樣本類型基礎知識第一頁，共28頁。大綱一、血液根本組成二、樣本類型分類及相關應用1、樣本類型分類2、凝血過程3、抗凝劑種類及應用4、促凝劑種類及應用5、別離膠作用原理三、真空采血管介紹四、臨床樣本處理2021/11/142第二頁，共28頁。一、血液的根本組成紅細胞血細胞白細胞血小板纖維蛋白原全血血液血漿蛋白白蛋白血漿固體成分球蛋白血漿/血清血清營養物質、脂類、酶、電解質、激素、維生素、無機鹽（鈣、鎂、鉀、鈉等）水2021/11/143第三頁，共28頁。樣本類型分類添加物血清無添加/促凝劑無添加/促凝劑+分離膠血漿EDTA-2鈉（鉀）/肝素/檸檬酸/草酸等EDTA-2鈉（鉀）/肝素/檸檬酸/草酸等+分離膠二、樣本類型分類及相關應用2021/11/144第四頁，共28頁。凝血過程1、血小板的聚集和沉積。2、凝血瀑布的激活：2021/11/145第五頁，共28頁。抗凝劑種類及應用肝素〔液體，鈉、鋰等〕檸檬酸〔液體，鈉、鉀等〕EDTA〔液體或固體，二鈉、二鉀、三鉀等〕草酸〔鈉、鉀〕ACD(液體，酸性枸櫞酸葡萄糖〕CPDA〔檸檬酸-磷酸-葡萄糖-腺嘌呤〕CPD〔枸櫞酸鹽-磷酸鹽-葡萄糖〕水蛭素2021/11/146第六頁，共28頁。抗凝劑種類及應用肝素〔液體，鈉、鋰等〕：肝素鋰在檢測非鋰離子時產生干擾的可能性最小，推薦使用肝素鋰作為抗凝劑。目前，在對pH值、血氣、電解質和鈣離子的檢測中肝素是唯一可以使用的抗凝劑。不適于做血凝試驗、白細胞計數。枸櫞酸鈉或枸櫞酸鈉緩沖液：凝血實驗首選的抗凝劑EDTA〔液體或固體，二鈉、二鉀、三鉀等〕：二鈉鹽和二鉀鹽使用時通常為干粉，血細胞計數和分類首選EDTA二鉀鹽作為抗凝劑；為了增強抗凝能力，EDTA三鉀使用時通常為溶液。通常使用的三鉀溶液將使血液稀釋1%至2%。

2021/11/147第七頁，共28頁。促凝劑種類及應用促凝劑的活性成分：活性二氧化硅、腦磷脂、凝血酶、白陶土、硅石粉、玻璃粉、碳素粉末及蛇毒等促凝成分經特殊加工而成。促凝劑的狀態：液體、霧狀噴涂、干粉、球狀、液固雙相。促凝劑可激活血漿和血小板中的局部凝血因子，生成凝血活酶，促進血液凝固，加速血塊回縮，到達快速別離血清的目的。促凝劑與血液的接觸面積：接觸面積越大，血液凝固時形成的纖維蛋白網狀構造越嚴密，血清的產量越高。全液體浸涂＞霧狀噴涂＞液固雙相＞干粉＞球狀促凝劑的效果評價：血液完全凝固的時間，一般要求玻璃管在15分鐘，塑膠管在20分鐘以內，促凝劑的有效成分不能影響檢測結果，血液凝固后不能在血清內有纖維蛋白絲或微小凝塊。〔塑膠管與血液接觸時，激活凝血因子VI、VII的能力非常弱〕2021/11/148第八頁，共28頁。別離膠離心后別離膠在血漿/血清和血細胞之間起到屏障隔離作用.SST和PST別離膠試管血清別離膠血凝塊2021/11/149第九頁，共28頁。三、真空采血管介紹真空采血系統真空采血管及采血針的生產廠家不適應真空采血情況真空采血管的材質及添加劑多管采集順序真空采血管引起溶血的原因2021/11/1410第十頁，共28頁。真空采血系統真空采血系統由真空采血管、采血針〔包括直針和頭皮針〕、持針器三個局部組成。真空采血管是其主要組成局部，主要用于血液標本的采集與保存。真空采血管在生產過程中預置了一定量的負壓，當采血針穿刺進入血管后，由于采血管內的負壓作用，血液自動流入采血管內。2021/11/1411第十一頁，共28頁。真空采血管：高檔：BD、GR、積水、泰爾茂；中高檔：陽普中檔：拱東、科華、威高；低檔：瀏陽、鑫樂、信靈、康健、索達真空采血針：高檔：NIPRO、哈娜好；中檔：康德萊低檔：瀏陽、福爾康2021/11/1412第十二頁，共28頁。不適應真空采血情況

①休克患者：血管痙攣，血管內壓力不夠，用采血管難以到達采血量標準。②小兒頸靜脈或股靜脈采血：用真空采血持針器沒有注射器靈活，所以用真空采血管采血成功率不高。③水腫患者、靜脈壓低的患者：用真空采血管采血成功率差。2021/11/1413第十三頁，共28頁。真空采血管的材質

玻璃：主要成分是親水性硅酸鹽,采血后玻璃試管內壁可出現吸附水分子的吸水層,所以,別離膠不能直接黏附于玻璃試管的內壁。隨著放置時間的延長,紅細胞中的鉀或者酶等物質,可以通過水分子吸水層向血清中擴散，所以,玻璃采血管在原狀態下保存血清的期限以2-3d為宜。塑料：常用聚對苯二甲酸(乙二)醇酯(PET)材質，疏水性質,其管壁不產生水分子層分離膠可結實地黏附在內壁上,紅細胞中的鉀不能擴散到血清中,因而冷藏保存8d血清鉀含量不變。也可-20℃保存標本〔玻璃采血管無法到達〕。密封膠塞：推薦使用丁基橡膠而不用天然橡膠，天然橡膠成分復雜，易致溶血。2021/11/1414第十四頁，共28頁。試管添加劑抗凝劑促凝劑別離膠氟化物其它(例如:硅酮涂層,外表活性劑)特殊應用的添加劑2021/11/1415第十五頁，共28頁。頭蓋顏色臨床用途標本類型制備步驟添加劑

紅色血清生化血清采血后不需顛倒混勻→靜置1小時→離心無（內壁涂有血液附壁防止劑）

黃色快速血清生化試驗血清采血后立即顛倒混勻8次→靜置20分鐘→離心分離膠、促凝劑（內壁涂有血液附壁防止劑）

橙色快速血清生化試驗血清采血后立即顛倒混勻8次→靜置20分鐘→離心促凝劑

淺藍色血凝試驗血漿采血后立即顛倒混勻8次→離心抗凝劑：檸檬酸鈉與血樣比為1:9

灰色血糖試驗血漿采血后立即顛倒混勻8次→離心抗凝劑：EDTA，氟化鈉

綠色快速血漿生化血流變試驗血漿采血后立即顛倒混勻8次→離心抗凝劑：肝素鋰或肝素鈉

淺綠色快速血漿生化試驗血漿采血后立即顛倒混勻8次→離心分離膠，肝素鋰

紫色血液學常規全血實驗全血采血后立即顛倒混勻8次→試驗前混勻標本抗凝劑：EDTA-2K或EDTA-3K

黑色血沉試驗全血采血后立即顛倒混勻8次→使用前混勻標本抗凝劑：檸檬酸鈉與血樣比為1：42021/11/1416第十六頁，共28頁。多管采血順序介紹1.人衛版檢驗臨床根底：玻璃管：血培養管→無抗凝劑血清管→枸櫞酸鈉抗凝管〔藍〕→其他抗凝管〔黑綠紫灰〕→金黃色促凝管；塑料管：血培養管〔黃〕→枸櫞酸鈉抗凝管〔藍〕→加或未加促凝劑或別離膠的血清管→肝素管〔綠〕→EDTA管〔紫〕→加GLU分解抑制劑管〔灰〕2.衛生部：血培養瓶→無添加劑血清管→凝血試驗管→添加劑管｛枸櫞酸鈉抗凝管〔藍〕→肝素管〔綠〕→EDTA管〔紫〕→加GLU分解抑制劑管〔灰〕｝3.美國CLSI〔臨床實驗室標準化協會〕，H3-A6：血培養管→血凝管〔藍〕→血清管→肝素管〔綠〕→EDTA管〔紫〕→加GLU分解抑制劑管〔灰〕4.日本標準：血培養管→血清用采血→檸檬酸采血→肝素采血→EDTA采血→加GLU分解抑制劑的采血5.BD:血培養瓶→藍→黑→黃→紅→綠→紫→灰2021/11/1417第十七頁，共28頁。三、臨床樣本處理真空采血管混勻次數及正確混勻方式真空采血管引起溶血的原因采血管類型對檢測結果的影響采血管放置時間對結果的影響外來物質對結果的影響2021/11/1418第十八頁，共28頁。混勻次數肝素全血培養檸檬酸鹽別離膠氟化物〔葡萄糖〕2021/11/1419第十九頁，共28頁。標準的混勻方式采血后立即輕輕倒轉采血試管4~5次混勻標本,等待標本充分凝固需要放置30min,離心半徑8cm,離心速度維持在3500~4000r/min離心10min2021/11/1420第二十頁，共28頁。2021/11/1421第二十一頁，共28頁。溶血對檢驗結果的影響：血細胞成分的釋放〔如血鉀升高〕顏色對檢測的干擾〔如PT、APTT的延長〕血細胞成分對檢測的干擾〔如腺苷酸激酶對某些酶學指標檢測的影響〕采血時常引起標本溶血的原因：將血標本從注射器推到試管中采血針在靜脈中反復探來探去混合有抗凝劑的試管時用力過猛從已有血腫的部位采血采血時有空氣進展注射器產生泡沫為增加血液量而擠壓穿刺部位盛血的試管質量粗糙2021/11/1422第二十二頁，共28頁。采血管類型對檢測結果的影響生化工程免疫發光發光工程2021/11/1423第二十三頁，共28頁。采血管放置時間對結果的影響HDL-C于22℃、4℃放置不同時間測定值差異無統計學意義〔P>0.05〕.TC/TG和LDL-C于22℃內的檢測結果相對穩定，但-20℃保存7d的標本，除LDL-C外，其余血脂3項均與即刻檢測結果有差異。總結，室溫4℃條件下保存的別離樣本在2～4h內的血脂檢測結果比較穩定，不影響結果。貯存過程中脂蛋白顆粒的構造可能改變，甚至裂解而影響選擇性改變脂蛋白之間可能有局部脂質交換。2021/11/1424第二十四頁，共28頁。外來物質的影響因素刺激物、藥物或成癮性藥物的影響及其控制因素常見影響工程舉例咖啡因血糖、脂肪酸、兒茶酚氨、血管緊張素煙草脂肪酸、腎上腺素、腎上腺皮質激素、醛固酮酒精乳酸、尿酸、腎上腺素、血糖、膽固醇嗎啡淀粉酶、脂肪酸、轉氨酶、