ICS07.080

CCSC04

DB4403

深圳市地方標準

DB4403/T123—2020

腫瘤細胞庫的建設(shè)與管理規(guī)范

Tumorcellbankconstructionandmanagementspecification

2020-11-23發(fā)布2020-12-01實施

深圳市市場監(jiān)督管理局發(fā)布

DB4403/T123—2020

腫瘤細胞庫的建設(shè)與管理規(guī)范

1范圍

本文件規(guī)定了腫瘤細胞庫的機構(gòu)設(shè)置、建設(shè)和環(huán)境要求，以及腫瘤細胞庫的管理、腫瘤樣本處置、

腫瘤細胞入庫與出庫、質(zhì)量控制和風(fēng)險評估的要求。

本文件適用于人源腫瘤細胞庫的建設(shè)和管理。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件，不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB18467—2011獻血者健康檢查要求

GB19489—2008實驗室生物安全通用要求

GB/T20988—2007信息安全技術(shù)信息系統(tǒng)災(zāi)難恢復(fù)規(guī)范

DB4403/T122—2020人源腫瘤細胞系建立技術(shù)規(guī)范

SZDB/Z188—2016細胞制備中心建設(shè)與管理規(guī)范

SZDB/Z266—2017綜合細胞庫設(shè)置和管理規(guī)范

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件。

3.1

腫瘤細胞tumorcell

腫瘤實質(zhì)部分的基本組成單位。

注：腫瘤細胞根據(jù)分化的特性可分為良性腫瘤細胞和惡性腫瘤細胞。

3.2

原代培養(yǎng)primaryculture

直接從機體取下器官、組織或細胞后進行的首次培養(yǎng)。

3.3

供體donor

提供腫瘤樣本的捐贈者。

4腫瘤細胞庫機構(gòu)設(shè)置

1

DB4403/T122—2020

4.1總則

4.1.1應(yīng)建立統(tǒng)一領(lǐng)導(dǎo)、分級管理、職責(zé)明確的細胞庫管理機構(gòu)，并實行最高管理者負責(zé)制。

4.1.2應(yīng)建立細胞庫運行機構(gòu)，與細胞庫管理機構(gòu)共同負責(zé)細胞庫建設(shè)的規(guī)劃、組織協(xié)調(diào)、運營和日

常工作的執(zhí)行與落實

4.1.3應(yīng)建立倫理審查、科學(xué)審查和安全審查機制，由獨立的生物安全委員會、倫理委員會和科學(xué)委

員會負責(zé)審查等工作。

4.1.4細胞庫的運行架構(gòu),如圖1所示。

圖1細胞庫的運行架構(gòu)圖

4.2職責(zé)與資質(zhì)要求

4.2.1最高管理者

應(yīng)具備生物學(xué)或醫(yī)學(xué)相關(guān)教育背景，并有相關(guān)行業(yè)10年以上管理經(jīng)驗。

對細胞庫的運作具有最高裁決權(quán)，負責(zé)制定腫瘤細胞庫的目標和總體方針，建立管理體系并

確保有效運作，監(jiān)督和管理各職能部門。

4.2.2生物安全委員會

應(yīng)由生物學(xué)家、醫(yī)務(wù)人員、技術(shù)人員和實驗室管理人員等各方面的專家或工作人員組成。

負責(zé)腫瘤細胞庫的生物安全政策和安全操作規(guī)范的審查。

4.2.3倫理委員會

應(yīng)由醫(yī)藥學(xué)、倫理學(xué)、法學(xué)等專家以及無利害關(guān)系的社區(qū)代表等人員組成。委員人數(shù)應(yīng)根據(jù)

細胞庫規(guī)模確定，且總數(shù)應(yīng)為奇數(shù)。

負責(zé)建立腫瘤細胞庫的倫理準則和相應(yīng)的倫理操作規(guī)范，對細胞庫的各項活動進行倫理審

查，對相關(guān)方提供倫理方面的指導(dǎo)與咨詢。

負責(zé)對已通過審查或正在進行的項目進行倫理監(jiān)督，遵循細胞提供者有知情同意權(quán)、隱私保

護權(quán)、可能范圍內(nèi)風(fēng)險最小的原則，保證細胞提供者和相關(guān)人員的利益和安全。

4.2.4科學(xué)委員會

2

DB4403/T123—2020

應(yīng)由生物或醫(yī)學(xué)領(lǐng)域?qū)＜医M成，成員應(yīng)有主持或參與大型科研項目的經(jīng)歷，或有10年以上

生物或醫(yī)學(xué)領(lǐng)域工作經(jīng)驗。

負責(zé)對生物樣本采集和使用的方案進行科學(xué)性審查。負責(zé)對細胞庫中樣本采集、存儲和使用

等技術(shù)環(huán)節(jié)進行科學(xué)審查。

4.2.5腫瘤細胞庫管理機構(gòu)

應(yīng)由生物或醫(yī)學(xué)相關(guān)專業(yè)背景，且具有生物或醫(yī)藥行業(yè)3年以上管理經(jīng)驗的人員組成。

負責(zé)腫瘤細胞庫建設(shè)的規(guī)劃、組織協(xié)調(diào)、運營。

4.2.6腫瘤細胞庫運行機構(gòu)

應(yīng)由具有相關(guān)工作經(jīng)驗且能承擔腫瘤細胞庫工作的生物、醫(yī)學(xué)、信息技術(shù)等各領(lǐng)域?qū)I(yè)人員

組成。

負責(zé)腫瘤細胞庫日常工作的執(zhí)行與落實，包括細胞樣本的采集與處理、出入庫管理、質(zhì)量管

理、安全管理以及日常行政工作。

5建設(shè)與環(huán)境要求

5.1建設(shè)布局

5.1.1腫瘤細胞庫場地要符合長久儲存要求，避免頻繁更換儲存場地。

5.1.2腫瘤細胞庫的設(shè)計及建造應(yīng)符合GB19489—2008的要求，其地形、地質(zhì)、水文條件、占地面積

及周圍環(huán)境、交通狀況等應(yīng)滿足建筑安全及使用要求。

5.1.3腫瘤細胞庫平面布局應(yīng)合理清晰，宜設(shè)置行政辦公區(qū)域、樣本庫區(qū)域、檔案存放區(qū)域、機房區(qū)

域（電子信息儲存），且各區(qū)域相互獨立，不應(yīng)交叉混合使用。行政辦公區(qū)域設(shè)計應(yīng)符合GB19489—

2008第5章實驗室設(shè)計原則及基本要求的規(guī)定，與進行細胞操作的實驗區(qū)域之間應(yīng)利用實體水泥構(gòu)筑

物進行物理隔離。

5.1.4根據(jù)細胞制備入庫的流程程序，設(shè)置各區(qū)域的位置，且腫瘤細胞庫各功能分區(qū)環(huán)境要求應(yīng)符合

SZDB/Z266—2017中5.3的規(guī)定。

5.1.5腫瘤細胞庫的建設(shè)應(yīng)由具有相應(yīng)資質(zhì)的施工單位進行。建設(shè)所用材料應(yīng)符合要求，達到防強

酸、防強堿、防震等效果。細胞庫建設(shè)完成后，各功能區(qū)域的潔凈級別應(yīng)由專業(yè)的檢測人員進行檢測

并出具合格證明。

5.1.6腫瘤細胞庫應(yīng)進行配套的信息化管理系統(tǒng)建設(shè)，包括但不限于細胞樣本接收管理系統(tǒng)、生產(chǎn)管

理系統(tǒng)、出入庫管理系統(tǒng)、環(huán)境監(jiān)測系統(tǒng)等。信息化管理系統(tǒng)建設(shè)應(yīng)立足于支撐腫瘤細胞庫的運營、管

理和服務(wù)全過程。

5.2環(huán)境要求

5.2.1腫瘤細胞庫各區(qū)環(huán)境的通風(fēng)系統(tǒng)、環(huán)境溫度、濕度、氧濃度、照明的要求可參考SZDB/Z266—

2017中的規(guī)定。

5.2.2腫瘤細胞庫的環(huán)境監(jiān)測系統(tǒng)應(yīng)實時監(jiān)測并記錄腫瘤細胞全庫各區(qū)域的環(huán)境變化。腫瘤細胞庫的

超低溫或深低溫存儲設(shè)備，應(yīng)安裝自動遠程監(jiān)控報警系統(tǒng)。

6腫瘤細胞庫管理要求

3

DB4403/T122—2020

6.1人員管理

6.1.1人員培訓(xùn)與考核、檔案管理應(yīng)符合SZDB/Z188—2016中6.1的規(guī)定。

6.1.2腫瘤細胞庫工作區(qū)域應(yīng)設(shè)立相關(guān)人員分級門禁制度和實驗室人員及外來人員準入制度，并建立

相應(yīng)人員準入登記記錄制度。

6.1.3應(yīng)建立工作人員健康檔案，每年至少體檢1次，符合所在崗位健康要求方可上崗；發(fā)生職業(yè)暴

露人員應(yīng)暫時調(diào)離工作崗位，再次上崗前應(yīng)體檢合格并取得主管人員的批準。

6.2物料管理

腫瘤細胞庫中物料采購、物料標識、物料存儲和物料使用應(yīng)符合SZDB/Z188—2016中6.3規(guī)定，存

儲物料應(yīng)具有嚴格的文件記錄制度，物料的使用信息應(yīng)可溯源。

6.3設(shè)備管理

6.3.1腫瘤細胞庫的設(shè)備主要包括生物安全柜、離心機、二氧化碳培養(yǎng)箱、細胞計數(shù)儀、程序降溫儀、

液氮罐。

6.3.2設(shè)備管理應(yīng)符合SZDB/Z188—2016中6.2規(guī)定，易造成交叉污染的設(shè)備宜避免共用。

6.4文件管理

腫瘤細胞庫的文件管理應(yīng)符合SZDB/Z185—2016中8.5規(guī)定。

6.5信息化管理

6.5.1系統(tǒng)組成

腫瘤細胞庫的信息化管理系統(tǒng)主要由細胞樣本接收管理系統(tǒng)、生產(chǎn)管理系統(tǒng)、出入庫管理系統(tǒng)組成。

各部分功能如下：

——細胞樣本接收管理系統(tǒng)用于申請腫瘤細胞樣本的捐贈申請、知情同意書的簽署、腫瘤細胞樣本

運輸、接收等信息的記錄和查詢；

——生產(chǎn)管理系統(tǒng)用于細胞庫操作人員記錄腫瘤細胞的原代分離、培養(yǎng)、傳代、質(zhì)量檢測等信息的

記錄、查詢和管理審核；

——出入庫管理系統(tǒng)用于腫瘤細胞樣本的入庫、在庫和出庫管理。

6.5.2數(shù)據(jù)管理

信息化管理系統(tǒng)應(yīng)采取分密級控制、數(shù)據(jù)訪問控制、防篡改和防竊取控制等措施。

應(yīng)指定專人負責(zé)保管備份數(shù)據(jù)，并定期進行完整性和可恢復(fù)性校驗。

應(yīng)使用通用術(shù)語、規(guī)范格式和統(tǒng)一編碼規(guī)則定義樣本信息。

應(yīng)對腫瘤細胞樣本信息、個人隱私信息等實行分類管理。

應(yīng)按照統(tǒng)一規(guī)則對數(shù)據(jù)做修改、備份、銷毀、更新等操作，并保存操作日志記錄。

6.5.3運行管理

應(yīng)建立規(guī)范化的日常操作流程和關(guān)鍵操作復(fù)核機制。

應(yīng)建立詳細的信息化系統(tǒng)運行日志和故障日志，及時修補漏洞和升級系統(tǒng)，并定期進行審核、

備份。

應(yīng)按照GB/T20988—2007中災(zāi)難恢復(fù)能力等級第1級的要求開展災(zāi)難備份工作，對于樣本信

息的備份應(yīng)遵循安全性、可追溯性原則。

4

DB4403/T123—2020

6.6安全管理

6.6.1應(yīng)具備完善的實驗室安全管理制度，同時對工作人員應(yīng)進行嚴格的安全培訓(xùn)，培訓(xùn)內(nèi)容應(yīng)包括

消防安全、壓力容器安全、化學(xué)性安全、液氮安全、生物安全、人員操作安全等，各類安全要求應(yīng)符

合SZDB/Z188—2016中6.9要求，且實驗操作人員應(yīng)定期進行安全演習(xí)。

6.6.2應(yīng)建立完整的實驗室環(huán)境安全監(jiān)控和應(yīng)急預(yù)警體系，其監(jiān)控和預(yù)警的安全信息應(yīng)包括消防安

全、壓力容器安全、化學(xué)性安全、液氮安全與生物安全，設(shè)置安全預(yù)警值，具備實時監(jiān)控、及時預(yù)警

和自動響應(yīng)。

7腫瘤樣本處置

7.1供體篩查與信息收集

7.1.1用于腫瘤細胞分離培養(yǎng)的組織應(yīng)進行篩選，供體的排除標準宜包括：

——病理類型為混合型；

——人源特定病毒檢測結(jié)果不符合GB18467—2011的規(guī)定；

——有精神障礙；

——伴有其他免疫性疾病，或長期應(yīng)用免疫抑制劑或激素；

——醫(yī)生認為其他不適合情況。

7.1.2應(yīng)收集捐贈者和腫瘤樣本的基本信息，可參考DB4403/T122—2020中附錄A和附錄B進行填

寫。

7.2樣本采集

7.2.1基本要求

腫瘤細胞庫應(yīng)針對不同類型的腫瘤樣本制定相應(yīng)標準采集方法和管理制度，并在符合GMP的標準上

嚴格執(zhí)行。腫瘤樣本的采集需由專業(yè)的醫(yī)護人員進行。

7.2.2實體瘤樣本采集

樣本應(yīng)首先滿足捐贈者的診斷和治療需求，剩余樣本才能用于建立腫瘤細胞系。

根據(jù)細胞培養(yǎng)和檢測需要，應(yīng)采集具有典型生物學(xué)特征的腫瘤組織、癌旁組織和正常組織。

實體瘤樣本的直徑宜不低于5mm。

注：正常組織宜選擇距離癌旁組織5—10cm進行取樣，或者根據(jù)需求方要求的其他標準進行取樣。

7.2.3胸腹水樣本采集

經(jīng)檢測當胸腹水樣本中存在較多腫瘤細胞時，可在無菌條件下抽取胸腹水，采集量宜不低于20mL。

7.3樣本接收

7.3.1樣本保存和運輸應(yīng)滿足以下要求：

——樣本應(yīng)保存在規(guī)定的樣本保存液中（如含抗生素的細胞培養(yǎng)基）；

——樣本保存和運輸應(yīng)在4℃～10℃條件下進行；

——樣本運輸時間宜不超過12h。

7.3.2腫瘤組織樣本在接收前應(yīng)檢查以下內(nèi)容：

——樣本保存是否密封完整；

5

DB4403/T122—2020

——整體運輸包裝是否無破損；

——樣本包裝標簽或標記是否清晰；

——樣本供者信息、樣本信息及相關(guān)檢測報告是否齊全。

7.4腫瘤細胞原代培養(yǎng)

7.4.1實體瘤樣本宜選擇組織塊法或酶消化法進行原代培養(yǎng)。

7.4.2胸腹水樣本宜采用直接離心法收集腫瘤細胞后直接進行培養(yǎng)。

7.4.3腫瘤細胞的分離和培養(yǎng)宜依據(jù)DB4403/T122—2020中6.1和6.2的要求。

7.4.4腫瘤細胞培養(yǎng)初期，培養(yǎng)瓶應(yīng)輕拿輕放，避免組織塊和細胞脫落；培養(yǎng)期間應(yīng)通過顯微鏡觀察

和記錄細胞生長狀態(tài)。待細胞融合度達到80%以上時，可進行細胞純化和傳代。

7.5細胞的純化

腫瘤細胞的純化宜依據(jù)DB4403/T122—2020中6.3的要求，采用機械刮除法、反復(fù)貼壁法、消化排

除法、密度梯度離心法中的一種或多種方法進行。

7.6細胞的傳代和凍存

7.6.1根據(jù)原代細胞融合度或聚團大小，判斷是否可以進行傳代操作。在符合GMP實驗室條件下進行

傳代操作，操作應(yīng)及時、迅速、密度適宜。細胞的傳代宜依據(jù)DB4403/T122—2020中6.4的方法進行。

7.6.2細胞數(shù)目達到凍存要求的細胞系，可進行凍存操作。在符合GMP實驗室條件下，采用合適的冷

凍保護液進行腫瘤細胞凍存，并遵循程序降溫的原則。

7.6.3細胞的凍存宜依據(jù)DB4403/T122—2020中6.5的方法進行。

7.7細胞的復(fù)蘇

細胞的復(fù)蘇操作宜依據(jù)貯存細胞的種類、數(shù)量、凍存方式、預(yù)定用途制訂相應(yīng)的復(fù)蘇標準規(guī)程。復(fù)

蘇過程中應(yīng)保證細胞或樣品的密封性，不能造成泄漏、污染或混淆，并對復(fù)蘇的細胞活性和數(shù)量進行檢

測。

8腫瘤細胞入庫與出庫

8.1細胞入庫

8.1.1應(yīng)對入庫的腫瘤細胞樣本進行編碼標識，于最小包裝上貼附標簽，標簽的編制規(guī)格宜符合

SZDB/Z188—2016中6.5的規(guī)定。

8.1.2腫瘤細胞應(yīng)滿足基本質(zhì)量要求，包括：

——無菌檢測、支原體檢測、內(nèi)（外）源病原因子檢測結(jié)果應(yīng)為陰性；

——應(yīng)進行種屬鑒定（如STR基因分型），應(yīng)無細胞種屬間和種屬內(nèi)細胞交叉污染；

——腫瘤細胞凍存前的存活率應(yīng)不低于90%；復(fù)蘇后的細胞存活率應(yīng)不低于80%；

——應(yīng)進行腫瘤細胞系典型的生物學(xué)特征檢測和鑒定，宜根據(jù)DB4403/T122—2020中附錄F選擇

相應(yīng)的腫瘤細胞標記物進行鑒定。

8.1.3樣本存儲期間，應(yīng)該實時檢查和監(jiān)控細胞庫存儲環(huán)境和設(shè)備運轉(zhuǎn)的正常狀態(tài)。

8.2細胞出庫

8.2.1發(fā)放出庫

6

DB4403/T123—2020

細胞發(fā)放需提交發(fā)放申請，對于發(fā)放的腫瘤細胞的使用和研究范圍進行詳細說明；經(jīng)審核通

過后，腫瘤細胞庫管理員提交細胞出庫申請放行單，并安排經(jīng)過合格培訓(xùn)的實驗室人員進行出庫操

作。

腫瘤細胞樣本以臨床細胞制劑形式應(yīng)用于臨床治療時（如腫瘤細胞疫苗）。實驗室出庫負責(zé)

人員需核對庫存細胞信息和細胞使用者信息，制定嚴格的細胞發(fā)放計劃，由實驗室出庫負責(zé)人員填寫

細胞儲存位置變更的相關(guān)文件后，在質(zhì)控人員監(jiān)督下進行細胞發(fā)放。

腫瘤細胞樣本提供科學(xué)研究使用時，需保證細胞供者在充分知情并簽訂知情同意書的情況下

完成細胞出庫，由實驗室出庫負責(zé)人員填寫能夠記錄細胞儲存位置變更的相關(guān)文件后，由質(zhì)控人員監(jiān)

督從液氮罐中取出需要的細胞進行使用。

細胞的發(fā)放應(yīng)建立及時有效的反饋制度，對已發(fā)放細胞樣本的使用情況進行收集、記錄。

8.2.2轉(zhuǎn)移出庫

腫瘤細胞庫內(nèi)部因整改、擴容或評估凍存干細胞質(zhì)量等情況而需要進行細胞轉(zhuǎn)移時，按照細

胞轉(zhuǎn)移操作規(guī)范進行轉(zhuǎn)移操作。

細胞轉(zhuǎn)移操作應(yīng)宜采用專用的細胞轉(zhuǎn)移設(shè)備，且應(yīng)對細胞轉(zhuǎn)移過程中的溫度變化進行監(jiān)控和

記錄。

8.2.3銷毀出庫

樣本的廢棄應(yīng)提供細胞廢棄申請書，應(yīng)征求供體對廢棄樣本的知情同意，腫瘤細胞應(yīng)按照醫(yī)

療廢棄物銷毀原則進行處理。

應(yīng)對樣本的銷毀進行記錄，包括銷毀的原因、批準和執(zhí)行銷毀的日期、銷毀的操作人員等。

9質(zhì)量控制與風(fēng)險評估

9.1質(zhì)量控制

9.1.1腫瘤細胞庫應(yīng)制定包括質(zhì)量手冊、管理性文件、標準操作文件及相關(guān)記錄的標準質(zhì)量管理體

系。

9.1.2腫瘤細胞庫應(yīng)制定樣本采集、腫瘤細胞制備、檢測、儲存的規(guī)章制度、操作規(guī)程，以便工作人

員在常規(guī)操作中對材料、試劑和設(shè)備進行質(zhì)量控制。

9.1.3物料、耗材應(yīng)完成相關(guān)的質(zhì)量檢驗，符合質(zhì)量標準的標本、試劑耗材、培養(yǎng)液、一次性無菌用

品方可使用。

9.1.4對不同類型的腫瘤細胞，應(yīng)建立相應(yīng)的細胞分離、傳代、凍存質(zhì)量標準和檢測流程，符合質(zhì)量

標準的腫瘤細胞方可進行儲存。

9.1.5應(yīng)建立不合格品管理機制并實施。

9.2風(fēng)險評估

9.2.1應(yīng)事先對腫瘤細胞樣本整個制備入庫過程進行評估，可采取回顧或者前瞻的方式，持續(xù)進行危

險識別、風(fēng)險評估和實施必要的控制機制。

9.2.2應(yīng)制定合理的風(fēng)險控制程序，以規(guī)定與產(chǎn)品安全相關(guān)的風(fēng)險的識別、分析、評價和控制的過程

和方法，以保證風(fēng)險管理的有效性，從而確保產(chǎn)品的安全性和有效性。

9.2.3應(yīng)依據(jù)細胞受微生物感染、交叉污染、異常突變、轉(zhuǎn)基因物種等風(fēng)險對每株細胞行風(fēng)險評估，

并依據(jù)風(fēng)險等級對細胞進行分類管理，同時及時公布和嚴格管控存在風(fēng)險的細胞操作和出入庫。

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DB4403/T122—2020

9.2.4腫瘤細胞庫應(yīng)建立嚴格的生物安全及危害性評估方案、生物安全審查制度及生物安全事故應(yīng)急

預(yù)案。涉及到感染性物質(zhì)的操作、運輸?shù)刃袨椋瑧?yīng)符合以下要求：

——由受過培訓(xùn)的專門人員進行；

——使用特定的操作或運輸工具；

——建立完善的記錄文件。

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參考文獻

[1]《干細胞制劑質(zhì)量控制及臨床前研究指導(dǎo)原則（試行）—cFDA》.2015.

[2]季加孚,袁志宏,步召德.腫瘤組織標本庫常用實驗技術(shù)手冊[J].2006.

[3]于穎彥,劉炳亞,朱正綱.腫瘤組織庫建立的進展及意義[J].診斷學(xué)理論與實踐,2009,

8(1):9—11.29(2):104—105.

[4]萬美容,劉福民,劉小云.腫瘤組織庫的建立與管理[J].徐州醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2009.

[5]CamposAHJFM,SilvaAA,MotaLDDC,etal.Thevalueofatumorbankinthe

developmentof