《基于聚合酶基因序列的HIV-1耐藥突變分析技術規范》編制說明一、工作簡況（一）項目背景及目的意義隨著抗逆轉錄病毒治療（ART）的推廣，接受抗病毒治療的HIV感染者人數不斷增加。HIV具有高度的變異性，在藥物壓力下易產生耐藥基因突變而出現耐藥毒株，長期服藥難以保持良好的依從性，增加了耐藥毒株產生的風險。耐藥毒株可進一步傳播，導致耐藥毒株的感染。HIV耐藥使病毒對藥物的敏感性下降并可導致治療失敗，影響抗病毒治療及暴露前后預防的效果，是艾滋病防治面臨的嚴峻挑戰。準確的HIV耐藥檢測方法是防控耐藥的有力工具，基于聚合酶基因序列的基因型耐藥檢測是目前主要使用的HIV耐藥檢測方法，檢測流程包括樣品采集及處理、核酸提取及純化、聚合酶基因片段擴增、測序及序列編輯、耐藥突變的確定及耐藥解釋等，操作復雜、影響因素多。為了得到準確的檢測結果，檢測方法、步驟和流程應規范化和標準化，并采取覆蓋檢測全過程的質量保證和質量控制措施。本標準旨在規范基于聚合酶基因序列的HIV基因型耐藥檢測及質量控制方法，以指導相關實驗室獲得準確的檢測結果。（二）任務來源2025年1月，由粵港澳大灣區標準創新聯盟批準團體標準《基于聚合酶基因序列的人免疫缺陷病毒1型基因型耐藥檢測技術規范》立項。本標準由中國疾病預防控制中心性病艾滋病預防控制中心提出，粵港澳大灣區標準創新聯盟歸口，標準編制組由中國疾病預防控制中心性病艾滋病預防控制中心、軍事科學院軍事醫學研究院微生物流行病研究所、中國科學院微生物研究所、中國醫科大學附屬第一醫院、浙江省疾病預防控制中心、北京市疾病預防控制中心、四川省疾病預防控制中心、上海市疾病預防控制中心、廣西壯族自治區疾病預防控制中心、江蘇省疾病預防控制中心、湖南省疾病預防控制中心、廣州醫科大學附屬市八醫院、香港大學艾滋病研究所、澳門仁伯爵綜合醫院、澳門衛生局、深圳華大智造科技股份有限公司共同組成。二、標準編制原則1.依法原則以現行法律法規的規定和相關標準為基礎。本標準中的約束性條款首先應與這些法律法規、強制性標準的要求保持一致，并在必要情況下予以細化和延伸，但總體上不得有悖于法律法規和強制性標準的要求。2.實用性原則標準的編寫結合了實驗室樣本要求、核酸提取及擴增、序列分析、耐藥性分析和質量控制等耐藥檢測的實際情況，可指導各實驗室和檢測機構建立自己的質檢標準和規范。三、標準編制過程1.前期準備階段2024年11月，參編單位成立標準編制組。標準編制組對目錄、方法內容進行討論并加以整理分析，起草標準的初步框架。2024年12月，標準編制組召開第一次工作會議，對標準制定的目的意義、標準框架進行討論，并根據會議結論形成標準草案。2.標準立項階段于聚合酶基因序列的人免疫缺陷病毒1型基因型耐藥檢測技術規范》大灣區團體標準的立項。3.標準起草階段參會成員對標準草案框架結構和各章節細節內容等展開討論，同時結合實際實驗方法，對標準內容進一步完善，會后形成了標準工作組討論稿（一稿）。起草單位對標準整體框架、主要技術指標、試驗方法以及術語定義提出建設性意見，形成了標準工作組討論稿（二稿）。主要研究討論各項內容的準確性和實用性。編制組根據會議討論結果對標準內容進一步完善。此外，對標準的內容表述和格式做了進一步規范，并形成標準征求意見稿。四、標準主要內容（一）范圍本文件規定了采用雙脫氧鏈末端終止法或高通量測序技術獲得HIV-1聚合酶基因序列，并進行HIV-1基因型耐藥檢測的方法，以及相應的質量控制程序。本文件適用于基于聚合酶基因序列進行人HIV-1基因型耐藥檢測的實驗室。（二）規范性引用文件本章節主要包括了標準文本中規范性引用的文件。（三）術語和定義本章節主要包括了人免疫缺陷病毒和耐藥等術語和定（四）基本要求本章節給出了樣本要求，規定了樣本類型，并對不同樣本類型給出具體的保存措施。（五）試驗方法原則試驗方法遵循基本原則、專業性、真實性原則。Sanger法測序的方法參照GB/T34265Sanger法測序技術指南；高通量基因測序的方法參照GB/T30989高通量基因測序技術規程；實驗室生物安全參照GB/T19489實驗室生物安全通用要求；艾滋病診斷參照WS293-2019艾滋病和艾滋病病毒感染診斷。五、預期效益HIV-1耐藥監測是全球艾滋病防控的重要組成部分，隨著抗病毒治療的廣泛實施，HIV耐藥性問題逐漸成為影響治療效果的關鍵挑戰。隨著治療范圍的進一步擴大，未來將有更多臨床和疾控機構參與耐藥檢測工作。這表明HIV-1耐藥突變檢測具有廣闊的市場需求。目前，我國耐藥突變檢測市場尚處于初級階段，部分實驗室技術參差不齊，檢測結果缺乏統一性和規范性。本標準的制定將為實驗室提供統一的技術框架，有助于提升檢測質量，進一步推動耐藥檢測的普及，為治療方案的制定和公共衛生決策提供科學依據。HIV-1耐藥突變分析技術正向著高效、精準、自動化的方向發展。結合新一代測序技術（NGS）和人工智能算法的應用，未來的耐藥檢測工作不僅能夠大幅提升檢測通量，還可基于海量數據構建毒株突變數據庫，優化耐藥突變的篩選和判讀流程。六、國內外相關研究依據、技術標準針對聚合酶基因序列的HIV-1基因型耐藥檢測，暫無國七、重大分歧意見的處理經過和依據本標準在編寫過程中無重大分歧意