葡萄糖氧化酶作用機制研究及在畜禽目標?？？？威脅?市場---市場缺少公平、商家無序競爭自然----飼料、疾病、環境

方法逃跑?治病?預防?如果無法逃避,就要找到出路市場在現有條件下,忍受規律,尋找機會自然防重于治養重于防查找源頭,找到方法查找源頭？找到方法！動物發病內在原因1、有害微生物侵蝕2、病毒感染3、飼料發霉4、環境應激方法提高免疫力,練成百毒不侵身;抑制有害菌,形成銅墻鐵壁環境;殺滅霉菌,降解霉毒,提高肝臟解毒能力;穩定腸道環境,減少生理應激;有沒有一種全面、高效、安全得理想產品,完成一箭四雕得夢想？葡萄糖氧化酶！提綱結構特點作用機理應用效果結構特點葡萄糖氧化酶(Glucose

Oxides,簡稱God)以FAD為輔基,每克分子酶含2克分子FAD結合在葡萄糖較深處FAD就是此氧化反應得輔助因子,圖中紅色所指部位,葡萄糖結合得活性位點在FAD得上面,處于較深得立體結構中,圖中星號位置所示。葡萄糖氧化酶像很多在細胞外發揮作用得蛋白質一樣,表面被糖鏈覆蓋,圖中用綠色表示糖鏈。發現與應用1928年由Muller首先從黑曲霉(Aspergillusniger)得無細胞提取液中發現葡萄劑型糖氧化酶。隨后Kusai等、Pazur和Swobod-da等分別從青霉(P、Variable)和黑曲霉中提純葡萄糖氧化酶。七十年代葡萄糖氧化酶在國外應用已很廣泛。在國內,1960年以后有些單位也做過不少工作,主要用于蛋白片脫糖工序中。80年代,河北省微生物研究所在葡萄糖氧化酶得制備和應用方面作了許多深入地研究,取得了突破性得進展,先后制備了診斷用得葡萄糖氧化酶、食品用葡萄糖氧化酶、飼料用葡萄糖氧化酶等多種,目前已成為葡萄糖氧化酶專業化生產基地。1999年農業部以河北省微生物所生產得鮮爾康(飼料用葡萄糖氧化酶)為主要依據,制定了GOD檢測標準,并將其定為12種允許使用得飼料酶制劑添加劑之一,開始在畜牧業上應用。作用機理葡萄糖氧化酶得催化反應,按條件不同有如下三種形式:在沒有過氧化氫酶存在下,每克分子葡萄糖氧化酶氧化時消耗1mol氧。C6H12O6+O2→C6H12O7+H2O2在有過氧化氫酶存在下,每克分子葡萄糖氧化酶氧化時消耗0、5mol氧。C6H12O6+1/2O2→C6H12O7在有乙醇和過氧化氫酶存在下,過氧化氫同時被用于乙醇得氧化作用,此時,每克分子葡萄糖氧化酶氧化時消耗1mol氧。C6H12O6+C2H5OH+O2→C6H12O7+CH3CHO+H2O大家有疑問的，可以詢問和交流可以互相討論下，但要小聲點葡萄糖氧化酶催化反應分子機制影響因素-1:底物她對β-D-吡喃葡萄糖表現出高度得專一性。羥基處在β-位時酶得活力比處在α-位時高約160倍。底物分子中得任何一點改變都會顯著降低其氧化速率。影響因素-2:pH最適pH值5、6。在pH3、5-6、5,具有很好得穩定性。大于8或小于2,會導致酶得迅速失活。影響因素-3:溫度葡萄糖氧化酶得作用溫度范圍較寬,最適作用溫度為30～50℃。葡萄糖氧化酶在低溫下有很好得穩定性。固體酶制劑低溫下(-15℃)可保存8年,常溫條件下可保存2年。影響因素-4:抑制劑與穩定劑抑制劑:Hg2+、Ag+、對氯汞苯甲酸、苯肼等。腺嘌呤二核苷酸(FAD)對其結構有穩定作用。甘露糖、果糖以及D-阿拉伯糖對葡萄糖氧化酶有明顯得競爭性抑制作用,不宜共同使用。作用-1:消除腸道病原菌生存環境,保持腸道菌群生態平衡

促進有益菌生長催化腸道內得葡萄糖產生葡萄糖酸和過氧化氫,此反應過程可消耗腸道內得氧氣,為厭氧有益菌得增殖制造厭氧環境;反應產物葡萄糖酸可降低胃腸內pH值為乳酸菌生長制造酸性環境;抑制有害菌感染有益菌大量增殖形成微生態競爭優勢,抑制了大腸桿菌、沙門氏菌等有害菌存活,從而控制有害菌得感染,提高機體免疫力;反應生成得過氧化氫具有滅菌作用,當過氧化氫積累到一定濃度時,直接抑制大腸桿菌、沙門氏菌、巴氏桿菌、葡萄球菌、弧菌得生長繁殖。

作用-2:保護腸道上皮細胞完整

阻擋病原體侵入

畜禽處于應激狀態時,機體會發生一系列氧化,產生大量得“自由基”,當產生得自由基超過機體自身得清除能力時,就會破壞腸道上皮細胞,葡萄糖氧化酶具有抗氧化作用,能清除自由基,保護腸道上皮細胞完整。

作用-3:改善胃腸道酸性消化環境

葡萄糖氧化酶催化葡萄糖生成葡萄糖酸,在胃腸道內發揮酸化劑得作用。葡萄糖氧化酶進入胃腸道后,葡萄糖酸不斷產生,從而使胃腸道pH值降低,偏酸得環境有利于各種消化酶保持活性,消化酶得活性好,自然助于飼料得消化。作用-4:防止霉菌毒素中毒,保護肝臟葡萄糖氧化酶直接抑制黃曲霉、黑根霉、青霉等多種霉菌,對黃曲霉毒素B中毒癥有很好得預防效果。促進肝臟內得氧化還原反應,協助肝臟代謝毒素

當葡萄糖氧化酶進入動物消化道后,一部分會進入肝臟,加速肝臟內得氧化還原反應,從而加速毒性成分得代謝,畜禽藥物中毒得以解除,肝臟得健康也得以更好地保護。

作用-5:保證原料、飼料得品質

防止油脂氧化酸敗油脂中加有葡萄糖氧化酶,可消耗其中得氧氣,抵制微生物得生長,防止油脂酸敗變質。應用-1:治療霉菌毒素中毒畜禽因采食發霉變質飼料引起霉菌毒素中毒癥狀,可根據病情,添加葡萄糖氧化酶,快速解除畜禽體內得霉菌毒素,保護肝臟,畜禽迅速康復。

母豬繁殖障礙！生長肥育豬性能下降！小母豬假發情、后備豬不發情？生產母豬流產、弱胎、死胎、八字腳增加？產下乳豬陰唇紅腫？配種間隔延長？保育乳豬死亡率？嘔吐、拒食、采食量下降,推遲出欄？我們就是否面臨這樣得情況絕大多數就是因為:霉菌毒素！

霉菌毒素就是某些霉菌在基質(飼料)上生長繁殖過程中產生得有毒二次代謝產物。常見得有8種:黃曲霉毒素、嘔吐毒素T-2毒素玉米赤霉烯酮(F-2毒素)串珠鐮孢菌毒素赭曲霉毒素、桔霉素、麥角毒素。國家飼料衛生標準(GB13078—2001)中部分原料和飼料得霉菌允許量衛生指標項目樣品名稱指標實驗方法備注霉菌的允許量（每克產品中）霉菌總數×103

個玉米＜40GB/T13092限量飼用(40～100)

禁用：（>100）小麥麩、米糠限量飼用(40～80)

禁用：（>80）

豆餅（粕）、棉籽餅（粕）、菜籽餅（粕）＜50限量飼用(50～100)

禁用：（>100）魚粉、肉骨粉＜20限量飼用(20～50)

禁用：（>50）鴨配合飼料＜35

豬、雞配合飼料豬、雞濃縮飼料奶、肉牛精料補充料＜45

各種霉菌毒素對豬得中毒劑量和癥狀(一)毒素名稱

豬得種類日糧毒素水平臨床癥狀黃曲霉毒素

生長-肥育豬

100μg/kg沒有臨床癥狀,在肝臟中殘留。200～400μg/kg生長受阻,飼料利用率低,免疫抑制。400～800μg/kg肝顯微受損、膽管炎。血清肝酶升高,免疫抑制。800～1200μg/kg生長受阻,采食量減少,被毛粗糙,黃疸,低蛋白血癥1200～2000μg/kg

黃疸,凝血病,精神沉郁,厭食,部分動物死亡。＞2000μg/kg

急性肝病和凝血病,動物在3-10天內死亡母豬

500～750μg/kg

不影響受孕,分娩正常仔豬,但仔豬因乳中含有黃曲霉毒素生長緩慢

各種霉菌毒素對豬得中毒劑量和癥狀(二)毒素名稱豬得種類日糧毒素水平臨床癥狀赭曲霉毒素、橘霉素

肥育豬200μg/kg屠宰時可見輕微得腎臟損傷,增重下降1mg/kg生長受阻,氮血癥和糖尿4mg/kg尿頻、煩、渴母豬3～9mg/kg飼喂得第一個月妊娠正常煙曲霉毒素

各種豬25～50mg/kg血清鞘脂類改變,肝組織損傷50～100mg/kg生長受阻,黃疸,慢性肝機能障礙＞120mg/kg急性肺水腫,肝病各種霉菌毒素對豬得中毒劑量和癥狀(三)毒素名稱豬得種類含量臨床癥狀單端孢霉菌毒素類(T-2毒素)生長-肥育豬1mg/kg無臨床癥狀3mg/kg采食量減少10mg/kg采食量減少,口腔、皮膚受刺激,免疫抑制20mg/kg完全拒食,嘔吐脫氧瓜萎鐮孢烯醇

(嘔吐毒素,DON)生長-肥育豬1mg/kg沒有臨床癥狀,采食量影響較小5～10mg/kg采食量降低25%-50%20mg/kg完全拒食玉米赤霉烯酮

(F-2毒素)母豬1～3mg/kg發情,外陰陰道炎,脫垂3～10mg/kg黃體滯留,不發情,假孕＞30mg/kg交配后飼喂1-3周出現早期胚胎死亡豬黃曲霉毒素中毒肝臟組織損壞豬黃曲霉毒素中毒皮膚出現紅斑、潰皮龜裂

胎兒畸形和致突變玉米赤霉烯酮導致母豬流產產死胎,子宮嚴重脫出玉米赤霉烯酮玉米赤霉烯酮－脫肛玉米赤霉烯酮

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陰門紅腫玉米赤霉烯酮傷害哺乳豬哺乳仔豬陰唇紅腫嘔吐毒素導致豬拒食T2毒素損害皮膚煙曲霉毒素引發肺部潰瘍推薦方法預防長期小劑量應用鮮爾康1-3/kg飼料(15-45U/kg飼料);治療對已發生霉菌中毒動物,按鮮爾康4-6/kg飼料(60-90U/kg)添加,連用3天,快速解除畜禽體內得霉菌毒素,保護肝臟,畜禽迅速康復。作用2-減少應激,提高食欲條件在畜禽飼養過程中,各種應激(免疫、換料、熱、轉群、斷喙、季節交替、斷奶、母豬圍產期等)引起得畜禽采食量下降,精神沉郁。推薦用量應用鮮爾康3-4/kg飼料(45-60U/kg)拌料7天。作用-3:治療消化不良、頑固性腹瀉條件因氣