微生物都因無法適應(yīng)這一環(huán)境而受到制約。8、醋酸菌是單細(xì)胞細(xì)菌(原核生物),代謝類型是異養(yǎng)需氧型,生殖方式為二分裂酶9、當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；當(dāng)缺乏糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿帷?C2H5OH＋4O2→CH3COOH＋6H2O酶10、控制發(fā)酵條件的作用①醋酸菌對(duì)氧氣的含量尤其敏感，當(dāng)進(jìn)行深層發(fā)酵時(shí)，雖然只是短時(shí)間中斷通入氧氣，也會(huì)引起醋酸菌死亡。②醋酸菌最適生長(zhǎng)溫度為30～35℃，控制好發(fā)酵溫度，使發(fā)酵時(shí)間縮短，又減少雜菌污染的機(jī)會(huì)。③有兩條途徑生成醋酸：直接氧化和以酒精為底物的氧化。11、試驗(yàn)流程：挑選葡萄→沖洗→榨汁→酒精發(fā)酵→果酒（→醋酸發(fā)酵→果醋）12、酒精檢查：果汁發(fā)酵後與否有酒精產(chǎn)生，可以用重鉻酸鉀來檢查。在酸性條件下，重鉻酸鉀與酒精反應(yīng)展現(xiàn)灰綠色。先在試管中加入發(fā)酵液2ｍL，再滴入物質(zhì)的量濃度為3mol/L的H2SO43滴，振蕩混勻，最終滴加常溫下飽和的重鉻酸鉀溶液3滴，振蕩試管，觀測(cè)顏色13、充氣口是在醋酸發(fā)酵時(shí)連接充氣泵進(jìn)行充氣用的；排氣口是在酒精發(fā)酵時(shí)用來排出二氧化碳的；出料口是用來取樣的。排氣口要通過一種長(zhǎng)而彎曲的膠管與瓶身相連接，其目的是防止空氣中微生物的污染。開口向下的目的是有助于二氧化碳的排出。使用該裝置制酒時(shí)，應(yīng)當(dāng)關(guān)閉充氣口；制醋時(shí)，應(yīng)當(dāng)充氣口連接氣泵，輸入氧氣。疑難解答（1）你認(rèn)為應(yīng)當(dāng)先沖洗葡萄還是先除去枝梗？為何？應(yīng)當(dāng)先沖洗，然後再除去枝梗，以防止除去枝梗時(shí)引起葡萄破損，增長(zhǎng)被雜菌污染的機(jī)會(huì)。（2）你認(rèn)為應(yīng)當(dāng)從哪些方面防止發(fā)酵液被污染？如：要先沖洗葡萄，再除去枝梗；榨汁機(jī)、發(fā)酵裝置要清洗潔凈，并進(jìn)行酒精消毒；每次排氣時(shí)只需擰松瓶蓋，不要完全揭開瓶蓋等。（3）制葡萄酒時(shí)，為何要將溫度控制在18～25℃？制葡萄醋時(shí)，為何要將溫度控制在30～35℃？溫度是酵母菌生長(zhǎng)和發(fā)酵的重要條件。20℃左右最適合酵母菌的繁殖。因此需要將溫度控制在其最適溫度范圍內(nèi)。而醋酸菌是適溫菌，最適生長(zhǎng)溫度為30～35℃，因此要將溫度控制在30～35℃。課題二腐乳的制作1、多種微生物參與了豆腐的發(fā)酵，如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中起重要作用的是毛霉。毛霉是一種絲狀真菌。代謝類型是異養(yǎng)需氧型。生殖方式是孢子生殖。營(yíng)腐生生活。2、原理：毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸。3、試驗(yàn)流程：讓豆腐上長(zhǎng)出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制4、釀造腐乳的重要生產(chǎn)工序是將豆腐進(jìn)行前期發(fā)酵和後期發(fā)酵。前期發(fā)酵的重要作用：1.發(fā)明條件讓毛霉生長(zhǎng)。2.使毛酶形成菌膜包住豆腐使腐乳成型。後期發(fā)酵重要是酶與微生物協(xié)同參與生化反應(yīng)的過程。通過多種輔料與酶的緩和作用，生成腐乳的香氣。5、將豆腐切成3cm×3cm×1cm的若干塊。所用豆腐的含水量為70％左右，水分過多則腐乳不易成形樣品水分含量（%）計(jì)算公式：(烘干前容器和樣品質(zhì)量-烘干後容器和樣品質(zhì)量)/烘干前樣品質(zhì)量·毛霉的生長(zhǎng)：條件：將豆腐塊平放在籠屜內(nèi)，將籠屜中的控制在15～18℃，并保持一定的溫度。來源：1.來自空氣中的毛霉孢子2.直接接種優(yōu)良毛霉菌種時(shí)間：5天·加鹽腌制：將長(zhǎng)滿毛霉的豆腐塊分層整潔地?cái)[放在瓶中，同步逐層加鹽，伴隨層數(shù)的加高而增長(zhǎng)鹽量，靠近瓶口表面的鹽要鋪厚某些。加鹽腌制的時(shí)間約為8天左右。·用鹽腌制時(shí)，注意控制鹽的用量：鹽的濃度過低，局限性以克制微生物的生長(zhǎng)，也許導(dǎo)致豆腐腐敗變質(zhì)；鹽的濃度過高會(huì)影響腐乳的口味·食鹽的作用：1.克制微生物的生長(zhǎng)，防止腐敗變質(zhì)2.析出水分，是豆腐變硬，在後期制作過程中不易酥爛3.調(diào)味作用，給腐乳以必要的咸味4.浸提毛酶菌絲上的蛋白酶。·配制鹵湯：鹵湯直接關(guān)系到腐乳的色、香、味。鹵湯是由酒及多種香辛料配制而成的。鹵湯中酒的含量一般控制在12%左右。·酒的作用：1.防止雜菌污染以防腐2.與有機(jī)酸結(jié)合形成酯，賦予腐乳風(fēng)味3.酒精含量的高下與腐乳後期發(fā)酵時(shí)間的長(zhǎng)短有很大關(guān)系，酒精含量越高，對(duì)蛋白酶的克制作用也越大，使腐乳成熟期延長(zhǎng)；酒精含量過低，蛋白酶的活性高，加緊蛋白質(zhì)的水解，雜菌繁殖快，豆腐易腐敗，難以成塊。·香辛料的作用：1.調(diào)味作用2.殺菌防腐作用3.參與并增進(jìn)發(fā)酵過程·防止雜菌污染：①用來腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷潔凈後要用沸水消毒。②裝瓶時(shí)，操作要迅速小心。整潔地?cái)[放好豆腐、加入鹵湯後，要用膠條將瓶口密封。封瓶時(shí)，最佳將瓶口通過酒精燈的火焰，防止瓶口被污染。疑難解答（1）運(yùn)用所學(xué)的生物學(xué)知識(shí)，解釋豆腐長(zhǎng)白毛是怎么一回事？豆腐生長(zhǎng)的白毛是毛霉的白色菌絲。嚴(yán)格地說是直立菌絲，在豆腐中尚有匍匐菌絲。（2）我們平常吃的豆腐，哪種適合用來做腐乳？含水量為70%左右的豆腐適于作腐乳。用含水量高的豆腐制作腐乳，不易成形。（3）吃腐乳時(shí)，你會(huì)發(fā)現(xiàn)腐乳外部有一層致密的“皮”。這層“皮”是怎樣形成的呢？它對(duì)人體有害嗎？它的作用是什么？“皮”是前期發(fā)酵時(shí)在豆腐表面上生長(zhǎng)的菌絲（匍匐菌絲），對(duì)人體無害。它能形成腐乳的“體”，使腐乳成形。課題三制作泡菜·制作泡菜所用微生物是乳酸菌，其代謝類型是異養(yǎng)厭氧型。在無氧條件下，降糖分解為乳酸。分裂方式是二分裂。反應(yīng)式為：C6H12O62C3H6O3+能量常見的乳酸菌有乳酸鏈球菌和乳酸桿菌。乳酸桿菌常用于生產(chǎn)酸奶。·亞硝酸鹽為白色粉末，易溶于水，在食品生產(chǎn)中用作食品添加劑。·膳食中的亞硝酸鹽一般不會(huì)危害人體健康，國(guó)家規(guī)定肉制品中不超過30mg/kg，醬腌菜中不超過20mg/kg，嬰兒奶粉中不超過2mg/kg。亞硝酸鹽被吸取後隨尿液排出體外，但在合適pH、溫度和一定微生物作用下形成致癌物質(zhì)亞硝胺。·一般在腌制10天後亞硝酸鹽含量開始減少，故在10天之後食用最佳*測(cè)定亞硝酸鹽含量的原理是在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)後，與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料，與已知濃度的原則顯色液目測(cè)比較，估算泡菜中亞硝酸鹽含量。專題二微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題一微生物的試驗(yàn)室培養(yǎng)·培養(yǎng)基按照物理性質(zhì)可分為液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基。在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑瓊脂（是從紅藻中提取的一種多糖，在配制培養(yǎng)基中用作凝固劑）後，制成瓊脂固體培養(yǎng)基。微生物在固體培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)，可以形成肉眼可見的菌落。根據(jù)菌落的特性可以判斷是哪一種菌。液體培養(yǎng)基應(yīng)用于工業(yè)或生活生產(chǎn)，固體培養(yǎng)基應(yīng)用于微生物的分離和鑒定，半固體培養(yǎng)基則常用于觀測(cè)微生物的運(yùn)動(dòng)及菌種保藏等。·按照成分培養(yǎng)基可分為人工合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基是用成分已知的化學(xué)物質(zhì)配制而成，其中成分的種類比例明確，常用于微生物的分離鑒定。天然培養(yǎng)基是用化學(xué)成分不明的天然物質(zhì)配制而成，常用于實(shí)際工業(yè)生產(chǎn)。·按照培養(yǎng)基的用途，可將培養(yǎng)基分為選擇培養(yǎng)基和鑒定培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基是指在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以克制不需要的微生物生長(zhǎng)，增進(jìn)所需要的微生物的生長(zhǎng)。鑒別培養(yǎng)基是根據(jù)微生物的特點(diǎn)，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥物配制而成的，用以鑒別不一樣類別的微生物。·培養(yǎng)基的化學(xué)成分包括水、無機(jī)鹽、碳源、氮源、生長(zhǎng)因子等。·碳源：能為微生物的代謝提供碳元素的物質(zhì)。如CO2、NaHCO3等無機(jī)碳源；糖類、石油、花生粉餅等有機(jī)碳源。異養(yǎng)微生物只能運(yùn)用有機(jī)碳源。單質(zhì)碳不能作為碳源。·氮源：能為微生物的代謝提供氮元素的物質(zhì)。如N2、NH3、NO3-、NH4+（無機(jī)氮源）蛋白質(zhì)、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨（有機(jī)氮源）等。只有固氮微生物才能運(yùn)用N2。·培養(yǎng)基還要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的規(guī)定。例如，培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需要在培養(yǎng)基中添加維生素，培養(yǎng)霉菌時(shí)須將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細(xì)菌是需要將pH調(diào)至中性或微堿性，培養(yǎng)厭氧型微生物是則需要提供無氧的條件·無菌技術(shù)·獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵，要注意如下幾種方面：①對(duì)試驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手，進(jìn)行清潔和消毒。②將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用品和培養(yǎng)基等器具進(jìn)行滅菌。③為防止周圍環(huán)境中微生物的污染，試驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行。④試驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)防止已經(jīng)滅菌處理的材料用品與周圍的物品相接觸。·無菌技術(shù)除了用來防止試驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外，尚有什么目的？答：無菌技術(shù)還能有效防止操作者自身被微生物感染。·消毒與滅菌的區(qū)別消毒指使用較為溫和的物理或化學(xué)措施僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害的微生物（不包括芽孢和孢子）。消毒措施常用煮沸消毒法，巴氏消毒法（對(duì)于某些不耐高溫的液體）尚有化學(xué)藥劑（如酒精、氯氣、石炭酸等）消毒、紫外線消毒。滅菌則是指使用強(qiáng)烈的理化原因殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。滅菌措施有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌。·滅菌措施：①接種環(huán)、接種針、試管口等使用灼燒滅菌法；②玻璃器皿、金屬用品等使用干熱滅菌法，所用器械是干熱滅菌箱；③培養(yǎng)基、無菌水等使用高壓蒸汽滅菌法，所用器械是高壓蒸汽滅菌鍋。④表面滅菌和空氣滅菌等使用紫外線滅菌法，所用器械是紫外燈。·制作牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基（1）措施環(huán)節(jié)：計(jì)算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。（2）倒平板操作的環(huán)節(jié)：①將滅過菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上，右手拿裝有培養(yǎng)基的錐形瓶，左手拔出棉塞。②右手拿錐形瓶，將瓶口迅速通過火焰。③用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍不小于瓶口的縫隙，右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基（約10～20mL）倒入培養(yǎng)皿，左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋。④等待平板冷卻凝固，大概需5～10min。然後，將平板倒過來放置，使培養(yǎng)皿蓋在下、皿底在上。·倒平板操作的討論1.培養(yǎng)基滅菌後，需要冷卻到50℃左右時(shí)，才能用來倒平板。你用什么措施來估計(jì)培養(yǎng)基的溫度？提醒：可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí)，就可以進(jìn)行倒平板了。2.為何需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？答：通過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。3.平板冷凝後，為何要將平板倒置？答：平板冷凝後，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，凝固後的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，導(dǎo)致污染。4.在倒平板的過程中，假如不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個(gè)平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎？為何？答：空氣中的微生物也許在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，因此最佳不要用這個(gè)平板培養(yǎng)微生物。·純化大腸桿菌（1）微生物接種的措施最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法。（2）平板劃線法是通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面持續(xù)劃線的操作。將匯集的菌種逐漸稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。在多次劃線後培養(yǎng)，可以分離到由一種細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的子細(xì)胞群體，這就是菌落。（3）稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然後將不一樣稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。分為系列稀釋操作和涂布平板操作兩步。（4）用平板劃線法和稀釋涂布平板法接種的目的是：使匯集在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落，以便于純化菌種。（5）平板劃線法操作環(huán)節(jié)：①將接種環(huán)放在火焰上灼燒，直到接種環(huán)燒紅。②在火焰旁冷卻接種環(huán)，并打開棉塞。③將試管口通過火焰。④將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中蘸取一環(huán)菌液。⑤將試管通過火焰，并塞上棉塞。⑥左手將皿蓋打開一條縫隙，右手將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃三至五條平行線，蓋上皿蓋。注意不要?jiǎng)澠婆囵B(yǎng)皿。⑦灼燒接種環(huán)，待其冷卻後，從第一區(qū)域劃線的末端開始往第二區(qū)域內(nèi)劃線。反復(fù)以上操作，在三、四、五區(qū)域內(nèi)劃線。注意不要將最終一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連。⑧將平板倒置放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。·平板劃線操作的討論1.為何在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為何？答：操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了防止接種環(huán)上也許存在的微生物污染培養(yǎng)物；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束後，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端，從而通過劃線次數(shù)的增長(zhǎng)，使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落。劃線結(jié)束後灼燒接種環(huán)，能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，防止細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。2.在灼燒接種環(huán)之後，為何要等其冷卻後再進(jìn)行劃線？答：以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。3.在作第二次以及其後的劃線操作時(shí)，為何總是從上一次劃線的末端開始劃線？答：劃線後，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細(xì)菌的數(shù)目伴隨劃線次數(shù)的增長(zhǎng)而逐漸減少，最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來的菌落。（6）涂布平板操作的環(huán)節(jié)：①將涂布器浸在盛有酒精的燒杯中。②取少許菌液，滴加到培養(yǎng)基表面。③將沾有少許酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃盡後，冷卻8～10s。④用涂布器將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面。·涂布平板操作的討論涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)行。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無菌操作規(guī)定，想一想，第2步應(yīng)怎樣進(jìn)行無菌操作？提醒：應(yīng)從操作的各個(gè)細(xì)節(jié)保證“無菌”。例如，酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周圍；等等。菌種的保留（1）對(duì)于頻繁使用的菌種，可以采用臨時(shí)保藏的措施。①臨時(shí)保藏措施將菌種接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上，在合適的溫度下培養(yǎng)。當(dāng)菌落長(zhǎng)成後，將試管放入4℃的冰箱中保藏。後來每3～6個(gè)月，都要重新將菌種從舊的培養(yǎng)基上轉(zhuǎn)移到新鮮的培養(yǎng)基上。②缺陷：這種措施保留的時(shí)間不長(zhǎng)，菌種輕易被污染或產(chǎn)生變異。（2）對(duì)于需要長(zhǎng)期保留的菌種，可以采用甘油管藏的措施。在3mL的甘油瓶中，裝入1mL甘油後滅菌。將1mL培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中，與甘油充足混勻後，放在－20℃的冷凍箱中保留。疑難解答（1）生物的營(yíng)養(yǎng)人及動(dòng)物的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：水、無機(jī)鹽、糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、維生素六類。植物的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：礦質(zhì)元素、水、二氧化碳等三類。微生物的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：水、無機(jī)鹽、碳源、氮源及特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)五類。（2）確定培養(yǎng)基制作與否合格的措施將未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫1～2天，無菌落生長(zhǎng)，闡明培養(yǎng)基的制備是成功的，否則需要重新制備。課題二土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥，尿素并不能直接被農(nóng)作物吸取。只有當(dāng)土壤中的細(xì)菌將尿素分解成氨之後，才能被植物運(yùn)用。土壤中的細(xì)菌之因此能分解尿素，是由于他們能合成脲酶尿素最初是從人的尿液中發(fā)現(xiàn)的篩選菌株（1）試驗(yàn)室中微生物的篩選應(yīng)用的原理人為提供有助于目的菌株生長(zhǎng)的條件（包括營(yíng)養(yǎng)、溫度、pH等），同步克制或制止其他微生物生長(zhǎng)。（2）選擇性培養(yǎng)基在微生物學(xué)中，將容許特定種類的微生物生長(zhǎng)，同步克制或制止其他種類微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基，稱作選擇培養(yǎng)基。（3）配制選擇培養(yǎng)基的根據(jù)根據(jù)選擇培養(yǎng)的菌種的生理代謝特點(diǎn)加入某種物質(zhì)以到達(dá)選擇的目的。例如，培養(yǎng)基中不加入有機(jī)物可以選擇培養(yǎng)自養(yǎng)微生物；培養(yǎng)基中不加入氮元素，可以選擇培養(yǎng)能固氮的微生物；加入高濃度的食鹽可選擇培養(yǎng)金黃色葡萄球菌等。記錄菌落數(shù)目（1）測(cè)定微生物數(shù)量的常用措施有稀釋涂布平板法和顯微鏡直接計(jì)數(shù)。（2）稀釋涂布平板法記錄樣品中活菌的數(shù)目的原理當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一種菌落，來源于樣品稀釋液中的一種活菌。通過記錄平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大概具有多少活細(xì)菌。為了保證成果精確，一般設(shè)置3～5個(gè)平板，選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，并取平均值。記錄的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低，因此，記錄成果一般用菌落數(shù)而不是活菌數(shù)來表達(dá)。采用此措施的注意事項(xiàng)：1.一般選用菌落數(shù)在30~300之間的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)2.為了防止菌落蔓延，影響計(jì)數(shù)，可在培養(yǎng)基中加入TTC3.本法僅限于形成菌落的微生物（1）土壤取樣：同其他生物環(huán)境相比，土壤中的微生物，數(shù)量最大，種類最多。在富具有機(jī)質(zhì)的土壤表層，有更多的微生物生長(zhǎng)。從富具有機(jī)物、潮濕、pH≈7的土壤中取樣。鏟去表層土，在距地表約3～8cm的土壤層取樣。（2）樣品的稀釋：樣品的稀釋程度將直接影響平板上生長(zhǎng)的菌落數(shù)目。在實(shí)際操作中，一般選用一定稀釋范圍的樣品液進(jìn)行培養(yǎng)，以保證獲得菌落數(shù)在30~300之間，適于計(jì)數(shù)的平板。測(cè)定土壤中細(xì)菌的數(shù)量，一般選用104105106測(cè)定放線菌的數(shù)量，一般選用103104105測(cè)定真菌的數(shù)量，一般選用102103104（3）微生物的培養(yǎng)與觀測(cè)不一樣種類的微生物，往往需要不一樣的培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時(shí)間。細(xì)菌30~37℃1~2天放線菌25~28℃5~7天霉菌25~28℃3~4天每隔24小時(shí)記錄一次菌落數(shù)目，選用菌落數(shù)目穩(wěn)定期的記錄作為成果，這樣可以防止因培養(yǎng)時(shí)間局限性而導(dǎo)致一樓菌落的數(shù)目。一般來說，在一定的培養(yǎng)條件下（相似的培養(yǎng)基、唯獨(dú)及培養(yǎng)時(shí)間），同種微生物體現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特性（形狀、大小、隆起程度、顏色）疑難解答（1）怎樣從平板上的菌落數(shù)推測(cè)出每克樣品中的菌落數(shù)？記錄某一稀釋度下平板上的菌落數(shù)，最佳能記錄3個(gè)平板，計(jì)算出平板菌落數(shù)的平均值每克樣品中的菌落數(shù)=（C/V）*M其中，C代表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積（ml），M代表稀釋倍數(shù)課題三分解纖維素的微生物的分離纖維素，一種由葡萄糖首尾相連而成的高分子化合物，是地球上含量最豐富的多糖類物質(zhì)。纖維素與纖維素酶（1）棉花是自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物，木材、作物秸稈等也富含纖維素。（2）纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般認(rèn)為它至少包括三種組分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶，前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖，第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。纖維素最終被水解成葡萄糖，為微生物的生長(zhǎng)提供營(yíng)養(yǎng)。纖維素分解菌的篩選（1）篩選措施：剛果紅染色法。可以通過顏色反應(yīng)直接對(duì)微生物進(jìn)行篩選。（2）剛果紅染色法篩選纖維素分解菌的原理剛果紅是一種染料，它可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物，但并不和水解後的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。當(dāng)我們?cè)诰哂欣w維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅時(shí)，剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解後，剛果紅－纖維素的復(fù)合物就無法形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。這樣，我們就可以通過與否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。分離分解纖維素的微生物的試驗(yàn)流程土壤取樣→選擇培養(yǎng)（此步與否需要，應(yīng)根據(jù)樣品中目的菌株數(shù)量的多少來確定）→梯度稀釋→將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上→挑選產(chǎn)生透明圈的菌落（1）土壤采集選擇富含纖維素的環(huán)境。（2）剛果紅染色法分離纖維素分解菌的環(huán)節(jié)倒平板操作、制備菌懸液、涂布平板（3）剛果紅染色法種類一種是先培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng)，另一種是在倒平板時(shí)就加入剛果紅。課題延伸對(duì)分解纖維素的微生物進(jìn)行了初步的篩選後，只是分離純化的第一步，為確定得到的是纖維素分解菌，還需要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的試驗(yàn)，纖維素酶的發(fā)酵措施有液體發(fā)酵和固體發(fā)酵兩種。纖維素酶的測(cè)定措施，一般是對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素後所產(chǎn)生的葡萄糖進(jìn)行定量的測(cè)定。疑難解答（1）為何要在富含纖維素的環(huán)境中尋找纖維素分解菌？由于生物與環(huán)境的互相依存關(guān)系，在富含纖維素的環(huán)境中，纖維素分解菌的含量相對(duì)提高，因此從這種土樣中獲得目的微生物的幾率要高于一般環(huán)境。（2）將濾紙埋在土壤中有什么作用？你認(rèn)為濾紙應(yīng)當(dāng)埋進(jìn)土壤多深？將濾紙埋在土壤中能使纖維素分解菌相對(duì)匯集，實(shí)際上是人工設(shè)置纖維素分解菌生存的合適環(huán)境。一般應(yīng)將紙埋于深約10cm左右腐殖土壤中。（3）兩種剛果紅染色法的比較措施一是老式的措施，缺陷是操作繁瑣，加入剛果紅溶液會(huì)使菌落之間發(fā)生混雜；其長(zhǎng)處是這樣顯示出的顏色反應(yīng)基本上是纖維素分解菌的作用。措施二的長(zhǎng)處是操作簡(jiǎn)便，不存在菌落混雜問題，缺陷是由于纖維素和瓊脂、土豆汁中都具有淀粉類物質(zhì)，可以使可以產(chǎn)生淀粉酶的微生物出現(xiàn)假陽性反應(yīng)。但這種只產(chǎn)生淀粉酶的微生物產(chǎn)生的透明圈較為模糊，由于培養(yǎng)基中纖維素占重要地位，因此可以與纖維素酶產(chǎn)生的透明圈相辨別。措施二的另一缺陷是：有些微生物具有降解色素的能力，它們?cè)陂L(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)過程中會(huì)降解剛果紅形成明顯的透明圈，與纖維素分解菌不易辨別。（4）為何選擇培養(yǎng)可以“濃縮”所需的微生物？在選擇培養(yǎng)的條件下，可以使那些可以適應(yīng)這種營(yíng)養(yǎng)條件的微生物得到迅速繁殖，而那些不適應(yīng)這種營(yíng)養(yǎng)條件的微生物的繁殖被克制，因此可以起到“濃縮”的作用。專題三植物的組織培養(yǎng)技術(shù)課題一菊花的組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)的基本過程細(xì)胞分化：在生物個(gè)體發(fā)育過程中，細(xì)胞在形態(tài)、構(gòu)造和生理功能上出現(xiàn)穩(wěn)定性差異的過程。離體的植物組織或細(xì)胞，在培養(yǎng)了一段時(shí)間後來，會(huì)通過細(xì)胞分裂，形成愈傷組織，愈傷組織的細(xì)胞排列疏松而無規(guī)則，是一種高度液泡化的呈無定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞。由高度分化的植物組織或細(xì)胞產(chǎn)生愈傷組織的過程，稱為植物細(xì)胞的脫分化，或者叫做去分化。脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)，又可以重新分化成根或芽等器官，這個(gè)過程叫做再分化。再分化形成的試管苗，移栽到地裏，可以發(fā)育成完整的植物體。植物細(xì)胞工程具有某種生物全套遺傳信息的任何一種活細(xì)胞，都具有發(fā)育成完整個(gè)體的能力，即每個(gè)生物細(xì)胞都具有全能性。但在生物體的生長(zhǎng)發(fā)育過程中并不體現(xiàn)出來，這是由于在特定的時(shí)間和空間條件下，通過基因的選擇性體現(xiàn)，構(gòu)成不一樣組織和器官。植物組織培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用有：實(shí)現(xiàn)優(yōu)良品種的迅速繁殖；培育脫毒作物；制作人工種子；培育作物新品種以及細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)等。·細(xì)胞分化是一種持久性的變化，它有什么生理意義？使多細(xì)胞生物體中細(xì)胞構(gòu)造和功能趨向?qū)ｉT化，有助于提高多種生理功能的效率。比較根尖分生組織和愈傷組織的異同組織類型組織類型細(xì)胞來源細(xì)胞形態(tài)細(xì)胞構(gòu)造細(xì)胞排列細(xì)胞去向根尖分生組織受精卵正方形無液泡緊密分化成多種細(xì)胞組織愈傷組織高度分化細(xì)胞無定形高度液泡化疏松再分化成新個(gè)體相似點(diǎn)都通過有絲分裂進(jìn)行細(xì)胞增殖影響植物組織培養(yǎng)的條件材料：不一樣的植物組織，培養(yǎng)的難易程度差異很大。植物材料的選擇直接關(guān)系到試驗(yàn)的成敗。植物的種類、材料的年齡和保留時(shí)間的長(zhǎng)短等都會(huì)影響試驗(yàn)成果。菊花組織培養(yǎng)一般選擇未開花植物的莖上部新萌生的側(cè)枝作材料。一般來說，輕易進(jìn)行無性繁殖的植物輕易進(jìn)行組織培養(yǎng)。選用生長(zhǎng)旺盛嫩枝進(jìn)行組培的是嫩枝生理狀態(tài)好，輕易誘導(dǎo)脫分化和再分化。營(yíng)養(yǎng)：離體的植物組織和細(xì)胞，對(duì)營(yíng)養(yǎng)、環(huán)境等條件的規(guī)定相對(duì)特殊，需要配制合適的培養(yǎng)基。常用的培養(yǎng)基是MS培養(yǎng)基，其中具有的大量元素是N、P、S、K、Ca、Mg，微量元素是Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、I、Co，有機(jī)物有甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等。激素：植物激素中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素。在生長(zhǎng)素存在的狀況下，細(xì)胞分裂素的作用展現(xiàn)加強(qiáng)趨勢(shì)。在培養(yǎng)基中需要添加生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素等植物激素，其濃度、使用的先後次序、用量的比例等都影響成果。使用次序試驗(yàn)成果先生長(zhǎng)素，後細(xì)胞分裂素有助于分裂但不分化先細(xì)胞分裂素，後生長(zhǎng)素細(xì)胞既分裂也分化同步使用分化頻率提高生長(zhǎng)素／細(xì)胞分裂素比值與成果比值高時(shí)促根分化，抑芽形成比值低時(shí)促芽分化，抑根形成比值適中增進(jìn)愈傷組織生長(zhǎng)環(huán)境條件：PH、溫度、光等環(huán)境條件。不一樣的植物對(duì)多種條件的規(guī)定往往不一樣。進(jìn)行菊花的組織培養(yǎng)，一般將pH控制在5.8左右，溫度控制在18~22℃，并且每曰用曰光燈照射12h.操作流程配制MS固體培養(yǎng)基：配制多種母液：將多種成分按配方比例配制成的濃縮液（培養(yǎng)基母液）。·使用時(shí)根據(jù)母液的濃縮倍數(shù)，計(jì)算用量，并加蒸餾水稀釋。·配制培養(yǎng)基：應(yīng)加入的物質(zhì)有瓊脂、蔗糖、大量元素、微量元素、有機(jī)物和植物激素的母液，并用蒸餾水定容到1000毫升。·在菊花組織培養(yǎng)中，可以不添加植物激素原因是菊花莖段組織培養(yǎng)比較輕易。·滅菌：采用的滅菌措施是高壓蒸汽滅菌。·MS培養(yǎng)基中多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的作用是什么？與肉湯培養(yǎng)基相比，MS培養(yǎng)基有哪些特點(diǎn)？大量元素和微量元素提供植物細(xì)胞所必需的無機(jī)鹽；蔗糖提供碳源，維持細(xì)胞滲透壓；甘氨酸、維生素等物質(zhì)重要是為了滿足離體植物細(xì)胞在正常代謝途徑受到一定影響後所產(chǎn)生的特殊營(yíng)養(yǎng)需求。微生物培養(yǎng)基以有機(jī)營(yíng)養(yǎng)為主，MS培養(yǎng)基則需提供大量無機(jī)營(yíng)養(yǎng)。外植體的消毒外植體：用于離體培養(yǎng)的植物器官或組織片段。選用菊花莖段時(shí)，要取生長(zhǎng)旺盛的嫩枝。菊花莖段用流水沖洗後可加少許洗衣粉，用軟刷輕輕刷洗，刷洗後在流水下沖洗20min左右。用無菌吸水紙吸干外植體表面的水分，放入體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精中搖動(dòng)2~3次，持續(xù)6~7s，立即將外植體取出，在無菌水中清洗。取出後仍用無菌吸水紙吸干外植體表面水分，放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的氯化汞溶液中1~2min。取出後，在無菌水中至少清洗3次，漂洗消毒液。注意：對(duì)外植體進(jìn)行表面消毒時(shí)，就要考慮藥劑的消毒效果，又要考慮植物的耐受能力。接種：接種過程中插入外植體時(shí)形態(tài)學(xué)上端朝上，每個(gè)錐形瓶接種7～8個(gè)外植體。外植體接種與細(xì)菌接種相似，操作環(huán)節(jié)相似，并且都規(guī)定無菌操作。培養(yǎng)：應(yīng)當(dāng)放在無菌箱中進(jìn)行，并定期進(jìn)行消毒，保持合適的溫度（18~22℃）和光照（12h）移栽：栽前應(yīng)先打開培養(yǎng)瓶的封口膜，讓其在培養(yǎng)間生長(zhǎng)幾曰，然後用流水清洗根部培養(yǎng)基。然後將幼苗移植到消過毒的蛭石或珍珠巖等環(huán)境中生活一段時(shí)間，進(jìn)行壯苗。最終進(jìn)行露天栽培。栽培外植體在培養(yǎng)過程中也許會(huì)被污染，原因有外植體消毒不徹底；培養(yǎng)基滅菌不徹底；接種中被雜菌污染；錐形瓶密封性差等。專題二月季的花藥培養(yǎng)被子植物的花粉發(fā)育被子植物的雄蕊一般包括花絲、花藥兩部分。花藥為囊狀構(gòu)造，內(nèi)部具有許多花粉。花粉是由花粉母細(xì)胞通過減數(shù)分裂而形成的，因此，花粉是單倍體的生殖細(xì)胞。被子植物花粉的發(fā)育要經(jīng)歷小孢子四分體時(shí)期、單核期和雙核期等階段。在小孢子四分體時(shí)期，4個(gè)單倍體細(xì)胞連在一起，進(jìn)入單核期時(shí)，四分體的4個(gè)單倍體細(xì)胞彼此分離，形成4個(gè)具有單細(xì)胞核的花粉粒。這時(shí)的細(xì)胞含濃厚的原生質(zhì)，核位于細(xì)胞的中央（單核居中期）。伴隨細(xì)胞不停長(zhǎng)大，細(xì)胞核由中央移向細(xì)胞一側(cè)（單核靠邊期），并分裂成1個(gè)生殖細(xì)胞核和1個(gè)花粉管細(xì)胞核，進(jìn)而形成兩個(gè)細(xì)胞，一種是生殖細(xì)胞，一種是營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞。生殖細(xì)胞將在分裂一次，形成兩個(gè)精子。注意：①成熟的花粉粒有兩類，一類是二核花粉粒，其花粉粒中只含花粉管細(xì)胞核和生殖細(xì)胞核，二核花粉粒的精子是在花粉管中形成的；另一類是三核花粉粒，花粉在成熟前，生殖細(xì)胞就進(jìn)行一次有絲分裂，形成兩個(gè)精子，此花粉粒中具有兩個(gè)精子核和一種花粉管核（營(yíng)養(yǎng)核）②花粉發(fā)育過程中的四分體和動(dòng)物細(xì)胞減數(shù)分裂的四分體不一樣。花粉發(fā)育過程中的四分體是花粉母細(xì)胞經(jīng)減數(shù)分裂形成的4個(gè)連在一起的單倍體細(xì)胞；而動(dòng)物細(xì)胞減數(shù)分裂過程中的四分體是聯(lián)會(huì)配對(duì)後的一對(duì)同源染色體，由于具有四條染色單體而稱為四分體。③同畢生殖細(xì)胞形成的兩個(gè)精子，其基因構(gòu)成完全相似。產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑通過花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株（即單倍體植株）一般有兩種途徑，一種是花粉通過胚狀體階段發(fā)育為植物，另一種是花粉在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上先形成愈傷組織，再將其誘導(dǎo)分化成植株。這兩種途徑之間并沒有絕對(duì)的界線，重要取決于培養(yǎng)基中激素的種類及其濃度配比。注意：①無論哪種產(chǎn)生方式，都要先誘導(dǎo)生芽，再誘導(dǎo)生根②胚狀體：植物體細(xì)胞組織培養(yǎng)過程中，誘導(dǎo)產(chǎn)生的形態(tài)與受精卵發(fā)育成的胚非常類似的構(gòu)造，其發(fā)育也與受精卵發(fā)育成的胚類似，有胚芽、胚根、胚軸等完整構(gòu)造，就像一粒種子，又稱為細(xì)胞胚。影響花藥培養(yǎng)的原因誘導(dǎo)花粉能否成功及誘導(dǎo)成功率的高下，受多種原因影響，其中材料的選擇與培養(yǎng)基的構(gòu)成是重要的影響原因·親本的生理狀況：花粉初期是的花藥比後期的更輕易產(chǎn)生花粉植株，選擇月季的初花期。·合適的花粉發(fā)育時(shí)期：一般來說，在單核期，細(xì)胞核由中央移向細(xì)胞一側(cè)的時(shí)期，花藥培養(yǎng)成功率最高·花蕾：選擇完全未開放的花蕾·親本植株的生長(zhǎng)條件、材料的低溫預(yù)處理以及接種密度等對(duì)誘導(dǎo)成功率均有一定影響·材料的選用：選擇花藥時(shí)，一般要通過鏡檢來確定其中的花粉與否處在合適的發(fā)育期。確定花粉發(fā)育時(shí)期的最常用的措施是醋酸洋紅法。不過，某些植物的花粉細(xì)胞核不易著色，需采用焙花青-鉻礬法，這種措施能將花粉細(xì)胞核染成藍(lán)黑色·材料的消毒·接種和培養(yǎng)：滅菌後的花蕾，要在無菌條件下除去萼片和花瓣，并立即將花藥接種到培養(yǎng)基上。在剝離花藥時(shí)，要盡量不損傷花藥（否則接種後輕易從受傷部位長(zhǎng)生愈傷組織），同步還要徹底清除花絲，由于與花絲相連的花藥不利于愈傷組織或胚狀體的形成，一般每瓶接種花藥7～10個(gè),培養(yǎng)溫度控制在25℃左右,不需要光照.幼小植株形成後才需要光照.一般通過20～30天培養(yǎng)後,會(huì)發(fā)現(xiàn)花藥開裂,長(zhǎng)出愈傷組織或形成胚狀體。將愈傷組織及時(shí)轉(zhuǎn)移到分化培養(yǎng)基上，以便深入分化出再生植株。假如花藥開裂釋放出胚狀體，則一種花藥內(nèi)就會(huì)產(chǎn)生大量幼小植株，必須在花藥開裂後盡快將幼小植株分開，分別移植到新的培養(yǎng)基上，否則這些植株將很難分開。還需要對(duì)培養(yǎng)出來的植株做深入的鑒定和篩選。植物組織培養(yǎng)技術(shù)與花藥培養(yǎng)技術(shù)的相似之處是：培養(yǎng)基配制措施、無菌技術(shù)及接種操作等基本相似。兩者的不一樣之處在于：花藥培養(yǎng)的選材非常重要，需事先探索時(shí)期合適的花蕾；花藥裂開後釋放出的愈傷組織或胚狀體也要及時(shí)更換培養(yǎng)基；花藥培養(yǎng)對(duì)培養(yǎng)基配方的規(guī)定更為嚴(yán)格。這些都使花藥培養(yǎng)的難度大為增長(zhǎng)。專題五ＤＮＡ和蛋白質(zhì)技術(shù)課題一ＤＮＡ的粗提取與鑒定·提取DNA的溶解性原理包括哪些方面？DNA在不一樣濃度NaCl溶液中溶解度不一樣；DNA不溶于酒精。·DNA在不一樣濃度NaCl溶液中溶解度有何特點(diǎn)？要使DNA溶解，需要使用什么濃度？要使DNA析出，又需要使用什么濃度？在0.14mol/L時(shí)溶解度最小；較高濃度可使DNA溶解；0.14mol/L可使DNA析出。·在溶解細(xì)胞中的DNA時(shí)，人們一般選用2mol/LNaCl溶液；將DNA分子析出的措施是向溶有DNA的NaCl溶液中緩慢注入蒸餾水，以稀釋NaCl溶液。酒精是一種常用有機(jī)溶劑，但DNA卻不能溶于酒精（尤其是95％冷卻酒精），但細(xì)胞中蛋白質(zhì)可溶于酒精。從理論上分析，預(yù)冷的乙醇溶液具有如下長(zhǎng)處。一是克制核酸水解酶活性，防止DNA降解；二是減少分子運(yùn)動(dòng)，易于形成沉淀析出；三是低溫有助于增長(zhǎng)DNA分子柔韌性，減少斷裂。·采用DNA不溶于酒精的原理，可以到達(dá)什么目的？將DNA和蛋白質(zhì)深入分離。·提取DNA還可以運(yùn)用DNA對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性原理。運(yùn)用該原理時(shí)，應(yīng)選用怎樣的酶和怎樣的溫度值？蛋白酶，由于酶具有專一性，蛋白酶只水解蛋白質(zhì)而不會(huì)對(duì)DNA產(chǎn)生影響。溫度值為60～80℃，由于該溫度值蛋白質(zhì)變性沉淀，而DNA不會(huì)變性。補(bǔ)充：DNA的變性是指DNA分子在高溫下解螺旋，其溫度在80℃以上，如在PCR技術(shù)中DNA變性溫度在95℃。·洗滌劑在提取DNA中有何作用？洗滌劑將細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)，從而瓦解細(xì)胞膜。·當(dāng)鑒定提取出的物質(zhì)與否是DNA時(shí)，需要使用什么指示劑進(jìn)行鑒定？在沸水浴條件下，DNA遇二苯胺展現(xiàn)藍(lán)色。原理總結(jié)：通過運(yùn)用不一樣濃度NaCl溶液溶解或析出DNA，可以從細(xì)胞中提取和提純DNA；再運(yùn)用酒精深入將DNA與蛋白質(zhì)分離開來，到達(dá)提純的目的；最終運(yùn)用二苯胺試劑鑒定提取的物質(zhì)與否是DNA。試驗(yàn)材料的選用不一樣生物的組