ICS65.020.01CCSX04SXSF2024-12-30發布IT/SXSF13—2025前言 2規范性引用文件 3術語和定義 4儀器 5試劑 6樣品制備 7測定 28結果計算 29重復性 3T/SXSF13－2025本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規則》的規定起草。本文件由山西省林學會提出并監督管理。本文件由山西省林學會團體標準化技術委員會歸口。本文件起草單位：山西省林業和草原科學研究院。本文件主要起草人：魏璐、田建華、史鵬、劉英翠、梁愛軍、朱建蕓、郭學斌、張春媛、李青輝、馬倩。1T/SXSF13—2025沙棘葉及其茶中多酚含量的測定分光光度法文件規定了沙棘葉及其茶中多酚含量測定的儀器、試劑、樣品制備、測定、結果計算和重復性等要求。本文件適用于采用分光光度法測定沙棘葉及其茶中多酚含量。2規范性引用文件下列文件中的內容通過文中的規范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6682分析實驗室用水規格和試驗方法3術語和定義本文件沒有需要界定的術語和定義。4儀器分析天平（精度0.1mg）、超聲提取器、分光光度計、粉碎機。5試劑5.1試劑和材料碳酸鈉（Na2CO3福林酚試劑，濃度1mol/L；沒食子酸標準品：純度≥98%，相對分子質量170.12；實驗用水，水質達到GB/T6682規定的三級及以上。5.210%碳酸鈉溶液用分析天平稱取10mg碳酸鈉（Na2CO3）于100mL容量瓶中，加水定容。5.320%福林酚溶液量取10mL濃度1mol/L福林酚試劑于50mL容量瓶中，加水定容。5.4沒食子酸標準工作液用分析天平稱取10mg沒食子酸標準品，在10mL容量瓶中加少許水溶解后定容，且須適時配用。分別吸取定容后溶液0.10、0.20、0.30、0.40、0.50、0.60mL置于10mL容量瓶中，加水定容，得濃度為10.0、20.0、30.0、40.0、50.0、60.0μg/mL的標準工作液。6樣品制備2T/SXSF13－20256.1樣品要求新鮮、無病蟲害的沙棘葉，干葉不少于100g，濕葉不少于500g。沙棘葉茶樣品不少于6.2樣品處理樣品經干燥，去除雜質，粉碎，過60目篩，密封備用。6.3測試液的制備稱取處理好的樣品100mg(±0.5mg），置于錐形瓶中，加入70℃熱水40mL，用超聲提取器進行超聲處理，超聲溫度32℃,超聲功率80W，超聲時間20min；對處理液進行過濾，殘渣再加入70℃熱水30mL，再次進行超聲處理，條件同前，重復兩次；三次超聲處理后的濾液合并至100mL容量瓶，加水定容，得測試液。7測定7.1標準曲線的繪制分別吸取沒食子酸標準工作液、水（做空白對照用）各1mL，置于10mL試管中，每個試管內分別加入20%福林酚試劑5.0mL，搖勻后反應5min～8min。加入10%碳酸鈉溶液4.0mL，進行超聲處理，超聲溫度32℃,超聲功率80W，超聲時間10min，靜置10min，如此反復3次，取出，冷卻至室溫，于760nm波長條件下測定沒食子酸標準工作液的吸光度。以沒食子酸工作液濃度為橫坐標，吸光度為縱坐標，繪制標準曲線和線性方程。7.2測試液的測定分別吸取測試液、水（做空白對照用）各1mL，置于10mL試管中，每個試管內分別加入20%福林酚試劑5.0mL，搖勻后反應5min～8min。加入10%碳酸鈉溶液4.0mL，進行超聲處理，超聲溫度32℃,超聲功率80W，超聲時間10min，靜置10min，如此反復3次，取出，冷卻至室溫，于760nm波長條件下測定測試液的吸光度，根據標準曲線求出測試液中多酚濃度。如果吸光度值超過60.0μg/mL沒食子酸標準工作液的吸光度時，應對測試液進行適當稀釋，再重新測定吸光度。8結果計算多酚含量按式（1）計算：式中：X—沙棘葉及葉茶中多酚的含量，單位為百分率（%）；c—由標準曲線計算得出的吸取測試液多酚濃度，單位為微克每毫升(μg/mLD—測試液定容后的稀釋倍數，如未進行稀釋，則D=1；V—測試液定容體積，單位為毫升