12Determinationofquinolones,sulfonamidesandamidolantibioticresiduesinnon-standarddrugsforaquaculturebyliquidchromatography-tandemmass2024-11-27發布1本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規則》的規定2水產養殖用非規范藥品中喹諾酮類、磺胺類、酰胺醇類抗生素殘留的測定液相色譜-質譜/質譜法和材料、儀器、分析步驟、結果計算、正確度GB/T6682分析實驗室用水規格和試相萃取柱凈化，液相色譜-質譜/質譜法檢5.1.1甲醇（CH3OH，CAS號5.1.2乙腈（CH3CN，CAS號）：3）：）：5.1.6氯化鈉（NaCl，CAS號：7647）：5.2溶液配制5.2.1乙酸銨（2.0mmoL/L）-甲酸溶液（0）：5.2.3甲酸-乙腈（0.1+99.9，體積比量取甲5.3標準品5.4標準溶液配制100μg/mL。取諾氟沙星、環丙沙星霉素、甲砜霉素、氟苯尼考各適量（相當于各活性成分10mg精密稱定，于各自容量瓶中，喹諾酮類需加0.2mL甲酸，均用甲醇溶解后并稀釋定容至100mL，配制成濃度為100500μg/mL。取氘代磺胺鄰二甲氧嘧啶、氘代磺胺間二甲氧嘧啶、氘代諾氟沙星、氘代環丙沙星、氘代恩諾沙星、氘代氯霉素內標各適量（相當于各活性成分5mg精密稱定醇溶解稀釋定容至10mL。配制成濃度為500μg/mL同位素內標標準儲備液，避光-18℃以下保存，有5.4.3喹諾酮類與磺胺類混合標準工作液準確吸取各喹諾酮類和磺胺類標準儲備液（5.4.1）適量，用甲醇稀釋制成1.0μg/mL混合標準工準確吸取各酰胺醇類標準儲備液（5.4.1）適量，用甲醇稀釋制成氯霉素、氟苯尼考0.1μg/mL，準確吸取各磺胺類和喹諾酮類內標標準儲備液（5.4.2）適量，用甲醇稀釋制成10.0μg/mL混合準確吸取各酰胺醇類內標標準儲備液（5.4.2）適量，用甲醇稀釋制成1.0μg/mL混合內標標準工45.5材料通過式固相萃取柱，200mg/6mL，或性6.1液相色譜-串聯質譜儀：配有電噴霧（ESI按GB/T20195的規定制備試樣，至少100g，粉碎使其全部通過1.0mm孔徑的分析篩，裝入密閉容），離心管中，再加入5mL酸化乙腈，重復上述操作，2mL乙腈淋洗固相萃取柱，合并收集液于40℃條件r/min離心5min，取上清液過0.2μm有機相濾膜后，取100μL濾液，用甲醇5），8.2.1.1.3流速：0.25mL/）；VV1688.2.1.2.1離子化模式：電噴霧離子源（ESI+多反應監測。8.2.1.2.3氣簾氣壓力：0.248.2.1.2.4碰撞氣壓力：0.028.2.1.2.6碰撞室入口電壓：8.2.1.2.7碰撞室出口電壓：8.2.1.2.11多反應監測母離子、子離子、解表2多反應監測母離子、子離子、解簇電m/zm/zv6注：*為定量碎片離子分別準確移取標準工作液適量，甲醇溶液（5.2.1）定容至1mL，喹諾酮類與磺胺類稀釋成質量濃），8.2.2.1.3流動相：甲醇-水；流動相洗脫程序見8.2.2.1.4流速：0.3mL7VV%1688.2.2.2.1離子化模式：電噴霧離子源（ESI-多反應監測。8.2.2.2.2噴霧電壓：-5508.2.2.2.3氣簾氣壓力：0.248.2.2.2.4碰撞氣壓力：0.028.2.2.2.5離子源溫度：558.2.2.2.6碰撞室入口電壓：8.2.2.2.7碰撞室出口電壓：8.2.2.2.11多反應監測母離子、子離子、解簇電壓和碰撞能量見表4。表4多反應監測母離子、子離子、解簇電m/zm/zv注：*為定量碎片離子10.0ng/mL、25.0ng/mL、50.0ng/mL、100ng/mL，內標液濃度均為5.0n8被測試樣中目標物色譜峰的保留時間與相應標準色譜峰的保留時間相比較，相對誤差應在>50>20～50>10～20磺胺嘧啶、磺胺甲基異噁唑、磺胺二甲嘧啶、磺得定量用子離子色譜峰面積，待測樣液中化合物的響應值應在儀器檢測的定量測定線性范圍之9結果計算），w——試樣中被測物殘留量的數值，單位為毫克每千克（mg/kg）；91——標準工作液中被測物的質量濃度數值，單位為2——標準工作曲線中得到的試樣溶液中被測物的質量濃度數值，單位為毫克每升（mg/L）；A——試樣溶液中被測物的質量色譜圖峰面積；Ai——試樣溶液中內標物的質量色譜圖峰面積；m——試樣質量數值，單位為（g）.計算結果以重復性條件下獲得的2次獨立測定結果的算術平均值表示，保留2