骨髓細胞形態(tài)學檢驗

第二臨床醫(yī)學院

陳學東臨床血液學檢測骨髓檢查診斷技術

骨髓活體組織檢查血細胞免疫標記技術血細胞染色體檢驗分子生物學技術造血干、祖細胞培養(yǎng)骨髓細胞形態(tài)學檢查急性白血病分型的歷史沿革FAB分型1976年法國(French)、美國(Amerian)和英國(Britain)等三國血細胞形態(tài)學專家討論、制訂了關于急性白血病的分型診斷標準，簡稱“FAB”分型。將急性非淋巴細胞白血病分成M1-M7共七個亞型，而急性淋巴細胞白血病分成L1-L3三型。MIC分型1986年在FAB分型基礎上,又提出了形態(tài)學(Morphology)、免疫學(Immunology,)和細胞遺傳學(Cytogenetic)分型MICM分型2001年,WHO在MIC分型基礎上又建立了MICM分型,即形態(tài)學、免疫學、細胞遺傳學和分子生物學分型相結合對白血病進行分型。y骨髓檢測技術的臨床用途免疫學形態(tài)學遺傳學分子學白血病診斷分型、治療方案選擇、預后評價及復發(fā)突變的指標伴有染色體或基因重現(xiàn)性異常的AMLMICM白血病診斷分型、治療方案選擇、預后評價、排除或鑒別診斷良惡性疾病鑒別，白血病分型，尤其是淋巴系統(tǒng)疾病，微小殘留白血病利用分子診斷技術對血液病基因進行檢測，用于白血病診斷分型、治療方案選擇、預后評價及復發(fā)突變的指標骨髓檢查主要內容骨髓細胞學檢查-細胞形態(tài)學-細胞化學染色-免疫表型分析-染色體分析-基因分析骨髓病理學檢查-組織結構-免疫組織化學染色WhytodoHowtodoHowtoapply骨髓細胞學檢查步驟

①確診某些造血和非造血系統(tǒng)疾病白血病，多發(fā)性骨髓瘤，霍奇金病，惡性組織細胞增多癥，骨髓轉移瘤，增生性貧血，戈謝病，尼曼-匹克病，瘧疾、黑熱病等

②輔助診斷某些造血系統(tǒng)疾病溶血性貧血，血小板減少性紫癜，骨髓增殖性疾病

③鑒別診斷

不明原因發(fā)熱,肝和脾、淋巴結腫大、骨痛、黃疸,紫癜、貧血、白細胞增高、消瘦等；外周血異形淋巴細胞，類白血病反應，嗜酸細胞增多癥④血液系統(tǒng)疾病的定期復查、化療后的療效觀察骨髓細胞學檢查步驟Whytodo骨髓細胞學檢查步驟Howtodo骨髓細胞檢查骨髓穿刺骨髓涂片和染色骨髓和外周血涂片的顯微鏡觀察組織細胞化學檢查綜合分析填寫骨髓細胞學報告骨髓穿刺適應癥和禁忌癥①出現(xiàn)不明原因的外周血細胞數(shù)量及成分異常②出現(xiàn)不明原因的發(fā)熱,肝腫大,脾腫大,淋巴結腫大③出現(xiàn)不明原因骨痛,骨質破壞,腎功能異常,黃疸,紫癜,

血沉明顯增加④血液系統(tǒng)疾病定期復查,化療后的療效觀察⑤骨髓活檢,微生物培養(yǎng),寄生蟲檢查、微量殘留白血病等

骨髓穿刺禁忌癥①有出血傾向或凝血時間明顯延長者不宜做,嚴重血友病患者禁忌②晚期妊娠的婦女應慎做③穿刺部位有異常，如炎癥、畸形，應避開。

骨髓穿刺術

bonemarrowaspirate部位：胸骨，髂后上棘,髂前上棘；3歲以下可選脛骨頭內側（膝關節(jié)下3cm)；此外根據(jù)病情需要，選擇定位穿刺胸骨穿刺髂后上棘穿刺骨髓穿刺術常規(guī)消毒，2%碘酒，75%乙醇，無菌操作骨髓穿刺術局部麻醉，2%的利多卡因1-2ml，皮內注射后垂直進針直達骨膜注射。骨髓穿刺術按確定好的部位，垂直進骨髓穿刺針（胸骨穿刺針和胸骨面呈45度角）骨髓穿刺術抽吸骨髓液0.2ml以內，制備骨髓片（熟練快速，骨髓易凝），8-12張同時制備外周血涂片3-4張骨髓穿刺的注意事項心理疏導：

做好講解，消除恐懼、緊張心理，取得配合防止感染:

術前最好洗澡、術中嚴格無菌操作、術后3日內勿洗澡。穿刺時機:

治療前進行，死亡病例在0.5小時內進行。骨髓涂片制備情況涂片制備良好涂片制備良好涂片制備不佳涂片制備差骨髓小粒骨髓涂片染色涂片染色：瑞特－姬姆薩染色（Wright-Gyms)偏酸偏堿骨髓細胞學診斷注意事項必須結合病史：注意年齡、性別、癥狀、體征、治療經(jīng)過、用藥史。必須結合末梢血象：對骨髓中不易辨認的細胞做出正確判斷。對某些局灶性病變可能需多次多部位穿刺如：惡組，再障、骨髓轉移癌，骨髓瘤等骨髓細胞學診斷注意事項某些疾病須結合病理學檢查如：骨髓纖維化，某些白血病，骨髓增生異常綜合癥，再生障礙性貧血、淋巴瘤等干抽：常見于骨髓纖維化、再生障礙性貧血、M7型白血病、毛細胞白血病、真紅、極度增生的白血病骨髓細胞學診斷注意事項細胞形態(tài)學的多樣性，需胞體、胞核、胞漿全面觀察，注意和周圍細胞比較注意涂片制作、染色、觀察部位對細胞形態(tài)的影響，全片細胞觀察和比較對于個別鑒于兩系統(tǒng)間的細胞，難以判斷，按大數(shù)歸類法歸類。骨髓細胞學診斷注意事項對于個別鑒于兩階段間的細胞，難以判斷，一般按成熟方向歸類對于鑒于兩系統(tǒng)間的細胞群，難以判斷，注意伴隨出現(xiàn)更成熟的細胞，按推測法歸類或結合組化結果分類見到難以識別的細胞，可歸入分類不明細胞。最好尋求幫助如組化、集體讀片、會診、結合其他診斷方法等骨髓涂片鏡下觀察1、判斷涂片制作、染色、取材情況2、判斷骨髓增生程度（有核細胞/紅細胞）3、計數(shù)并分類全片巨核細胞正常成人在1.5cm×３cm,可見巨核細胞7~35個4、觀察體積較大或成堆分布的異常細胞如：異常組織細胞，轉移癌細胞，Gauche細胞等BACK低倍鏡觀察×10好的涂片紅細胞分開排列好的染色淋巴細胞分辨紫紅色核和淡蘭色漿粒細胞能數(shù)清核分葉數(shù),顆粒清晰BACK涂片和染色判斷標準增生低下增生活躍增生明顯活躍增生極度活躍BACK白血病再生障礙性貧血增生程度判斷方法1增生程度判斷方法2分級有核細胞數(shù)/HP常見疾病增生極度活躍>100各種白血病等增生明顯活躍50-100各種白血病增生性貧血等增生活躍20-50健康人、貧血、細菌感染等增生減低10-20造血功能低下，低增生性白血病

增生極度減低<10典型的再生障礙性

低倍鏡下瀏覽路徑低倍鏡下計數(shù)巨核細胞，高倍鏡下分類細胞back低倍鏡下×10異常細胞觀察戈謝細胞淋巴瘤寄生蟲馬爾尼菲青霉菌利什曼原蟲骨髓中的癌細胞肝癌細胞肺癌細胞胃癌細胞神經(jīng)母細胞瘤病例骨髓涂片鏡下觀察

1.有核細胞計數(shù)及分類

a.骨髓片200-500個有核細胞；對于增生極度減低的可以分類100個，甚至50個；血涂片100個有核細胞。

b.計算各系列細胞極其不同發(fā)育階段細胞分別占有核細胞百分比

c.計算M：E比值

2.觀察各系統(tǒng)細胞的形態(tài)特點：成熟情況,有無異常細胞

成熟情況（胞體、染色質、核仁、顆粒、胞漿顏色、）3.觀察有無特殊細胞、異常細胞及寄生蟲油鏡觀察×100倍骨髓粒細胞系統(tǒng)骨髓像粒細胞系統(tǒng)約占有核細胞的40%-60%；其中原粒細胞＜2%，早幼粒細胞＜5%，中幼粒細胞＜8%、晚幼粒細胞＜10%，，桿狀核約20%，分葉核約12%，成熟粒細胞中桿狀核多于分葉核。成熟嗜酸性粒細胞小于5%，成熟嗜堿性粒細胞小于1%.

細胞形態(tài)未見異常。骨髓紅細胞系統(tǒng)骨髓像紅細胞系統(tǒng)幼紅細胞約占有核細胞的20-25%，其中原紅細胞﹤1%，早幼紅細胞﹤5%，以中、晚幼紅細胞為主，約各占10%.

細胞形態(tài)未見異常。骨髓淋巴、單核、漿、系統(tǒng)骨髓像淋巴細胞系統(tǒng)約占20-25%，小兒偏高，可達40%，原始淋巴和幼稚淋巴細胞極罕見，多為成熟淋巴細胞。單核細胞系統(tǒng)一般均小于4%，均系成熟階段的細胞。漿細胞系統(tǒng)一般均小于2%，均系成熟階段的細胞。巨核細胞系統(tǒng)骨髓像巨核細胞系統(tǒng)通常在1.5cm×3cm的片膜上（全片），可見巨核細胞7～35個，

原巨核細胞不見或罕見，幼巨核細胞0～5%，顆粒巨核細胞10%～27%，產(chǎn)生血小板巨核細胞44%～60%，裸核8%～30%。血小板易見、形態(tài)正常，散在或成堆存在正常骨髓其他類細胞可見內皮細胞、成纖維細胞等偶見組織細胞、成骨細胞、吞噬細胞、退化細胞。分裂相少見不見寄生蟲不見異常細胞（如癌細胞）骨髓報告格式病人信息：姓名、性別、科室、床號、采集日期、采集部位、臨床診斷等骨髓片和血片的分類數(shù)據(jù)骨髓片和外周血片的描述性報告涂片的取材、制備、染色評價骨髓增生程度的評價、粒/紅各系統(tǒng)各階段細胞的比例、形態(tài)，尤其是具有診斷意義的細胞形態(tài)描述細胞化學染色結果診斷意見和建議報告人簽名和報告日期結果計算1.計算各系統(tǒng)總百分比及各階段細胞百分比；2.粒/紅比值（M/E）正常人M/E2～4：１粒、紅比值正常

可見于正常骨髓象、原發(fā)性血小板減少性紫癜、粒系統(tǒng)和紅細胞系統(tǒng)同時減少(如再生障礙性貧血)、多發(fā)性骨髓瘤粒、紅比值增高

見于幼稚紅細胞減少(如單純紅細胞性再生障礙性貧血)、急性化膿性細菌感染引起的粒細胞增多、類白血病樣反應、粒細胞系統(tǒng)白血病等。粒、紅比值降低或比例倒置

見于粒細胞減少(如粒細胞缺乏癥)、各種增生性貧血(如缺鐵性貧血、失血后貧血、溶血性貧血等)、巨幼紅細胞性貧血(如惡性貧血、營養(yǎng)性巨細胞性貧血、胃切除后巨幼紅細胞性貧血等)。3.計算各階段巨核細胞百分比或各階段巨核細胞的個數(shù)；各系統(tǒng)各階段細胞的比例粒系細胞：約占總有核細胞的40%~60%，其中原粒<2%,早幼粒<5%，中幼粒細胞+晚幼粒細胞<15%，桿狀核粒細胞百分率高于分葉核粒細胞，嗜酸粒細胞<5%，嗜堿粒細胞<1%。紅系，占20%，其中原紅細胞<1%,早幼紅細胞<5%，中幼和晚幼紅細胞各占10%。淋巴細胞：約占20%，小兒可達40%。單核細胞<4%，漿細胞2%。血片觀察內容白細胞分類計數(shù)成熟紅細胞有無異常略估血小板形態(tài)與數(shù)量注意有無寄生蟲（如瘧原蟲）骨髓細胞學檢查報告單1.描述骨髓片：

取材增生程度粒/紅比值各階段細胞比例及巨核細胞數(shù)2.描述血片：

各系統(tǒng)細胞特點3.細胞化學染色4.診斷意見骨髓細胞檢查-診斷意見診斷意見：肯定性診斷：白血病、巨幼細胞貧血、、骨髓轉移癌、寄生蟲符合性診斷：骨髓形態(tài)學可以解釋臨床表現(xiàn)，增生性貧血、ITP，骨髓增殖性疾病、粒細胞缺乏、MDS排除性診斷：血小板減少癥。判定是原發(fā)性血小板較少還是繼發(fā)性。描述性診斷：骨髓象有改變，但對臨床提不出支持或肯定意見。應做進一步檢查。血片檢查的重要性

1.不同疾病時，骨髓象相似而血象有區(qū)別（漿白和MM）

2.不同疾病時，骨髓象有區(qū)別而血象相似（骨纖和CML）

3.同一患者骨髓象變化不顯著，血象有異常（傳單）

4.同一患者骨髓象異常，血象無變化（MM）

5.骨髓象易辨認，血象難辨認（類白血病）病例分析

1病例分析

1.該患應考慮為血液系統(tǒng)疾病根據(jù)是：

（1）臨床病史、癥狀（面色蒼白、心慌、頭暈，下肢有出血點，偶有鼻血，低熱）

（2）體格檢查（T37.50C，輕度貧血貌，胸骨壓痛陽性）

2.為了明確診斷，應做以下實驗室檢查：

（1）血常規(guī)檢查（RBC、WBC、PLT)

（2）骨髓細胞學檢查（骨髓穿刺檢查）

（3）肝、腎功能檢查（以除外肝、腎疾病）血常規(guī)：WBC8×109/L

RBC3.90×1012/L，HGB80g/L，PLT32×109/L肝腎功能正常骨髓細胞學檢查（如下所示）組織化學染色及意義診斷主觀性客觀性組織化學染色意義輔助判斷急性白血病的細胞類型輔助血液系統(tǒng)疾病的診斷和鑒別診斷細胞化學染色檢驗細胞化學染色方法

酶脂類糖原鐵固定

蒸汽固定—甲醛（40%），5-10min液體固定---甲醛、乙醇、甲醇、丙酮；細胞化學染色檢驗有色沉淀反應偶氮偶聯(lián)法---NAP、SE、NSE、ACP聯(lián)苯胺法-----POX普魯士蘭反應--Fe雪夫反應---PAS金屬沉淀法---NAP-鈣鈷法細胞化學染色檢驗復染使各種細胞有明顯的對比度中性紅---鐵染色甲基綠---糖原染色核固紅---NAP、鐵染色蘇木素---POX、NAP甲綠----丁酸、雙染細胞化學染色檢驗常見細胞化學染色鐵染色(Fe)中性粒細胞堿性磷酸酶（NAP)過氧化物酶染色(POX)過碘酸－雪夫染色（PAS)氯乙酸AS-D萘酯酶染色（NAS-DCE)α-醋酸萘酚酯酶(α-NAE）α-丁酸萘酚酯酶(α-NBE）酸性磷酸酶（acidphoshataseACP)常用骨髓酶學染色（一）

細胞外鐵存在于骨髓小粒中骨髓儲存鐵細胞內鐵存在于中，晚幼紅細胞及紅細胞中，為骨髓內可利用的鐵

鐵染色一、鐵染色原理：

4Fe3++3K4「Fe(CN)6」酸性

含鐵物質亞鐵氰化鉀

Fe4「Fe(CN)6」3+12K+

亞鐵氰化鐵細胞化學染色檢驗結果判斷細胞化學染色檢驗細胞外鐵：根據(jù)存在于骨髓小粒的中的藍色顆粒多少外鐵：-、+、++、+++、++++參考區(qū)間：約2/3人+～

++；約1/3人(+)細胞內鐵：存在于有核紅和成熟紅細胞內的鐵；計數(shù)100個中、晚幼紅細胞中鐵粒幼紅細胞百分比

鐵粒幼紅細胞陽性率:19%～44%無環(huán)形鐵幼細胞及鐵粒紅細胞細胞外鐵染色鐵粒紅細胞（Siderocyte）:成熟紅細胞中出現(xiàn)鐵顆粒稱為鐵粒紅細胞。鐵粒幼紅細胞（Sideroblast）:胞質中出現(xiàn)藍色鐵顆粒的幼紅細胞。環(huán)形鐵粒幼紅細胞（Ringedsideroblast）：幼紅細胞胞質內藍色顆粒多于6個，圍繞核周1/2以上的鐵粒幼紅細胞。環(huán)形鐵粒幼細胞細胞內鐵鐵染色臨床意義缺鐵性貧血診斷和療效：外鐵陰性，內鐵明顯下降或0；鐵劑治療后可觀察療效變化非缺鐵性貧血：溶性、巨幼貧、AA、紅白血病、多次輸血后等，內鐵和外鐵正常或增加感染、肝硬化、腎性貧血、血色病：外鐵明顯增加，內鐵減少骨髓增生異常綜合征（MDS）：外鐵常增加，環(huán)形鐵粒幼﹥15%增生性貧血中性粒細胞堿性磷酸酶染色

（neutrophilalkalinephosphataseNAP）

（偶氮偶聯(lián)法）

[原理]

磷酸萘酚鈉NAP萘酚+重氮鹽偶聯(lián)

PH9.6

（亮紅色沉著于胞漿中）

[結果]

NAP主要存在于成熟中性粒細胞，其他血細胞均呈陰性反應。細胞化學染色檢驗常用骨髓酶學染色（一）中性粒細胞堿性磷酸酶（NAP)中性粒細胞堿性磷酸酶：存在成熟中性粒細胞（分葉和桿狀），陽性為紅色顆粒，反應強度分1+，2+，3+，4+，圖為3+。NAP陽性率：100個中性成熟粒細胞中陽性細胞總數(shù)NAP積分：100個細胞中陽性細胞的分數(shù)總和中性粒細胞堿性磷酸酶染色（NAP）+++++++++++++-嗜酸粒細胞-NAP臨床意義[參考值]

正常：陽性率：40～89%積分：14-113分[臨床意義]NAP活性的變化常有助于某些疾病的診斷和鑒別診斷增加：生理性增高:應急狀態(tài)、新生兒、妊娠、經(jīng)前期細菌性感染（類白血病反應）急性淋巴細胞白血病、慢性淋巴細胞白血病、AA、貧血、骨髓增值性疾病、惡性淋巴瘤、骨髓轉移癌、慢粒急變下降：慢性粒細胞白血病慢性期、急性粒細胞白血病、陣發(fā)性睡眠血紅蛋白尿、MDS、惡性組織細胞白血病類白血病反應慢粒白血病反應細胞化學染色檢驗NAP積分>200分NAP積分0分過氧化物酶染色(Peroxidase,POX)

[原理]

聯(lián)苯胺法

細胞內H2O2

POX聯(lián)苯胺[O]聯(lián)苯胺藍+亞硝基氰化鈉棕黑色顆粒(定位于胞漿內)

細胞化學染色檢驗過氧化物酶（POX）POX（+）：原粒細胞Ⅱ型、早幼粒細胞、中性分葉核細胞、嗜酸粒細胞、幼稚和成熟單核細胞POX(-)：原粒細胞Ⅰ型、原單核細胞、幼紅細胞、淋巴細胞、巨核細胞、嗜堿性粒細胞常用骨髓酶學染色（二)陰性：胞漿無顆粒弱陽性：細小顆粒，強陽性：粗大密顆粒。

陽性結果為棕黑色

過氧化物酶POXPOX染色臨床意義POX染色時輔助判斷急性白血病細胞類型的首選、最重要的細胞化學染色。POX(+)AML(M1-M5),M6POX(-)AML(M0,M7),M5,M6

ALLFAB分型規(guī)定急性淋巴細胞白血病POX的陽性率<3%.如果POX>3%即為急性髓性細胞白血病。POX（+）可排除ALL,但POX（-）并不能排除急性髓系白血病或急性單核細胞白血病。三、糖原染色（過碘酸-雪夫反應）

(periodicacid–Schiff,PAS)【原理】氧化

過碘酸+細胞內的含乙二醇基的糖原雙醛基+無色品紅（雪夫堿）紫紅色沉淀細胞化學染色檢驗涂片于95％乙醇固定10min（DW沖洗）高碘酸氧化15～20min，沖洗，待干雪夫染液染色30～60min亞硫酸溶液沖洗3次，每次2min水洗，待干，鏡檢甲綠復染10～20min操作步驟注意事項1.雪夫氏試劑變紅無效2.結果觀察要及時，長期保存會褪色PAS糖原染色

糖原染色（PAS)過碘酸-雪夫反應胞質中出現(xiàn)紅色者為陽性反應可呈顆粒狀、小塊狀或彌漫狀粒系:原粒（-）-分葉核呈陽性紅系:有核紅和成熟紅呈陰性單核系:原單呈陰性、其他陰性或陽性淋巴系：少數(shù)呈陽性，約占20%巨核系：巨核和血小板呈陽性其他細胞：巨噬細胞呈陽性、少數(shù)漿細胞呈陽性PAS染色臨床意義ALL呈陽性反應顆粒狀紅白血病強陽性急性單核細胞白血病PAS反應對三種白血病類型的鑒別粗顆粒或塊狀細顆粒彌散狀，邊緣粗顆粒PAS染色的臨床意義急性白血病鑒別急性淋巴細胞白血病、淋巴瘤細胞白血病：PAS反應呈強陽性，呈粗大顆粒狀或大塊狀。慢性淋巴細胞白血病PAS反應呈陽性，顆粒粗大急性原粒細胞白血病為陰性或弱陽性，陽性反應物為細顆粒或勻紅色。急性單核細胞白血病可呈彌漫性、細顆粒狀PAS反應弱陽性。幼紅細胞增生性疾病鑒別：急性紅白血病（M6）PAS反應陽性反應物質為粗大顆粒狀；骨髓增生異常綜合征（MDS）的幼紅細胞PAS反應可呈陽性；巨幼細胞性貧血、溶血性貧血幼紅細胞的PAS反應為陰性戈謝細胞強陽性，尼曼-匹克細胞弱陽性、淋巴瘤細胞陽性、骨髓轉移的腺癌細胞陽性（四）酯酶染色esteraseA氯乙酸AS-D萘酚酯酶（NAS-DCE）tBα-醋酸萘酚酯酶（α-NAE）醋酸萘酚酯酶（NAS-DAE）CDα-丁酸萘酚酯酶（α-NBE）特異性酯酶

粒細胞酯酶中性非特異性

酯酶中性非特異性酯酶

單核細胞酯酶

非特異性酯酶酯酶染色EsteraseStaining方法

偶氮偶聯(lián)法1特異性酯酶染色

氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色（SpecificEsteraseStaining）2.非特異性酯酶染色

Non-SpecificEsteraseStaining）а-醋酸萘酚酯酶染色（a-NAE)а-丁酸萘酚酯酶染色（a-

NBE）

醋酸AS-D萘酚酯酶染色

（NAS-DAE）（NAS-DCE）分類

（一）氯乙酸AS-D萘酯酶染色

naphytholAS-Dchloroacetate

esterase,NAS-DCE原理：

氯醋酸AS-D萘酚AS-DNCEAS-D萘酚

H2O

不溶性紅色沉淀+堅牢醬紫

細胞化學染色檢驗氯乙酸AS-D萘酯酶染色(NAS-DCE)氯乙酸AS-D萘酯酶染色（NAS-DCE)胞質中出現(xiàn)紅色沉淀為陽性反應。僅見于粒細胞系統(tǒng)（原粒-成熟粒細胞）嗜酸細胞和嗜堿細胞：陰性單核細胞：多陰性淋巴細胞：陰性其他：陰性特異性酯酶原粒細胞和早幼粒細胞強陽性急性單核細胞白血病及急性淋巴細胞白血病均呈陰性NAS-DCE染色臨床意義（二）α-醋酸萘酚酯酶(α-NAE)

(α-naphythyolacetateesterase）α-醋酸萘酚α

–NAEα-萘酚+重氮鹽（堅牢藍B）

棕黑或灰黑色（胞漿中）細胞化學染色檢驗α-醋酸萘酚酯酶(α-NAE)

α-醋酸萘酚酯酶(α-NAE)

α-NAE染色：為非特異性酯酶，此酶主要存在于單核細胞中、粒細胞、淋巴細胞。

2張相同標本同時固定后，配制2缸孵育液，其中一缸內加入NaF（抑制酶活性），然后將2張標本分別放入2個缸內各自染色。最后分別進行積分，求出抑制率。（﹥50％）鑒別白血病類型需做:氟化鈉抑制試驗（NaFInhibittest

）NaF抑制率＝抑制前陽性率或積分抑制后陽性率或積分抑制前陽性率或積分×100％-細胞化學染色檢驗α-丁酸萘酚酯酶染色(α-NBE)α-NBE主要存在于單核細胞中，陽性可被NaF抑制。粒系:各階段細胞均陰性酯酶雙染色α-醋酸萘酚酯酶+氯乙酸AS-D萘酚酯酶α-丁酸萘酚酯酶+氯乙酸AS-D萘酚酯酶臨床多用：ANLL-M4兩種酯酶在同一張片子上染色五、酸性磷酸酶（acidphoshataseACP)原理：硫化鉛法和偶氮偶聯(lián)法結果：胞質內出現(xiàn)棕黑色顆粒者為陽性（硫化鉛）

胞質內出現(xiàn)亮紅色顆粒者為陽性（偶氮偶聯(lián)法）

細胞化學染色檢驗結果

胞質中有棕黃或棕黑色顆粒狀或片狀沉淀為陽性。臨床意義鑒別T淋巴細胞和B淋巴細胞，T淋巴細胞呈陽性反應，而B淋巴細胞為陰性反應

鑒別多毛細胞白血病（強陽性），不被L-酒石酸所抑制細胞化學染色檢驗臨床意義慢性淋巴細胞白血病和惡性淋巴瘤呈陽性，可被被L-酒石酸所抑制鑒別戈謝細胞（+）和尼曼-匹克細胞（-）組織化學染色鑒別

三種急性白血病細胞化學染色鑒別

急淋急粒急單

POX（－）

（＋~+++）（-~+/-）

PAS粗顆粒（－）~（＋）小顆粒

NAS-DAE（－）

－/+不被NaF抑制＋被NaF抑制

AS-DCE（－）（＋）（+/-）

NAP積分升高積分減低常見急性白血病的細胞化學染色結果POX染色-+或-～+++～++++--++-或+類型ALLM1、M2M3M4M5PAS染色粗顆粒狀彌散狀彌散狀細顆粒狀細顆粒狀--++NAS-DCE-+或-+++～++++-，個別+a-NAS+DAE-或+不抑制-或+不抑制+++～+++不抑制--～+++部分抑制+～+++抑制本節(jié)主要內容

常見的細胞化學染色及臨床應用（Fe、ANP、POX、PAS、NEC、ACP、）

骨髓細胞學檢查

分析這些染色結果1.POX強陽性，α-NAE弱陽性，不被NaF抑制應該是：A粒細胞？

B單核細胞？

C淋巴細胞？2.為了鑒別慢性粒細胞白血病（CML）和類白血病反應,下列首選實驗是：

1）

SB染色

2）

PAS染色

3）

NAP積分

4）ACP染色

5）POX染色

分析這些染色結果病例分析

1某男患，24歲，農(nóng)民。

主訴：面色蒼白，