PAGE6-分解纖維素的微生物的分別(建議用時：40分鐘)題組一纖維素與纖維素酶1．纖維素酶可以將下列哪種物質分解()A．牛肉片B．魚片C．濾紙條D．塑料條C[纖維素酶只能使纖維素分解，本題中只有C項濾紙條的主要成分是纖維素，所以可以將濾紙條分解。]2．下列關于纖維素酶的說法，錯誤的是()A．纖維素酶是一種復合酶，至少包括三種B．纖維素酶可把纖維素分解成葡萄糖C．纖維素酶可用于去掉植物的細胞壁D．葡萄糖苷酶可把纖維素分解成葡萄糖D[纖維素酶是一種復合酶，至少包括三種組分：C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。纖維素在C1酶和CX酶的作用下分解為纖維二糖，再在葡萄糖苷酶的作用下分解為葡萄糖，但葡萄糖苷酶不能干脆分解纖維素。]3．纖維素酶的測定方法一般是()A．對纖維素進行定量測定B．對纖維素酶分解纖維素后所產生的葡萄糖進行定量測定C．對纖維素酶分解纖維素后所產生的纖維二糖進行定量測定D．對纖維素分解菌進行定量測定B[鑒別培育基上形成的透亮圈中的菌落只是對分解纖維素的微生物進行的初步篩選，為確定得到的是纖維素分解菌，還須要進行發酵產纖維素酶的試驗，并且進行纖維素酶的測定，測定方法一般是對纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產生的葡萄糖進行定量測定。故正確答案為B。]4．剛果紅是一種酸性染料，能將下列哪些物質染色()①纖維二糖②葡萄糖③纖維素④蘇木精⑤彈性纖維A．①③④ B．①②③C．②③④ D．③④⑤D[剛果紅是一種酸性染料，可與纖維素反應形成紅色復合物，在動物組織制片中用來染神經軸、彈性纖維、胚胎材料等，在植物制片中可以跟蘇木精作二重染色。]5．在加入剛果紅的培育基中會出現透亮圈，產生的透亮圈是()A．剛果紅與纖維素形成的復合物B．剛果紅與纖維二糖形成的復合物C．纖維素分解后形成的葡萄糖導致的D．以纖維素分解菌為中心形成的D[剛果紅可以與纖維素結合形成紅色復合物，但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發生這種反應。當纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅—纖維素的復合物就無法形成，培育基中會出現以纖維素分解菌為中心的透亮圈。]題組二纖維素分解菌的篩選6．纖維素分解菌的選擇培育基中酵母膏能供應的主要養分物質是()①碳源②氮源③生長因子④無機鹽A．③ B．①②C．①②③ D．①②③④C[酵母細胞的水溶液提取物濃縮而成的膏狀物質為酵母膏，富含B類維生素，也含有機氮化物和糖類。]7．要將能分解纖維素的細菌從土壤中分別出來，應將它們接種在()A．加入伊紅美藍的鑒別培育基上B．含有蛋白胨的固體培育基上C．只含纖維素粉而無其他碳源的選擇培育基上D．含四大養分要素的培育基上C[要把纖維素分解菌從土壤中分別出來，就要選擇使纖維素分解菌能生存，但其他微生物不能生存的選擇培育基進行培育，其選擇條件是以纖維素粉作為唯一碳源。在該培育基上，只有能分解纖維素的細菌能夠生存，其他微生物因不能利用纖維素而不能生存。]8．運用剛果紅染色時，加入剛果紅應在()①制備培育基時②梯度稀釋時③倒平板時④涂布時⑤長出菌落時A．①③B．②⑤C．③⑤D．④⑤C[常用的剛果紅染色法有兩種，一種是先培育微生物，長出菌落后再加入剛果紅進行顏色反應；另一種是倒平板時就加入剛果紅。最終，兩種染色法都可以在培育基上視察到以纖維素分解菌為中心的透亮圈。]9．當今世界，能源和資源危機日趨嚴峻，人們希望能借助纖維素酶將地球上最豐富(占全球總生物量80%)、最廉價的可再生資源纖維素轉化為能干脆利用的能源和資源。纖維素酶可以從能分解纖維素的細菌培育液中提取。某同學設計了如下分別土壤中纖維素分解菌的試驗流程：土壤取樣→選擇培育→()→鑒別培育(1)請補充試驗流程：____________________________；找不到合適的取樣環境，可實行的方法是_____________________。(2)選擇培育的目的是_________________________；探討人員用化合物A、硝酸鹽、磷酸鹽以及微量元素配制的培育基進行選擇培育，該培育基為________(填“液體”或“固體”)培育基，其中加入的化合物A是________，為微生物的生長供應________。(3)為了鑒別纖維素分解菌和進一步純化菌種，可以在鑒別培育基上加入____________染液，將篩選獲得的菌液稀釋后用______________法接種到鑒別培育基上，然后選擇產生____________的菌落作為菌種進行擴大培育。[解析](1)經選擇培育后，需經稀釋后才能將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培育基上。(2)可用含纖維素的液體培育基進行選擇培育來增加纖維素分解菌的濃度。(3)剛果紅是一種染料，可與纖維素反應形成紅色復合物；培育基中有分解纖維素微生物存在的區域，纖維素會被分解，將出現透亮圈。[答案](1)梯度稀釋將富含纖維素的物質埋在土壤中(2)增加纖維素分解菌的濃度液體纖維素碳源(3)剛果紅涂布平板透亮圈10．某污水池中含有一種有害的、難于降解的有機化合物A。現有探討人員欲探究污水凈化處理的方案，進行了如圖所示的試驗，請據圖回答下列問題：(1)在進行初選時，將污泥樣品接種于以____________為唯一碳源的固體培育基上；在利用錐形瓶進行培育時，須要振蕩培育，因此可推想“目的菌”的細胞呼吸方式為____________。(2)在接種前須要對培育基進行滅菌處理，常用的滅菌方法是____________________；而在接種時利用的無菌技術要求試驗操作應在__________________旁邊進行，以避開四周環境中微生物的污染。(3)純化菌種時，為了獲得單菌落，常采納的接種方法有________________和________________；接種后應將培育基進行________(填“正放”或“倒置”)培育。(4)培育若干天后，應將有機化合物A含量較________的培育液轉移至新的培育液中進行連續培育；轉移至新培育液中培育的目的是使“目的菌”的數量________；在試驗結束時，將運用過的培育基進行________處理后才能倒掉。[解析]在初選時，選擇培育基中的唯一碳源應當是有機化合物A；在培育時需進行振蕩處理，說明“目的菌”應當是需氧型，其細胞呼吸方式為有氧呼吸。本試驗應選擇有機化合物A含量少的錐形瓶，該錐形瓶中分解有機化合物A的微生物應多于其他瓶中的；轉移至新的培育液中，是為了給“目的菌”供應更多的養分、更好的生存環境，從而增加“目的菌”的數量；在試驗結束后，運用過的培育基中仍有少量的微生物殘留，因此須要進行滅菌處理。[答案](1)有機化合物A有氧呼吸(2)高壓蒸汽滅菌法酒精燈火焰(3)平板劃線法稀釋涂布平板法倒置(4)少增加滅菌11．在將樣品稀釋涂布到鑒別纖維素分解菌的培育基上之前一般先進行選擇培育，其主要目的是()A．完全除去其他微生物B．沒有意義，去掉這一步更好C．增加纖維素分解菌的濃度D．使纖維素分解菌充分長大C[纖維素分解菌假如在所采集的土樣中含量少，稀釋涂布到鑒別培育基上后形成的菌落數少，不利于選擇所需菌落，通過選擇培育可以增加纖維素分解菌的濃度，以確保能夠從樣品中分別到所須要的微生物。]12．選擇培育基是依據某一種或某一類微生物的特別養分要求或對一些物理、化學抗性而設計的培育基。利用這種培育基可以將所須要的微生物從混雜的微生物中分別出來。為選擇酵母菌和硝化細菌，應選用的培育基分別為()A．伊紅美藍培育基、含有霉素培育基B．含青霉素培育基、含氨的無機培育基C．含氨的無機培育基、含青霉素培育基D．含青霉素培育基、伊紅美藍培育基B[酵母菌是真菌，通常可以用含青霉素的培育基進行選擇培育，因為青霉素抑制細菌生長，但不抑制真菌生長。硝化細菌為自養型生物，能夠利用氨轉變為亞硝酸和硝酸所釋放的能量，把無機物轉變為有機物以維持自身生命活動，利用含氨的無機培育基可進行選擇培育。]13．運用液體選擇培育基培育纖維素分解菌的目的是()①用液體選擇培育基可獲得大量纖維素分解菌②用液體培育基便于稀釋涂布平板③纖維素分解菌只能在液體培育基中生長④用液體培育基可鑒別纖維素分解菌A．①② B．①③C．②④ D．③④A[運用液體選擇培育基培育纖維素分解菌，一方面可以獲得大量纖維素分解菌，另一方面便于稀釋涂布平板。纖維素分解菌也可以在固體培育基上生長；鑒別纖維素分解菌運用的是固體培育基。]14．下列有關培育基和菌種鑒定的敘述，不正確的是()A．在培育基中加入較高濃度的氯化鈉，可篩選出抗鹽突變體植物B．可利用固體培育基上菌落的特征來推斷和鑒別細菌的類型C．利用剛果紅培育基上是否形成透亮圈來篩選纖維素分解菌D．在無氮培育基中加入酚紅指示劑鑒定尿素分解菌D[在只含有尿素作為唯一氮源的培育基中加入酚紅指示劑鑒定尿素分解菌。]15．下圖為分別并統計分解纖維素的微生物的試驗流程，據此回答有關問題：(1)要從富含纖維素的環境中分別纖維素分解菌，從高溫熱泉中找尋耐熱菌，這說明____________________________________。(2)在將樣品接種到鑒別纖維素分解菌的培育基之前，可通過選擇培育增加纖維素分解菌的濃度，某同學依據須要配制了纖維素分解菌的培育基如下表。整個試驗過程嚴格無菌操作，假如將其中的纖維素粉換成________，菌落數_____________________________________________________，即可說明選擇培育基的作用。成分含量纖維素粉5.0gNaNO31.0gNa2HPO4·7H2O1.2gKH2PO40.9gMgSO4·7H2O0.5gKCl0.5g酵母膏0.5g水解酪素0.5g蒸餾水定容至1000mL(3)接種微生物最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，本試驗宜采納____________法，緣由是____________________________。[解析]在找尋目的微生物時要依據目的菌株對生存環境的要求，到相應的環境中去找尋；微生物的選擇培育就是依據微生物的不同特點，在培育基中加入某些物質，允許一部分微生物的生存，而抑制另一部分微生物的生長。在本試驗中，由于只有纖維素分解菌才能利用培育基中的纖維素，因此只含有纖維素粉的培育基為選擇培育基，而葡萄糖是很多微生物都能利用的碳源，因此通常用葡萄糖來配制完全培育基，在選擇培育基上生長的微生物種類少，菌落數就少；微生物的分別的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，因為這兩種方法都能使菌體分散到培育基的表面，但是平板劃線法不能確定接種量，而稀釋涂布平板法可以確定接種量，因此平板劃線法不能依據稀釋液體積計算每克樣品中的菌株數。[答案](1)依據目的菌株對生存環境的要求，到相應的環境中去找尋(2)葡萄糖明顯多于選擇培育基(3)稀釋涂布平板平板劃線法難以依據稀釋液體積計算每克樣品中的菌株數不能正確辨析纖維素分解菌的分別與鑒定16．下列關于分別纖維素分解菌的試驗的敘述，錯誤的是()A．選擇培育的目的是增加纖