專題10生物技術與工程第32練微生物培養1．（2022·海南·高考真題）為探究校內植物園土壤中的細菌種類，某興趣小組采集園內土壤樣本并開展相關實驗。下列有關敘述錯誤的是（

）A．采樣時應隨機采集植物園中多個不同地點的土壤樣本B．培養細菌時，可選用牛肉膏蛋白胨固體培養基C．土壤溶液稀釋倍數越低，越容易得到單菌落D．鑒定細菌種類時，除形態學鑒定外，還可借助生物化學的方法2．（2021·天津·高考真題）下列操作能達到滅菌目的的是（

）A．用免洗酒精凝膠擦手 B．制作泡菜前用開水燙洗容器C．在火焰上灼燒接種環 D．防疫期間用石炭酸噴灑教室3．（2021·北京·高考真題）野生草本植物多具有根系發達、生長較快、抗逆性強的特點，除用于生態治理外，其中一些可替代木材栽培食用菌，收獲后剩余的菌渣可作肥料或飼料。相關敘述錯誤的是（）A．種植此類草本植物可以減少水土流失B．菌渣作為農作物的肥料可實現能量的循環利用C．用作培養基的草本植物給食用菌提供碳源和氮源D．菌渣作飼料實現了物質在植物、真菌和動物間的轉移4．（2021·北京·高考真題）人體皮膚表面存在著多種微生物，某同學擬從中分離出葡萄球菌。下述操作不正確的是（）A．對配制的培養基進行高壓蒸汽滅菌B．使用無菌棉拭子從皮膚表面取樣C．用取樣后的棉拭子在固體培養基上涂布D．觀察菌落的形態和顏色等進行初步判斷5．（2021·山東·高考真題）解脂菌能利用分泌的脂肪酶將脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收利用。脂肪酸會使醇溶青瓊脂平板變為深藍色。將不能直接吸收脂肪的甲，乙兩種菌分別等量接種在醇溶青瓊脂平板上培養。甲菌菌落周圍呈現深藍色，乙菌菌落周圍不變色，下列說法錯誤的是（

）A．甲菌屬于解脂菌B．實驗中所用培養基以脂肪為唯一碳源C．可將兩種菌分別接種在同一平板的不同區域進行對比D．該平板可用來比較解脂菌分泌脂肪酶的能力6．（2021·浙江·高考真題）下列關于原生質體和細胞計數的敘述，錯誤的是（）A．測定植物原生質體的密度時，可用血細胞計數板B．紅墨水不能進入活細胞，可用于檢測細胞的存活狀態并計數C．涂布分離法和劃線分離法均能得到單菌落，都可用于細胞計數D．酵母菌在液體培養基中培養一段時間后，可用比濁計測定其密度7．（2020·江蘇·高考真題）為純化菌種，在鑒別培養基上劃線接種纖維素降解細菌，培養結果如圖所示。下列敘述正確的是（

）A．倒平板后需間歇晃動，以保證表面平整B．圖中Ⅰ、Ⅱ區的細菌數量均太多，應從Ⅲ區挑取單菌落C．該實驗結果因單菌落太多，不能達到菌種純化的目的D．菌落周圍的纖維素被降解后，可被剛果紅染成紅色8．（2020·山東·高考真題）野生型大腸桿菌可以在基本培養基上生長，發生基因突變產生的氨基酸依賴型菌株需要在基本培養基上補充相應氨基酸才能生長。將甲硫氨酸依賴型菌株M和蘇氨酸依賴型菌株N單獨接種在基本培養基上時，均不會產生菌落。某同學實驗過程中發現，將M、N菌株混合培養一段時間，充分稀釋后再涂布到基本培養基上，培養后出現許多由單個細菌形成的菌落，將這些菌落分別接種到基本培養基上，培養后均有菌落出現。該同學對這些菌落出現原因的分析，不合理的是（

）A．操作過程中出現雜菌污染B．M、N菌株互為對方提供所缺失的氨基酸C．混合培養過程中，菌株獲得了對方的遺傳物質D．混合培養過程中，菌株中已突變的基因再次發生突變9．（2021·山東·高考真題）含硫蛋白質在某些微生物的作用下產生硫化氫導致生活污水發臭。硫化氫可以與硫酸亞鐵銨結合形成黑色沉淀。為探究發臭水體中甲、乙菌是否產生硫化氫及兩種菌的運動能力，用穿刺接種的方法，分別將兩種菌接種在含有硫酸亞鐵銨的培養基上進行培養，如圖所示。若兩種菌繁殖速度相等，下列說法錯誤的是（

）A．乙菌的運動能力比甲菌強B．為不影響菌的運動需選用液體培養基C．該實驗不能比較出兩種菌產生硫化氫的量D．穿刺接種等接種技術的核心是防止雜菌的污染10．（2022·湖南·高考真題）黃酒源于中國，與啤酒、葡萄酒并稱世界三大發酵酒。發酵酒的釀造過程中除了產生乙醇外，也產生不利于人體健康的氨基甲酸乙酯（EC）。EC主要由尿素與乙醇反應形成，各國對酒中的EC含量有嚴格的限量標準。回答下列問題:(1)某黃酒釀制工藝流程如圖所示，圖中加入的菌種a是_______，工藝b是_______（填“消毒”或“滅菌”），采用工藝b的目的是____________________。(2)以尿素為唯一氮源的培養基中加入________指示劑，根據顏色變化，可以初步鑒定分解尿素的細菌。尿素分解菌產生的脲酶可用于降解黃酒中的尿素，脲酶固定化后穩定性和利用效率提高，固定化方法有_________________________（答出兩種即可）。(3)研究人員利用脲酶基因構建基因工程菌L，在不同條件下分批發酵生產脲酶，結果如圖所示。推測________是決定工程菌L高脲酶活力的關鍵因素，理由是__________________。(4)某公司開發了一種新的黃酒產品，發現EC含量超標。簡要寫出利用微生物降低該黃酒中EC含量的思路_____________________________。11．（2021·湖南·高考真題）大熊貓是我國特有的珍稀野生動物，每只成年大熊貓每日進食竹子量可達12~38kg。大熊貓可利用竹子中8%的纖維素和27%的半纖維素。研究人員從大熊貓糞便和土壤中篩選纖維素分解菌。回答下列問題：（1）纖維素酶是一種復合酶，一般認為它至少包括三種組分，即_________。為篩選纖維素分解菌，將大熊貓新鮮糞便樣品稀釋液接種至以_________為唯一碳源的固體培養基上進行培養，該培養基從功能上分類屬于_________培養基。（2）配制的培養基必須進行_______________滅菌處理，目的是_________。檢測固體培養基滅菌效果的常用方法是_________。（3）簡要寫出測定大熊貓新鮮糞便中纖維素分解菌活菌數的實驗思路_________。（4）為高效降解農業秸稈廢棄物，研究人員利用從土壤中篩選獲得的3株纖維素分解菌，在37℃條件下進行玉米秸稈降解實驗，結果如表所示。在該條件下纖維素酶活力最高的是菌株_________，理由是_________。菌株秸稈總重(g)秸稈殘重(g)秸稈失重（%）纖維素降解率（%）A2.001.5124.5016.14B2.001.5323.5014.92C2.001.4229.0023.3212．（2021·河北·高考真題）葡萄酒生產過程中會產生大量的釀酒殘渣（皮渣）。目前這些皮渣主要用作飼料或肥料，同時研究者也采取多種措施拓展其利用價值。回答下列問題：（1）皮渣中含有較多的天然食用色素花色苷，可用萃取法提取。萃取前將原料干燥、粉碎的目的分別是__________，萃取效率主要取決于萃取劑的__________。萃取過程需要在適宜溫度下進行，溫度過高會導致花色苷__________。研究發現，萃取時輔以纖維素酶、果膠酶處理可提高花色苷的提取率，原因是____________________。（2）為了解皮渣中微生物的數量，取10g皮渣加入90mL無菌水，混勻、靜置后取上清液，用稀釋涂布平板法將0.1mL稀釋液接種于培養基上。104倍稀釋對應的三個平板中菌落數量分別為78、91和95，則每克皮渣中微生物數量為__________個。（3）皮渣堆積會積累醋酸菌，可從中篩選優良菌株。制備醋酸菌初篩平板時，需要將培養基的pH調至__________性，滅菌后須在未凝固的培養基中加入無菌碳酸鈣粉末、充分混勻后倒平板，加入碳酸鈣的目的是______________________________。培養篩選得到的醋酸菌時，在缺少糖源的液體培養基中可加入乙醇作為__________。（4）皮渣堆積過程中也會積累某些兼性厭氧型乳酸菌。初篩醋酸菌時，乳酸菌有可能混入其中，且兩者菌落形態相似。請設計一個簡單實驗，區分篩選平板上的醋酸菌和乳酸菌_________。（簡要寫出實驗步驟和預期結果）13．（2021·廣東·高考真題）中國科學家運用合成生物學方法構建了一株嗜鹽單胞菌H，以糖蜜（甘蔗榨糖后的廢棄液，含較多蔗糖）為原料，在實驗室發酵生產PHA等新型高附加值可降解材料，期望提高甘蔗的整體利用價值。工藝流程如圖。回答下列問題：（1）為提高菌株H對蔗糖的耐受能力和利用效率，可在液體培養基中將蔗糖作為___________，并不斷提高其濃度，經多次傳代培養（指培養一段時間后，將部分培養物轉入新配的培養基中繼續培養）以獲得目標菌株。培養過程中定期取樣并用___________的方法進行菌落計數，評估菌株增殖狀況。此外，選育優良菌株的方法還有___________等。（答出兩種方法即可）（2）基于菌株H嗜鹽、酸堿耐受能力強等特性，研究人員設計了一種不需要滅菌的發酵系統，其培養基鹽濃度設為60g/L，pH為10，菌株H可正常持續發酵60d以上。該系統不需要滅菌的原因是___________。（答出兩點即可）（3）研究人員在工廠進行擴大培養，在適宜的營養物濃度、溫度、pH條件下發酵，結果發現發酵液中菌株H細胞增殖和PHA產量均未達到預期，并產生了少量乙醇等物質，說明發酵條件中___________可能是高密度培養的限制因素。（4）菌株H還能通過分解餐廚垃圾（主要含蛋白質、淀粉、油脂等）來生產PHA，說明其能分泌___________。14．（2020·江蘇·高考真題）產脂肪酶酵母可用于含油廢水處理。為篩選產脂肪酶酵母菌株，科研人員開展了相關研究。請回答下列問題：（1）常規微生物實驗中，下列物品及其滅菌方法錯誤的是__________（填編號）。編號①②③④物品培養基接種環培養皿涂布器滅菌方法高壓蒸汽火焰灼燒干熱臭氧（2）稱取1．0g某土壤樣品，轉入99mL無菌水中，制備成菌懸液，經__________后，獲得細胞密度不同的菌懸液。分別取0．1mL菌懸液涂布在固體培養基上，其中10倍稀釋的菌懸液培養后平均長出了46個酵母菌落，則該樣本中每克土壤約含酵母菌__________個。（3）為了進一步提高酵母菌產酶能力，對分離所得的菌株，采用射線輻照進行__________育種。將輻照處理后的酵母菌涂布在以__________為唯一碳源的固體培養基上，培養一段時間后，按照菌落直徑大小進行初篩，選擇直徑__________的菌落，純化后獲得A、B兩突變菌株。（4）在處理含油廢水的同時，可獲得單細胞蛋白，實現污染物資源化。為評價A、B兩菌株的相關性能，進行了培養研究，結果如圖。據圖分析，應選擇菌株__________進行后續相關研究，理由是__________。15．（2020·全國·高考真題）某種物質S（一種含有C、H、N的有機物）難以降解，會對環境造成污染，只有某些細菌能降解S。研究人員按照下圖所示流程從淤泥中分離得到能高效降解S的細菌菌株。實驗過程中需要甲、乙兩種培養基，甲的組分為無機鹽、水和S，乙的組分為無機鹽、水、S和Y。回答下列問題：（1）實驗時，盛有水或培養基的搖瓶通常采用_______________的方法進行滅菌。乙培養基中的Y物質是_______________。甲、乙培養基均屬于______________培養基。（2）實驗中初步估測搖瓶M中細菌細胞數為2×107個/mL，若要在每個平板上涂布100μ