…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁(yè)，總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè)，總=sectionpages11頁(yè)2025年魯教版選擇性必修3生物上冊(cè)月考試卷981考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共5題，共10分)1、生物技術(shù)發(fā)展速度很快，已滅絕生物的“復(fù)生”將不再是神話。如果世界上最后一只野馬剛死亡，下列提供的“復(fù)生”野馬個(gè)體的方法中能夠成功的是（）A.將野馬的體細(xì)胞取出，利用組織培養(yǎng)技術(shù)，經(jīng)脫分化、再分化，培育成新個(gè)體B.將野馬的體細(xì)胞兩兩融合，再經(jīng)組織培養(yǎng)培育成新個(gè)體C.取出野馬的體細(xì)胞核移植到母家馬的去核卵母細(xì)胞中，經(jīng)孕育培養(yǎng)成新個(gè)體D.將野馬基因?qū)爰荫R的受精卵中，培育成新個(gè)體2、《細(xì)胞—干細(xì)胞》雜志在線發(fā)表了中國(guó)科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院誘導(dǎo)人成纖維細(xì)胞重編程為肝細(xì)胞（hihep細(xì)胞）的成果。hihep細(xì)胞具有肝細(xì)胞的許多功能，包括分泌血清白蛋白、積累糖原、代謝藥物、藥物轉(zhuǎn)運(yùn)等。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.人成纖維細(xì)胞與hihep細(xì)胞的DNA和RNA基本相同B.人成纖維細(xì)胞重編程為hihep細(xì)胞過程中遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變C.hihep細(xì)胞誘導(dǎo)成功徹底解決了人類重癥肝病的治療D.研究表明，分化的細(xì)胞其分化后的狀態(tài)是可以改變的3、研究表明漸凍癥是因?yàn)橥蛔兓蚴股窠?jīng)元合成了毒蛋白，從而阻礙了軸突內(nèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的流動(dòng)。將誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞）移植給漸凍癥實(shí)驗(yàn)鼠，能延長(zhǎng)其壽命。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.可通過DNA分子雜交技術(shù)來(lái)對(duì)漸凍癥疑似患者進(jìn)行排查B.可通過導(dǎo)入某種調(diào)節(jié)因子抑制突變基因表達(dá)來(lái)治療漸凍癥C.iPS細(xì)胞具有組織特異性，能分化成特定的細(xì)胞或組織D.理論上，iPS細(xì)胞用來(lái)治療漸凍癥可避免免疫排斥反應(yīng)4、下列關(guān)于基因工程成果的概述，不正確的是（）A.在醫(yī)藥衛(wèi)生方面，主要用于診斷治療疾病B.在農(nóng)業(yè)上主要是培育高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)、品質(zhì)優(yōu)良和具有抗的活性的農(nóng)作物C.在畜牧養(yǎng)殖業(yè)上培育出了品質(zhì)優(yōu)良的動(dòng)物D.在環(huán)境保護(hù)方面主要用于環(huán)境監(jiān)測(cè)和對(duì)污染環(huán)境的凈化5、紫杉醇是存在于紅豆杉屬植物體內(nèi)的一種次生代謝物，具有較高的抗癌活性。生產(chǎn)紫杉醇的傳統(tǒng)方法是從瀕危植物紅豆杉的樹皮和樹葉中提取，但這種方法不利于紅豆杉的保護(hù)。目前，科學(xué)家已研究出通過植物細(xì)胞工程相關(guān)技術(shù)獲得紫杉醇的新途徑，下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.所選外植體宜為紅豆杉的莖尖等幼嫩部位B.①過程為“脫分化”，一般不需要光照C.上述利用植物細(xì)胞工程技術(shù)生產(chǎn)紫杉醇的過程體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性D.該生產(chǎn)技術(shù)不受季節(jié)、天氣限制，對(duì)社會(huì)、經(jīng)濟(jì)、環(huán)境保護(hù)具有重要意義評(píng)卷人得分二、多選題(共9題，共18分)6、在紀(jì)錄片《舌尖上的中國(guó)》中多次講到了利用不同微生物發(fā)酵來(lái)制作美味食品。桑葚果實(shí)富含多種營(yíng)養(yǎng)成分及黃酮類化合物（一般難溶或不溶于水，易溶于乙醇等有機(jī)溶劑），目前以桑葚為原料開發(fā)的桑葚酒深受大眾歡迎。醬豆是人們利用大豆制作的一道地方美食，具體做法如下：大豆煮熟→霉菌發(fā)酵→加入蔬菜→加鹽、加調(diào)味酒和香辛料→乳酸發(fā)酵。下列相關(guān)內(nèi)容的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.桑葚酒制作時(shí)榨出的果汁需經(jīng)過高壓蒸汽滅菌后，才能裝進(jìn)發(fā)酵瓶密閉發(fā)酵B.若要提取桑葚中的黃酮苷，可以采用萃取的方法C.醬豆最后在環(huán)境溫暖、氧氣充足的條件下發(fā)酵形成D.醬豆中有機(jī)物的種類和含量均減少7、下列關(guān)于DNA粗提取與鑒定、DNA片段的擴(kuò)增及電泳鑒定的原理的敘述正確的是（）A.利用DNA不溶于酒精，但蛋白質(zhì)均溶于酒精的原理，可分離DNA與蛋白質(zhì)B.利用在一定溫度下DNA遇二苯胺試劑會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色的原理對(duì)粗提取的DNA進(jìn)行鑒定C.PCR技術(shù)利用了DNA的熱變性原理，通過調(diào)節(jié)溫度來(lái)控制DNA雙鏈的解聚與結(jié)合D.電泳鑒定DNA利用了DNA在電場(chǎng)中會(huì)向著它所帶電荷相反的電極移動(dòng)的原理8、甲品種青花菜具有由核基因控制的多種優(yōu)良性狀；但屬于胞質(zhì)雄性不育品種。通過體細(xì)胞雜交，成功地將乙品種細(xì)胞質(zhì)中的可育基因引入甲中，下圖為該操作示意圖。下列相關(guān)敘述正確的是（）

A.人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合可使用離心法B.融合的原生質(zhì)體再生出細(xì)胞壁后再進(jìn)行組織培養(yǎng)C.雜種細(xì)胞經(jīng)過一定激素和營(yíng)養(yǎng)的誘導(dǎo)，發(fā)育成為雜種植株D.篩選出的雜種植株含有控制甲青花菜優(yōu)良性狀的基因，但只能通過母本進(jìn)行傳遞9、以純化鑒定后的重組大腸桿菌RecQ解旋酶免疫小鼠（2n=40），融合免疫小鼠的脾細(xì)胞及骨髓瘤細(xì)胞（2n=62-68），篩選雜交瘤細(xì)胞，制備抗RecQ解旋酶單克隆抗體（mAb），相關(guān)檢測(cè)結(jié)果如圖A、B所示。有關(guān)說(shuō)法正確的是（）

圖A雜交瘤細(xì)胞染色體數(shù)目圖B不同濃度mAb對(duì)RecQ蛋白結(jié)合DNA活性的影響A.重組大腸桿菌RecQ解旋酶可刺激相應(yīng)B淋巴細(xì)胞增殖分化B.單克隆抗體的制備過程中需要進(jìn)行2次篩選和2次抗原檢測(cè)C.雜交瘤細(xì)胞在融合的過程中可能會(huì)發(fā)生染色體數(shù)目的丟失D.該mAb能特異性與RecQ解旋酶結(jié)合，在稀釋度為1/800時(shí)可顯著抑制RecQ解旋酶與DNA的結(jié)合10、如圖是單克隆抗體制備過程示意圖，1～3代表相關(guān)過程，a～e代表相關(guān)細(xì)胞，其中c是兩兩融合的細(xì)胞。以下敘述錯(cuò)誤的是（）

A.過程1是給小鼠注射特定抗原蛋白，可刺激小鼠產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)B.過程2的促融方法可采用電融合技術(shù)，該技術(shù)能擊穿核膜促使核融合C.c細(xì)胞有三種，每種細(xì)胞染色體組數(shù)不相等，e細(xì)胞是雜交瘤細(xì)胞D.過程3是進(jìn)行抗體檢測(cè)，并克隆產(chǎn)生陽(yáng)性細(xì)胞的過程11、自生固氮菌是土壤中能獨(dú)立固定空氣中N2的細(xì)菌，將玉米種子用自身固氮菌拌種后播種，可顯著提高產(chǎn)量并降低化肥的使用量。科研人員進(jìn)行了土壤中自生固氮菌的分離和固氮能力測(cè)定的研究，部分實(shí)驗(yàn)流程如圖。以下敘述正確的是（）

A.步驟①土樣應(yīng)取自當(dāng)?shù)乇韺油寥溃徊襟E③將土壤懸浮液稀釋了1000倍B.自生固氮菌是自養(yǎng)型生物，不可用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板來(lái)計(jì)數(shù)土壤懸浮液中的菌體數(shù)C.步驟②需充分振蕩20min，主要目的是使土壤中的微生物充分釋放到無(wú)菌水中D.步驟④所用的接種工具是涂布器，該選擇培養(yǎng)基的特點(diǎn)是不添加氮源12、世界首例免疫艾滋病的基因編輯嬰兒用到了能夠精確定位并修飾基因的基因編輯技術(shù)，即基因編輯時(shí)用約為頭發(fā)二十分之一細(xì)的針把Cas9蛋白和特定的RNA引導(dǎo)序列注入受精卵中，對(duì)CCR5基因進(jìn)行修改，預(yù)期嬰兒出生后能天然抵抗人類免疫缺陷病毒，關(guān)于該技術(shù)的安全性問題，下列說(shuō)法正確的是（）A.基因編輯時(shí)，引導(dǎo)序列可能發(fā)生變異，導(dǎo)致剪切錯(cuò)誤，造成不可預(yù)知的后果B.經(jīng)過基因編輯的個(gè)體，有可能影響基因選擇性表達(dá)，而導(dǎo)致其他疾病的產(chǎn)生C.將基因編輯技術(shù)應(yīng)用于治療性克隆，符合人類倫理道德D.只要加強(qiáng)監(jiān)管、完善法律法規(guī)、完善技術(shù)手段，不需擔(dān)心基因編輯技術(shù)的安全性13、農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒上的T-DNA可以轉(zhuǎn)移并隨機(jī)插入到被侵染植物的染色體DNA中。研究者將下圖中被侵染植物的DNA片段連接成環(huán)；并以此環(huán)為模板，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增出T-DNA插入位置兩側(cè)的未知序列，以此可確定T-DNA插入的具體位置。下列說(shuō)法正確的是（）

A.進(jìn)行PCR擴(kuò)增的依據(jù)是DNA分子雙鏈復(fù)制的原理B.進(jìn)行PCR擴(kuò)增需要的酶有解旋酶和熱穩(wěn)定DNA聚合酶C.利用圖中的引物②、③組合可擴(kuò)增出兩側(cè)的未知序列D.通過與受體細(xì)胞的基因組序列比對(duì)，可確定T-DNA的插入位置14、某對(duì)美國(guó)夫婦將用他們精子、卵子形成的胚胎冷藏在澳大利亞墨爾本一家不孕癥治療中心。在一次外出時(shí)，他們因飛機(jī)失事而去世。于是有親人提出，可以將該夫婦冷藏的胚胎植入某個(gè)受體母親子宮，生下一個(gè)孩子來(lái)繼承遺產(chǎn)。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.用精子、卵子形成胚胎需要借助人工授精技術(shù)B.若實(shí)施胚胎移植，需要受體母親處于合適的生理狀態(tài)C.受體母親與胚胎的主要HLA的相似程度要大于50%D.該件事反映了“胚胎冷藏”技術(shù)可能帶來(lái)倫理問題評(píng)卷人得分三、填空題(共7題，共14分)15、酶是細(xì)胞合成的生物催化劑。隨著生物科學(xué)技術(shù)的發(fā)展；酶已經(jīng)走出實(shí)驗(yàn)室，走進(jìn)人們的生產(chǎn)和生活。請(qǐng)回答下面有關(guān)酶的問題：

（1）在腐乳制作的過程中；利用毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成________，____________將脂肪水解為甘油和脂肪酸。加酶洗衣粉里添加的酶制劑中，應(yīng)用最廣泛；效果最明顯的是____________。

（2）果膠酶包括_____________________________；生產(chǎn)中如果要固定果膠酶；最好采用______________________________________法固定化。

（3）酶提取和分離原理：需要用__________法去除相對(duì)分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白，以純化酶；利用_________________________法對(duì)酶進(jìn)行純度鑒定。16、原核基因采取______獲得，真核基因是______。人工合成目的基因的常用方法有______和______。17、來(lái)源：主要是從______中分離純化出來(lái)的。18、植物體細(xì)胞雜交的意義：_____。19、植物繁殖的新途徑。

微型繁殖：可以高效快速地實(shí)現(xiàn)種苗的大量繁殖。

作物脫毒：采用______組織培養(yǎng)來(lái)除去病毒（因?yàn)橹参锓稚鷧^(qū)附近的病毒______）

人工種子：以植物組織培養(yǎng)得到的______、不定芽、頂芽和腋芽等為材料，經(jīng)_____包裝得到的種子。優(yōu)點(diǎn)：完全保持優(yōu)良品種的遺傳特性，______；方便儲(chǔ)藏和運(yùn)輸。

人工種子的結(jié)構(gòu)包括：______、_____和______。20、首先要檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了______，方法是采用______。21、科學(xué)家采用定點(diǎn)誘變的方法構(gòu)建T4溶菌酶的新蛋白質(zhì)，發(fā)現(xiàn)其中一種新蛋白質(zhì)的第9和第164位氨基酸殘基被轉(zhuǎn)換為半胱氨酸殘基，并形成一個(gè)二硫鍵。這種新蛋白質(zhì)的熱穩(wěn)定性會(huì)有什么變化？這項(xiàng)技術(shù)的要點(diǎn)是什么？_________評(píng)卷人得分四、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共6分)22、使用日益廣泛的手機(jī)；在方便人們通訊聯(lián)絡(luò)的同時(shí)也成為細(xì)菌等病原體傳播的途徑。為了解手機(jī)上細(xì)菌的情況，某興趣小組進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)回答相關(guān)問題：

(1)取附著在手機(jī)上細(xì)菌進(jìn)行取樣培養(yǎng)后，對(duì)菌液進(jìn)行系列梯度稀釋的目的是_______。

(2)A平板上生長(zhǎng)的菌落有多種形態(tài)，說(shuō)明附著在手機(jī)細(xì)菌有____種。若要使菌落能在A平板上生長(zhǎng)，下列培養(yǎng)基組分中最合理的是_____(選填“甲、乙、丙”)，原因是_____。可采取____________來(lái)檢測(cè)培養(yǎng)基A制備是否合格。培養(yǎng)基編號(hào)培養(yǎng)基組分甲蔗糖、NaC1、瓊脂、水乙牛肉膏、蛋白胨、NaCl、瓊脂、水丙蛋白胨、NaCl、蔗糖、水

(3)初篩后將平板B的菌落通過“影印”方法接種到C培養(yǎng)基上培養(yǎng)，使C培養(yǎng)基對(duì)應(yīng)位置上出現(xiàn)相同菌落。然后用伊紅-美藍(lán)染液對(duì)C進(jìn)行染色，根據(jù)染色后D中出現(xiàn)的結(jié)果，可判斷平板B中______(選填圖中數(shù)字)是大腸桿菌的菌落。

(4)某同學(xué)采用平板劃線法進(jìn)一步純化大腸桿菌，接種培養(yǎng)一段時(shí)間后，發(fā)現(xiàn)第一劃線區(qū)不間斷長(zhǎng)滿菌落，第二劃線區(qū)上幾乎無(wú)菌落，產(chǎn)生此情況的可能原因____________。23、干燥綜合征（SS）是臨床常見的一種自身免疫病；患者血清中存在多種抗體，其中以SSB抗體特異性最強(qiáng)。下圖表示科研人員利用基因工程技術(shù)獲得SSB蛋白及利用SSB蛋白對(duì)小鼠進(jìn)行免疫的過程。回答下列問題：

(1)利用RNA通過①過程獲得cDNA需要________酶。已知真核生物mRNA在3'端加有PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）保護(hù)尾部不被降解。為了針對(duì)性獲得cDNA，應(yīng)如何設(shè)計(jì)逆轉(zhuǎn)錄第一步時(shí)的DNA引物______，設(shè)計(jì)引物的目的是______。

(2)為確保與pET41a質(zhì)粒定向連接，對(duì)逆轉(zhuǎn)錄得到的cDNA擴(kuò)增時(shí)，應(yīng)在相應(yīng)引物的_______（填“5'”或“3'”）端加上______酶切位點(diǎn)。

(3)③過程用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染大腸桿菌時(shí)，需要用Ca2+處理大腸桿菌，目的是______，然后將處理后的大腸桿菌先接種在添加_______的培養(yǎng)基（A）上培養(yǎng)，待長(zhǎng)出菌落后再利用無(wú)菌膜同位置轉(zhuǎn)移到添加______的培養(yǎng)基（B）上培養(yǎng)，收集_______菌落進(jìn)一步純化后將菌體破碎處理；篩選得到SSB蛋白。

(4)將改造后的大腸桿菌生產(chǎn)的SSB蛋白注入到小鼠體內(nèi)是為了檢測(cè)該蛋白是否具有抗原性，則后續(xù)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容應(yīng)為抽取小鼠血液_______。24、三氯生是一種抑菌物質(zhì)，具有優(yōu)異的貯存穩(wěn)定性，可以替代抗生素用于基因工程中篩選含目的基因的受體細(xì)胞。已知fabV（從霍亂弧菌中發(fā)現(xiàn)的烯脂酰ACP還原酶）基因可以使大腸桿菌抵抗三氯生。

(1)通過PCR方法擴(kuò)增fabV基因時(shí)，先要根據(jù)_____設(shè)計(jì)兩種特異性引物序列，以確保Taq酶從引物的3′端延伸DNA鏈，至少需要經(jīng)過_____次擴(kuò)增才能獲得8個(gè)雙鏈等長(zhǎng)的目的基因。

(2)基因工程的核心步驟是_____；某科研團(tuán)隊(duì)將可以受溫度調(diào)控的基因插入上述選出的重組質(zhì)粒中，構(gòu)建了溫度調(diào)控表達(dá)質(zhì)粒（如圖2）。其中C基因在低溫下會(huì)抑制P2，R基因在高溫下會(huì)抑制P1，如果將lacZ基因和GFP（綠色熒蛋白）基因插入圖2質(zhì)粒中，使得最后表現(xiàn)為低溫下只表達(dá)GFP蛋白，而高溫下只表達(dá)lacZ蛋白。則lacZ基因插在_____之間，GFP基因的插入位置及注意點(diǎn)是_____。

(3)若以大腸桿菌為受體細(xì)胞，篩選上述插入了GFP基因的受體細(xì)胞的依據(jù)是：大腸桿菌能在含_____的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，且_____。評(píng)卷人得分五、綜合題(共1題，共2分)25、用DNA重組技術(shù)可以賦予生物以新的遺傳特性；創(chuàng)造出更符合人類需要的生物產(chǎn)品。在此過程中需要使用多種工具酶，其中4種限制性核酸內(nèi)切酶的切割位點(diǎn)如圖所示。

回答下列問題：

（1）常用的DNA連接酶有E.coliDNA連接酶和T4DNA連接酶。上圖中__________酶切割后的DNA片段可以用E.coliDNA連接酶連接。上圖中___________酶切割后的DNA片段可以用T4DNA連接酶連接。

（2）DNA連接酶催化目的基因片段與質(zhì)粒載體片段之間形成的化學(xué)鍵是____________。

（3）DNA重組技術(shù)中所用的質(zhì)粒載體具有一些特征，如質(zhì)粒DNA分子上有復(fù)制原點(diǎn)，可以保證質(zhì)粒在受體細(xì)胞中能___________；質(zhì)粒DNA分子上有______________，便于外源DNA插入；質(zhì)粒DNA分子上有標(biāo)記基因（如某種抗生素抗性基因），利用抗生素可篩選出含質(zhì)粒載體的宿主細(xì)胞，方法是______________。

（4）表達(dá)載體含有啟動(dòng)子，啟動(dòng)子是指__________________。參考答案一、選擇題(共5題，共10分)1、C【分析】【分析】

1.動(dòng)物核移植的概念：將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中；使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎．這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體。核移植得到的動(dòng)物稱克隆動(dòng)物。

2.植物細(xì)胞的全能性可以通過植物組織培養(yǎng)來(lái)實(shí)現(xiàn)；動(dòng)物細(xì)胞的全能性受到限制，不能用動(dòng)物細(xì)胞復(fù)制動(dòng)物。

【詳解】

A；由于動(dòng)物細(xì)胞的全能性受到限制；目前動(dòng)物的體細(xì)胞還不能直接培養(yǎng)成動(dòng)物個(gè)體，A錯(cuò)誤；

B；由于動(dòng)物細(xì)胞的全能性受到限制；目前動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)還不能產(chǎn)生生物體，B錯(cuò)誤；

C；將野驢的體細(xì)胞核移植到母家馬的去核卵母細(xì)胞中；形成重組細(xì)胞，進(jìn)而經(jīng)過培養(yǎng)獲得重組胚胎，可以克隆形成野馬，該過程利用核移植技術(shù)，為體細(xì)胞克隆的例子，C正確；

D；將野馬的基因?qū)爰荫R的受精卵中；屬于基因工程，可培育成新性狀的家馬，不能讓野馬復(fù)生，D錯(cuò)誤。

故選C。

【點(diǎn)睛】2、D【分析】【分析】

細(xì)胞分化是指在個(gè)體發(fā)育中；相同細(xì)胞的后代，在形態(tài)；結(jié)構(gòu)和生理功能上發(fā)生穩(wěn)定性差異的過程。細(xì)胞分化過程遺傳物質(zhì)不變，只是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果。

【詳解】

A；人成纖維細(xì)胞與hihep細(xì)胞的DNA基本相同；由于基因的選擇性表達(dá)，RNA不完全相同，A錯(cuò)誤；

B；人成纖維細(xì)胞重編程為hihep細(xì)胞過程中遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生改變；B錯(cuò)誤；

C；由題干信息可知：hihep細(xì)胞具有肝細(xì)胞的許多功能；但并未完全代替肝臟細(xì)胞，故hihep細(xì)胞誘導(dǎo)成功不能徹底解決人類重癥肝病的治療，C錯(cuò)誤；

D；根據(jù)題干信息可知；人成纖維細(xì)胞重編程為肝細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)成功，說(shuō)明分化的細(xì)胞其分化后的狀態(tài)是可以改變的，D正確。

故選D。3、C【分析】【分析】

DNA分子雜交的基礎(chǔ)是；具有互補(bǔ)堿基序列的DNA分子，可以通過堿基對(duì)之間形成氫鍵等，形成穩(wěn)定的雙鏈區(qū)。在進(jìn)行DNA分子雜交前，先要將兩種生物的DNA分子從細(xì)胞中提取出來(lái)，再通過加熱或提高pH的方法，將雙鏈DNA分子分離成為單鏈，這個(gè)過程稱為變性。然后，將兩種生物的DNA單鏈放在一起雜交，其中一種生物的DNA單鏈?zhǔn)孪扔猛凰剡M(jìn)行標(biāo)記，如果兩種生物DNA分子之間存在互補(bǔ)的部分就能形成雙鏈區(qū)。由于同位素被檢出的靈敏度高，即使兩種生物DNA分子之間形成百萬(wàn)分之一的雙鏈區(qū)也能夠被檢出。

【詳解】

A；漸凍癥是因?yàn)橥蛔兓蚴股窠?jīng)元合成了毒蛋白；因此可通過DNA分子雜交技術(shù)對(duì)漸凍癥患者進(jìn)行排查，A正確；

B；導(dǎo)入某種調(diào)節(jié)因子抑制突變基因表達(dá)；使神經(jīng)元細(xì)胞不能合成毒蛋白，從而達(dá)到治療疾病的目的，B正確；

C；iPS細(xì)胞不具有組織特異性；可分化成多種不同的細(xì)胞或組織，C錯(cuò)誤；

D；理論上；iPS細(xì)胞可增值分化形成正常的神經(jīng)細(xì)胞，用來(lái)治療漸凍癥還可避免免疫排斥反應(yīng)，D正確。

故選C。4、A【分析】【分析】

基因工程成果：

（1）在農(nóng)業(yè)上主要是培育高產(chǎn)；穩(wěn)產(chǎn)、品質(zhì)優(yōu)良和具有抗性的農(nóng)作物；

（2）在畜牧養(yǎng)殖業(yè)上培育出品質(zhì)優(yōu)良的動(dòng)物；

（3）在環(huán)境保護(hù)方面主要用于環(huán)境監(jiān)測(cè)和對(duì)污染環(huán)境的凈化；

（4）在醫(yī)藥衛(wèi)生方面；主要用于生產(chǎn)蛋白類藥物。基因治療現(xiàn)在處于臨床試驗(yàn)階段。

【詳解】

A；基因工程在醫(yī)藥衛(wèi)生方面；主要用于生產(chǎn)蛋白類藥物，而不是主要用于診斷治療疾病，A錯(cuò)誤；

B；基因工程能在農(nóng)業(yè)上主要是培育產(chǎn)量高的、品質(zhì)優(yōu)良和具有抗性的一些農(nóng)作物；B正確；

C；上述分析可知；基因工程能在畜牧養(yǎng)殖業(yè)上培育出了品質(zhì)優(yōu)良的動(dòng)物，C正確；

D；基因工程在環(huán)境保護(hù)方面；可以應(yīng)用于環(huán)境監(jiān)測(cè)和環(huán)境凈化領(lǐng)域，D正確。

故選A。5、C【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素使用比例對(duì)植物細(xì)胞發(fā)育的影響：生長(zhǎng)素用量比細(xì)胞分裂素用量；比值高時(shí)，有利于根的分化；抑制芽的形成；比值低時(shí)，有利于芽的分化、抑制根的形成；比值適中時(shí)，促進(jìn)愈傷組織的形成。

【詳解】

A；由于紅豆杉的莖尖等幼嫩部位分化程度低；容易誘導(dǎo)，所以所選外植體宜為紅豆杉的莖尖等幼嫩部位，A正確；

B；①表示脫分化形成愈傷組織；生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素二者比值適中時(shí)，有利于促進(jìn)愈傷組織的形成，一般不需要光照，B正確；

C；上述利用植物細(xì)胞工程技術(shù)獲得了高產(chǎn)細(xì)胞群；并沒有培育成植株，故沒有體現(xiàn)細(xì)胞的全能性，C錯(cuò)誤；

D；植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的條件可以認(rèn)為控制；具有快速，高效、不受季節(jié)、外部環(huán)境等條件的限制的特點(diǎn)，對(duì)社會(huì)、經(jīng)濟(jì)、環(huán)境保護(hù)具有重要意義，D正確。

故選C。二、多選題(共9題，共18分)6、A:C:D【分析】【分析】

根據(jù)題意可知；醬豆制作時(shí)，首先要利用霉菌進(jìn)行發(fā)酵，霉菌等微生物產(chǎn)生的酶可以將大分子物質(zhì)分解成小分子物質(zhì)，最后進(jìn)行乳酸發(fā)酵時(shí)所需的乳酸菌是厭氧生物，需要在無(wú)氧條件下進(jìn)行。

【詳解】

A；桑葚酒制作時(shí)榨出的桑葚汁不能進(jìn)行高壓蒸汽滅菌；否則會(huì)殺死桑葚表皮上的酵母菌菌種，A錯(cuò)誤；

B；因桑葚中的黃酮苷一般難溶或不溶于水；易溶于乙醇等有機(jī)溶劑，所以提取桑葚中的黃酮苷可采用萃取的方法，B正確；

C；醬豆制作最后是進(jìn)行乳酸發(fā)酵；乳酸發(fā)酵中的乳酸菌為厭氧型生物，故乳酸發(fā)酵應(yīng)在無(wú)氧條件下進(jìn)行，C錯(cuò)誤；

D；在微生物的作用下；大豆所含的蛋白質(zhì)、脂肪等大分子物質(zhì)被分解成易于吸收的小分子物質(zhì)，同時(shí)微生物的呼吸要消耗大豆中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，并形成多種中間產(chǎn)物，所以醬豆中有機(jī)物的種類增加，含量減少，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值增加，D錯(cuò)誤。

故選ACD。

【點(diǎn)睛】7、B:C:D【分析】【分析】

DNA粗提取和鑒定的原理：

（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液；但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精；DNA對(duì)酶；高溫和洗滌劑的耐受性。

（2）DNA的鑒定：在沸水浴的條件下；DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色。

【詳解】

A；DNA不溶于酒精溶液；但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精，可將DNA與蛋白質(zhì)分離，A錯(cuò)誤；

B；在沸水浴的條件下；DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色，B正確；

C；PCR是一種體外擴(kuò)增DNA片段的技術(shù)；利用了DNA熱變性原理，通過調(diào)節(jié)溫度來(lái)控制DNA雙鏈的解聚與結(jié)合，包括：高溫變性（解鏈）→低溫復(fù)性→中溫延伸三個(gè)步驟，C正確；

D；由于同性相斥、異性相吸；帶電分子會(huì)向著與其所帶電荷相反的電極移動(dòng)，電泳鑒定DNA利用了DNA在電場(chǎng)中會(huì)向著它所帶電荷相反的電極移動(dòng)的原理，D正確。

故選BCD。8、A:B:C【分析】【分析】

題圖分析：該圖為體細(xì)胞雜交過程；其中A為去除細(xì)胞壁，制備原生質(zhì)體，可以用酶解法，B為誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，可以用聚乙二醇處理，融合的雜種細(xì)胞應(yīng)該具備乙品種細(xì)胞質(zhì)中的可育基因，甲品種的控制多種優(yōu)良性狀的核基因，該過程的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性和植物細(xì)胞的全能性。

【詳解】

A；人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法有化學(xué)法（聚乙二醇）和物理法（離心、振動(dòng)、電刺激等）兩大類；A正確；

B；雜種細(xì)胞再生出細(xì)胞壁是細(xì)胞融合成功的標(biāo)志；融合成功之后再進(jìn)行組織培養(yǎng)，B正確；

C；雜種細(xì)胞經(jīng)過外源生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的誘導(dǎo)；脫分化形成愈傷組織，再分化形成胚狀體，進(jìn)一步成為雜種植株，C正確；

D；甲品種青花菜具有由核基因控制的多種優(yōu)良性狀；雜種植株細(xì)胞核內(nèi)含有控制甲青花菜優(yōu)良性狀的基因，具備乙品種細(xì)胞質(zhì)中的可育基因，因此精子中具備一半核基因，并可通過父本（精子）進(jìn)行傳遞，D錯(cuò)誤。

故選ABC。9、A:C:D【分析】【分析】

單克隆抗體的制備過程是：對(duì)小動(dòng)物注射抗原；從該動(dòng)物的脾臟中獲取效應(yīng)B細(xì)胞，將效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞(體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng))，最后獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；重組大腸桿菌RecQ解旋酶相當(dāng)于抗原；能刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的體液免疫應(yīng)答，則在人體內(nèi)可刺激B細(xì)胞增殖分化為漿細(xì)胞和記憶B細(xì)胞，A正確；

B；單克隆抗體的制備過程中需要進(jìn)行2次篩選和1次抗原檢測(cè)；第一次是用選擇性培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；第二次是通過克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，進(jìn)一步篩選出能產(chǎn)生人們所需要抗體的雜交瘤細(xì)胞，B錯(cuò)誤；

C；據(jù)圖1分析；染色體數(shù)目有為80-93的細(xì)胞，免疫小鼠中B淋巴細(xì)胞染色體數(shù)目為40，骨髓瘤細(xì)胞染色體數(shù)目為62-68，兩者之和大于80-93，故雜交瘤細(xì)胞在融合的過程中可能會(huì)發(fā)生染色體數(shù)目的丟失，C正確；

D、據(jù)圖2分析，單抗稀釋度為1/800時(shí)RecQ解旋酶結(jié)合DNA活性最低，可知mAb能特異性與RecQ解旋酶結(jié)合可顯著抑制RecQ解旋酶與DNA的結(jié)合；D正確。

故選ACD。10、B:C【分析】【分析】

單克隆抗體的制備涉及細(xì)胞融合；細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞篩選；從題干信息圖可看出，過程1代表的是注射特異性抗原使小鼠免疫，從而獲得能產(chǎn)生相應(yīng)抗體的B淋巴細(xì)胞；過程2是將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的過程；過程3是克隆培養(yǎng)篩選后的陽(yáng)性細(xì)胞，一共需要進(jìn)行兩次，最終獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，此后在培養(yǎng)基或小鼠腹腔中培養(yǎng)。

【詳解】

A；圖中過程1是通過注射抗原或抗原蛋白來(lái)獲得產(chǎn)生相應(yīng)抗體的B淋巴細(xì)胞；A正確；

B；過程2是促進(jìn)細(xì)胞融合的過程；其中電融合技術(shù)是用低壓電流擊穿細(xì)胞膜促使細(xì)胞融合，B錯(cuò)誤；

C；c細(xì)胞為雜交瘤細(xì)胞；有三種，分別是骨髓瘤細(xì)胞-骨髓瘤細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞-B淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞-B淋巴細(xì)胞，其中骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞都有兩個(gè)染色體組，融合后的細(xì)胞都含有4個(gè)染色體組，其中e細(xì)胞是雜交瘤細(xì)胞，C錯(cuò)誤；

D；過程3是專一抗體檢測(cè)及克隆培養(yǎng)篩選后獲得陽(yáng)性細(xì)胞；該過程需要多次進(jìn)行，D正確。

故選BC。11、A:C:D【分析】【分析】

微生物常見的接種的方法。

（1）平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。

（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

【詳解】

A；自生固氮菌是需氧型生物；步驟①土樣應(yīng)取自表層的土壤，步驟③中的稀釋梯度分別為10，100，1000倍，所以土壤懸浮液稀釋了1000倍，A正確；

B；自生固氮菌是異養(yǎng)型生物；可用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板或稀釋涂布平板法來(lái)計(jì)數(shù)土壤懸浮液中的菌體數(shù)，B錯(cuò)誤；

C；步驟②需充分振蕩20min；主要目的是使土壤中的微生物充分釋放到無(wú)菌水中，C正確；

D；步驟④為稀釋涂布平板法接種；所用的接種工具是涂布器，該選擇培養(yǎng)基的特點(diǎn)是不添加氮源，利用的是空氣中的氮?dú)猓珼正確。

故選ACD。12、A:B:C【分析】【分析】

基因編輯技術(shù)是指通過核酸酶對(duì)靶基因進(jìn)行定點(diǎn)改造；實(shí)現(xiàn)特定DNA的定點(diǎn)敲除；敲入以及突變等，最終下調(diào)或上調(diào)基因的表達(dá)，以使細(xì)胞獲得新表型的一種新型技術(shù)。

【詳解】

A；基因編輯時(shí)的引導(dǎo)序列是RNA；RNA的堿基序列改變可能導(dǎo)致識(shí)別錯(cuò)誤，導(dǎo)致剪切錯(cuò)誤，造成不可預(yù)知的后果，A正確；

B；基因編輯后；基因的序列發(fā)生改變，基因的表達(dá)具有選擇性，可以相互影響，基因選擇性表達(dá)受干擾后，容易導(dǎo)致某些疾病的產(chǎn)生，B正確；

C；依據(jù)我國(guó)法律；生殖性克隆不符合人類倫理道德，治療性克隆符合人類倫理道德，C正確；

D；加強(qiáng)監(jiān)管、完善法律法規(guī)、完善技術(shù)手段；但基因編輯技術(shù)仍存在一定的安全性，所以要理性看待，D錯(cuò)誤。

故選ABC。13、A:D【分析】【分析】

PCR技術(shù)：

1；概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)；是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。

2；原理：DNA復(fù)制。

3；前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對(duì)引物。

4；條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。

5；過程：①高溫變性：DNA解旋過程（PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶；高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開）；低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。

【詳解】

A；PCR擴(kuò)增依據(jù)的是DNA分子雙鏈復(fù)制的原理；A正確；

B；進(jìn)行PCR擴(kuò)增需要熱穩(wěn)定DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶）；但不需要解旋酶，B錯(cuò)誤；

C；DNA的兩條鏈反向平行；子鏈從引物的3′端開始延伸，則利用圖中的引物①、④組合可擴(kuò)增出兩側(cè)的未知序列，C錯(cuò)誤；

D；通過與受體細(xì)胞的基因組序列比對(duì)；即可確定T-DNA的插入位置，D正確。

故選AD。

【點(diǎn)睛】14、B:D【分析】【分析】

胚胎移植的生理學(xué)基礎(chǔ)：①動(dòng)物發(fā)情排卵后；同種動(dòng)物的供；受體生殖器官的生理變化是相同的，這就為供體的胚胎移入受體提供了相同的生理環(huán)境。②早期胚胎在一定時(shí)間內(nèi)處于游離狀態(tài)，這就為胚胎的收集提供了可能。③受體對(duì)移入子宮的外來(lái)胚胎不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，這為胚胎在受體的存活提供了可能。④供體胚胎可與受體子宮建立正常的生理和組織聯(lián)系，但供體胚胎的遺傳特性在孕育過程中不受影響。

【詳解】

A；人工授精技術(shù)是輔助生殖技術(shù)；在臨床上利用工具把精液放置進(jìn)入子宮內(nèi)，合成受精卵，用精子、卵子形成胚胎需要借助的是體外受精技術(shù)，不是人工授精技術(shù)，A錯(cuò)誤；

B；若實(shí)施胚胎移植；需要受體母親處于受孕狀態(tài)，即處于合適的生理狀態(tài)，B正確；

C；子宮對(duì)外來(lái)胚胎一般不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)；因此不需要受體母親與胚胎的主要HLA相似，C錯(cuò)誤；

D；“胚胎冷藏”技術(shù)所引起的這些爭(zhēng)論；實(shí)質(zhì)是冷凍胚胎的道德與法律地位的爭(zhēng)論，即帶來(lái)的倫理問題，D正確。

故選BD。三、填空題(共7題，共14分)15、略

【分析】【分析】

1；腐乳制作過程中多種微生物參與了發(fā)酵；其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物產(chǎn)生蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化成小分子肽和氨基酸，脂肪酶將脂肪轉(zhuǎn)化成甘油和脂肪酸。

2；果膠酶能夠分解果膠；瓦解植物的細(xì)胞壁及胞間層，使榨取果汁變得容易，而果膠分解成可溶性的半乳糖醛酸，也使得渾濁的果汁變得澄清。果膠酶并不特指某一種酶，而是分解果膠的一類酶的總稱，包括多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解酶和果膠酯酶。

【詳解】

（1）在腐乳制作的過程中；利用毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子肽和氨基酸，脂肪酶將脂肪水解為甘油和脂肪酸；加酶洗衣粉里添加的酶制劑中，應(yīng)用最廣泛；效果最明顯的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶。

（2）果膠酶并不特指某一種酶；而是分解果膠的一類酶的總稱，包括多聚半乳糖醛酸酶；果膠分解酶和果膠酯酶；在果汁生產(chǎn)過程中如果要固定果膠酶，最好采用化學(xué)結(jié)合和物理吸附法固定化，這是因?yàn)槊阜肿有。w積小的酶容易從包埋材料中漏出。

（3）酶提取和分離原理：需要用凝膠色譜法去除相對(duì)分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白；以純化酶；利用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法對(duì)酶進(jìn)行純度鑒定。

【點(diǎn)睛】

本題考查腐乳制作和酶提取等知識(shí)，對(duì)于此類試題，需要考生注意的細(xì)節(jié)較多，如實(shí)驗(yàn)的原理、實(shí)驗(yàn)步驟、實(shí)驗(yàn)采用的試劑及試劑的作用等，需要考生在平時(shí)的學(xué)習(xí)過程中注意積累。【解析】小分子肽和氨基酸脂肪酶堿性蛋白酶和堿性脂肪酶半乳糖醛酸酶、果膠分解酶、果膠酯酶化學(xué)結(jié)合法和物理吸附凝膠色譜（分配色譜）聚丙烯酰胺凝膠電泳16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】直接分離人工合成反轉(zhuǎn)錄法化學(xué)合成法17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】原核生物18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】莖尖極少或沒有）胚狀體人工薄膜不受季節(jié)的限制人工種皮；胚狀體和人工胚乳。

（2）20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】目的基因DNA分子雜交技術(shù)。21、略

【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)形成二硫鍵，使蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)更加穩(wěn)定，因此T4溶菌酶的熱穩(wěn)定性會(huì)提高。這項(xiàng)技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)，其步驟為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質(zhì)。【解析】會(huì)提高T4溶菌酶的耐熱性。這項(xiàng)技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)，該技術(shù)的要點(diǎn)是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質(zhì)。四、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共6分)22、略

【分析】【分析】

1、微生物常見的接種的方法：

（1）平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。

（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

2、實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法

①灼燒滅菌：將微生物的接種工具，如接種環(huán)、接種針或其他金屬工具，直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，可以迅速?gòu)氐椎販缇送猓诮臃N過程中，試管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通過火焰燃燒來(lái)滅菌；

②干熱滅菌：能耐高溫的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）和金屬用具等，可以采用這種方法滅菌；

③高壓蒸汽滅菌：將滅菌物品放置在盛有適量水的高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)；為達(dá)到良好的滅菌效果，一般在壓力為100kPa，溫度為121℃的條件下，維持15～30min。

(1)

取附著在手機(jī)上細(xì)菌進(jìn)行取樣培養(yǎng)后；對(duì)菌液進(jìn)行系列梯度稀釋的目的是將微生物分散成單個(gè)細(xì)胞，進(jìn)而獲得單個(gè)的菌落。

(2)

A平板上生長(zhǎng)的菌落有多種形態(tài)；說(shuō)明附著在手機(jī)細(xì)菌種類較多。牛肉膏；蛋白胨提供的主要營(yíng)養(yǎng)是氮源、維生素和生長(zhǎng)因子。培養(yǎng)基乙含有碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽這幾類營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，且加入了瓊脂作為凝固劑，可以達(dá)到實(shí)驗(yàn)效果；培養(yǎng)基甲不含蛋白胨（氮源），菌落無(wú)法在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)；培養(yǎng)基丙不含凝固劑（瓊脂），無(wú)法形成固體培養(yǎng)基，無(wú)法在培養(yǎng)基表面形成菌落。檢測(cè)培養(yǎng)基A制備是否合格，可將培養(yǎng)基置于適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間，檢測(cè)其是否雜菌生成。

(3)

伊紅為酸性染料；美藍(lán)為堿性染料。當(dāng)大腸桿菌分解乳糖產(chǎn)酸時(shí)細(xì)菌帶正電荷被染成紅色，再與美藍(lán)結(jié)合形成紫黑色菌落，并帶有綠色金屬光澤。由圖可知3號(hào)菌落為大腸桿菌菌落。

(4)

采用平板劃線法接種培養(yǎng)一段時(shí)間后；發(fā)現(xiàn)第一劃線區(qū)域上都不間斷長(zhǎng)滿菌落，第二劃線區(qū)域幾乎無(wú)菌落，原因可能是接種環(huán)灼燒后未冷卻就劃線或未從第一區(qū)域末端開始劃線。

【點(diǎn)睛】

本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識(shí)記微生物接種的方法、菌落計(jì)數(shù)、以及菌種保存等知識(shí)，意在考查考生對(duì)基礎(chǔ)知識(shí)的掌握和靈活運(yùn)用基礎(chǔ)知識(shí)的能力。【解析】(1)將微生物分散成單個(gè)細(xì)胞；進(jìn)而獲得單個(gè)的菌落。

(2)多乙培養(yǎng)基乙含有碳源；氮源、水、無(wú)機(jī)鹽這幾類營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)；且加入了瓊脂作為凝固劑，可以達(dá)到實(shí)驗(yàn)效果將培養(yǎng)基置于適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間，檢測(cè)其是否雜菌生成。

(3)3

(4)第一次劃線后接種環(huán)灼燒后沒有冷卻；未從第一次劃線區(qū)開始劃線23、略

【分析】【分析】

1；基因工程的四個(gè)步驟：目的基因的篩選與獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與鑒定。

2、在基因工程操作中，常用原核生物作為受體細(xì)胞，其中以大腸桿菌應(yīng)用最為廣泛。研究人員一般先用Ca2＋處理大腸桿菌細(xì)胞；使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，然后再將重組的基因表達(dá)載體導(dǎo)入其中。

【詳解】

（1）利用RNA通過①過程（逆轉(zhuǎn)錄）獲得cDNA需要逆轉(zhuǎn)錄酶；已知真核生物基因的mRNA在3'端加有PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）保護(hù)尾部不被降解。逆轉(zhuǎn)錄第一步以mRMA為模板合成DNA單鏈；新鏈與模板鏈反向平行，由于新鏈只能由5'端向3'端延伸，所以逆轉(zhuǎn)錄第一步的引物應(yīng)與mRNA尾部的PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）互補(bǔ)配對(duì)，即用多聚胸腺嘧啶脫氧核苷酸序列為引物；設(shè)計(jì)引物的目的是使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸。

（2）對(duì)逆轉(zhuǎn)錄得到的cDNA擴(kuò)增時(shí)；引物的5'端結(jié)合母鏈的3'端之后DNA聚合酶開始擴(kuò)增DNA。為確保其與pET41a質(zhì)粒定向連接，應(yīng)使用不同種的限制酶切割質(zhì)粒和目的基因，由圖可知，使用EcoRI酶會(huì)破環(huán)SSB基因，故應(yīng)在相應(yīng)引物的5'端加上BamHI和XhoⅠ酶切位點(diǎn)。

（3）由題圖分析可知：質(zhì)粒上存在卡那霉素和氯霉素抗性基因，由于XhoⅠ酶破壞了氯霉素抗性基因，所以成功組裝的重組質(zhì)粒不能在添加了氯霉素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，③過程用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染大腸桿菌時(shí)，需要用Ca2+處理大腸桿菌；目的是使大腸桿菌成為易于吸收外源DNA的狀態(tài)，然后分別將處理后的大腸桿菌先接種在添加卡那霉素的培養(yǎng)基（A）上培養(yǎng)，待長(zhǎng)出菌落后再利用無(wú)菌膜同位置轉(zhuǎn)移到添加氯霉素的培養(yǎng)基（B）上培養(yǎng)，收集能在含卡那霉素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)而不能在含氯霉素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落進(jìn)一步純化后將菌體破碎處理，經(jīng)篩選即可得到SSB蛋白。

（4）將改造后的大腸桿菌生產(chǎn)的SSB蛋白注入到小鼠體內(nèi)是為了檢測(cè)該蛋白是否具有抗原性，如果該蛋白有抗原性，會(huì)引起機(jī)體的免疫反應(yīng)，產(chǎn)生相應(yīng)抗體。則后續(xù)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容應(yīng)為抽取小鼠血液提取其中的抗體，利用抗原—抗體雜交的方法檢測(cè)其是否含有抗SSB的抗體。【解析】(1)逆轉(zhuǎn)錄用多聚胸腺嘧啶脫氧核苷酸序列為引物

使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸

(2)5’BamHⅠ和XhoI

(3)使大腸桿菌成為易于吸收外源DNA的狀態(tài)卡那霉素氯霉素能在含卡那霉素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)而不能在含氯霉素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的。

(4)提取其中的抗體，利用抗原—抗體雜交的方法檢測(cè)其是否含有抗SSB的抗體24、略

【分析】【分析】

1；基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫(kù)中獲取；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因；啟動(dòng)子、終止子