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文檔簡介
第六篇:獸醫(yī)微生物學與免疫學一細菌的結構與生理【01】細菌形態(tài):具有細胞壁和核質的單細胞原核細胞型微生物。無成形的細胞核,無完整的細胞器。以微米為測量單位。在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng),肉眼可見菌體集落。【02】細菌結構(一)細胞壁:1、肽聚糖:為聚糖骨架;原核生物細胞特有。2、磷壁酸:G+菌特有;其抗原性較強:黏附宿主細胞。
3、外膜:外膜蛋白:脂蛋白、微孔蛋白。脂質雙層:脂多糖:類脂A:內(nèi)毒素成分。核心多糖:具有屬特異性。特異性多糖:具有種型特異性。4、周漿間隙:外膜與細胞膜之間,可獲得營養(yǎng),解除病毒。
(二)細胞膜:定義:為脂質雙層,并鑲嵌有特殊功能的載體蛋白酶類;不含膽固醇。
功能:物質交換、分泌胞外酶、產(chǎn)生與利用能量有關、細胞生物合成的場所。(三)細胞質:成分:水、蛋白質、脂類、核酸、少量無機鹽、核糖體、質粒。(為超微結構)核糖體:由RNA和蛋白質組成;是蛋白質合成場所。質粒:定義:細胞染色體外的遺傳物質,為雙股DNA分子。包括:F質粒:決定細菌的致育性。R質粒:決定耐藥性。毒力質粒:決定致病性。(四)核體:染色體(裸露的雙鏈DNA)【03】G+菌:革蘭氏染色為紫色;G-菌:革蘭氏染色為紅色。【04】細胞壁的功能:維持固有形態(tài)、物質交換、攜帶有抗原決定簇與致病性有關。【05】細菌特殊結構:⑴莢膜:①為黏液樣物質;②為多糖或多肽或透明質酸奶;③在營養(yǎng)品豐富時才形成;④能抵抗吞噬;⑤有特異性抗氧。⑵鞭毛:①細長波浪狀物業(yè);②成分為蛋白質;③能運行(沙門菌);④有特異的H抗氧;⑤與黏附有關。⑶菌毛:①普通菌毛:有黏附功能的;②性菌毛:F菌毛。成分為菌毛蛋白(pillin);有良好的抗生素抗性。⑷芽孢:定義:一定條件下胞質脫水濃縮形成;有多層膜包裹;通透性低;有完整核質和酶系統(tǒng);代謝靜止;不能分裂繁殖。是抵抗不良環(huán)境的特殊形成。滅活方法:160℃干熱滅菌或高壓蒸氣滅菌。【06】細菌染色方法①革蘭氏染色法的程序:草酸銨結晶紫染色1min→碘液染1min→95%醇脫色30s→碳酸復紅1min、意義:鑒別細菌、選擇抗菌藥物。②瑞氏染色法:將細菌染成藍色;組織細胞的細胞核染成藍色;背景和細胞漿染成紅色。③抗酸染色法:常用于結核桿菌、副結核桿菌的染色(紅色)。順序是:碳酸復紅微熱3-5min→3%鹽酸酒精脫色→堿性美蘭復紅1min、④特殊染色法:包括抗酸染色法,芽孢、莢膜、鞭毛染色法。【07】細菌的生長條件:①營養(yǎng)物質;②酸堿度(最宜pH為7、2-7、6);③溫度(最適為3%);④氣體(氧氣、二氧化碳);⑤滲透性。【08】世代時間:一個菌體以二分裂方式繁殖為兩個菌體所需的時間。【09】細菌的生長曲線分為四個時期:①遲緩期:菌體增大,代謝活躍;分裂遲緩,細菌數(shù)增加不顯著。②對數(shù)期:活菌數(shù)對數(shù)直線上升;生物活性典型;對抗生素敏感。③穩(wěn)定期:新繁殖的活菌數(shù)與死菌數(shù)平衡;產(chǎn)生芽孢,外毒素等。④衰亡期:死菌數(shù)超過活菌數(shù);菌體形態(tài)改變。【10】細菌新成代謝的能量由ATP供給。【11】細菌生物氧化的類型①發(fā)酵:以有機物為受氫體。②有氧呼吸:以氧氣為受氫體。③厭氧呼吸:以無機物硝酸鹽為受氫體。【12】細菌合成的代謝產(chǎn)物:①致熱源:(操作時嚴格注意無菌操作)。②毒素:內(nèi)毒素為G-菌死后釋放,外毒素為G+菌分泌的蛋白質。③侵襲性酶類:透明質酸酶(促使細菌擴散)。④色素:銅綠假單胞菌產(chǎn)綠色色素。⑤細菌素:僅對近緣菌株有抗菌作用的蛋白質,如:綠膿菌素。⑥抗生素:多有放線菌和真菌產(chǎn)生。⑦維生素:大腸桿菌能合成維生素B維生素K。【13】細菌的分解代謝試驗:①氧化發(fā)酵試驗:大腸桿菌產(chǎn)酸產(chǎn)氣;沙門菌產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。②氧化酶試驗:陽性者為什么紫色。(陽性菌有假單胞菌、氣單胞菌;陰性菌有:腸科桿菌)③過氧化氫酶試驗:陽性者產(chǎn)生氣泡。(陽性:葡萄球菌、微球菌。陰性:鏈球菌。)④硫化氫試驗:產(chǎn)生黑色為陽性(陽性:變形桿菌;陰性:大腸桿菌)⑤尿素酶試驗:陽性者呈紅紫色(陽性:變形桿菌;陰性:沙門菌)⑥吲哚試驗:陽性呈紅色(陽性:大肝桿菌、變形桿菌)⑦甲基紅試驗(MR):紅色反應為陽性(陽性:大腸桿;陰性:產(chǎn)氣桿)⑧VP試驗:陽性呈紅色(陽性:產(chǎn)氣桿菌;陰性:大腸桿菌)⑨枸櫞酸鹽利用試驗(C):培養(yǎng)基變深蘭為陽性(陽性:產(chǎn)氣桿菌;陰性:大腸桿菌)⑩IMVC試驗:大腸桿菌++--;產(chǎn)氣桿菌--++【14】固體培養(yǎng)基中瓊脂含義2%;半固體培養(yǎng)基中瓊脂含量0.5%。【15】基礎培養(yǎng)基:常用普通肉湯培養(yǎng)基,含蛋白胨、牛肉浸膏、NaCl、水等;常用于糖發(fā)酵試驗。【16】營養(yǎng)培養(yǎng)基:在基礎培養(yǎng)基中加入葡萄糖、血液、血清、酵母浸膏等;常用血瓊脂平板(鏈球菌)。【17】選擇培養(yǎng)基:麥康凱培養(yǎng)基抑制G+生長,利于用大腸桿菌、沙門菌生長。【18】鑒別培養(yǎng)基:另加入底物及指示劑,而鑒別細菌。【19】厭氧培養(yǎng)基:常用皰肉培養(yǎng)基;即在肉浸液中加入煮過的肉渣,用凡士林封口。【20】液體培養(yǎng)基生長現(xiàn)象:①混濁生長(葡萄球菌);②沉淀生長(鏈球菌);③菌膜生長(枯草桿菌)。【21】半固體培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象:沿穿刺線生長或穿刺線向四周擴散呈放射狀生長。【22】固體培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象:平板上劃線后形成菌落;斜面上劃線重疊形成菌苔。二細菌的感染【01】正常菌體的分布:①口腔:球菌、乳桿菌、棒狀桿菌;②胃:乳桿菌、幽門螺桿菌;③反芻前胃:無芽孢厭氧菌;④大腸:雙歧,擬桿菌,腸球菌,大腸桿菌,乳桿菌;⑤鼻、咽:葡萄酒球菌;⑥喉、扁桃體:甲型鏈球菌,卡他球菌;⑦陰道:乳桿菌;⑧尿道口:葡萄球菌,棒狀桿菌;⑨支氣管、肺:無菌;【02】正常菌群的生理作用:生物頡頏作用,營養(yǎng)作用,免疫作用。【03】柯赫法則:是確定某種細菌是否有具有致病性的主要依據(jù)。①特定的病原菌應在同一疾病中可見,在健康者不存在;②此病原菌能被分離培養(yǎng)而得到純種;③此病原菌純培養(yǎng)物接種易感動物能導致同樣病癥;④自實驗感染的動物體內(nèi)能重新獲得該病原菌的純培養(yǎng)物。【04】細菌的毒力因子:⑴侵襲力①黏附因子F1菌毛:無特異性;F4菌毛K88:黏附豬小腸前段;F6菌毛987P:黏附豬小腸后段。②侵襲性酶透明質酸酶、鏈激酶:鏈球菌產(chǎn)生;膠原酶:梭菌、氣單胞菌產(chǎn)生;血液凝固酶:致病葡萄菌產(chǎn)生。③Ⅱ型分泌系統(tǒng)沙門氏菌、大腸桿菌等具有。④干擾防御莢膜:抵抗吞噬;細菌表面蛋白:抗吞噬、避免抗體補體作用;蛋白酶;細胞內(nèi)逃逸:如產(chǎn)生過氧化氫,中和吞噬細胞中的氧自由基。⑵毒素①外毒素由G+及少量G-(如產(chǎn)毒性大腸埃希氏菌)產(chǎn)生;
0、3%甲醛
刺激機體外毒素→→→→類毒素→→→產(chǎn)生抗毒素;
神經(jīng)毒素:包括破傷風毒素,肉毒毒素。②內(nèi)毒素是G-菌細胞壁的脂多糖,當細菌死亡后才游離出來;產(chǎn)生癥狀:發(fā)熱、毒血癥、休克、內(nèi)凝血、出血。【05】破傷風梭菌及其芽孢必須侵入缺氧的深部創(chuàng)口才能致病。【06】幾種血癥的區(qū)別①菌血癥:病原菌侵入血統(tǒng),但不繁殖。②毒血癥:病原菌不的入血,但其產(chǎn)生內(nèi)毒素入血,引起癥狀。③敗血癥:病原菌入血,并繁殖產(chǎn)生毒性物質,引起中毒癥狀(高熱、皮膚黏膜淤斑、肝脾腫大)。④膿毒血癥:化膿性細菌入血并繁殖,產(chǎn)生新的化膿灶。【07】藥敏試驗結果判定標準:①敏感:用常用劑量時,該抗菌藥物治療有效。②中介:指被測菌株的MIC與該抗菌藥物常用劑量所能達到的血清和組織濃度相近。③耐藥:指被測菌株不能被該抗菌藥物常用劑量達到的血液濃度所抑制,臨床治療無效。三細菌感染的診斷【01】采集樣本的原則:①嚴格無菌操作;②根據(jù)不同疾病或同一疾病不同時期采集不同的標本;③應在使用抗菌藥前采集,且采集時不得使用消毒劑;④樣本須新鮮,盡快送檢;⑤多數(shù)可冷藏運輸,糞便樣本常加入甘油緩沖鹽水保存液;⑥按規(guī)定包裝、冷藏、專人遞送;做好標記。【02】抗體檢測:最好檢測急性期和恢復雙份血清樣本,后者為前者4倍以上才具診斷價值。【03】聚合酶鏈式反應(PCR)的4種主要材料:DNA模板、引物、耐熱DNA聚合酶、脫氧核苷酸。【04】核酸雜交技術的設計原理:DNA雙螺旋分子的堿基互補原理。【05】利用生化反應對腸道桿菌進行鑒定是必不可少的。四消毒與滅菌【01】消毒:指殺滅病原微生物,但不一定能殺死芽孢。【02】滅菌:指殺滅病原微生物、非病原微生物及其芽孢。【03】高壓蒸汽滅菌法:應用最廣、滅菌效果最好的方法。其條件為103、4kp、121、3℃、維持15-30min、【04】煮沸法:100℃時5min可殺死細菌的繁殖體,1-3h殺死芽孢,加入2%碳酸鈉則沸點升至少105℃【05】流通蒸汽法:100℃30min殺死細菌的繁殖體,不可殺死芽孢。【06】巴氏消毒法:主要用于食品消毒,如下65℃維持30min、【07】熱空氣滅菌法:160℃,2h可殺死芽孢。用于玻璃器皿消毒。【08】紫外線滅菌:265nm波長的紫外線殺菌能力最強。用于實驗室,養(yǎng)殖場入口的消毒室、手術室、種蛋等的空氣消毒。【09】電離輻射滅菌:稱“冷滅菌”,用于一次性醫(yī)用塑料制品消毒。【10】濾過除菌法:所器具為濾
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