生物課后集訓:專題課題多聚酶鏈式反應擴增DNA片段_第1頁
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學必求其心得,業必貴于專精學必求其心得,業必貴于專精學必求其心得,業必貴于專精課后集訓基礎達標1.(四川高考,3)細胞增殖過程中DNA含量會發生變化.通過測定一定數量細胞的DNA含量,可分析其細胞周期。根據細胞DNA含量不同,將某種連續增殖的細胞株細胞分為三組,每組的細胞數如下圖.從圖中所示結果分析其細胞周期,不正確的是()A.乙組細胞正在進行DNA復制B.細胞分裂間期的時間比分裂期長C。丙組中只有部分細胞的染色體數目加倍D.將周期阻斷在DNA復制前會導致甲組細胞數減少解析:該細胞中DNA含量的變化范圍為2C~4C,復制前為2C,復制后為4C,所以乙細胞正在復制。DNA復制發生在分裂間期,圖中甲和乙所代表的細胞處于分裂間期,數量多于分裂期的細胞,分裂間期時間長。丙組細胞已經完成DNA復制,而染色體數目加倍只發生在有絲分裂后期,所以丙組中只有部分細胞處于分裂后期。答案:D2。(山東濰坊統考)關于DNA復制,下列敘述正確的是()A。DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA,只能從5′端延伸DNA鏈B.DNA復制不需要引物C.引物與DNA母鏈通過堿基互補配對進行結合D.DNA的合成方向總是從子鏈的3′端向5′端延伸解析:由于DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA,只能從引物的3′端延伸DNA鏈。因此,DNA復制需要引物。首先復制的是3′端、即復制方向為3′→5′;由于DNA分子是反向平行的,子鏈是依據堿基互補配對原則,在DNA聚合酶作用下合成的,其合成方向從子鏈5′→3′。答案:C3。DNA的羥基(-OH)末端稱為()A。3′端B.5′端C。1′端D.2′端解析:DNA的兩條鏈是反向平行的,為了明確地表示DNA的方向,通常將DNA的羥基(—OH)末端稱為3′端。答案:A4.DNA復制過程中的前提是()A.獲得引物B。催化合成DNA子鏈C。解旋D。4種脫氧核苷酸解析:在DNA的復制過程中,雙鏈的解開是進行DNA復制的前提。答案:C5。PCR操作中,從第二輪循環開始擴增的DNA片段()A。固定長度B.一端固定C.都不固定D。不能確定解析:從第二輪循環開始,由引物Ⅰ延伸而成的DNA單鏈會與引物Ⅱ結合,進行DNA的延伸,這樣,DNA聚合酶只能特異地復制處于兩個引物之間的DNA序列。答案:A6。引物的作用是()A.打開DNA雙鏈B。催化合成DNA子鏈C。使DNA聚合酶能夠從引物的3′端開始復制D。提供模板解析:DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA,而只能從3′端延伸DNA鏈,引物的作用就在于此。答案:C7.DNA合成方向是()A。從子鏈的3′端向5′端延伸B.從引物的5′端開始延伸C.從子鏈的5′端向3′端延伸D。以上皆可解析:DNA聚合酶能從引物的3′端開始延伸DNA鏈,DNA的合成方向總是從子鏈的5′端向3′端延伸。答案:C8.PCR過程中DNA復性所需的溫度條件為()A。90℃以上B。72℃左右C。80℃左右D。50℃左右解析:在80~100℃的溫度范圍內DNA變性;在溫度下降到50℃左右時復性。答案:D9。下圖是哪次循環的產物()A.第一次循環B。第二次循環C。第三次循環D.第四次循環解析:根據引物的特點,可以確定為第一次循環。答案:A10。從第二次循環開始,復制的DNA片段呈擴增()A.直線B。指數C.對數D.不變解析:從第二輪循環開始,復制的DNA片段呈指數擴增。答案:B11。PCR具體操作時用()A.微量離心管B.微量移液管C。玻璃試管D。塑料瓶解析:在實驗室中,做PCR通常用微量離心管,它是一種薄壁塑料管,總容積為0.5mL.具體操作時用微量移液管將各組分加到微量離心管中。答案:AB12.PCR利用了DNA的原理,來控制DNA的解聚與結合()A。特異性B.穩定性C.熱變性D.多樣性解析:PCR利用了DNA的熱變性原理,通過控制溫度來控制雙鏈的解聚與結合.答案:C綜合運用13。TaqDNA聚合酶是從一種嗜熱細菌中分離提取的,該菌是1966年從美國黃石國家森林公園的一個熱泉中發現的。實驗表明,PCR反應時變性溫度為95℃,50個循環后,TaqDNA聚合酶仍有65%的活性。TaqDNA聚合酶的熱穩定性是該酶用于PCR的前提條件,也是PCR技術能迅速發展和廣泛應用的原因。TaqDNA聚合酶還具有逆轉靈活性,其作用類似于逆轉錄酶。TaqDNA聚合酶表現為Mg2+依賴,該酶的催化活性對Mg2+濃度非常敏感。測定結果為MgCl2濃度在2。0mmol/L時該酶催化活性最高,此濃度能最大限度地激活TaqDNA聚合酶的活性,Mg2+過高就抑制酶活性,因而MgCl2的濃度在不同的反應體系中應適當調整,優化濃度。TaqDNA聚合酶具有5′→3′聚合酶活性和5′→3′外切酶活性,而無3′→5′外切酶活性,它不具有校對活性。因而在PCR中如發生某些堿基的錯配,該酶是沒有校正功能的.TaqDNA聚合酶的堿基錯配幾率為2。1×10-4.(1)TaqDNA聚合酶在高溫下仍保持活性,因此在PCR擴增時可以________加入,________(填“需要"或“不需要")再添加。(2)影響PCR反應的影響因素除引物、反應溫度、時間和TaqDNA聚合酶濃度外,從材料中可知,還應有________。(3)這種嗜熱細菌能夠在熱泉中生存,這是________的結果。(4)PCR中由堿基錯配引起的變異屬于________。假設對一個DNA進行擴增,第一次循環時某一條模板鏈上發生堿基錯配,則擴增若干次后檢測所有DNA的擴增片段,與原DNA相應片段相同的占________。解析:此題考查閱讀能力。要求能從所給的材料中獲取新知識,科學地接受知識并進行邏輯推理。由于文字較多,首先快速閱讀獲得大致信息,然后根據問題再仔細閱讀分析,科學地接受并應用材料信息。TaqDNA聚合酶的發現,解決了PCR中高溫導致DNA聚合酶失活的問題,使PCR技術趨于自動化,只需要一次性加入,不需要每次變性后再添加。閱讀材料后會發現,Mg2+濃度可以影響酶的活性從而影響PCR。答案:(1)一次性不需要(2)Mg2+濃度(3)長期自然選擇(4)基因突變1/214。近10年來,PCR技術(多聚酶鏈式反應)成為分子生物學實驗室的一種常規手段,其原理是利用DNA半保留復制,在試管中進行DNA的人工復制(如下圖),在很短的時間內,將DNA擴增幾百萬倍甚至幾十億倍,使實驗室所需的遺傳物質不再受限于活的生物體.(1)加熱使DNA雙鏈打開,這一步是打開________鍵,稱為________,在細胞中是在________酶的作用下進行的。(2)當溫度降低時,引物與模板末端結合,在DNA聚合酶的作用下,引物沿模板延伸,最終合成2條DNA分子,此過程中原料是________,遵循的原則是________________________________。(3)PCR技術的必需條件,除了模板、原料、ATP、酶以外,至少還有三個條件,即液體環境、適宜的________和________。(4)通過PCR技術使DNA分子大量復制,若將一個用15N標記的DNA分子放入試管中,以14N標記的脫氧核苷酸為原料,連續復制4次以后,則15N標記的DNA分子占全部DNA總數的比例為________。解析:考查PCR技術過程中DNA的解旋、DNA復制的原料、堿基互補配對原則以及DNA復制的條件.答案:(1)氫解旋解旋(2)4種脫氧核苷酸堿基互補配對原則(3)溫度酸堿度(4)1/815。(2006山東淄博統考)在遺傳病診斷及刑偵破案中常需要對樣品DNA進行分析,PCR技術能快速擴增DNA片段,在幾小時內復制出上百萬份的DNA拷貝,有效地解決了因為樣品DNA含量太低而難以對樣品進行分析研究的問題。參照下圖,完成相關問題:(1)在相應的空格內寫出引物2,并在復性這一步驟中將引物2置于合適的位置。(2)在相應的空格內寫出循環一次后生成的DNA分子。(3)若將作為原料的四種脫氧核苷酸用32P標記,請分析循環一

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