安圖TORCH抗體親和力檢測提綱抗體親和力定義TORCH抗體親和力檢測的意義TORCH抗體親和力檢測的現狀安圖TORCH抗體親和力檢測試劑盒2安圖TORCH抗體親和力檢測抗體親和力是整個抗體分子與抗原表位之間結合強度，即抗體的結合部位與相應抗原決定簇之間的非共價引力與斥力之和。抗體親和力（Avidity）的定義3安圖TORCH抗體親和力檢測抗體親和力成熟理論初次感染產生的抗體為低親和力抗體，隨著時間的推移，體內抗體逐漸成熟為高親和力的抗體，一般需要3-6個月時間。◆模板學說（Templatetheory）◆克隆選擇學說（Clonalselectiontheory）4安圖TORCH抗體親和力檢測模板學說（Templatetheory）免疫系統在按照抗原（模版）來制造更高親和力的抗體5安圖TORCH抗體親和力檢測B體細胞高頻突變BBBBYYYYYYYYYYBYYYYYYYYYY原發感染3~6個月克隆選擇學說（Clonalselectiontheory）免疫系統對高親和力抗體的篩選過程6安圖TORCH抗體親和力檢測TORCH抗體親和力檢測的意義胎兒出生缺陷的風險與原發感染/復發感染、感染發生的時間、孕周密切相關判斷原發感染或復發感染判斷原發感染發生的時間TORCH規范化檢測流程的重要環節7安圖TORCH抗體親和力檢測8安圖TORCH抗體親和力檢測對于巨細胞病毒IgM抗體陽性的樣本，需要結合IgG抗體親和力的結果進行分析。IgM抗體陽性，同時IgG抗體低親和力，有較高風險。9安圖TORCH抗體親和力檢測美國帕洛艾爾托醫療基金會弓形蟲確認實驗室，將弓形蟲IgG親和力抗體檢測列為確認方法之一，用于排除假陽性及非急性感染。10安圖TORCH抗體親和力檢測對IgM抗體陽性或可疑的樣本，進行IgG抗體親和力檢測很有價值，如果IgG抗體為低親和力，再進行羊水穿刺PCR檢測是合適的選擇。對生殖器皰疹患者的單純皰疹病毒IgG抗體親和力檢測可以區分原發和復發感染。11安圖TORCH抗體親和力檢測使用敏感方法檢測TORCHIgG/IgMIgG-IgM-IgG+IgM-IgG+IgM+IgG-IgM+孕期衛生教育無需進一步檢測讓患者3周后再檢測孕期≤20周孕期＞20周IgG親和力檢測IgG親和力檢測高親和力低親和力高親和力無需進一步檢測高度傳染性回顧性檢測前三個月樣本IgG-IgM-和IgG-IgM+IgG+IgM-IgG+IgM+低親和力IgGIgG+IgM+高親和力IgG高度傳染性復發低傳染性高度傳染性無需進一步檢測可進一步檢測母體病毒血癥評估：尿液PCR、血液PCR胎兒健康度評估：超聲、MRI侵入性檢測：羊膜穿刺、定量PCR超聲、MRI案例分析2MunroSC,etal.JClinmicrobiol,2005,43:4713-471813安圖TORCH抗體親和力檢測TORCH抗體親和力檢測現狀試劑盒檢測原理：解離劑法和抗原中和法，解離劑法是主流方法。試劑盒檢測方法：酶聯免疫法、自動化化學發光法，酶聯免疫法較多。國內，對TORCH親和力研究較少，僅有少量的文獻報道了IgG親和力檢測的臨床意義，在臨床上還沒有得以真正運用。國外，對TORCHIgG親和力強弱與感染時間的關系做了許多研究工作，雅培，索林和梅里埃等很多廠家的抗體親和力試劑盒都獲得了FDA或CE認證，用于TORCH感染的輔助診斷。巨細胞病毒和弓形蟲抗體親和力檢測應用普遍。各廠家試劑盒的檢測結果存在差異。14安圖TORCH抗體親和力檢測抗體親和力檢測方法通過解離劑將低親和力抗體解離掉。通過中和抗原將高親和力抗體中和掉。15安圖TORCH抗體親和力檢測國內獲得批準文號的產品及方法廠家及項目名稱安圖DiaSorinRocheAbbottBiomerieuxCMV-IgGAVIELISA化學發光電化學發光化學發光ELISA熒光RV-IgGAVIELISA////TOX-IgGAVIELISA化學發光電化學發光化學發光ELISA熒光HSV-1IgGELISA////HSV-2IgGELISA//2012年以后批準上市16安圖TORCH抗體親和力檢測國外批準上市的主要廠家及方法17安圖TORCH抗體親和力檢測巨細胞病毒親和力試劑盒檢測結果比較18安圖TORCH抗體親和力檢測安圖標桿Radim、Euroimmun與臨床的符合率優于其他廠家，安圖產品研發以Radim為參比試劑盒。19安圖TORCH抗體親和力檢測弓形蟲親和力試劑盒檢測結果比較各廠家檢測結果差異不大低親和力結果可能不是急性感染高親和力結果可以排除急性感染20安圖TORCH抗體親和力檢測第一個國產TORCH五項抗體親和力檢測試劑盒（2013年獲得批準文號）國家十二五規劃863課題項目之一產品設計兼顧IgG檢測靈敏度和高值樣本OD值不超限產品原理：解離劑法產品方法：ELISA樣本稀釋：1/100孔外稀釋反應模式：30分鐘-10分鐘-30分鐘-10分鐘加樣量：稀釋后樣本、對照緩沖液、解離緩沖液、酶結合物均100ul/孔。波長設置：450/620nm雙波長讀數，如果樣本OD值>3.0，用405/620nm雙波長讀數。結果計算：親和力指數=解離緩沖液孔OD值/對照緩沖液孔OD值×100%安圖TORCH抗體親和力檢測試劑盒21安圖TORCH抗體親和力檢測123456789101112

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BC○QH○S4

CD○QH○S4

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H加樣模式22安圖TORCH抗體親和力檢測BIOMEX血清轉化盤48份樣本的親和力與感染時間的關系BIOMEX48份血清轉化盤的感染時間小于80天，其中33份樣本為IgG陽性，均為低親和力，靈敏度為100%。RV

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轉

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盤23安圖TORCH抗體親和力檢測圖1：安圖試劑盒CMV-IgG抗體親和力水平隨感染時間的變化圖2：AbbottATCHIT試劑盒CMV-IgG抗體親和力水平隨感染時間的變化CMV血

清

轉

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盤安圖試劑盒在感染100天后檢測基本為高親和力AbbottATCHIT試劑盒在感染后120天仍為低親和力。24安圖TORCH抗體親和力檢測IgG+IgM-既往感染樣本評價項目名稱總樣本數量高親和力灰區低親和力特異性CMV-AVI744708171997.4%RV-AVI97896801098.98%TOX-AVI2282149597.7%HSV1-AVI5875766599.1%HSV2-AVI3883765798.2%25安圖TORCH抗體親和力檢測共同推進TORCH檢測的規范化26安圖TORCH抗體親和力檢測安圖TORCH抗體親和力檢測提綱抗體親和力定義TORCH抗體親和力檢測的意義TORCH抗體親和力檢測的現狀安圖TORCH抗體親和力檢測試劑盒28安圖TORCH抗體親和力檢測抗體親和力是整個抗體分子與抗原表位之間結合強度，即抗體的結合部位與相應抗原決定簇之間的非共價引力與斥力之和。抗體親和力（Avidity）的定義29安圖TORCH抗體親和力檢測抗體親和力成熟理論初次感染產生的抗體為低親和力抗體，隨著時間的推移，體內抗體逐漸成熟為高親和力的抗體，一般需要3-6個月時間。◆模板學說（Templatetheory）◆克隆選擇學說（Clonalselectiontheory）30安圖TORCH抗體親和力檢測模板學說（Templatetheory）免疫系統在按照抗原（模版）來制造更高親和力的抗體31安圖TORCH抗體親和力檢測B體細胞高頻突變BBBBYYYYYYYYYYBYYYYYYYYYY原發感染3~6個月克隆選擇學說（Clonalselectiontheory）免疫系統對高親和力抗體的篩選過程32安圖TORCH抗體親和力檢測TORCH抗體親和力檢測的意義胎兒出生缺陷的風險與原發感染/復發感染、感染發生的時間、孕周密切相關判斷原發感染或復發感染判斷原發感染發生的時間TORCH規范化檢測流程的重要環節33安圖TORCH抗體親和力檢測34安圖TORCH抗體親和力檢測對于巨細胞病毒IgM抗體陽性的樣本，需要結合IgG抗體親和力的結果進行分析。IgM抗體陽性，同時IgG抗體低親和力，有較高風險。35安圖TORCH抗體親和力檢測美國帕洛艾爾托醫療基金會弓形蟲確認實驗室，將弓形蟲IgG親和力抗體檢測列為確認方法之一，用于排除假陽性及非急性感染。36安圖TORCH抗體親和力檢測對IgM抗體陽性或可疑的樣本，進行IgG抗體親和力檢測很有價值，如果IgG抗體為低親和力，再進行羊水穿刺PCR檢測是合適的選擇。對生殖器皰疹患者的單純皰疹病毒IgG抗體親和力檢測可以區分原發和復發感染。37安圖TORCH抗體親和力檢測使用敏感方法檢測TORCHIgG/IgMIgG-IgM-IgG+IgM-IgG+IgM+IgG-IgM+孕期衛生教育無需進一步檢測讓患者3周后再檢測孕期≤20周孕期＞20周IgG親和力檢測IgG親和力檢測高親和力低親和力高親和力無需進一步檢測高度傳染性回顧性檢測前三個月樣本IgG-IgM-和IgG-IgM+IgG+IgM-IgG+IgM+低親和力IgGIgG+IgM+高親和力IgG高度傳染性復發低傳染性高度傳染性無需進一步檢測可進一步檢測母體病毒血癥評估：尿液PCR、血液PCR胎兒健康度評估：超聲、MRI侵入性檢測：羊膜穿刺、定量PCR超聲、MRI案例分析2MunroSC,etal.JClinmicrobiol,2005,43:4713-471839安圖TORCH抗體親和力檢測TORCH抗體親和力檢測現狀試劑盒檢測原理：解離劑法和抗原中和法，解離劑法是主流方法。試劑盒檢測方法：酶聯免疫法、自動化化學發光法，酶聯免疫法較多。國內，對TORCH親和力研究較少，僅有少量的文獻報道了IgG親和力檢測的臨床意義，在臨床上還沒有得以真正運用。國外，對TORCHIgG親和力強弱與感染時間的關系做了許多研究工作，雅培，索林和梅里埃等很多廠家的抗體親和力試劑盒都獲得了FDA或CE認證，用于TORCH感染的輔助診斷。巨細胞病毒和弓形蟲抗體親和力檢測應用普遍。各廠家試劑盒的檢測結果存在差異。40安圖TORCH抗體親和力檢測抗體親和力檢測方法通過解離劑將低親和力抗體解離掉。通過中和抗原將高親和力抗體中和掉。41安圖TORCH抗體親和力檢測國內獲得批準文號的產品及方法廠家及項目名稱安圖DiaSorinRocheAbbottBiomerieuxCMV-IgGAVIELISA化學發光電化學發光化學發光ELISA熒光RV-IgGAVIELISA////TOX-IgGAVIELISA化學發光電化學發光化學發光ELISA熒光HSV-1IgGELISA////HSV-2IgGELISA//2012年以后批準上市42安圖TORCH抗體親和力檢測國外批準上市的主要廠家及方法43安圖TORCH抗體親和力檢測巨細胞病毒親和力試劑盒檢測結果比較44安圖TORCH抗體親和力檢測安圖標桿Radim、Euroimmun與臨床的符合率優于其他廠家，安圖產品研發以Radim為參比試劑盒。45安圖TORCH抗體親和力檢測弓形蟲親和力試劑盒檢測結果比較各廠家檢測結果差異不大低親和力結果可能不是急性感染高親和力結果可以排除急性感染46安圖TORCH抗體親和力檢測第一個國產TORCH五項抗體親和力檢測試劑盒（2013年獲得批準文號）國家十二五規劃863課題項目之一產品設計兼顧IgG檢測靈敏度和高值樣本OD值不超限產品原理：解離劑法產品方法：ELISA樣本稀釋：1/100孔外稀釋反應模式：30分鐘-10分鐘-30分鐘-10分鐘加樣量：稀釋后樣本、對照緩沖液、解離緩沖液、酶結合物均100ul/孔。波長設置：450/620nm雙波長讀數，如果樣本OD值>3.0，用405/620nm雙波長讀數。結果計算：親和力指數=解離緩沖液孔OD值/對照緩沖液孔OD值×100%安圖TORCH抗體親和力檢測試劑盒47安圖TORCH抗體親和力檢測123456789101112

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