1蔬菜中殺螟硫磷的快速測定免疫層析法本標準規(guī)定了蔬菜中殺螟硫磷農(nóng)藥殘留的免疫層析快速檢測方法的原理、試劑與材料、試樣制備、測定、結(jié)果判定與表述與檢測限和特異性。本標準適用于農(nóng)產(chǎn)品中殺螟硫磷農(nóng)藥殘留的在線篩查和快速監(jiān)測。2規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過本標準的引用而構(gòu)成為本標準的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有的修改單（不包括勘誤表的內(nèi)容）或修改版均不適用于本標準，然而，鼓勵根據(jù)本標準達成協(xié)議的各方研究可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有修改單）適用于本文件。GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和實驗方法GB2763-2019食品安全國家標準食品中農(nóng)藥最大殘留限量3原理利用免疫測定中競爭法檢測原理，通過在檢測區(qū)包被一定量的包被抗原，對照區(qū)包被羊抗鼠多克隆抗體，利用膠體金標記的抗體與樣品及檢測區(qū)的物質(zhì)之間的競爭反應，觀測在檢測條的檢測區(qū)和對照區(qū)呈現(xiàn)的反應結(jié)果（試紙條出現(xiàn)色帶），然后根據(jù)色帶顏色的深淺，判斷農(nóng)藥檢出或超標。4試劑與材料除另有規(guī)定外，所有試劑均為分析純和GB/T6682中規(guī)定的二級水。免疫層析試劑盒：殺螟硫磷免疫層析試劑盒，試劑盒中包括陽性參考品、陰性參考品、甲醇、樣品處理液、檢測液和檢測試紙條，檢測試紙條使用鋁箔袋密封包裝。5試樣制備稱取10g±0.01g蔬菜樣品，剪碎后加入1mL甲醇，靜置15min。加入5mL樣品處理液，充分混勻后，利用濾紙進行固液分離。濾液轉(zhuǎn)移至10mL容量瓶并定容至10mL（樣品處理液沖洗濾紙中的樣品）。樣品濾液由檢測液進行5倍稀釋6測定2撕開鋁箔袋，取出檢測試紙條。將試紙條浸入檢測液中，在層析作用下向檢測試紙條的尾端側(cè)向流動，在6-8min（最長不超過8min）之內(nèi)觀察檢測區(qū)和質(zhì)控區(qū)的色帶條數(shù)和顏色深淺。同時對試劑盒內(nèi)的陽性參考品、陰性參考品和檢測液（空白）進行同樣操作，以協(xié)助結(jié)果判斷。7結(jié)果判定與表述對照陽性參考品、陰性參考品和空白的結(jié)果，根據(jù)競爭免疫法的原理及試紙條檢測區(qū)和控制區(qū)的色帶，按照如下原則進行結(jié)果判定：（a）無效：在檢測試紙條的質(zhì)控區(qū)未出現(xiàn)色帶，表示試紙條已失效；（b）陽性：僅在質(zhì)控區(qū)出現(xiàn)一條紅線，表示待測樣品中殺螟硫磷含量已超標；（c）陰性：在檢測區(qū)及控制區(qū)各出現(xiàn)一條紅線，表示待測樣品中殺螟硫磷含量未超標；（d）臨界值：在控制區(qū)出現(xiàn)一條紅線，在檢測區(qū)出現(xiàn)一條模糊的陰影線，表示待測樣品中殺螟硫磷含量接近標準值。凡是結(jié)果呈現(xiàn)陽性或臨界值的樣品均為“陽性可疑”樣品，需重復檢測兩次以上，并可用質(zhì)譜方法進行確證。8檢測限和特異性蔬菜中殺螟硫磷的檢測限為0.5mg/kg（依據(jù)為GB2763-2019食品安全國家標準食品中