ICS65.020.20

CCSB15

41

河南省地方標(biāo)準(zhǔn)

DB41/T2391—2023

小麥抗赤霉病評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范

2023-03-07發(fā)布2023-06-06實(shí)施

河南省市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布

DB41/T2391—2023

目次

前言.................................................................................II

1范圍...............................................................................1

2規(guī)范性引用文件.....................................................................1

3術(shù)語(yǔ)和定義.........................................................................1

4抗性鑒定圃設(shè)置.....................................................................2

5病原物接種體.......................................................................2

6接種方法...........................................................................2

7病情調(diào)查...........................................................................2

8抗性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn).......................................................................3

9抗性評(píng)價(jià)...........................................................................4

10重復(fù)鑒定..........................................................................4

11鑒定記載表格......................................................................4

附錄A（資料性）小麥赤霉病病原物.....................................................5

附錄B（資料性）小麥赤霉病抗性鑒定原始記錄及結(jié)果鑒定表...............................6

I

DB41/T2391—2023

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定

起草。

本文件由河南省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出并歸口。

本文件起草單位：河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所、河南省植物保護(hù)檢疫站。

本文件主要起草人：宋玉立、李好海、徐飛、張國(guó)彥、楊共強(qiáng)、李鐵樁、蘇東、李金秀、樊驊、王

俊美、馮超紅、韓景紅、胡玉紅、路敏、朱曉紅。

II

DB41/T2391—2023

小麥抗赤霉病評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范

1范圍

本文件規(guī)定了小麥抗赤霉病接種體制備、接種方法、病害調(diào)查及抗性評(píng)價(jià)的技術(shù)規(guī)范。

本文件適用于普通小麥、野生小麥和小麥近緣種等。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB5009.111食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇及其乙酰化衍生物的測(cè)定

NY/T1443.4小麥抗病蟲(chóng)性評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范第4部分：小麥抗赤霉病評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范

3術(shù)語(yǔ)和定義

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。

3.1

小麥赤霉病

由禾谷鐮孢（FusariumgraminearumSchwabe［有性世代為Gibberellazeae（Schw.）Petch］）

等鐮孢屬真菌侵染小麥穗部，引起小麥穗枯，產(chǎn)生紅色霉層，同時(shí)在籽粒中可產(chǎn)生脫氧雪腐鐮刀菌烯醇

（DON）和玉米赤霉烯酮（ZEN）等多種真菌毒素，造成小麥減產(chǎn)和品質(zhì)下降的小麥病害。

3.2

抗侵染

寄主植物避免、終止或阻滯病原物侵入，減輕發(fā)病和損失程度的可遺傳特性。

3.3

抗擴(kuò)展

寄主植物阻滯病原物擴(kuò)展，減輕發(fā)病和損失程度的可遺傳特性。

3.4

抗毒素積累

病原物侵入后寄主植物限制病原物毒素分泌或降解毒素，減少組織中毒素含量的可遺傳特性。

3.5

嚴(yán)重度

發(fā)病植物單元上發(fā)病面積或體積占該單元總面積或總體積的百分率，亦可用分級(jí)法表示，即將發(fā)病

的嚴(yán)重程度由輕到重劃分出幾個(gè)級(jí)別，分別用一些代表值表示，說(shuō)明病害發(fā)生的嚴(yán)重程度。

3.6

病情指數(shù)

綜合衡量發(fā)病率和嚴(yán)重度的病情評(píng)價(jià)指標(biāo)。計(jì)算公式如下（1）：

1

DB41/T2391—2023

nn

···············································(1)

DI(XiSi)/(XiSmax)100

i0i0

式中：

DI——病情指數(shù)；

i——病級(jí)數(shù)（0～n）；

Xi——i級(jí)的單元數(shù)；

Si——i級(jí)嚴(yán)重度的代表值；

Smax——嚴(yán)重度的最高級(jí)值。

4抗性鑒定圃設(shè)置

4.1鑒定圃選址

鑒定圃應(yīng)設(shè)置在小麥赤霉病適發(fā)區(qū)，選擇具備良好的自然發(fā)病環(huán)境和灌溉條件、地勢(shì)平坦、地力均

勻的地塊。鑒定圃不施用任何殺菌劑。

4.2鑒定對(duì)照品種

高抗對(duì)照品種為‘寧麥13’、中抗對(duì)照品種為‘鄭麥9023’、中感對(duì)照品種為‘西農(nóng)979’、高感

對(duì)照品種為‘矮抗58’。

4.3種植要求

種植管理同大田生產(chǎn)。每畝播量為10kg～12.5kg。

鑒定材料順序排列，重復(fù)2次，每50～100份鑒定材料設(shè)1組高抗、中抗、中感和高感對(duì)照品種。

鑒定小區(qū)行長(zhǎng)100cm～150cm，行距20cm。每份鑒定材料種植2行。

5病原物接種體

經(jīng)形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)鑒定為禾谷鐮孢（見(jiàn)附錄A中A.1），進(jìn)行致病力測(cè)定后，選擇強(qiáng)致病力菌株。

接種體的制備方法見(jiàn)附錄A中A.2。

6接種方法

穗部噴霧接種：于小麥揚(yáng)花期，采用禾谷鐮孢分生孢子懸浮液（濃度為每毫升5×104個(gè)）噴霧接種，

1m2噴霧50mL。選取30穗進(jìn)行保濕，10穗為1組，分別套上透明塑料袋保濕2d。接種宜選擇傍晚進(jìn)行。

單花滴注接種：于小麥揚(yáng)花期剪去麥穗中部小穗的內(nèi)外穎殼頂部少許，滴入濃度為每毫升5×105

個(gè)的禾谷鐮孢分生孢子懸浮液20μL，每個(gè)材料接種30穗，每穗接種1個(gè)小花，10穗為1組，分別套上透

明塑料袋保濕2d。

接種后若遇干旱天氣，應(yīng)及時(shí)進(jìn)行田間灌溉，以滿(mǎn)足病害發(fā)生所需的條件。

7病情調(diào)查

7.1調(diào)查時(shí)間

2

DB41/T2391—2023

乳熟期調(diào)查1次病情，一般為揚(yáng)花后21d～25d。

7.2調(diào)查方法及項(xiàng)目

調(diào)查接種麥穗的嚴(yán)重度，按照NY/T1443.4計(jì)算平均嚴(yán)重度、發(fā)病率和病情指數(shù)。

嚴(yán)重度分級(jí)及其對(duì)應(yīng)的癥狀描述見(jiàn)表1。

表1小麥赤霉病嚴(yán)重度分級(jí)及其癥狀描述

嚴(yán)重度分級(jí)癥狀描述

0麥穗無(wú)病

1發(fā)病小穗占總小穗數(shù)＜25.0%

225.0%≤發(fā)病小穗占總小穗數(shù)＜50.0%

350.0%≤發(fā)病小穗占總小穗數(shù)＜75.0%

4發(fā)病小穗占總小穗數(shù)≥75.0%

8抗性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

8.1噴霧接種條件下的抗性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

8.1.1噴霧接種條件下的抗性評(píng)價(jià)

當(dāng)鑒定圃高感對(duì)照品種病穗率達(dá)到50%以上，該批次抗赤霉病鑒定視為有效。依據(jù)鑒定材料發(fā)病程

度（病情指數(shù)）確定其對(duì)赤霉病的抗性水平（見(jiàn)表2）。

表2噴霧接種條件下小麥赤霉病抗性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

病情指數(shù)抗性評(píng)價(jià)

DI=0免疫Immune(I)

0＜DI＜DICK-HR高抗HighlyResistant(HR)

DICK-HR≤DI＜DICK-MR中抗Moderatelyresistant(MR)

DICK-MR≤DI≤DICK-MS中感Moderatelysusceptible(MS)

DI＞DICK-MS高感Highlysusceptible(HS)

注：DI：病情指數(shù)；DICK-HR：高抗對(duì)照寧麥13病情指數(shù)；DICK-MR：中抗對(duì)照鄭麥9023病情指數(shù)；DICK-MS：中感對(duì)照西農(nóng)

979病情指數(shù)。

8.1.2噴霧接種條件下的抗毒素積累評(píng)價(jià)

收獲期將各個(gè)品種的麥穗分別裝入網(wǎng)袋10穗一組共3組，分別脫粒，進(jìn)行DON毒素含量測(cè)定。DON毒

素含量測(cè)定按照GB5009.111。按照表3進(jìn)行抗毒素積累評(píng)價(jià)。

表3噴霧接種條件下小麥抗毒素積累評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

DON毒素含量(mg/kg)抗性評(píng)價(jià)

DON≤1高抗HighlyResistant(HR)

1＜DON≤10中抗Moderatelyresistant(MR)

10＜DON≤20中感Moderatelysusceptible(MS)

DON＞20高感Highlysusceptible(HS)

3

DB41/T2391—2023

8.2單花滴注接種條件下的抗性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

8.2.1單花滴注接種條件下的抗性評(píng)價(jià)

當(dāng)高感對(duì)照品種平均嚴(yán)重度達(dá)到3級(jí)以上時(shí)，該批次材料抗赤霉病鑒定視為有效。依據(jù)鑒定材料的

病害發(fā)生平均嚴(yán)重度確定其對(duì)赤霉病的抗性水平，劃分標(biāo)準(zhǔn)見(jiàn)表4。

表4單花滴注接種條件下小麥赤霉病抗性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

平均嚴(yán)重度抗性評(píng)價(jià)

平均嚴(yán)重度=0免疫Immune(I)

平均嚴(yán)重度＜平均嚴(yán)重度CK-HR高抗HighlyResistant(HR)

平均嚴(yán)重度CK-HR≤平均嚴(yán)重度＜平均嚴(yán)重度CK-MR中抗Moderatelyresistant(MR)

平均嚴(yán)重度CK-MR≤平均嚴(yán)重度≤平均嚴(yán)重度CK-MS中感Moderatelysusceptible(MS)

平均嚴(yán)重度＞平均嚴(yán)重度CK-MS高感Highlysusceptible(HS)

注：平均嚴(yán)重度CK-HR：高抗對(duì)照寧麥13平均嚴(yán)重度；平均嚴(yán)重度CK-MR：中抗對(duì)照鄭麥9023平均嚴(yán)重度；平均嚴(yán)重

度CK-MS：中感對(duì)照西農(nóng)979平均嚴(yán)重度

8.2.2單花滴注接種條件下的抗毒素積累評(píng)價(jià)

收獲期將各個(gè)品種的麥穗分別裝入網(wǎng)袋10穗一組共3組，分別脫粒，進(jìn)行DON毒素含量測(cè)定。DON毒

素含量測(cè)定按照GB5009.111。依據(jù)表5進(jìn)行抗毒素積累評(píng)價(jià)。

表5單花滴注接種條件下小麥抗毒素積累評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

DON毒素含量(ppm)抗性評(píng)價(jià)

DON≤1高抗HighlyResistant(HR)

1＜DON≤5中抗Moderatelyresistant(MR)

5＜DON≤10中感Moderatelysusceptible(MS)

DON＞10高感Highlysusceptible(HS)

9抗性評(píng)價(jià)

應(yīng)選擇一種或多種方法進(jìn)行抗性評(píng)價(jià)。若用兩種接種方法綜合確定抗性水平時(shí)，通常以最高級(jí)別（病

情指數(shù)或平均嚴(yán)重度）為準(zhǔn)。

10重復(fù)鑒定

鑒定中表現(xiàn)為高抗、中抗和中感的材料，次年重復(fù)鑒定。當(dāng)兩年抗性鑒定結(jié)果不一致時(shí)，以記載的

最高病情級(jí)別（病情指數(shù)或平均嚴(yán)重度）為準(zhǔn)。

11鑒定記載表格

小麥抗赤霉病鑒定原始記錄及結(jié)果記載表格見(jiàn)附錄B。

4

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附錄A

（資料性）

小麥赤霉病病原物

A.1接種菌株的分離、鑒定和選擇

從發(fā)病麥穗上，切取病組織（穎、籽粒或穗軸等），用75%的乙醇表面消毒3min～5min后，于馬

鈴薯蔗糖瓊脂（PDA）平板上進(jìn)行培養(yǎng)，分離物經(jīng)形態(tài)學(xué)和分子鑒定后，通過(guò)分離物純化及致病性測(cè)定，

篩選強(qiáng)致病力菌株，冷藏保存?zhèn)溆谩?/p>

形態(tài)學(xué)鑒定：無(wú)性態(tài)為禾谷鐮孢FusariumgraminearumSchwabe，屬半知菌類(lèi)鐮孢屬（Fusarium）

真菌。其大型分生孢子鐮刀形，有隔膜3～7個(gè)，頂端鈍圓，基部足細(xì)胞明顯，單個(gè)孢子無(wú)色，聚集在一

起呈粉紅色黏稠狀。小型孢子很少產(chǎn)生。有性態(tài)為玉蜀黍赤霉Gibberellazeae(Schiwein)Petch，屬

子囊菌門(mén)（Ascomycotina）、核菌綱（Pyrenomycetes）、肉座菌目（Hypocreales）、肉座菌科（Hypocreaceae），

赤霉屬（Gibberella）真菌。子囊殼散生或聚生于寄主組織表面，略包于子座中，梨形，有孔口，頂部

呈疣狀突起，紫紅或紫藍(lán)至紫黑色。子囊無(wú)色，棍棒狀，大小70.0μm～74.2μm×8.9μm～9.2μm，內(nèi)

含8個(gè)子囊孢子。子囊孢子無(wú)色，紡錘形，兩端鈍圓，多為3個(gè)隔膜，19.6μm～22.4μm×3.6μm～4.6μm。

分子生物學(xué)鑒定：收集菌絲并提取DNA，然后用禾谷鐮孢特異性引物Fg16F/R（Fg16F:5'-

CTCCGGATATGTTGCGTCAA-3'，F(xiàn)g16R:5'-GGTAGGTATCCGACATGGCAA-3'）進(jìn)行擴(kuò)增，條帶大小為400bp～

500bp；或用EF-1α（EF1:5'-ATGGGTAAGGA(A/G)GACAAGAC-3'，EF2:

5'-GGA(G/A)GTACCAGT(G/C)ATCATGTT-3'）擴(kuò)增測(cè)序，序列比對(duì)參照GenBank登錄號(hào):AF212455(禾谷鐮

孢菌株NRRL5883)。

推薦使用保藏于中國(guó)普通微生物菌種保藏管理中心的5個(gè)代表性強(qiáng)致病力菌株（表A.1）。

表A.1標(biāo)準(zhǔn)菌株（保藏于中國(guó)普通微生物菌種保藏管理中心）

菌株編號(hào)來(lái)源名稱(chēng)保存編號(hào)

14AY1-2河南省安陽(yáng)市禾谷鐮孢CGMCC3.20314

14KF3-8河南省開(kāi)封市禾谷鐮孢CGMCC3.20318

14LY9-2-4河南省洛陽(yáng)市禾谷鐮孢CGMCC3.20317

14YY1-3河南省新鄉(xiāng)市禾谷鐮孢CGMCC3.20315

14ZK1-4河南省周口市禾谷鐮孢CGMCC3.20316

A.2接種體的制備

分生孢子接種體制備：稱(chēng)取一定量的綠豆，按綠豆：水=6:100比例加入水，加熱煮沸，換小火繼

續(xù)加熱10min，分裝至三角瓶中，在121℃下滅菌30min，冷卻后即制成綠豆培養(yǎng)液。將PDA培養(yǎng)基平板

活化培養(yǎng)的病菌接種于經(jīng)高壓滅菌的綠豆培養(yǎng)液中，在25℃下振蕩培養(yǎng)（150r/min），4d～5d后進(jìn)

行鏡檢，確認(rèn)大量產(chǎn)生分生孢子后，配制接種懸浮液。懸浮液中分生孢子濃度調(diào)至每毫升5×105個(gè)和5

×104個(gè)，分別用于單花滴注接種和噴霧接種。若暫時(shí)不接種，可將接種懸浮液置于4℃冰箱中冷藏保

存5d～6d。

5

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附錄B

（資料性）

小麥赤霉病抗性鑒定原始記錄及結(jié)果鑒定表

小麥赤霉病抗性鑒定原始記錄及結(jié)果鑒定表見(jiàn)表B.1。

表B.1年小麥赤霉病抗性鑒定原始記錄及結(jié)果鑒定表

噴霧接種單花滴注接種

編品種來(lái)嚴(yán)重度及病情指數(shù)嚴(yán)重度抗性

抗性抗性

號(hào)名稱(chēng)源01234病情01234平總評(píng)

評(píng)價(jià)評(píng)價(jià)

級(jí)級(jí)級(jí)級(jí)級(jí)指數(shù)級(jí)級(jí)級(jí)級(jí)級(jí)均

注1：鑒定地點(diǎn)茬口

注2：接種病原菌分離物編號(hào)

注3：接種日期調(diào)查日期

注4：播種日期收獲日期

6

DB41/T2391—2023

目次

前言.................................................................................II

1范圍...............................................................................1

2規(guī)范性引用文件.....................................................................1

3術(shù)語(yǔ)和定義.........................................................................1

4抗性鑒定圃設(shè)置.....................................................................2

5病原物接種體.......................................................................2

6接種方法...........................................................................2

7病情調(diào)查...........................................................................2

8抗性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn).......................................................................3

9抗性評(píng)價(jià)...........................................................................4

10重復(fù)鑒定..........................................................................4

11鑒定記載表格......................................................................4

附錄A（資料性）小麥赤霉病病原物.....................................................5

附錄B（資料性）小麥赤霉病抗性鑒定原始記錄及結(jié)果鑒定