第一單元細菌的結構與生理(一)細菌的形態1.細菌的概念具有細胞壁和核質的單細胞原核細胞型微生物。無成形的細胞核，無完整的細胞器。微米為測量(二)細菌的基本結構1.細胞壁結構+菌。②磷壁酸G菌特有；其抗原性較強黏附宿主細胞。+菌類脂A(3)細胞壁的功能(4)革蘭氏染色G菌+G-菌組成為脂質雙層，并鑲嵌有特殊功能的載體蛋白和酶類，不含膽固醇。功能①物質交換；②分泌胞外酶；③能量的產生與利用有關；④細胞生物合成的場所。由。F質粒決定細菌的致育性。R。。(三)細菌的特殊結構；。1能運動④有特異的H抗原；②性菌毛F，成分為蛋白質；與細菌的接合F質粒的轉移。。(四)細菌的染色方法(1)程序草酸銨結晶紫染色1min→碘液染1min→95%乙醇脫色30s→碳酸復紅1min。(2)意義鑒別細菌、選擇抗菌藥物。(1)抗酸染色法常用于結核桿菌、副結核桿菌的染色紅色。①順序石碳酸復紅微熱3—5min→3%鹽酸酒精脫色→堿性美蘭復紅1min。(五)細菌的生長繁殖②酸堿度最適宜pH為7.2～7.6;③溫度最適宜為37℃;?;①遲緩期菌體增大，代謝活躍；分裂遲緩，細菌數增加不顯著。(六)細菌的代謝(1)代謝的能量供給ATP;(2)細菌代謝活動的核心能量代謝。(3)細菌獲得能量的基質糖類，貯存能量的形式高能磷酸鍵(ADP、ATP)。(4)細菌生物氧化的類型①發酵以有機物為受氫體。②呼吸以無機物為受氫體。其中，ab厭氧呼吸以無機物(硝酸鹽、硫酸鹽)為受氫體。毒素內毒素為G菌死后釋放，外毒素為G'菌分泌的蛋白質。2④色素銅綠假單胞菌產綠色色素。⑤細菌素僅對近緣菌株有抗菌作用的蛋白質，如綠膿菌素。⑦維生素大腸桿菌能合成維生素B、維生素K。陽性菌產酸產氣(大腸桿菌)陰性菌產酸不產氣沙門氏菌腸科桿菌紫色(假單胞菌、氣單胞菌)產氣泡(葡萄球菌、微球菌)黑色(變形桿菌)鏈球菌大腸桿菌紅紫色(變形桿菌)沙門菌紅色(大肝桿菌、變形桿菌)紅色(大腸桿菌)⑦甲基紅試驗(MR)產氣桿菌紅色(產氣桿菌)大腸桿菌⑨枸櫞酸鹽利用試驗(C)深藍色(產氣桿菌)大腸桿菌(七)細菌的人工培養1.培養基(理化性狀)分為液體培養基、半固體培養基固體培養基含2%瓊脂；2.培養基的分類(營養組成和用途)(1)基礎培養基常用普通肉湯培養基，含蛋白胨、牛肉浸膏、NaCl、水等；常用于糖發酵試驗。(2)營養培養基在基礎培養基中加入葡萄糖、血液、血清、酵母浸膏等；常用血瓊脂平板(鏈球菌)。(4)鑒別培養基加入底物及指示劑，(5)厭氧培養基(1)液體培養基生長現象①混濁生長葡萄球菌；②沉淀生長鏈球菌；③菌膜生長枯草桿菌。(2)半固體培養基中的生長現象沿穿刺線生長或穿刺線向四周擴散呈放射狀生長。(3)固體培養基中的生長現象平板上劃線后形成菌落；斜面上劃線重疊形成菌苔。(一)正常菌群(1)消化道球菌、乳桿菌、棒狀桿菌；①胃乳桿菌、幽門螺桿菌、八疊球菌；③小腸有消化液故細菌少；④大腸雙歧菌、擬桿菌；腸球菌、大腸桿菌、乳桿菌、葡萄球菌、酵母菌；(2)呼吸道(3)泌尿生殖道3(二)細菌的致病性體(1)侵襲力②侵襲性酶。透明質酸酶、鏈激酶(鏈球菌產生)、膠原酶(梭菌、氣單胞菌產)、血液凝固酶(致病葡萄菌產生)。蛋白酶細胞內逃逸(如產生過氧化氫，中和吞噬細胞中的氧自由基)。(2)毒素由G外毒素經0.3%甲醛處理，轉為類毒素，刺激機體產生抗毒素；神經毒素包括破傷風毒素、肉毒毒素。②內毒素是G菌細胞壁的脂多糖，當細菌死亡后才游離出來；產生癥狀發熱、毒血癥、休克、管內凝血、出血。。②毒血癥病原菌不入血，但其產生內毒素入血，引起癥狀。③敗血癥病原菌入血，并繁殖產生毒性物質，引起中毒癥狀(高熱、皮膚黏膜淤斑、肝脾腫大)。(三)細菌的耐藥性①敏感用常用劑量時，該抗菌藥物治療有效。②中介指被測菌株的MIC與該抗菌藥物常用劑量所能達到的血清和組織濃度相近。③耐藥指被測菌株不能被該抗菌藥物常用劑量達到的血液濃度所抑制，臨床治療無效。1.樣品保存液30%無菌甘油緩沖鹽水(細菌)、50%無菌甘油緩沖鹽水(病毒)。。。,◎高壓蒸汽滅菌法(121.3℃,15~30min)是應用最廣、效果最好的方法◎煮沸法100℃30min左右，2%碳酸鈉提高沸點h◎紫外線265~266表面消毒(穿透力弱),空間消毒4◎氫氧化鈉(燒堿)2%水溶液殺滅繁殖體和病毒，4%溶液45min殺滅芽孢。一般配成20%的石灰乳涂刷廄舍墻壁、畜欄及地面消毒。熏蒸消毒，溫度應不低于15℃,相對濕度60%~80%乙醇(75%)、碘酊(2%)季銨鹽類(改變細菌細胞壁或細胞膜通透性，常用濃度0.1%左右)◎球菌鏈球菌，α溶血(不完全溶血)、β溶血(完全溶血)、γ溶血(完全不溶血)白僵病(白僵菌、真菌、可觀察到大量的菱形結晶)、質型多角體病毒(病毒、呼腸孤病毒科)、多角體病毒(病毒、桿狀病毒科)◎大腸桿菌麥康凱培養基(發酵乳糖)紅色菌落；伊紅美藍瓊脂黑色帶金屬閃光的菌落；引起的常見疾病◎沙門氏菌麥康凱培養基(不發酵乳糖)無色透明菌落；專嗜性沙門氏菌、偏嗜性沙門氏菌、泛嗜性沙門氏菌(鼠傷寒沙門氏菌);引起的常見疾病巴氏桿菌科及相關屬多殺性巴氏桿菌(兩極著色)、引起的常見疾病生出血性敗血癥巴氏桿菌；牛肺疫(牛傳染性胸膜肺炎)支原體豬出血性敗血癥(豬肺疫)巴氏桿菌；豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌◎鴨疫里氏桿菌雛鴨傳染性漿膜炎；2~3周齡雛鴨；引起的疾病病理變化與禽大腸桿菌類似(三炎)◎嗜血桿菌副豬嗜血桿菌、巧克力培養基、X因子和V因子、格氏病V因子、◎布魯氏菌人畜共患(波浪熱),病原局限于腺體組織和生殖器官(赤鮮醇)、胞內菌感染、三種檢測方法(首先◎支氣管敗血波氏菌犬傳染性氣管支氣管炎(幼犬窩咳)和兔傳染性鼻炎、麥康凱(藍灰色)◎產單核細胞李氏桿菌4℃可生長，易污染冷藏食品，常呈V字形排列或成對出現◎炭疽芽孢桿菌菌體最大、兩端平切(竹節狀)、陽性、在機體內有莢膜(無芽孢),在外界有芽孢(無莢膜)、粗◎分支桿菌屬結核分支桿菌、牛分支桿菌(人畜共患)、禽分支桿菌和副結核分支桿菌◎豬痢短螺旋體豬痢疾(黑痢),特征病變在大腸，暗視野顯微鏡觀察◎支原體(霉形體)“煎荷包蛋狀”、禽類慢性呼吸道病(雞毒支原體)、豬氣喘病(豬肺炎支原體)、牛傳染性胸膜肺炎/牛肺疫(支原體)、山羊傳染性胸膜肺炎(山羊支原體肺炎亞種)特別注意梭菌屬形成芽孢，芽胞直徑多大于菌體直徑，使菌體呈梭狀，故名“梭狀芽胞桿菌”,簡稱梭菌；◎產氣莢膜梭菌魏氏梭菌，腸毒血癥和壞死性腸炎，暴烈發酵(洶涌發酵)5嗜血支原體又叫豬附紅細胞體。寄生于動物紅細胞表面、血漿及骨髓內，引起豬的一種以貧血、黃疸、發熱為主(1)囊膜③有的囊膜表面有纖突。囊膜+纖突=表面抗原。(2)核衣殼組成ab。(1)核酸種類DNA或RNA,不可同時存在；遺傳相關。(2)蛋白質病毒的主要成分。分為結構蛋白和非結構蛋白。(3)脂質與糖類來自宿主細胞。主要是磷脂，其次是膽固醇。(1)實驗動物培養法；(2)雞胚培養法最好是SPF雞胚。(3)細胞培養法。原代細胞、二倍體細胞株傳代細胞系。。等。2.包含體是某些病毒感染細胞出現的特征性的形態變化，可通過染色后在光學顯微鏡下檢測。如氏體(狂犬病毒產生);病毒胞漿(痘病毒產生);貓頭鷹眼(皰疹病毒產生)。3.空斑將病毒接種吸附于單層細胞，原先感染病毒的細胞及病毒擴散的周圍細胞會形成一個近似圓形的斑點，類病毒克隆將獲得的單個空斑制成懸液，梯度稀釋后再做空斑，最終可獲得只含一個病毒顆粒及其子代的空斑，。(1)潛伏感染病毒不復制，查不出病毒；；(3)慢發病毒感染可檢出病毒；潛伏期長；癥狀出現逐漸加重，最后死亡；(4)遲發性臨床癥狀的急性感染病毒復制與病程無關；不能分離出病毒。6(一)病毒的采集與準備①取適宜的組織病料、分泌物和糞便等，充分研磨，加入青鏈霉素，4℃冰霜處理2～4小時或過夜，離心取上②咽喉拭子即用棉試子蘸取，浸泡入含有2%犢牛血清和含青鏈霉素的漢格氏液中，充分涮棉試子，反復凍融(二)病毒的分離鑒定細胞培養(三)病毒感染單位的測定(1)ID?半數感染發病(雞胚或動物);(2)RD50體溫半數反應(數)量；(四)病毒感染的血清學診斷2.血凝抑制試驗(HI)(五)病毒感染的分子診斷。3.DNA芯片技術。(一)痘病毒科③核酸由DNA組成；③癥狀為眼結膜炎、特征性“獅子頭”;體溫42℃;④診斷檢查感染細胞中的胞漿內包含體。(二)非洲豬瘟病毒科①有囊膜，衣殼20面體對稱；基因組由單分子線狀雙股DNA組成；②是唯一已知核酸為DNA的蟲媒病毒，由軟蜱傳播；③癥狀全身出血、呼吸障礙、神經癥狀；死亡率高。(三)皰疹病毒科,7；①即牛皰疹病毒1型，病毒呈球狀，衣殼20面體對稱，有囊膜和纖突。基因組為線狀雙鏈DNA;；。①即禽皰疹病毒2型，衣殼20面體對稱，基因組為線狀雙股DNA;②特征導致腫瘤、外周神經腫大、兩肢麻痹；③4種類型內臟型、神經型、皮膚型、眼型；④病毒不經卵傳播，靶細胞為T淋巴細胞。①即禽皰疹病毒1型，有囊膜；③癥狀咳出血樣粘液，白喉樣變，發病率100%,死亡率50%。①即鴨皰疹病毒1型，只有一個血清型；②癥狀腸炎、脈管炎廣泛局灶性壞死，產蛋率可下降25%、發病率5%～100%;。(四)腺病毒科；;④癥狀肝、腎、脾、肺的嚴重出血、壞死；康復期出現“藍眼”;感染犬經尿、糞、唾液排毒。;③癥狀褪色蛋、軟殼蛋，輸卵管上皮細胞壞死且可見核內包涵體；④主要傳染源蛋。(五)細小病毒科;③診斷可用熒光抗體檢測病毒；檢測血清抗體價值不大。;VP2；③特征嘔吐、腹瀉、白細胞減少、出血性腸炎、嚴重脫水；④診斷用;。4.貓泛白細胞減少癥即貓瘟熱，感染后5天可測到中和抗體，抗體滴度與免疫保護成正比。8①即貂細小病毒；特征急性腸炎和白細胞減少；②診斷常用HA-HI實驗。;②癥狀慢性消耗性、超敏感性、自身免疫性疾病；③引起肝炎、關節炎、腎小球腎炎、貧血、死亡；碘凝集實驗。(六)圓環病毒科;。(七)反轉錄病毒科形，②特征雛雞腫瘤，病毒血癥，淋巴細胞增多癥；。②為慢性病毒屬成員，感染率可達80%;③特征2～4月齡發生腦脊髓炎；12月齡多發性關節炎；病毒可通過吃初乳感染；,②特征發熱、貧血黃疸、死亡率達80%;。(八)呼腸孤病毒科;VP2。③特征高熱、舌部發紺、唇部水腫。壞疽性鼻炎；④診斷必須臨床癥狀與病毒分離才能確認，病毒應取急性發熱期的全血。①為雙鏈RNA病毒科；無囊膜，20面體，雙鏈雙節段RNA;VP2為保護性抗原；②有兩個血清型，無交叉保護，1型只感染雞，2型無致病性；③癥狀3～6周齡雞最易感；斷用(十)副黏病毒科9①即禽副黏病毒1型，OIE通報疫病；③有兩種纖突血凝性神經氨酸酶HN、融合蛋白F,它們的裂解與活化決定病毒的毒力；④只有一個血清型，通過⑤診斷必須作病毒分離及血清學實驗；即接種雞胚尿囊腔分離病毒，再做HI實驗；當病毒對1日齡雛雞腦內接種的致病指數ICPI>0.7,必須向OIE申報疫情。；；④癥狀口腔潰瘍壞死，回、盲、結、直腸嚴重出血；⑤診斷病料接種綿羊細胞，特點是出現多核細胞；再進行病毒中和試驗；；③最常見的急性型特征為雙相熱，且第二階段伴有白細胞減少癥；④診斷盲傳數代后，可出現典型CPE出現放射狀細胞及形成合胞體。(十一)彈狀病毒科①病毒為子彈狀，有釘狀纖突，有囊膜，螺旋對稱，單股分子負鏈單股RNA;②傳播途徑咬傷；④診斷需作腦組織切片，檢測Negri氏包含體。；③癥狀40℃以上，呼吸急促，全身虛弱，發病100%,死亡10%。(十二)正黏病毒科;③為甲型流感病毒屬，單負股RNA,分8個階段，易發生抗原性漂移(基因點突變)和抗原性轉移(基因重組);④有兩種纖突血凝素HA和神經氨酸酶NA,HA具有血凝性和免疫原性；⑤傳播野鴨；⑥診斷從泄殖腔取樣，接種于尿囊腔，取尿囊液用雞紅細胞作HA-HI試驗。⑦高致病性毒株的OIE標準將含有病毒的雞胚尿囊液1:10稀釋，接種4周齡雞8只，死亡≥6只；。(十三)冠狀病毒科,S；③癥狀1～4周齡雞最易感，呼吸抑制，產蛋下降。形，,10②免疫特點與呼吸道冠狀病毒、貓傳染性腹膜炎病毒、犬冠狀病毒有抗原相關性；母源IgA抗體使仔豬產生被動免疫；仔豬血清中的的體軀發癢，病程長達1~6個月，最終死亡。為甚至狂暴，病程2~3周，長者可達1年，最終死亡。診斷：用(一)豬的免疫球蛋白豬的免疫球蛋白分為IgG、IgM、IgA、IgE和IgD。豬IgG有5個亞類，包括IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3和IgG4。豬IgG是主要的血清免疫球蛋白，約占總量的85%;IgM約占12%;二聚體IgA約占血清免疫球蛋白的3%。豬有2個亞類，即IgAl和IgA2,IgAl的絞鏈區含12個氨基酸，而IgA2的絞鏈區僅由2個氨基酸構成。豬有4種同種異型，有1種同種異型。此外，新生仔豬可能有一類無輕鏈的5SIgG。豬與人的免疫球蛋白(二)牛的免疫球蛋白牛的免疫球蛋白分為、、、和。牛有3個亞類，即IgG1。lgG2和IgG3,IgG2可能還有IgG2a和IgG2b兩個亞類。IgG1占血清的50%,也是牛奶中的主要免疫球蛋白。IgG2的水平在牛個體之間的變異很大。牛的巨噬細胞和中性粒細胞具有獨特的免疫球蛋白受體，其結構與其他動物的受體不同，僅與IgG2結合。IgG2有2種同種異型(G2A1和G2A2)。IgG1有1種同種異型(G1A1)。某些牛的輕鏈有同種異型B1,(三)綿羊的免疫球蛋白綿羊的免疫球蛋白分為IgG、IgM、IgE和1gD。綿羊IgG有3個亞類，即IgG1、IgG2和IgG3,IgGla可能屬于同種異型。有2個亞類(IgA1和IgA2)。(四)馬的免疫球蛋白和IgG1(IgGa)IgG2(IgGc)、IgG4(1gGb)、IgG5、IgG6|lgG(BT)]和IgG7。IgG3曾被命名為IgG(T),最初被認為是IgA的同源物，T是指(五)雞的免疫球蛋白雞的免疫球蛋白有、、IgA,無IgE,已鑒定出禽類的同源區，但未確證的存在。雞性質獨特，被稱為IgY,功能與哺乳動物相似；分子質量為200ku,有3個亞類(IgG1、和IgG3)。雞主要存在于分泌液中，以二聚體形式存在。雞主要是在初次免疫反應中產生，并含有J鏈。雞胚尿囊液和1日齡雛雞體內含有單體，可能來自母雞的輸卵管分泌液。雞免疫球蛋白至少有5種同種異型，其中2個位于的CH1區，2個位于重鏈，還有1個位于輕鏈。(六)鴨的免疫球蛋白鴨的免疫球蛋白稱為IgY,有2類(7.8S和5.7S)。鴨的和均來自。卵黃中主要含7.8SIgG,是唯。鴨膽汁中含有IgA,黏膜免疫系統中也有。鴨血清中含有。尚未發現鴨有IgD。(一)抗原11(1)抗原凡是能刺激機體產生抗體和效應性淋巴細胞，并能與之結合引起特異性免疫反應的物質。(2)抗原性包括免疫原性與反應原性。(1)抗原分子的特性。①異源性；②分子大小；③化學組成與結構；④物理狀態；⑤對抗加工和遞呈的易感性。(2)宿主生物系統。(3)免疫劑量與免疫途經。不同免疫途經的免疫效果皮內>皮下>肌注>腹腔注射>靜注。3.抗原決定簇即抗原表位，指抗原分子中與淋巴細胞特異性受體和抗體結合，具有。(1)組成蛋白質抗原由5～7個氨基酸殘基組成；多糖抗原由5～6個單糖組成；核酸抗原由5～8個核苷酸殘基(2)分類T被T(1)依據性質半抗原只有反應原性，而缺乏免疫原性的物質。如。(2)依據來源。④異嗜性抗原與種屬特異性無關，存在于人、動物、植物及微生物之間的共同抗原。T大(二)抗體(4)CH3與B細胞、巨噬細胞的FC受體結合的部位；是K；(4)IgE親細胞性抗體可與肥大細胞、嗜堿性粒細胞結合。I型過敏反應、抗寄生蟲反應。3.(1)單克隆抗體指由一個B細胞分化增殖的子代細胞產生的針對單一抗原決定簇的抗體。(2)多克隆抗體采用傳統的免疫方法，將抗原物質經不同途徑注入動物體內，經數次免疫后果取動物血液，分(三)免疫系統12(1)骨髓是動物最重要的造血器官，是各種免疫細胞發生和分化的場所；產生的抗體主要為IgG;是再次免疫應(2)胸腺是T細胞分化成熟的中樞免疫器官。(3)法氏囊即腔上囊，為禽類所特有；是誘導B細胞分化與成熟的場所；可作為外周淋巴器官，能捕捉抗原和合。(2)脾臟紅髓生成紅細胞，捕獲抗原；白髓滯留(4)黏膜部淋巴小結構成重要的黏膜免疫系統。3.T細胞的重要表面標志T。4.B細胞的重要表面標志B細胞抗原受體BCR、FCR、CR、有絲分裂原R。植物排斥反應、清除自身的凋亡細胞。當靶細胞與相應的IgG抗體結合，K的Fc6.NK細胞即自然殺傷細胞，是ADCC作用；主要作用非特異殺傷腫瘤細胞、抵抗感染、排斥骨髓細胞的移植。7.抗原遞呈細胞即輔佐細胞、A細胞；包括即8.巨噬細胞(1)概念存在于正常動物和人血清中的一組不耐熱、具有酶活性的球蛋白。含量穩定，與抗原刺激無關；補體可(2)補體激活作用細胞溶解、細胞粘附、調理作用、免疫調節、炎癥反應、病毒中和、免疫復合物的溶解。(一)概念與種類1.細胞因子是指有免疫細胞和某些非免疫細胞合成和分泌的一些高活性多功能蛋白質多肽分子。主要介導和調節(1)白細胞介素IL在白細胞間起免疫調節作用的因子。(2)干擾素IFN-γ由抗原刺激T細胞產生；有免疫調節功能。(3)腫瘤壞死因子TNF是重要的促炎因子和免疫調節分子。(4)集落刺激因子CSF促進造血細胞增殖、分化、成熟。(二)特性與生物學作用(1)具有激素樣活性作用；(2