生物制藥工藝及質量控制測試卷姓名_________________________地址_______________________________學號______________________-------------------------------密-------------------------封----------------------------線--------------------------1.請首先在試卷的標封處填寫您的姓名，身份證號和地址名稱。2.請仔細閱讀各種題目，在規定的位置填寫您的答案。一、選擇題1.生物制藥工藝流程中，以下哪個步驟不屬于上游工藝？

A.細胞培養

B.細胞裂解

C.分子克隆

D.蛋白質純化

2.質量控制測試中，以下哪種方法不屬于生物活性檢測？

A.ELISA

B.WesternBlot

C.免疫熒光

D.熒光定量PCR

3.生物制藥工藝中，以下哪種細胞培養技術不屬于無血清培養？

A.基質細胞培養

B.重組細胞培養

C.乳清酸培養基培養

D.紅細胞裂解物培養基培養

4.質量控制測試中，以下哪種方法不屬于無菌檢測？

A.滅菌過濾

B.滅菌燈照射

C.滅菌柜培養

D.滅菌指示劑檢測

5.生物制藥工藝中，以下哪種蛋白質純化技術不屬于親和層析？

A.離子交換層析

B.膠體金層析

C.色譜層析

D.聚丙烯酰胺凝膠電泳

6.質量控制測試中，以下哪種方法不屬于穩定性測試？

A.短期穩定性測試

B.長期穩定性測試

C.高溫穩定性測試

D.高壓穩定性測試

7.生物制藥工藝中，以下哪種設備不屬于發酵罐？

A.均質攪拌罐

B.真空發酵罐

C.膜反應器

D.離心式發酵罐

8.質量控制測試中，以下哪種方法不屬于生物效價檢測？

A.生物學活性檢測

B.免疫學檢測

C.生物化學檢測

D.微生物學檢測

答案及解題思路：

1.D.蛋白質純化

解題思路：上游工藝主要涉及生物分子的生產，包括細胞培養、分子克隆和細胞裂解等步驟。蛋白質純化是下游工藝的一部分，用于純化生產出來的生物分子。

2.D.熒光定量PCR

解題思路：ELISA、WesternBlot和免疫熒光都是用于檢測生物分子的生物活性。熒光定量PCR主要用于檢測DNA或RNA的定量，不屬于生物活性檢測。

3.C.乳清酸培養基培養

解題思路：無血清培養技術旨在去除培養基中的血清成分，減少蛋白質和激素的干擾。乳清酸培養基含有血清成分，不屬于無血清培養。

4.B.滅菌燈照射

解題思路：滅菌過濾、滅菌柜培養和滅菌指示劑檢測都是無菌檢測的方法。滅菌燈照射主要用于消毒，不用于無菌檢測。

5.D.聚丙烯酰胺凝膠電泳

解題思路：親和層析是利用生物分子間的特定相互作用進行分離的技術。離子交換層析、膠體金層析和色譜層析都屬于親和層析，而聚丙烯酰胺凝膠電泳是用于蛋白質分子量測定的技術。

6.D.高壓穩定性測試

解題思路：穩定性測試旨在評估生物制藥產品在不同條件下的穩定性。短期穩定性測試、長期穩定性測試和高溫穩定性測試都是常見的穩定性測試方法，而高壓穩定性測試不常見。

7.C.膜反應器

解題思路：發酵罐是用于大規模培養微生物或細胞進行生物分子生產的設備。均質攪拌罐、真空發酵罐和離心式發酵罐都是發酵罐的類型，而膜反應器通常用于化學反應過程。

8.D.微生物學檢測

解題思路：生物效價檢測旨在評估生物制藥產品的生物活性。生物學活性檢測、免疫學檢測和生物化學檢測都是生物效價檢測的方法，而微生物學檢測主要用于檢測污染。二、填空題1.生物制藥工藝流程主要包括______、______、______等步驟。

答案：上游工藝、中游工藝、下游工藝

解題思路：生物制藥工藝流程分為上游工藝，即發酵和細胞培養階段；中游工藝，包括純化和質量檢驗；下游工藝，即最終的產品生產和包裝。這三個階段構成了完整的生物制藥工藝流程。

2.質量控制測試主要包括______、______、______等環節。

答案：原料質量測試、中間產品控制、最終產品測試

解題思路：質量控制是保證生物制藥產品質量的關鍵環節，通常包括原料的質量檢測、中間產品生產過程中的質量控制和最終產品的全面檢測。

3.生物制藥工藝中，細胞培養常用的培養基有______、______、______等。

答案：DMEM（Dulbecco'sModifiedEagleMedium）、MEM（MinimumEssentialMedium）、RPMI1640

解題思路：這些培養基是細胞培養中最常用的基礎培養基，適用于不同類型細胞的不同需求。

4.質量控制測試中，無菌檢測常用的方法有______、______、______等。

答案：培養基法、過濾法、接種法

解題思路：無菌檢測旨在確認產品中不含微生物，培養基法是通過在培養基上接種待測樣本觀察生長情況，過濾法是使用無菌濾膜過濾待測樣本，接種法是將待測樣本接種至培養皿中觀察微生物生長。

5.蛋白質純化常用的技術有______、______、______等。

答案：親和層析、離子交換層析、凝膠過濾層析

解題思路：蛋白質純化過程中，這些層析技術是常用的方法，親和層析利用蛋白質與配體之間的特異性結合，離子交換層析基于電荷差異分離蛋白質，凝膠過濾層析根據分子大小分離蛋白質。

答案及解題思路：

答案：上游工藝、中游工藝、下游工藝；原料質量測試、中間產品控制、最終產品測試；DMEM、MEM、RPMI1640；培養基法、過濾法、接種法；親和層析、離子交換層析、凝膠過濾層析

解題思路：

上游工藝、中游工藝、下游工藝描述了生物制藥的基本流程，涵蓋了從原料處理到最終產品的全周期。

質量控制測試環節保證產品在每個階段都符合規定的質量標準。

細胞培養培養基的選擇根據細胞的特殊需求來定。

無菌檢測的方法針對不同的檢測要求和應用場景。

蛋白質純化技術利用不同的原理對蛋白質進行分離和純化，以提高其純度和質量。三、判斷題1.生物制藥工藝中，上游工藝主要包括細胞培養、細胞裂解、分子克隆等步驟。（）

答案：√

解題思路：上游工藝通常指的是生物制藥生產過程中從生物材料中提取和純化目標產品的初期步驟。細胞培養是其中核心步驟，而細胞裂解和分子克隆也是上游工藝中常見的步驟，用于獲取或放大目標細胞系。

2.質量控制測試中，生物活性檢測常用的方法有ELISA、WesternBlot、免疫熒光等。（）

答案：√

解題思路：生物活性檢測是質量控制的關鍵環節，ELISA（酶聯免疫吸附測定）、WesternBlot（蛋白質印跡分析）和免疫熒光是常用的生物活性檢測方法，它們分別用于檢測抗原抗體反應、蛋白質表達和細胞內信號分子的定位。

3.生物制藥工藝中，無血清培養是指不添加血清的細胞培養技術。（）

答案：√

解題思路：無血清培養是一種不使用血清的細胞培養技術，目的是為了減少血清中可能存在的污染物和細胞生長因子的不穩定性，從而提高細胞培養的均一性和可重復性。

4.質量控制測試中，無菌檢測常用的方法有滅菌過濾、滅菌燈照射、滅菌柜培養等。（）

答案：×

解題思路：無菌檢測旨在確認產品或環境是否含有微生物。滅菌過濾是一種有效的方法，用于去除或滅活微生物。滅菌燈照射和滅菌柜培養主要用于環境消毒，而不是用于無菌檢測。

5.蛋白質純化常用的技術有離子交換層析、膠體金層析、色譜層析等。（）

答案：×

解題思路：蛋白質純化中常用的技術包括離子交換層析、親和層析和色譜層析等。膠體金層析并不是蛋白質純化的常用技術，它更多用于免疫檢測領域。

：四、簡答題1.簡述生物制藥工藝流程的主要步驟。

（1）上游工藝：包括細胞培養、發酵、提取等步驟。

（2）中游工藝：包括粗分離、純化、濃縮等步驟。

（3）下游工藝：包括無菌過濾、填充、包裝等步驟。

2.簡述質量控制測試的主要環節。

（1）原料和中間產品的質量控制。

（2）半成品的質量控制。

（3）成品的質量控制。

（4）穩定性測試。

（5）生物活性檢測。

3.簡述細胞培養常用的培養基及其特點。

（1）基礎培養基：如DMEM、MEM等，提供細胞生長的基本營養。

（2）特殊培養基：如含血清培養基，用于某些特殊細胞系的培養。

（3）選擇性培養基：如抗生素、生長因子等，用于篩選和培養特定細胞。

4.簡述無菌檢測常用的方法及其原理。

（1）平板計數法：通過平板培養，計數生長的微生物數量，判斷無菌狀態。

（2）薄膜過濾法：利用薄膜過濾除去微生物，再對濾膜進行培養，檢測微生物。

（3）生物指示劑法：使用特定微生物作為指示，檢測產品中的微生物污染。

5.簡述蛋白質純化常用的技術及其原理。

（1）離子交換層析：根據蛋白質的電荷差異進行分離。

（2）凝膠過濾（分子篩層析）：根據蛋白質的分子量大小進行分離。

（3）親和層析：利用蛋白質與特定配體的特異性結合進行分離。

（4）電泳：根據蛋白質的電荷和分子量進行分離。

答案及解題思路：

1.答案：生物制藥工藝流程主要分為上游工藝、中游工藝和下游工藝。上游工藝包括細胞培養、發酵、提取等步驟；中游工藝包括粗分離、純化、濃縮等步驟；下游工藝包括無菌過濾、填充、包裝等步驟。

解題思路：首先了解生物制藥工藝的基本流程，然后根據題目要求，分別描述上游、中游和下游工藝的步驟。

2.答案：質量控制測試主要環節包括原料和中間產品的質量控制、半成品的質量控制、成品的質量控制、穩定性測試和生物活性檢測。

解題思路：根據題目要求，列出質量控制測試的主要環節，并簡要描述每個環節的目的和內容。

3.答案：細胞培養常用的培養基包括基礎培養基、特殊培養基和選擇性培養基，它們分別提供細胞生長的基本營養、針對特殊細胞系的營養和篩選特定細胞的功能。

解題思路：根據題目要求，列舉常見的細胞培養基類型，并簡要描述其特點和適用范圍。

4.答案：無菌檢測常用的方法包括平板計數法、薄膜過濾法和生物指示劑法，它們分別通過計數生長的微生物、過濾除去微生物和使用微生物指示劑來檢測無菌狀態。

解題思路：根據題目要求，列舉常見的無菌檢測方法，并簡要解釋每種方法的原理和操作步驟。

5.答案：蛋白質純化常用的技術包括離子交換層析、凝膠過濾、親和層析和電泳，它們分別根據蛋白質的電荷、分子量、特異性和電荷進行分離。

解題思路：根據題目要求，列舉常見的蛋白質純化技術，并簡要描述每種技術的原理和操作步驟。五、論述題1.論述生物制藥工藝中上游工藝的重要性及其影響因素。

重要性：

上游工藝是生物制藥工藝的基礎，直接關系到最終產品的質量和產量。

上游工藝中的細胞培養過程對于維持細胞活性和生物活性。

優化上游工藝可以降低生產成本，提高生產效率。

影響因素：

培養基成分和配比：合適的培養基可以提供細胞生長所需的所有營養。

培養條件：包括溫度、pH、氧氣和二氧化碳的供應等。

生物反應器的設計和操作：影響細胞生長的環境和穩定性。

污染控制：微生物和細胞的污染會影響生產過程和產品質量。

2.論述質量控制測試在生物制藥工藝中的作用及其意義。

作用：

保證生物藥物的安全性、有效性和質量一致性。

監控生產過程中的潛在問題，及時發覺并解決。

滿足監管要求，符合藥品生產質量管理規范（GMP）。

意義：

提高產品質量，保障患者用藥安全。

增強市場競爭力，提高企業信譽。

避免潛在的法律法規風險。

3.論述細胞培養過程中可能出現的污染及其防治措施。

污染類型：

微生物污染：細菌、真菌和病毒等。

細胞污染：其他細胞類型或死細胞。

纖維素污染：玻璃器皿、管道等表面殘留的纖維素。

防治措施：

嚴格的無菌操作：包括消毒、滅菌和個人防護。

使用高質材料：減少污染源。

監控和測試：定期檢查生產環境、設備和培養物。

4.論述無菌檢測在生物制藥工藝中的重要性及其檢測方法。

重要性：

防止微生物污染，保證產品質量和安全性。

滿足GMP要求，保證生產過程符合規范。

檢測方法：

空氣細菌計數：評估無菌操作環境。

生物指示劑測試：檢測生產過程中的無菌水平。

終產品無菌檢測：