大鼠心律失常模型的建立和藥物篩選

基礎醫學院藥理學系實驗目的掌握大鼠急性心律失常模型的建立方法。了解急性心肌缺血再灌注損傷時心電圖改變、心律失常發生的類型和次數。通過對受試藥物的觀察，了解藥物抗心律失常效果，借此達到篩選抗心律失常藥物的目的。心律失常模型建立方法急性心肌缺血——結扎左冠狀動脈前降支外科手術藥物（氯仿、氯化鈣、烏頭堿）電刺激實驗器械手術器械一套氣管插管小動物呼吸機PowerLab生物機能實驗系統潮氣量8～12ml

呼－吸比為1：2

呼吸頻率70～80次/分呼吸壓力1.5～2.5kPa呼吸機參數設定：

大鼠正常心率：320－450次/分

PowerLab實驗系統記錄Ⅱ導聯心電圖麻醉后插管后缺血0時刻缺血30min再灌5min再灌30min心律失常記錄特殊時間點設置通道設置

3通道20%氨基甲酸乙酯溶液（烏拉坦）受試藥物（利多卡因）

實驗藥品實驗動物Wistar大鼠，體重250－300g，雌雄均可實驗步驟麻醉、固定、備皮記錄Ⅱ導聯心電圖氣管插管，調節小動物呼吸機（不連接）開胸和心包切開術復制心肌缺血再灌注損傷模型藥物治療需觀察的指標：心電圖實驗步驟1.麻醉、固定、備皮20%氨基甲酸乙酯溶液,0.6ml/100g,IP

棕色導線---右上肢綠色導線---右下肢紅色導線---左下肢2.連接Ⅱ導聯心電極

大鼠正常心率：320－450次/分3.氣管插管在氣管上剪一倒T形小口插入氣管插管并結扎固定，吸取氣管插管內的分泌物保持氣管通暢。4.開胸和心包切開術在劍突上方沿體軸正中向頸部剪2cm左右開口，將皮膚與左胸部肌肉分開，沿胸肌走行方向用止血鉗鈍性分離使胸肌下方的肋骨暴露。4.開胸和心包切開術在第4～5肋間打開胸腔，將氣管插管與呼吸機相連，觀察大鼠胸部起伏幅度，保證呼吸壓力為1.5～2.5kPa。4.開胸和心包切開術用開胸器牽拉肋骨，注意不要損傷肺部，以免大量出血，暴露心臟，破壞心包膜。5.復制心肌缺血再灌注損傷模型及藥物治療

輕按大鼠腹部，將心臟擠出胸腔，在肺動脈干與左心耳之間尋找左冠狀動脈前降支主干。

大鼠左冠狀動脈前降支從主動脈發出后走行于肺動脈段和左心耳間，以后沿室間溝下行但是在心臟表面無法直接見到血管，應該以左心耳和肺動脈段下緣為參照。平左心耳下緣結扎左冠狀動脈前降支，結扎動作要輕柔迅速。5.復制心肌缺血再灌注損傷模型及藥物治療

盡量減少對心臟的損傷，控制在1min內完成。結扎后將心臟放回胸腔。缺血30min，再灌30min。

藥物治療5.復制心肌缺血再灌注損傷模型及藥物治療結扎/再灌注成功的標志1.肉眼直視觀察：結扎打結瞬間，LAD遠端供血心肌先變紫紺，而后稍顯蒼白；松解結扎線，缺血心肌變得較前紅潤；2.心電圖：結扎后出現顯著的ST段抬高，不是所有的ST抬高均有意義，心電圖的改變很準確,但一定要出現J點抬高。3.染色證實：TTC染色法，可清晰地分辨出正常組織（紅色）和梗死區（白色）。4.血清酶學的測量梗死的地方其實肉眼大致能看出，和其他地方相比發白6.心電圖的觀察與記錄心律失常的類型心律失常發生的次數和持續時間J點（J點為