消毒與滅菌遺傳與變異2025/3/152根據(jù)作用得對象、殺滅得程度:消毒、滅菌、抑菌、防腐、無菌2025/3/153消毒disinfection殺死物體上病原微生物得方法(芽胞及非病原微生物不一定能殺死)。(非活組織)

滅菌sterilization殺死物體上所有微生物得方法(包括所有細(xì)菌繁殖體及芽胞)。消毒滅菌概念抑菌bacteriostasis

抑制細(xì)菌在體內(nèi)、外生長得方法(一般用于活組織)2025/3/154●

防腐

antisepsis防止或抑制體外細(xì)菌生長繁殖得方法。(非活組織)有苯甲酸、苯甲酸鈉、山梨酸、山梨酸鉀、丙酸鈣●無菌asepsis不含活菌。防止細(xì)菌進(jìn)入機(jī)體或物品得技術(shù),稱無菌操作。2025/3/155第一節(jié)物理消毒滅菌法一、常用方法1、熱力法(干熱、濕熱)2、輻射消毒(紫外線、電離幅射、微波)3、濾過除菌(除菌濾器、適用物品)4、超聲波(機(jī)制:裂解細(xì)菌,主要用于粉碎細(xì)胞、提取抗原)5、干燥與低溫抑菌

2025/3/156

熱力滅菌法

一、物理消毒滅菌法高溫殺滅細(xì)菌焚燒----最徹底得滅菌方法燒灼----直接用火焰滅菌方法干烤----加熱160-180℃2h干熱滅菌法2025/3/157濕熱滅菌法加壓蒸汽滅菌法最有效得滅菌方法121℃20-30mim煮沸消毒法水煮100℃5mim(繁殖體)-2h(芽胞)流通蒸汽消毒法巴氏消毒法間歇蒸汽滅菌法水蒸汽100℃15-30mim(繁殖體)反復(fù)多次流動(dòng)蒸汽間歇加熱滅菌較低得溫度(61℃30mim/71℃30s)殺滅致病菌2025/3/158濕熱滅菌與干熱滅菌得比較同一溫度下,濕熱滅菌比干熱滅菌效果好原因1、濕熱中細(xì)菌菌體蛋白較易凝固2、濕熱得穿透力比干熱大3、濕熱得蒸汽有潛熱2025/3/159輻射殺菌法

紫外線殺菌機(jī)理:波長240-300nm得紫外線具有殺菌作用,其中260-266nm殺菌作用最強(qiáng)干擾DNA得復(fù)制與轉(zhuǎn)錄紫外線穿透力較弱不耐熱物品得表面消毒特點(diǎn):應(yīng)用范圍:空氣消毒手術(shù)室、傳染病房、細(xì)菌實(shí)驗(yàn)室

10大家應(yīng)該也有點(diǎn)累了，稍作休息大家有疑問的，可以詢問和交流2025/3/1511殺菌機(jī)理:應(yīng)用范圍:電離輻射包括高速電子、X射線和γ射線產(chǎn)生游離基,破壞DNA。一次性醫(yī)用塑料制品得消毒食品得消毒-不破壞其營養(yǎng)成分2025/3/1512濾過除菌法用物理阻留得方法將液體或空氣中得細(xì)菌除去,以達(dá)到除菌目得濾菌器含有微細(xì)小孔<0、22μm,只允許液體或氣體及孔徑<0、22μm得顆粒通過,細(xì)菌不能濾過適用范圍血清、毒素、抗生素以及空氣等得除菌2025/3/1513不銹鋼濾器針式濾器2025/3/15142025/3/1515第二節(jié)化學(xué)消毒滅菌法1、化學(xué)消毒劑得殺菌機(jī)制

2、常用消毒劑

3、影響消毒劑作用得因素2025/3/1516一、化學(xué)消毒劑作用機(jī)制1、促進(jìn)菌體蛋白質(zhì)變性凝固(酚、醇、醛、酸堿類)2、干擾細(xì)菌酶系統(tǒng)和代謝

(氧化劑、重金屬鹽類)

3、損傷細(xì)菌細(xì)胞膜,增加其通透性(表面活性劑、脂溶劑)

2025/3/15172025/3/151870%~75%高錳酸鉀0、1%2%0、1%0、2%~0、3%2%~2、5%2%~4%2025/3/15192025/3/1520影響消毒劑作用得因素消毒劑種類濃度時(shí)間細(xì)菌菌齡種類環(huán)境酸堿度有機(jī)物溫度2025/3/1521本章小結(jié)消毒滅菌抑菌防腐無菌高壓蒸汽滅菌最有效2025/3/1522第四章遺傳與變異變異:親代與子代、子代與子代之間性狀出現(xiàn)差異2025/3/1523變異:親代與子代、子代與子代之間性狀出現(xiàn)差異。遺傳:親代得生物學(xué)性狀相對穩(wěn)定地傳給子代,使物種得以延續(xù)。形態(tài)結(jié)構(gòu)、生長代謝、致病性、耐藥性、抗原性等。遺傳性變異:非遺傳性變異:基因結(jié)構(gòu)改變表型改變2025/3/1524名詞解釋

轉(zhuǎn)化接合轉(zhuǎn)導(dǎo)溶原性轉(zhuǎn)換本章要點(diǎn)2025/3/1525一、細(xì)菌變異得現(xiàn)象二、細(xì)菌遺傳變異得物質(zhì)基礎(chǔ)三、細(xì)菌變異得機(jī)制主要內(nèi)容

轉(zhuǎn)化接合轉(zhuǎn)導(dǎo)溶原性轉(zhuǎn)換2025/3/1526第二節(jié)細(xì)菌遺傳變異一、細(xì)菌變異得現(xiàn)象

1、形態(tài)結(jié)構(gòu)變異

L型菌;鞭毛(H-O變異)、莢膜、芽胞變異等

2、毒力變異毒力增強(qiáng)-白喉棒狀桿菌;毒力減弱-疫苗制備(BCG)

3、耐藥性變異臨床治療中嚴(yán)重問題痢疾志賀菌–鏈霉素依賴菌

4、菌落變異從光滑型(S)粗糙型(R)2025/3/1527細(xì)胞壁缺陷型——細(xì)菌L型細(xì)菌L型得命名細(xì)菌L型培養(yǎng)后菌落

特征(圖)細(xì)菌L型得臨床意義細(xì)菌L型菌落:A細(xì)菌型菌落

B荷包蛋樣L型菌落

C顆粒型L型菌落

D絲狀型L型菌落2025/3/1528二、細(xì)菌變異得物質(zhì)基礎(chǔ)

染色體質(zhì)粒轉(zhuǎn)座子2025/3/1529(一)細(xì)菌染色體

細(xì)菌染色體為一環(huán)狀雙股DNA鏈,呈超螺旋形式纏繞成團(tuán),構(gòu)成核質(zhì)(染色體長度約為菌體總長1000倍)。內(nèi)含細(xì)菌主要得遺傳信息。目前,已完成約80種細(xì)菌全基因序列測定,對深入研究細(xì)菌致病機(jī)制及進(jìn)化有重要意義。二細(xì)菌遺傳得物質(zhì)基礎(chǔ)2025/3/1530(二)質(zhì)粒plasmid概念:質(zhì)粒為細(xì)菌染色體外得遺傳物質(zhì),環(huán)狀雙股DNA。質(zhì)粒攜帶有遺傳信息,控制某些特定得遺傳性狀,可獨(dú)立復(fù)制,與細(xì)菌得遺傳變異有關(guān)。2025/3/1531種類:致育質(zhì)粒/F質(zhì)粒-(fertilityplasmid)F質(zhì)粒,產(chǎn)生性菌毛---F+耐藥質(zhì)粒-(resistanceplasmid)R質(zhì)粒毒力質(zhì)粒-(virulenceplasmid)Vi質(zhì)粒,產(chǎn)生相應(yīng)毒素細(xì)菌素質(zhì)粒-Col質(zhì)粒,產(chǎn)生細(xì)菌素代謝質(zhì)粒-編碼產(chǎn)生相關(guān)酶,如脲酶、枸櫞酸鹽利用酶等2025/3/1532特征:①自我復(fù)制-可與染色體同步/不同步②決定細(xì)菌某些生物學(xué)性狀③可自行丟失及消除,不影響細(xì)菌存活④可轉(zhuǎn)移性-可以各種方式轉(zhuǎn)移到其她菌⑤相容性-幾種質(zhì)粒可存在于同一菌體內(nèi),稱相容性質(zhì)粒2025/3/1533三、轉(zhuǎn)座因子概念:就是一類在細(xì)菌染色體、質(zhì)粒上可自行移動(dòng)得特異性得獨(dú)立得DNA片段。種類:1、插入序列2、轉(zhuǎn)座子3、整合子2025/3/1534意義:①改變遺傳物質(zhì)得核苷酸序列②影響插入點(diǎn)附近基因得表達(dá)(失活)均能造成細(xì)菌性狀得變異2025/3/1535轉(zhuǎn)座2025/3/1536噬菌體感染細(xì)菌得一類病毒2025/3/1537毒性噬菌體:殺死細(xì)菌溫和噬菌體/前噬菌體:其基因整合到細(xì)菌基因組中2025/3/1538噬菌體生活周期前噬菌體形成2025/3/1539三、細(xì)菌變異得機(jī)制基因突變與修復(fù)基因得轉(zhuǎn)移與重組2025/3/1540(一)基因突變概念突變mutation指細(xì)菌遺傳物質(zhì)得結(jié)構(gòu)突然發(fā)生得穩(wěn)定性得改變,可遺傳子代。根據(jù)涉及基因得多少分為點(diǎn)突變及染色體畸變二種基因突變2025/3/1541(二)基因突變得規(guī)律:1、突變率低2、自發(fā)性和隨機(jī)性基因突變2025/3/15423、回復(fù)突變野生型(自然環(huán)境下得表型株)突變型(發(fā)生了基因突變得菌株)

突變回復(fù)突變野生型突變型2025/3/1543

基因得轉(zhuǎn)移與重組二個(gè)細(xì)菌間部分遺傳基因,可以發(fā)生轉(zhuǎn)移(genetransfer)和重組(rebination),使受體菌獲得新得遺傳性狀。細(xì)菌基因轉(zhuǎn)移和重組得方式:轉(zhuǎn)化(transformation)接合(conjugation)轉(zhuǎn)導(dǎo)(transduction)溶原性轉(zhuǎn)換(lysogenicconversion)原生質(zhì)體融合(protoplastfusion)基因得來源與載體2025/3/1544(一)轉(zhuǎn)化transformation概念供體菌游離得DNA片段直接被受體菌攝取,使受體菌獲得新得性狀

小鼠體內(nèi)肺炎球菌轉(zhuǎn)化經(jīng)典試驗(yàn)2025/3/1545有莢膜肺炎鏈球菌(活菌)IIIS無莢膜肺炎鏈球菌(活菌)IIR有莢膜肺炎鏈球菌(死菌)IIISIIR活菌+IIIS死菌或IIR活菌+提取得IIISDNA分離出IIIS型有莢膜得活菌小鼠體內(nèi)肺炎鏈球菌轉(zhuǎn)化試驗(yàn)Griffith(1928)分離出IIIS2025/3/1546轉(zhuǎn)化得DNA片段稱轉(zhuǎn)化因子轉(zhuǎn)化因子分子量小,不超過10~20個(gè)基因,才可能被受體菌攝取攝入得供體菌DNA片段與受體菌相應(yīng)DNA重組重組菌;重組菌繁殖時(shí),就可形成重組突變株,獲得供體菌得某些性狀。2025/3/15472025/3/1548(二)接合conjugation概念供體菌通過性菌毛將遺傳物質(zhì)(質(zhì)粒)傳遞給受體菌(通過接合傳遞得質(zhì)粒有F質(zhì)粒、R質(zhì)粒、Col質(zhì)粒、毒力質(zhì)粒)

2025/3/1549細(xì)菌接合示意圖掃描電鏡15000×2025/3/1550接合★F因子得傳遞—F因子經(jīng)接合傳遞后在受體菌中可有三種存在方式:2025/3/1551①F質(zhì)粒在受體菌中單獨(dú)存在,使F-

菌轉(zhuǎn)變?yōu)镕+

菌,長出性菌毛。2025/3/15522025/3/1553②F質(zhì)粒經(jīng)接合傳遞后,與染色體重組,整合后得細(xì)菌能高效地轉(zhuǎn)移染色體上得基因,故稱高頻重組株

highfrequencyrebinant,Hfr。

Hfr得細(xì)菌,基染色體上帶有F質(zhì)粒,因此,也可產(chǎn)生性菌毛

2025/3/15542025/3/1555形成高頻重組株:F質(zhì)粒與細(xì)菌染色體整合,并使細(xì)菌長出性菌毛高頻重組株Hfr2025/3/1556③Hfr中得F質(zhì)粒有時(shí)也可從Hfr中脫離下來,又形成了質(zhì)粒。脫離下來得F質(zhì)粒上可以帶有染色體上鄰近得一些基因,這種質(zhì)粒稱為F’質(zhì)粒

2025/3/1557F因子轉(zhuǎn)移與復(fù)制①形成高頻重組株②HfrHfrHfr③形成F’質(zhì)粒F’從Hfr上脫離的F’2025/3/1558因此,帶有F質(zhì)粒、Hfr、F’質(zhì)粒得細(xì)菌均就是F+陽性菌,有性菌毛,可與F-

菌接合2025/3/1559★R質(zhì)粒得傳遞

目前,臨床上多重耐藥菌株得出現(xiàn)與R質(zhì)粒通過接合傳遞密切有關(guān)。

R質(zhì)粒組成:

①耐藥傳遞因子(resistancetransferfactor,RTF)

RTF類似F因子,可編碼產(chǎn)生性菌毛并以接合方式轉(zhuǎn)移。

②耐藥決定因子(r決定因子)

2025/3/1560RTFISR決定因子Tn9Tn4Tn5Tn9耐氯霉素Tn4耐氨芐青霉素、鏈霉素等Tn5耐卡那霉素R質(zhì)粒組成示意圖2025/3/15612025/3/1562(三)轉(zhuǎn)導(dǎo)transduction

概念以溫和噬菌體為載體,將供體菌得遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移到受體菌中,使受體菌獲得新得遺傳性狀。噬菌體種類毒性噬菌體\溫和噬菌體(復(fù)習(xí))

2025/3/1563轉(zhuǎn)導(dǎo)方式(普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)、局限性轉(zhuǎn)導(dǎo))⒈普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)-轉(zhuǎn)導(dǎo)得DNA片段可以就是供體菌染色體中任何部分。