蛋白質(zhì)技術(shù)作業(yè)總結(jié)1、名詞解釋肽單位:又稱為肽基（peptidegroup）,是肽鍵主鏈上反復(fù)結(jié)構(gòu)。是由參于肽鏈形成氮原子,碳原子和它們4個(gè)替換成份:羰基氧原子,酰氨氫原子和兩個(gè)相鄰α-碳原子組成一個(gè)平面單位。疏水內(nèi)核:蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)共同特征,在分子內(nèi)部由一個(gè)由疏水側(cè)鏈堆積形成結(jié)構(gòu)。有穩(wěn)定結(jié)構(gòu)作用。分子伴侶:是以熱休克蛋白為代表一類參與蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)、折疊、聚合、解聚、錯(cuò)誤折疊后重新折疊、水解以及原始蛋白質(zhì)活性調(diào)控等一系列功效保守蛋白質(zhì)家族。2、哪些氨基酸強(qiáng)烈傾向于形成阿爾法螺旋？哪些非常不利于形成阿爾法螺旋氨基酸？強(qiáng)烈傾向于形成阿爾法螺旋氨基酸:谷氨酸Glu、蛋氨酸Met、丙氨酸Ala、亮氨酸Leu

非常不利于形成阿爾法螺旋氨基酸:絲氨酸Ser、酪氨酸Tyr、甘氨酸Gly、脯氨酸Pro3.簡(jiǎn)述β-折疊特征。β-折疊結(jié)構(gòu)形成通常需要兩條或兩條以上肽段共同參與,即兩條或多條幾乎完全伸展多肽鏈側(cè)向聚集在一起,相鄰肽鏈主鏈上氨基和羰基之間形成有規(guī)則氫鍵,維持這種結(jié)構(gòu)穩(wěn)定。β-折疊結(jié)構(gòu)特點(diǎn)以下:包含肽段較短,通常為5—10個(gè)氨基酸殘基。（2）借相鄰主鍵間氫鍵維系,在反平行層中是窄對(duì)氫鍵,平行層中是寬對(duì)氫鍵。（3）相鄰肽鏈走向能夠是平行和反平行兩種。（4）主鏈骨架伸展展現(xiàn)鋸齒狀。4、結(jié)構(gòu)域、亞基基礎(chǔ)區(qū)分是什么？一個(gè)分子中結(jié)構(gòu)域區(qū)是以共價(jià)鍵相連,而亞基是以非共價(jià)鍵。5.圖解蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)層次體系6.請(qǐng)列出建立一個(gè)蛋白質(zhì)純化試驗(yàn)室所需要基礎(chǔ)設(shè)備。樣品處理:

1.低溫冷凍高速離心機(jī),常規(guī)離心機(jī),超聲破碎儀,機(jī)械破碎儀

2.不一樣體積超濾裝置,雙蒸水裝置,冷凍干燥機(jī),冰箱（4,-20,-70攝氏度）

蛋白質(zhì)分離純化:

一套蛋白質(zhì)分離純化系統(tǒng)（比如法瑪西亞AKTA系統(tǒng)）,同時(shí)配置多種類型層析柱和填料;高效液相系統(tǒng)。

檢測(cè)判定系統(tǒng):

電泳儀,WESTERNBLOT轉(zhuǎn)膜儀（半干或濕轉(zhuǎn)）,干膠儀,紫外分光光度計(jì),酶標(biāo)儀。7、經(jīng)過(guò)半合成對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行工程操作標(biāo)準(zhǔn)是利用非共價(jià)鍵相互作用,二硫鍵,常規(guī)肽鍵（經(jīng)過(guò)化學(xué)法或酶法產(chǎn)生）,其她非肽共價(jià)鍵將較小肽段連在一起。8、簡(jiǎn)明描述試驗(yàn)設(shè)計(jì)方案:以大腸桿菌質(zhì)粒DNA為載體克隆一個(gè)目蛋白基因,并使之在大腸桿菌中進(jìn)行表示。9、測(cè)定蛋白分子量方法有哪些？（思索:設(shè)計(jì)一試驗(yàn)方案測(cè)定蛋白質(zhì)分子量）沉降法（超速離心法）、凝膠過(guò)濾法、SDS.測(cè)定總蛋白質(zhì)量方法。凱氏定氮法、雙縮脲法、Fol