\o"分享到微博"\o"分享到微信"\o"分享到QQ"\o"分享到QQ空間"【摘要】目的：對比酶聯免疫吸附法（酶免法）和膠體金法檢測丙肝抗體的價值。方法：選擇2023年8月—2023年12月919例參與檢驗的病例，對研究對象進行血液樣本采集。對所采集的血樣均分別進行酶免法檢測和膠體金法檢測，以丙肝病毒核酸檢測結果為診斷的金標準，比較不同檢測方式對丙肝抗體的陽性檢出情況，此外比較不同檢測方式的檢測時間及重復采樣情況。結果：金標準證實其中20份為陽性，陽性率為2.18%。酶免法與膠體金法的陽性檢出率分別為95.00%與90.00%，對比差異無統計學意義（P>0.05）。膠體金法的檢測時間為（8.84±1.21）min，明顯短于酶免法的（31.15±4.26）min，差異有統計學意義（P<0.05）；膠體金法重復采樣率為0.76%，低于酶免法的2.50%，對比差異有統計學意義（P<0.05）。結論：對于丙肝抗體檢測，應用酶免法與膠體金法的陽性檢出率均較高，但膠體金法的檢測速度快，重復采樣率低，因此可作為大規模篩查丙肝的首選方法。【關鍵詞】丙肝抗體；酶免法；膠體金法ComparativeanalysisofenzymeimmunoassayandcolloidalgoldmethodfordetectinghepatitisCantibodiesWANGShanshan，MAYanweiDepartmentofLaboratoryMedicine，BeilinDistrictDiseasePreventionCenter，Xi’anCity，Xi’an，Shaanxi710001，China【Abstract】Objective：Tocomparethevalueofenzyme-linkedimmunosorbentassay（ELISA）andcolloidalgoldmethodindetectinghepatitisCantibodies.Methods：919testcaseswereselectedfromAugust2023toDecember2023，andbloodsampleswerecollectedfromthestudysubjects.Forthecollectedbloodsamples，enzyme-linkedimmunosorbentassay（ELISA）andcolloidalgoldmethodwereusedfordetection.TheresultsofhepatitisCvirusnucleicacidtestingwereusedasthegoldstandardfordiagnosistocomparethepositivedetectionofhepatitisCantibodiesusingdifferentdetectionmethods.Inaddition，thedetectiontimeandrepeatedsamplingofdifferentdetectionmethodswerecompared.Results：Thegoldstandardconfirmedthat20ofthemwerepositive，withapositiverateof2.18%.Thepositivedetectionratesofenzyme-linkedimmunosorbentassayandcolloidalgoldassaywere95.00%and90.00%，respectively，andtherewasnostatisticallysignificantdifferenceinthecomparison（P>0.05）.Thedetectiontimeofcolloidalgoldmethodwas（8.84±1.21）min，whichwassignificantlyshorterthan（31.15±4.26）minofenzymeimmunoassaymethod，andthedifferencewasstatisticallysignificant（P<0.05）；Therepeatedsamplingrateofcolloidalgoldmethodwas0.76%，whichwaslowerthan2.50%ofenzymeimmunoassaymethod，andthedifferencewasstatisticallysignificant（P<0.05）.Conclusion：ForthedetectionofhepatitisCantibodies，bothenzymeimmunoassayandcolloidalgoldmethodhavehighpositivedetectionrates.However，colloidalgoldmethodhasafastdetectionspeedandlowrepeatsamplingrate，makingitthepreferredmethodforlarge-scalescreeningofhepatitisC.【KeyWords】HepatitisCantibody；Enzymeimmunoassay；Colloidalgoldmethod丙肝是一種因感染丙型肝炎病毒（HCV）導致的以肝臟損害為主的傳染病，急性期的癥狀較輕，一般為疲乏、食欲減退、惡心等，早期檢出率較低。而較高比例的患者可持續轉變為慢性肝炎，并且還有一定概率進展為肝硬化以及肝癌[1]。隨著生活水平的提高，人們對自身健康體檢的重視度提高，此外，基于對傳染病的預防干預，對丙肝的篩查也成為體檢的重要項目。在丙肝的診斷中，檢測丙肝抗體是重要的方式，而抗體的檢測方法中，酶聯免疫吸附法（酶免法）和膠體金法是兩種常見方式[2]。酶免法通過使用特殊的酶標示劑來放大抗原抗體反應的信號，從而提高檢測的靈敏度和特異性，該方式具有方便、靈敏等優點[3]。膠體金法則利用膠體金顆粒的特殊光學性質，將抗體或抗原標記在膠體金顆粒上，通過抗原抗體反應形成的復合物在檢測樣本中產生顏色變化，從而實現對目標物質的定性或定量檢測，該方法具有操作簡便、結果直觀、敏感性高等優點，特別適用于大規模篩查和現場檢測[4]。針對丙肝抗體的檢測，不同方式的應用效果存在爭議，本次研究共納入919份待檢標本，對比分別采取酶免法和膠體金法的檢測結果差異，以供參考借鑒，報告如下。1資料與方法1.1一般資料選取2023年8月—2023年12月919例參與檢驗的病例，采集其血液標本進行檢查。患者一般資料如下：男512例，女407例；年齡22～71歲，平均年齡（48.12±3.46）歲。納入標準：患者均在前次檢查未檢出丙肝抗體；具有良好的意識及溝通交流能力。排除標準：合并肝腎等嚴重功能損傷者；惡性腫瘤、血液疾病或自身免疫疾病者；精神疾病及認知障礙者。1.2方法患者的樣本采集，均是安排專業采血人員按照規范及無菌原則采血。主要是經靜脈途徑采集4mL血液樣本，置于真空采血管中。將采集的樣本及時送至實驗室進行檢驗，檢驗前血樣置入離心機以3000r/min速度持續離心10min分離血清，分離后立即檢測，檢測完成后將剩余血清分離，置于-20℃冰箱保存。酶免法：檢測方式應用來源上海科華生物工程股份有限公司提供的ELISA檢測試劑盒。室溫下將試劑靜置30min取出板條同時設置對照孔，其中陰性2孔、陽性2孔（分別加入100uL陰陽性對照），空白1孔。按微孔板的順序，分別進行試劑樣品編號，將100uL的樣本稀釋液加入相應微孔內，取10uL的待測樣本血清加入至各孔混勻后進行封板，在37℃環境中持續溫育60min，在取出后借助洗板機持續清洗5遍。各孔均加100uL酶結合物混勻，封板，37℃溫育30min，取出后以洗板機持續清洗5遍。將顯色劑A、B液各50uL加入至各孔混合均勻，在37℃避光環境下顯色30min，各孔同時加50uL終止液混合均勻，酶標儀波長450/630nm，獲得各孔的OD值。陽性標準：OD值/臨界值≥1.0。膠體金法：檢測試劑由英科新創（廈門）科技股份有限公司提供，加入分離出的血清10uL滴加至加樣處，滴加2滴（約100uL）樣本稀釋液稀釋，稀釋15min后觀察檢測線、對照線顯色情況。檢測線、對照線分別出現紅色條帶視為陽性；測試區無紅色條帶，僅對照區出現紅色條帶視為陰性；對照線未出現紅色條帶則說明試劑失效并需重新檢測。1.3觀察指標陽性檢出率。以丙肝病毒核酸檢測結果為診斷的金標準，對比不同方式檢測丙肝抗體陽性情況。陽性率=陽性例數/標本數量×100%。（2）檢測時間和重復采樣。對比不同方式檢測花費的時間，統計不同方法需要重復采樣檢測的例數。1.4統計學方法采用SPSS21.0統計學軟件進行數據分析。計數資料采用（%）表示，進行x2檢驗，計量資料采用（x±s）表示，進行t檢驗，P<0.05為差異具有統計學意義。2結果2.1不同檢測方式陽性檢出率比較金標準方式，對于919份樣本，檢出陽性樣本20份，檢出率為2.18%。對于丙肝抗體檢出情況，酶免法與膠體金法的陽性檢出率較高，對比差異無統計學意義（P>0.05），見表1。2.2不同檢測方式檢測時間和重復采樣比較膠體金法檢測時間短于酶免法，重復采樣率低于酶免法，對比差異有統計學意義（P<0.05），見表2。3討論丙肝是傳染性疾病，人群中普遍易感，感染的人群通常早期無典型癥狀，并且很多感染者也可經體內抗丙肝病毒抗體清除感染源預防疾病。而病毒感染后引起丙肝者，疾病持續進展則可引起慢性肝炎甚至肝癌，這種比例也很高。根據世界衛生組織（WHO）的統計結果顯示，2015年全球大約7100萬人受丙肝病毒感染，且大量慢性感染者可出現肝硬化或者肝癌，而每年死于丙肝及相關肝硬化、肝癌死亡的人數在40萬以上[5]。基于丙肝的高流行性情況，做好疾病預防工作具有重要意義，而具體預防方式上，進行實驗室檢查是主要的方案。丙肝抗體檢測是用于篩查和診斷丙肝的重要檢測方法，通過檢測丙肝抗體能夠幫助確定一個人是否曾經感染過HCV。檢測的血液中是否存在針對HCV的抗體。如果結果是陽性，說明曾經感染過HCV，但并不一定意味著目前仍然有活躍的病毒感染。而如果抗體檢測結果為陽性，通常需要進一步的檢測，丙肝病毒核酸檢測，通過進一步的檢測以確定是否存在持續的病毒感染，這樣可以評估感染是急性還是慢性的，以及病毒的量和類型[6]。對檢測及篩查的結果分析，使得傳染病防控工作人員也能夠更好地了解丙肝的流行情況，有助于制定有效的公共衛生策略和預防措施。而在對丙肝抗體的檢測方法上，常用的檢測方式主要包括酶免法和膠體金法兩種。在丙肝抗體酶免法測定中，首先將丙型肝炎病毒抗原固定在固相載體上，然后將待測樣本中的抗體與固定抗原結合。接著加入酶標示劑，使其與結合在固相載體上的抗體結合。最后加入酶的底物，樣本中的抗體如果與固定抗原結合，就會催化底物發生化學反應，產生顏色或熒光。通過觀察顏色或熒光的強度，可以判斷樣本中是否存在丙型肝炎病毒抗體[7]。丙型肝炎病毒抗體檢測試劑盒（膠體金法）是專門用于檢測人體內的丙型肝炎病毒抗體的診斷工具。該試劑盒基于膠體金技術的原理，通過特定的抗原與抗體反應，實現對丙型肝炎病毒感染的快速、可視化檢測。膠體金法在醫療衛生領域具有廣泛的應用價值，可用于醫院、診所、實驗室等場所，為醫生提供快速、準確的診斷依據，同時也可用于大規模人群篩查，有助于控制丙型肝炎病毒的傳播[7]。本次研究中，對比兩種檢測方式丙肝抗體陽性檢出率，不同檢測方法的檢出率對比無差異，說明酶免法和膠體金法陽性檢出率均較高，檢出率基本一致。而在檢測時間上，膠體金法時間更短，且膠體金法檢測重復采樣例數更少。這說明膠體金法用于丙肝抗體的檢測，檢測方式所需時間短，檢測方式根據顯色的情況判定結果陽