水產品中硝基呋喃類代謝物的快速測定++膠體金免疫層析法FDIS_第1頁
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B50DB130B50DB1302/T341—20122012-11-20發布2012-12-10實施唐山市質量技術監督局發布DB1302/T341—2012本標準由唐山市質量技術監督局提出。本標準起草單位：唐山市畜牧水產品質量監測中心。本標準起草人：蒙君麗、李愛軍、葛懷禮、董李學、苗建民、鄭百芹、劉洋、張潔、劉志強、衛大群。1DB1302/T341—2012水產品中硝基呋喃類代謝物的快速測定膠體金免疫層析法1范圍本標準規定了水產品中硝基呋喃類代謝物殘留量的樣品制備和膠體金免疫層析法測定。本標準適用于水產品中硝基呋喃類代謝物（呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃妥因、呋喃西林）的快速篩選測定。2規范性引用文件下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。3制樣3.1樣品的制備取新鮮或解凍的供試水產品肌肉組織，剪碎，置于組織勻漿機中充分勻漿。3.2樣品的保存-20℃冰箱中貯存備用。4測定方法4.1方法原理硝基呋喃類代謝物膠體金免疫層析法應用了競爭抑制免疫層析的原理，樣品中的呋喃類代謝物在流動過程中與膠體金標記的特異性單克隆抗體結合，抑制了抗體和NC膜檢測線(T)上硝基呋喃類代謝物-蛋白偶聯物的結合。如樣品制備液中呋喃類代謝物含量大于檢測線(T)時，檢測線(T)不顯顏色，結果為陽性。反之，檢測線(T)顯紅色，結果為陰性。4.2試劑和材料以下所用的試劑，除特別注明外均為分析純試劑，水為符合GB/T6682規定的三級水。4.2.1硝基呋喃類檢測卡(試劑盒自帶)：4℃~30℃陰涼避光干燥處儲存。4.2.2乙酸乙酯。4.2.3衍生化試劑(試劑盒自帶)。4.2.4吸管(試劑盒自帶)。4.2.5試劑A試劑B試劑C試劑D(試劑盒自帶)。4.3儀器和設備4.3.1組織勻漿機。4.3.2天平：感量0.01g。4.3.3振蕩器或混旋器。4.3.4離心機。4.3.5氮氣吹干裝置。4.3.6微量移液器：單道20μL～200μL、200μL～1000μL、多道300μL。4.3.7計時器。2DB1302/T341—20124.4試樣制備離心管中注意：請勿吸取脂肪層和下層液體于50℃水浴中用氮氣吹干(若無氮氣可將乙酸乙酯5檢測和結果判定5.1檢測取出待測檢測卡（見圖1平放，用塑料吸管或移液槍取4.4中液體80μl(2～3滴)于加樣孔，目5.2結果判定5.2.1檢測線(T)和質控線(C)均呈現肉眼可見紅色線的為陰性。（見圖2）5.2.2檢測線(T)無顯色，質控線(C)呈現肉眼可見紅色線的為陽性。（見圖3）5.2.3檢測線(T)和質控線(C)均無顯色，或只出現檢測線(T)而質控線(C)無顯色的為無效。（見圖4）6檢測限和結果確認6.1檢測限呋喃唑酮代謝物:1μg/kg；呋喃它酮代謝物:2μg/kg；呋喃妥因代謝

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