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文檔簡介

i八珍袋泡茶質量標準提升研究目錄摘要 iiABSTRACT iii前言 11儀器與試藥 11.1儀器 11.2試藥 22方法與結果 22.1薄層色譜鑒別 22.2含量測定 4綜述 12致謝 17第13頁,共=NUMPAGES22-517頁八珍袋泡茶質量標準提升研究摘要:目的:提升八珍袋泡茶的質量標準。方法:采用薄層色譜(TLC)法對制劑中當歸、川芎、茯苓和甘草4味中藥進行定性鑒別;采用高效液色譜(HPLC)法同時測定制劑中芍藥苷和藁本內酯的含量。結果:當歸、川芎、茯苓、甘草的薄層色譜斑點清晰,分離度較好,陰性對照無干擾;芍藥苷、藁本內酯的線性范圍分別為0.159~1.271μg(r=0.9998),0.14~1.12μg(r=0.9996);芍藥苷、藁本內酯的加樣回收率分別為98.64%(RSD=1.36%,n=9)、98.34%(RSD=1.64%,n=9)。結論:該研究方法簡單,準確,操作性強,可控制八珍袋泡茶的質量。關鍵詞:八珍袋泡茶;薄層色譜法;芍藥苷;藁本內酯;高效液相色譜法前言八珍袋泡茶原方出自明代醫家薛己所著的《正體類要》,是由黨參、炒白術、茯苓、甘草、當歸、白芍、川芎、熟地黃八味中藥材組成,都具有補氣益血之功效[1],適用于氣血虧損,面色發黃,四肢乏力等癥狀。其中當歸屬于補血藥,不僅能夠補血,更有“補而不滯”的特點,得以活血調經,除此之外,當歸還能潤腸通便;川芎為血中之氣藥,其療效能活血化瘀,行氣開郁,止痛;茯苓不僅能利水消腫,健脾補中,還可以安身神,入心經的作用;甘草有清熱解毒,健脾益氣,止咳化痰,緩急止痛,并且還可以調和諸藥的作用;白芍既能養血調經,柔肝止痛,又能斂陰收汗,平抑肝陽。茯苓、白芍、甘草中分別含有茯苓多糖、芍藥苷、甘草酸成分都有免疫調節[2-4]作用;白芍中芍藥苷成分研究,臨床治療于肝癌[5],Aβ刺激的神經炎癥[6],MRGPRX2引起的假性過敏[7]等;當歸、川芎中藁本內酯成分對婦科疾病[8]、心血管系統[9]有較強藥理活性,在治療循環系統疾病過程中,能擴張血管、增加冠脈流量[10],另外血管平滑肌細胞的增殖有抑制作用[11]。其中當歸、川芎在臨床上常配對伍用,增強養血補血、活血化瘀、調經止痛的作用[12]。在1991年出版的《衛生部藥品標準》中,就有收錄八珍袋泡茶的質量標準,迄今逾三十多年仍在收錄范圍內,但其完善與提高的空間很大,目前有關八珍袋泡茶中的同時測定不同成分的含量和薄層色譜定性鑒別相對較少,八珍袋泡茶方中藥材多,單個藥材成分的鑒定和含測較為復雜,本研究在現在有文獻報道的基礎上,結合《中國藥典》2020版中當歸、川芎、茯苓、甘草質量標準有關方法,采用薄層色譜法同時對當歸和川芎,茯苓和甘草進行定性鑒,以高效液相法同時測定芍藥苷和藁本內酯的含量,以期為質量標準提高提供實驗數據,對保證其質量標準的完善和提高具有重要意義。1儀器與試藥1.1儀器高效液相色譜儀(UV檢測器,美國瓦里安公司,型號:VARIAN210);電子分析天平(北京賽多利斯儀器系統有限公司,精度為0.1mg,型號:BSA124S型);超聲波清洗機(寧波新芝生物科技股份公司,功率為200W,頻率為40kHz,型號:SB-5200D型);紫外可見分光光度計(日本ShimadzuUV公司,型號:UV-1240型);暗箱式四用紫外分析儀(上海嘉鵬科技有限公司,型號:ZF-型)。1.2試藥當歸對照藥材(批號:120927-201617)、川芎對照藥材(批號:120918-201813)、茯苓對照藥材(批號121117-201910)、甘草對照藥材(批號:120904-202021)、芍藥苷對照品(批號:110736-202044,含量以96.8%計)均購自中國食品藥品檢定研究院;藁本內酯對照品(上海麥克林生化科技有限公司,批號:Z812557,含量≧99%);乙腈、磷酸為色譜純試劑,水為超純水,其余試劑均為分析純試劑;八珍袋泡茶共3批(廣西藥用植物園制藥廠生產,批號分別為:210101、210102、210401,規格:2.4g/袋)。2方法與結果2.1薄層色譜鑒別2.1.1當歸、川芎的鑒別取本品2袋,加入30ml的石油醚,經過超聲處理30min后,取出,濾過,濾液水浴蒸干,再用1ml環己烷將剩余的殘渣完全溶解,既得供試品溶液;取當歸、川芎對照藥材粉各1g,分別以相同方法制備成對照藥材溶液;按八珍袋泡茶處方比例取缺當歸、川芎的其余藥材,按工藝制備成缺當歸、川芎陰性樣品,以上述相同方法制備成陰性對照品溶液。按2020年版《中國藥典(四部)》通則0502薄層色譜法[13]試驗,吸取上述制備好的4種溶液各5μl,并且點于同一硅膠G薄層板上,以環己烷-乙酸乙酯(9:1)溶液作為展開劑,飽和30min,展開,取出,晾干后在365nm紫外光下檢視。結果顯示,供試品色譜與對照藥材色譜在相應的位置上有相同顏色的熒光斑點,且陰性對照無干擾,見圖2.1。123456注:1.當歸對照藥材溶液;2.川芎對照藥材溶液;3-5.供試品溶液;6.陰性對照品溶液圖2.1當歸、川芎薄層色譜圖2.1.2茯苓、甘草的鑒別以“2.1.1”項下供試品溶液作為供試品溶液;取茯苓、甘草對照藥材粉各1g,加入30ml的石油醚,經過超聲處理30min后,取出,濾過,濾液水浴蒸干,再用1ml環己烷將剩余的殘渣完全溶解,分別制成對照藥材溶液;按八珍袋泡茶處方比例取缺茯苓、甘草的其余藥材,按工藝制備成缺茯苓、甘草陰性樣品,以上述相同方法制備成陰性溶液。按2020年版《中國藥典(四部)》通則0502薄層色譜法[13]試驗,吸取上述制備好的4種溶液各10μl,且分別點于同一硅膠G薄層板上,以環己烷-氯仿-丙酮(10:2:0.7)溶液作為展開劑,飽和30min,展開,取出并晾干,噴灑10%硫酸乙醇溶液,放置105℃加熱板上至斑點清晰再放置10min,在紫外光(365nm)下檢視。結果顯示,供試品色譜與對照藥材色譜在相應的位置上有相同顏色的熒光斑點,且陰性對照無干擾,見圖2.2。123456注:1.茯苓對照藥材溶液;2.甘草對照藥材溶液;3-5.供試品溶液;6.陰性對照品溶液圖2.2茯苓、甘草薄層色譜圖2.2含量測定2.2.1色譜條件色譜柱:KromasilC18色譜柱(250mmx4.6mm,5μm);流動相為乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B),梯度洗脫:0~12min,19%A,81%B;12~13min,19%~27%A,81%~73%B;13~26min,27%A,73%B;26~27min,27%~19%A,73%~81%B;27~30min,19%A,81%B;檢測波長:0~15min:230nm(檢測芍藥苷)、15~40min:280nm(檢測藁本內酯);流速:1.0ml/min;柱溫:30℃;進樣量:10μl;理論塔板數不低于4000。2.2.2對照品溶液制備精密稱取芍藥苷對照品0.0082g、藁本內酯對照品0.0070g,置于50mL容量瓶中,加入70%乙醇溶解至刻度,配制成芍藥苷濃度為0.1588mg/mL、藁本內酯濃度為0.1400mg/mL的混合對照品儲備液,精密量取上液5mL,置10mL棕色容量瓶中,即得混合對照品溶液。2.2.3供試品溶液精密稱取八珍袋泡茶樣品1g,置于50ml具塞瓶中,用移液管量取25ml的70%乙醇溶液加入,稱重并浸泡1h,經過超聲處理30min后取出并冷卻,再重新稱定重量,用70%乙醇補足減失重量,充分搖勻且濾過,取續濾液,既得。2.2.4陰性對照溶液按八珍袋泡茶處方比例取缺白芍、當歸、川芎的其余藥材,按其工藝制備成缺白芍、當歸、川芎陰性樣品,并按“2.2.3”項下相同方法制備陰性樣品溶液,既得。2.2.5專屬性試驗分別精密吸取上述配制好的芍藥苷和藁本內酯的混合對照品溶液、八珍袋泡茶供試品溶液及缺白芍、當歸、川芎的陰性對照溶液各10μl,按“2.2.1”項下所研究建立的色譜條件進行檢測分析,記錄色譜圖,見圖2.3。結果顯示,芍藥苷、藁本內酯色譜峰與混合對照品在相同的保留時間有相同的色譜峰,峰形良好,前后與其它色譜峰分離度大于1.5,且陰性對照無干擾,具有良好的專屬性。1.芍藥苷2。藁本內酯A.混合對照品溶液B。供試品溶液C。陰性對照品溶液圖2.3高效液相色譜圖2.2.6線性關系考察分別精密量取2.2.1”項下配制好的混合對照品儲備液1,2,3,4,5,6,7,8ml,分別置于10ml容量瓶中,加入70%乙醇定容到刻度線,充分搖勻,微孔濾膜過濾既得。按“2.2.1”項下所研究建立的色譜條件進行測定,記錄峰面積,以進樣量為橫坐標(X,μg),峰面積為縱坐標(Y)繪制標準曲線,并計算得芍藥苷、藁本內酯回歸方程分別為:Y=33.7046X+35.8124,r=0.9998;Y=6.5671X+4.8128,r=0.9996。結果表明,芍藥苷、藁本內酯線性范圍分別在0.159~1.271μg、0.14~1.12μg與峰面積呈良好的線性關系,結果如表2.1和表2.2所示。表2.1芍藥苷線性關系考察1ml2ml3ml4ml5ml6ml7ml8ml濃度(mg/ml)0.01590.03180.04760.06350.07940.09530.11120.1271進樣量(ug)0.1590.3180.4760.6350.7940.9531.1121.271峰面積41.101046.501352.046857.444162.363167.620373.345678.8002表2.2藁本內酯線性關系考察1ml2ml3ml4ml5ml6ml7ml8ml濃度(mg/ml)0.01400.02800.04200.05600.07000.08400.98000.1120進樣量(ug)0.140.280.420.560.700.840.981.12峰面積5.72446.67967.61518.46219.327710.351211.227912.21202.2.7精密度試驗取2.2.1”項下配制好的混合對照品儲備液適量,按“2.2.1”項下所研究建立的色譜條件連續重復進樣測定6次,記錄峰面積并計算RSD值,考察芍藥苷、藁本內酯混合對照品峰面積的變化情況。結果表明,芍藥苷、藁本內酯峰面積RSD分別為0.71%、0.82%,表明該儀器精密度良好。2.2.8穩定性試驗精密稱取八珍袋泡茶(批號:210101)樣品1g,按“2.2.3”項下相同方法制備樣品溶液,再按“2.2.1”項下所研究建立的色譜條件進樣測定,分別在0、1、2、4、8、12、24h進樣測定,記錄峰面積并計算RSD值,考察八珍袋泡茶供試品溶液室溫下放置在不同的時間內峰面積變化情況。結果表明,供試品溶液中芍藥苷、藁本內酯峰面積RSD分別為1.18%,1.55%,表明該八珍袋泡茶供試品溶液在24h內相對穩定。2.2.9重復性試驗精密稱取八珍袋泡茶(批號:210101)樣品1g,共6份,按“2.2.3”項下相同方法制備樣品溶液,再按2.2.1項下所研究建立的色譜條件進樣測定,記錄6份芍藥苷、藁本內酯的峰面積以計算含量。結果表明,芍藥苷、藁本內酯平均含量分別為1.9076mg/g、1.1873mg/g,RSD分別為0.94%,1.09%。說明該方法的重復性良好。2.2.10加樣回收試驗精密稱取芍藥苷對照品0.0130g、藁本內酯對照品0.0078g,置于25ml棕色容量瓶中,加70%乙醇溶解并稀釋至刻度線,配成含芍藥苷0.5034mg/ml、藁本內酯0.3120mg/ml的混合對照品溶液;精密稱取八珍袋泡茶(芍藥苷含量為1.9076mg/g、藁本內酯含量為1.1873mg/g)樣品0.5g共9份,依次精密加入混合對照品溶液(芍藥苷濃度0.5034mg/ml、藁本內酯0.3120mg/ml)1,2,3ml各3份,按“2.2.3”項下相同方法制備樣品溶液,再按“2.2.1”項下所研究建立的色譜條件進樣測定,記錄峰面積并計算,結果芍藥苷、藁本內酯平均回收率分別為98.64%、98.34%,其RSD分別為1.36%、1.64%,結果見表2.3。2.2.11樣品含量測定精密稱取3批不同批號的八珍袋泡茶樣品1g,按“2.2.3”項下相同方法制備樣品溶液,再按“2.2.1”項下所研究建立的色譜條件進樣測定,記錄芍藥苷、藁本內酯峰面積并計算含量,結果見表2.4。表2.3加樣回收率試驗結果(n=9)成分取樣量(g)樣品中對照品量(mg)加入對照品量(mg)測得對照品量(mg)回收量(mg)回收率(%)平均回收率(%)RSD%芍藥苷0.52761.00630.50341.49860.492297.7898.641.36%0.52100.99380.50341.49130.497698.840.52310.99780.50341.50460.5069100.690.52951.01001.00682.00330.993398.660.52531.00201.00681.97390.971996.530.52781.00671.00682.00340.996698.990.52461.00061.51022.46491.464396.960.53161.01401.51022.51951.505599.690.52420.99991.51022.50461.504899.64藁本內酯0.52760.62640.31200.92960.303297.1798.341.64%0.52100.61860.31200.92920.310799.570.52310.62110.31200.93230.311299.750.52950.62870.62401.25060.622099.670.52530.62370.62401.22540.601796.430.52780.62670.62401.25410.6274100.540.52460.62290.96301.55940.936697.260.53160.63120.96301.55800.926896.240.52420.62240.96301.56980.947598.39表2.4樣品含量測定結果(n=3)批號芍藥苷(mg/g)藁本內酯(mg/g)2101011.9076187241.19332104011.89941.17503討論八珍袋泡茶方中藥材種類較多,為了更有效的控制其質量,本研究對處方中的藥材開展薄層鑒別,采用高效液相色譜法對有效成分進行定量測定。根據《中國藥典》2020年版一部藥材項下的相關方法并結合近年來發表的研究成果[14-16],采用TLC法同時對當歸和川芎進行定性鑒定、同時對茯苓和甘草進行定性鑒定,相較于現有的單個藥材進行定性鑒定的方法,該方法更加高效且可行;藁本內酯是當歸、川芎的主要活性成分之一,含量較高[17-19],在以HPLC法測定芍藥苷含量的基礎上,通過不斷考察不同流動相梯度洗脫的方法[20-22],最終以乙腈-0.1%磷酸梯度洗脫為流動相;以此建立了對藁本內酯的含量測定方法且與芍藥苷同時進行,進一步完善了對八珍袋泡茶的含量測定依據。八珍袋泡茶療效明顯,臨床應用廣泛,而藥品質量安全不容忽視。其現有的質量標準研究僅收有對單個藥材的定性和定量方法,不能很好地控制產品質量,總體來看,標準還不夠完善,且普遍偏低。本研究提升了八珍袋泡茶的質量標準,將現有較為復雜的研究方法進行了優化,研究結果表明,本研究方法簡便可行,從生產上來看,不僅節約了檢驗成本,還為八珍袋泡茶的質量標準做出了更為有力的參考依據,以期將其質量標準更加標準化。參考文獻[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典:一部[M].北京:中國醫藥科技出版社,2020:485-486.[2]杜曉妍,吳嬌.茯苓的化學成分和藥理作用研究進展[J].新鄉醫學院學報,2021,38(05):496-500.[3]張育貴,張淑娟,邊甜甜,等.芍藥苷藥理作用研究新進展[J].中草藥,2019,50(15):3735-3740.[4]孫娟,莊亦心,胡鋒清,等.甘草酸作為甜味劑的研究進展[J].中國食品添加劑,2020,31(11):144-148.[5]FengZeng,QixinZhong,RulanTan,etal.PaeoniflorinAffectsHepatocellularCarcinomaProgressionbyInhibitingWnt/β-CateninPathwaythroughDownregulationof5-HT1D[J].CurrentPharmaceuticalBiotechnology,2021,22(9).[6]ChoEunJu,KimHyunYoung,LeeAhYoung.PaeoniflorinamelioratesAβ-stimulatedneuroinflammationviaregulationofNF-κBsignalingpathwayandAβdegradationinC6glialcells.[J].Nutritionresearchandpractice,2020,14(6).[7]WangJianli,ZhangYongjing,WangJue,etal.PaeoniflorininhibitsMRGPRX2-mediatedpseudo-allergicreactionviacalciumsignalingpathway.[J].Phytotherapyresearch:PTR,2020,34(2).[8]董晴,陳明蒼.當歸化學成分及藥理作用研究進展[J].亞太傳統醫藥,2016,12(02):32-34.[9]楊志軍,顧寧.藁本內酯心血管藥理作用研究概況[J].吉林中醫藥,2016,36(02):211-213.[10]汪程遠,張燕,譚月晗.含川芎、當歸中成藥中藁本內酯的檢測分析[J].中國醫藥導報,2012,9(26):119-121.[11]QunLu,Tai-QiuQiu,HongYang.Ligustilideinhibitsvascularsmoothmusclecellsproliferation[J].EuropeanJournalofPharmacology,2006,542(1).[12]李偉霞,唐于平,王歡,等.藥對研究(Ⅶ)——當歸-川芎藥對[J].中國中藥雜志,2013,38(24):4220-4226.[13]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典:四部[M].北京:中國醫藥科技出版社,2020:59-60.[14]姚世霞,王春瑤,朱旭江,等.八珍補汁質量標準提升研究[J].亞太傳統醫藥,2021,17(11):71-74.[15]楊惠蓮,謝靜,冷靜.八珍袋泡茶的薄層色譜鑒別[J].醫藥導報,2012,31(02):234-236.[16]畢建云,張靜,趙云濤,等.逐瘀止痛遠紅外灸貼的質量標準研究[J].食品與藥品,2020,22(06):442-447.[17]陳振鶴,吳國泰,孫敏,等.當歸中藁本內酯研究概況[J].甘肅中醫藥大學學報,2018,35(02):102-105.[18]韓煒.川芎的化學成分與藥理作用研究進展[J].中國現代中藥,2017,19(09):1341-1349.[19]ZuoAi-Hua,WangLi,XiaoHong-Bin.[Researchprogressstudiesonpharmacologyandpharmacokineticsofligustilide].[J].ZhongguoZhongyaozazhi=Zhongguozhongyaozazhi=ChinajournalofChinesemateriamedica,2012,37(22).[20]楊艷,劉云華,黃志芳,等.一測多評法測定川芎、當歸中洋川芎內酯A和藁本內酯的含量[J].中國實驗方劑學雜志,2015,21(03):58-62.[21]顏仁龍,郭璐,潘明鳳,等.HPLC法測定川芎中藁本內酯和歐當歸內酯A的含量[J].安徽農業科學,2012,40(26):12857-12858.[22]陳香玲,陳紅軍.高效液相色譜法同時測定八珍益母膠囊中10種活性成分含量[J].中南藥學,2016,14(03):306-309.綜述八珍袋泡茶的研究進展摘要:本文通過閱讀相關的文獻,主要對八珍袋泡茶方中單味藥化學成分和藥理作用、薄層色譜和有效成分提取及含量測定的研究展開綜述,為八珍袋泡茶進一步研究發展奠定基礎。關鍵詞:八珍袋泡茶;研究發展;綜述八珍袋泡茶原方出自明代醫家薛己所著的《正體類要》,是由黨參、炒白術、茯苓、甘草、當歸、白芍、川芎、熟地黃八味中藥材組成,適用于氣血虧損,面色發黃,四肢乏力等癥狀。在1991年出版的《衛生部藥品標準》中,就有收錄八珍袋泡茶的質量標準,迄今逾三十多年仍在收錄范圍內,但其完善與提高的空間很大。該制劑藥味眾多,為保證患者用藥安全,需通過多方面的監控,提高質量標準。現將八珍袋泡茶方中單味藥化學成分和藥理作用進行簡單的了解,薄層色譜和有效成分提取及含量測定的相關研究整理分析撰寫成綜述如下。1單味藥化學成分和藥理作用簡析通過研究發現,八珍袋泡茶制劑中黨參中參苷Ⅰ是苷類含量最高,揮發性成分眾多,還有糖類、甾類、生物堿等其他成分。黨參對各大系統有一定的治療作用,如對血液系統的作用有增加血紅蛋白含量、抑制血小板聚集;對中樞神經系統的作用有提高記憶力、降低驚厥和死亡的時間或次數;對消化系統的作用有抗潰瘍、對胃黏膜起到保護等[1]。炒白術所含蒼術酮是揮發性成分中最高、多糖類、苷類、氨基酸等成分,具有免疫調節、抗腫瘤、利尿、抗炎抗菌、抗衰老等作用[2]-[3]。茯苓主要活性成分為三萜類和多糖類化合物,具有抗腫瘤、免疫調節、抗衰老、抗炎、抗氧化等藥理作用[4]。甘草所含成分有三萜類、生物堿及黃酮類等,可用于治療系統疾病:心律失常、動脈粥樣硬化的心血管系統疾病;氣管炎、支氣管痙攣以及咽炎等呼吸系統疾病;胃潰瘍、肝炎的消化系統疾病;還可以用于抗癌、解毒、抗病原微生物等作用[5]白芍中的萜類以單萜為主,以其苷類,它們中含芍藥苷活性成分最高,其次是芍藥內酯,另外還含有揮發油類、甾體類及黃酮類化合物等,具有抗炎鎮痛、抗血栓、降低血脂、降低血糖、保肝護肝、改善心肌肥厚等作用[6]。董晴等[7]、張曉娟等[8],當歸和川芎都含有有機酸類、揮發油,它們分別代表有效成分是阿魏酸、藁本內酯。其中當歸還含有大量的多糖、多種氨基酸、香豆素等成分,具有補血活血、鎮痛、抗氧化、抗炎和保護臟器器官等藥理作用。川芎中川芎嗪被認為特征性的生物堿,具有鎮痛、抗炎、改善心功能、抗凝血、缺氧細胞保護、抗衰老等作用。當歸與川芎配伍能活血行氣。熟地黃主要含有環烯醚萜苷類、糖苷類、氨基酸類、紫羅蘭酮類和多種微量元素等化學成分,具有抗氧化、抗衰老、增強免疫力、促進造血、抗突變、抑制腫瘤等作用[9]-[10]。2薄層色譜鑒別楊惠蓮等[11],研究中八珍袋泡茶樣品采用乙醚溶解超聲處理,其中川芎和當歸所含的有效成分多種相同,專屬性增強,有利于同時鑒別,以環己烷-乙酸乙酯(9:1)為展開劑;茯苓以環己烷-三氯甲烷-丙酮(7:3:1)為展開劑,結果分離效果好,此方法專屬性強,重復性好。另外還建立有黨參以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸(20:4:0.5)為展開劑;白術以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(8:2:0.2)為展開劑,在各自薄層色譜系統下黨參、白術斑點清晰,簡便可靠。3.有效成分提取及含量測定的研究3.1白芍中芍藥苷的提取及含量測定于定榮等[12],分別采用水提取和乙醇提取白芍中芍藥苷,水提取主要是受浸泡程度、水量、煎煮時間等影響;乙醇提取受濃度、提取時間和溶劑用量等影響。利用Kromasil100-5C18(4.6mm×250mm,5μm)為色譜柱,以乙腈-0.1%磷酸溶液(14∶86)作為流動相,檢測波長230nm。結果得到水提取、50%乙醇超聲提取、80%乙醇加熱回流提取、50%乙醇超聲提取、80%乙醇索氏提取含量分別為1.5622、2.6384、2.8950、3.0228、1.8323mg/g。水提取方便,節約成本,但芍藥苷是水溶性性質,提取的同時會伴隨著很多雜質,使含量偏低,應用相對較少。50%乙醇超聲提取比50%、80%乙醇回流提取和80%乙醇索氏提取效果更明顯。采用超聲提取較為適宜,并且操作簡便,節約時間,避免高溫使芍藥苷的破壞,成分流失。建立HPLC法測定八珍袋泡茶中芍藥苷的含量,楊清林等[13],采用50%甲醇超聲提取1h小時,以迪馬DiamonsilC18(250mm×4.6mm,5μm)為色譜柱,乙腈-水(17∶83)為流動相,檢測波長為230nm,結果平均回收率為98.58%,RSD=1.17%(n=9),三批樣品平均含量分別為2.4、2.2、2.4mg/g。謝靜等[14],采用稀乙醇超聲提取30min,以乙腈-0.1%磷酸溶液(13∶87)為流動相,檢測波長為230nm,平均加樣回收率為102.0%,RSD=1.4%(n=6),三批樣品平均含量分別為2.59、2.60、2.59mg/g。從測定結果來看,乙醇提取和甲醇提取沒有明顯的差異。張瑜等[15],其中有酶法提取的研究,在原料中加入酶,并在恒溫下攪拌水浴加熱酶兩個小時后離心取上清液。采用HPLC測定芍藥苷含量,結果提取率為2.76%、2.62%。酶提取主要有助于水解以破壞細胞壁的結構,從而提高芍藥苷的提取率。該提取方法需根據酶的活性選擇最合適的PH值和溫度,對實驗操作要求嚴格,這在技術上有一定的局限性。3.2當歸、川芎中藁本內酯的提取及含量測定胡杰等[16],采用70%乙醇回流提取當歸、川芎飲片中藁本內酯,以ODSC18柱(4.6mm×200mm,5μm),甲醇-水-乙酸(75.0:24.8:0.2),檢測波長為326nm,結果測得含量分別為3.506、6.990mg/g。研究表明有機溶劑對藁本內酯溶解性能較好,并且也指出溫度高可能會使提取成分發生異構化。汪程遠等[17],測定不同廠家生產含有川芎、當歸中成藥中藁本內酯有效成分,以甲醇超聲提取,利用HypersilODS(4.6mm×150mm,5μm)為色譜柱,甲醇-5%異丙醇(45∶55)為流動相,檢測波長為280nm,結果平均回收率為99.20%,RSD=0.53%(n=6),其中烏雞白鳳丸和補腎益腦丸各三批樣品藁本內酯含量分別為0.003%、0.0234%。4總結綜上所述,八珍袋泡茶中單味藥的藥理作用廣泛,但在該制劑上是否能治療相應的癥狀,還得進一步臨床試驗研究發現。八珍袋泡茶方中藥材多,所含的化學成分復雜,其有效成分研究分析相對艱難,需要研究者的共同努力探索。檢測分析技術常用薄層色譜法和高效液相法,作為質量標準依據之一。八珍袋泡茶制劑目前有關八珍袋泡茶中的同時測定不同成分的含量和薄層色譜定性鑒別相對較少,在單味藥的有效成分的研究在薄層色譜法鑒別和高效液相法含量測定已有初步的探索,但質量標準相對較低。建議多種成分的同時測定的探索或收集不同廠家生產的樣品進行對比,以讓該制劑整體的質量標準提高。隨著經濟水平的提高和科技飛速的發展,中藥材的分析技術越來越精湛,可以為八珍袋泡茶的研究分析提供技術支撐,讓八珍袋泡茶的質量標準更加完善。中藥材在我國具有悠久的歷史,并且在2019年新冠肺炎的襲來,國家主張堅持“中西醫并重,中西藥并用”,體

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