玉環縣人民醫院檢驗科文件編號：JYK-3-XZ-002版本/修訂號：C/0主題內容2012新增作業指導書生效日期：20120301第4頁共4頁編寫制定日期審核審核日期：核準執行日期李永臣2012-03-01李永臣2012-03-01章林華2012-03-01肌鈣蛋白I測定標準操作規程1檢驗申請單獨檢驗項目申請：血漿或血清肌鈣蛋白I（縮寫TNI）；組合項目申請：心肌標志物組合。臨床醫生根據需要提出檢驗申請。2標本采集與處理2.1標本采集2.1.1常規靜脈采血約3ml，置普通試管中。采用血清標本的也可采用含分離膠的真空采血管。2.1.2檢驗申請單和血標本試管標上統一且唯一的標識符。2.1.3急診標本采集后，在檢驗申請單上填寫標本采集時間。2.1.4標本采集后與檢驗申請單一起及時運送至檢驗科，標本運送時應冷藏保溫。專人負責標本的接收并記錄標本的狀態，對不合格標本予以拒收。2.1.5下列標本為不合格標本2.1.5.1標本量不足：少于0.5ml的全血標本，或少于0.3ml的血清或血漿。2.1.5.2對反應吸光度有干擾的標本，包括嚴重溶血、嚴重渾濁的標本。2.1.5.3無法確認標本與申請單對應關系的。2.1.5.4其他如標識涂改、標本試管破裂等。2.2標本保存2.2.1接收標本后在30min內將標本離心分離出血清或血漿,避免溶血。離心必須達到4000rpm×15min，離心后的血漿或血清中不能含有顆粒物或微量纖維蛋白，并應盡快將血漿或血清與血細胞分離。2.2.2標本保存時間：標本置2～8℃可穩定24h，需較長時間保存應將血清存放于-20℃。2.2.3已完成測試的標本保持完整的識別號，置4～8℃冰箱內保存7d。2.3標本采集的注意事項2.3.1采血前使受檢者保持平靜、松弛、避免劇烈活動，清晨禁食狀態下采血。2.3.2標本應注意始終置于冷藏，并在4h內完成檢測,一般急診30分鐘報告。3方法原理微粒子酶免疫測定（MEIA）：待測標本中的cTnI與包被鼠抗人cTnI單克隆抗體的微粒子反應后，加入堿性磷酸酶（AP）標記的鼠抗人cTnI抗體，形成抗體-抗原-酶標記抗體復合物，在玻璃纖維柱上洗滌，游離的抗原、抗體被洗掉，結合的抗原抗體的微粒子則被保留在纖維柱濾膜表面，加入底物4-甲基傘型酣磷酸鹽(4-Mup)，在AP酶作用下，脫磷酸后形成熒光物質－甲基傘型酮(4-Mu)，其熒光強度與待測標本中的cTnICK-MB濃度成正比，由標準曲線可計算待測物的濃度。4試劑及其他用品4.1試劑盒名稱:cTnI。4.2試劑盒來源/產品號：美國雅培公司。4.3試劑盒保存：在2~8℃冰箱保存下可穩定至有效期內，不可冰凍。在儀器試劑倉內可穩定336h。4.4試劑盒準備：液體試劑，開蓋后即可使用。4.5試劑盒主要成分：R1a：磁性微粒子結合的單克隆抗cTnI抗體R1b：0.1NNaOHR1c：包被AP酶的單克隆鼠抗cTnI抗體4.6其他用品準備：RV杯、樣品杯、1號液MUP底物、3號液MatrixCell洗滌液、4號液Line稀釋液。5校準品與校準模式采用美國雅培公司提供的定標液和標準曲線校正模式。6質控品與室內質控規則6.1每星期或更換新瓶或新批號試劑時做室內質控。6.2根據每批號質控品的BNP的均值及失控線，作Levey-Jennings控制圖。質控結果如超過失控線，查找原因糾正。7適用儀器Architecti1000SR美國雅培公司。8標本檢測步驟檢測的階段步驟：裝載試劑→進行校準→進行質控→輸入標本檢測項目→加載標本→標本測定→結果復核→報告。9主要分析參數無須輸入操作參數，儀器根據預設的分析項目參數自動進行分析。標本用量50μL。10結果計算由于是非線性標準模式，儀器根據校準曲線自動給出每個標本測定結果。結果單位以ng/mL表示。11檢驗結果的報告及范圍11.1結果的報告11.1.1結果經審核后，確認準確無誤后發出報告。11.1.2報告單上標明結果的計量單位、參考區間、報告日期、時間、操作者和審核者簽名，并有與申請單相同的醫學信息。11.1.3如收到標本的質量可能對測定結果有影響的也在報告單上指出。11.2報告范圍：0～50ng/mL，超過此范圍的結果報告時必須附有證明該結果準確可靠的文字說明，例如：系根據標本重新稀釋后重復測定的結果。12操作性能12.1精密度：批內CV3.0%～5.1%，批間CV3.9%～5.2%。12.2分析范圍：0～30ng/mL。12.3分析靈敏度：0.42ng/mL。12.4準確性：回收試驗結果，回收率96%～106%。12.5方法的有限性及干擾因素：CK-MB至50000ng/mL未見鉤狀效應。血紅蛋白512mg/dL或甘油三酯3000mg/dL時，在允許精度范圍內無影響。膽紅素的濃度超過100mg/L時，產生負干擾。13參考范圍及醫學決定水平0-0.4ng/mL14臨床意義14.1存在形式：心肌肌鈣蛋白有三種存在形式,cTnT，cTnI，cTnC，故cTn是心肌細胞所特有的成分，其血清濃度增高是心肌損傷的特異性生化標志。14.2cTnI是最重要的心肌標志物之一，在證實急性心肌梗塞（AMI）的4-6小時，血清水平即可升高，隨著壞死的肌原纖維不斷崩解破壞，固定于其上的cTnI不斷釋放入血，常于11-24小時后達峰值，約1周后降至正常水平。14.3監控AMI融栓治療時再灌注情況有確切功。成功的溶栓療法使冠脈復通后30、60分鐘后血清cTnI還會繼續升高。14.4cTnI可敏感地測出不穩定型心絞痛的微小心肌損傷和非Q波心肌梗死。不穩定型心絞痛病人血中cTnI陽性率20-40%，明顯優于CK-MB。15結果審核以及分析與相關項目的聯系15.1由資深專業人員負責檢驗結果的審核。15.2認真審核每一個測定結果，審核者對發出報告結果的準確性和可靠性負責，并在報告單的審核者處簽名。15.3相關項目：審核與其他腎上腺或垂體功能有關的等的關系，如出現與臨床不符甚至相悖的情況，應分析與查找原因。16有關引用程序與文件16.1Architecti1000SR分析儀儀器標準操作規