稀土敏化熒光法檢測動物源食品中環(huán)丙沙星藥物殘留的研究與應用

答辯內(nèi)容第一章緒論第二章實驗部分第三章結(jié)論致謝第一章緒論氟喹諾酮類藥物(Fluoroquinolones，F(xiàn)Qs)是一類十分重要的廣譜抗菌藥物，是繼磺胺類藥物之后人類在合成抗菌藥方面最重要的突破。氟喹諾酮類藥物幾乎適用于臨床常見的多種細菌感染性疾病，很多己經(jīng)成為畜禽專用的抗菌藥物。其中本次實驗檢驗的環(huán)丙沙星(CPFX)是其中最常用的藥物之一。環(huán)丙沙星的結(jié)構(gòu)式對人體的毒性作用導致人類病原菌耐藥性的產(chǎn)生對環(huán)境的污染作用獸藥殘留的危害FQs殘留的主要檢測方法

高效液相色譜法1具有靈敏度高、特異性強、定量準確、穩(wěn)定性和重復性好等優(yōu)點，缺點是儀器昂貴，樣品的前處理較繁瑣耗時。

2普遍適用于抗菌藥物的殘留測定，其檢測限常高于藥物的最高殘留量，不夠靈敏，因此僅能作為殘留的一種篩選方法。微生物法3操作簡便、快速和樣品容量大的優(yōu)點,可使用正相或反相板,分辨率較高。缺點是樣品的前處理較繁瑣耗時。

高效薄層色譜法稀土敏化熒光法

鑭系敏化熒光：屬f→f禁戒躍遷的三價鑭系金屬如Tb3+對200-400nm紫外光的吸收相當弱，因而發(fā)光發(fā)光效率很低。但當有機配體與Tb3+離子形成配合物后，在高能射線激發(fā)下，配體吸收能量后有效的傳遞給Tb3+從而發(fā)射出鑭系離子的特征熒光。

鑭系敏化發(fā)光過程中的光的吸收和發(fā)射可簡單表示如下：

L+hν→L*（配體吸收激發(fā)光能）L*+Ln3+→L+Ln3+*（能量轉(zhuǎn)移）Ln3+*→Ln3++hν（發(fā)射Ln3+特征熒光）稀土敏化熒光法的優(yōu)點Stokes位移大，克服了因激發(fā)和發(fā)射光譜重疊帶來的誤差1發(fā)射光譜譜帶窄，特異性強

2熒光壽命長，比普通熒光物質(zhì)高幾個數(shù)量級

3熒光強度大，可提高測定的靈敏度

4熒光穩(wěn)定，受外界影響少。

5第二章實驗部分雞胗購自虹橋菜市場七氧化四鋱Tb4O7（優(yōu)級純）環(huán)丙沙星標準品C17H18FN3O3（分析純）Cary100紫外-可見分光光度計920穩(wěn)態(tài)熒光光譜儀970CRT型熒光儀試驗材料與儀器實驗部分熒光光譜測定Tb3+離子濃度對于實驗體系的影響繪制標準曲線計算回歸方程樣品的測定

結(jié)論pH值對于實驗體系的影響體系激發(fā)波長的選擇方法回收率的測定

體系激發(fā)波長的選擇271nm320nm1.0×10-5mol/L環(huán)丙沙星的紫外可見吸收光譜（Cary100紫外-可見分光光度計，美國瓦里安公司）熒光光譜測定490nm545nm588nm621nm435nm環(huán)丙沙星和環(huán)丙沙星-鋱離子配合物的熒光光譜（920穩(wěn)態(tài)熒光光譜儀，英國愛丁堡公司）CPFX：1.0×10-5mol/L；Tb3+：1.0×10-3mol/L；pH：6.0

pH值對于實驗體系的影響發(fā)射波長555nm下pH對CPFX－Tb3+配合物體系的影響（970CRT型熒光儀，上海三科儀器有限公司）CPFX：1.0×10-5mol/L；Tb3+：1.0×10-3mol/LTb3+濃度對于實驗體系的影響Tb3+濃度的影響（970CRT型熒光儀，上海三科儀器有限公司）CPFX：1.0×10-5mol/L；pH：6.4

標準曲線與回歸方程Tb3+：1.0×10-3mol/L；pH：6.4CPFX濃度在5.0×10-7mol/L～1.0×10-5mol/L范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。樣品的處理振蕩離心上清液樣品提取液清洗儀器振蕩離心樣品樣品提取液混勻靜置下清液待用正己烷上清液樣品的測定樣品-Tb3+熒光光譜（920穩(wěn)態(tài)熒光光譜儀，英國愛丁堡公司）Tb3+：1.0×10-3mol/L；pH：6.4方法回收率的測定

加入量（1×10-5mol/L）測定量（1×10-5mol/L）回收率（%）平均回收率（%）相對標準差（%）Added（1×10-5mol/L）Measured（1×10-5mol/L）Recover（%）AverageRecover（%）RSD2.001.73486.780.22.444.003.13078.26.004.93882.38.005.88073.5關(guān)于儀器的差異490nm545nm588nm621nm435nm445nm436nm555nm482nm—CPFX—CPFX—Tb3+CPFX（1.0×10-5mol/L）CPFX（1.0×10-5mol/L）—Tb3+（1.0×10-3mol/L）920穩(wěn)態(tài)熒光光譜儀英國愛丁堡公司970CRT型熒光儀上海三科儀器有限公司結(jié)論本文利用Tb3+離子與氟喹諾酮藥物形成配合物后產(chǎn)生的敏化熒光來檢測動物源食品中的環(huán)丙沙星含量，建立了Tb3+增敏熒光光度法檢測雞肉組織中的環(huán)丙沙星的方法。

本實驗樣品前處理簡單、快速，實驗過程操作方便、快捷、經(jīng)濟，可以滿足快速判斷CPFX的殘留量超標與否的要求，為CPFX藥物殘留分析提供了極為經(jīng)濟的快速篩選方法。三、致謝

本論文是在孫春燕副教授的悉心指導下完成的。導師扎實的理論基礎，嚴謹?shù)膶W風以及精益求精的科研精神都是我學習的榜樣。導師不僅在學習上給予我諄諄教誨，而且在生活的各個方面都給與了我無微不至的關(guān)懷和幫助。在此，謹向我的恩師孫春燕副教授致以最誠摯的感謝和祝福。

我還要感謝在整個實驗過程中給予我很多關(guān)心的盧靜老師，袁媛老師，葉海清老師，王海波老師，卜秀娟老師，李鳳芝老師等，感謝你們對我一直以來的的幫助和指導！謝謝！9、青少年是一個美好而又是一去不可再得的時期，是將來一切光明和幸福的開端。。4月-254月-25Saturday,April5,202510、人的志向通常和他們的能力成正比例。23:55:5723:55:5723:554/5/202511:55:57PM11、夫?qū)W須志也，才須學也，非學無以廣才，非志無以成學。4月-2523:55:5723:55Apr-2505-Apr-2512、越是無能的人，越喜歡挑剔別人的錯兒。23:55:5723:55:5723:55Saturday,April5,202513、志不立，天下無可成之事。4月-254月-2523:55:5723:55:57April5,202514、古之立大事者，不惟有超世之才，亦必有堅忍不拔之志。05四月202511:55:57下午23:55:574月-2515、會當凌絕頂，一覽眾山小。四月2511:55下午4月-2523:55April5,202516、