PAGEPAGE1團體標準《豬流行性腹瀉免疫凈化技術規程》（征求意見稿）編制說明一、項目來源根據《廣西標準化協會關于下達2024年第三批團體標準制修訂項目計劃的通知》（桂標協［2024］25號）精神，團體標準《豬流行性腹瀉免疫凈化技術規程》由廣西獸醫協會提出，廣西壯族自治區動物疫病預防控制中心、廣西農墾永新畜牧集團西江有限公司、廣西農墾永新畜牧集團有限公司良圻原種豬場、廣西農墾永新畜牧集團新利牧業有限公司、廣西農墾永新畜牧集團金光有限公司共同起草，項目編號為2024-0308。二、項目背景及目的意義豬流行性腹瀉（PED）是由豬流行性腹瀉病毒(porcineepidemicdiartheavirus,PEDV)引起以腹瀉、嘔吐、脫水為主要特征的一種高度接觸性腸道傳染病。該病首次于20世紀70年代初在英國暴發。隨后10年間，在亞洲、美洲、歐洲等范圍內廣泛流行，給生豬養殖造成巨大經濟損失。我國于1976年首次報道了豬流行性腹瀉，并迅速擴散到諸多省份。該病的流行無明顯季節性，一年四季均可暴發，無地域性；發病表現為嘔吐、水樣糞便，在仔豬階段病死率達80%以上。據報道廣西區多地方不同程度感染PEDV，且感染全年存在，目前由PEDV等引起的仔豬腹瀉已成為危害我區豬群最為嚴重的疫病之一。該病無特效藥治療，疫苗免疫與生物安全管理是防控該病的主要措施。我國對PED的研究主要集中在研發高效診斷試劑盒、新型高效疫苗和新的治療策略。我國對動物疫病凈化工作歷來十分重視，2012年國務院辦公廳下發《國家中長期動物疫病防治規劃（2012-2020年）》，提出要大力開展種畜禽場疫病凈化工作，實施種畜禽場疫病凈化計劃。2017年，中共中央辦公廳、國務院辦公廳聯合印發《關于創新體制機制推進農業綠色發展的意見》要求實施動物疫病凈化計劃，推動動物疫病防控從有效控制向逐步凈化消滅轉變。2021年5月1日修訂實施的《中華人民共和國動物防疫法》，明確將“凈化消滅”納入動物防疫的方針和要求。2021年10月農業農村部發布了《關于推進動物疫病凈化工作的意見》，提出實施動物疫病凈化消滅，是動物疫病防控的重要路徑，也是動物疫病防控的最終目標。按照我國動物疫病防控需要和國家中長期規劃要求，我區種豬場重要疫病凈化工作近年來逐步推進，取得明顯成效，開展豬流行性腹瀉等疫病凈化事關養豬企業健康發展，事關種業振興、畜牧業高質量發展，事關動物產品安全、公共衛生安全。本技術規程總結最新的科研成果和規模化生產實際，并在實踐中驗證、示范和應用，取得顯著成效。把實踐中行之有效的技術規范，制定成團體標準，推薦給同行學習、借鑒和實施，使科技成果轉化為現實生產力，意義重大。本技術規程從生產管理、生物安全防控、免疫控制、PED管理措施、監測凈化、凈化效果評價、凈化維持、檔案記錄等方面，規范規模豬場PED的免疫、防控與凈化。本規程的制定及推廣能夠有效控制豬流行性腹瀉的發生與流行、提高豬群的生產性能，促進經濟效益和行業健康發展，提升種豬品質，促進畜牧業提質增效、高質量發展，保障我區養豬業可持續發展，對促進農村經濟增長、鞏固脫貧攻堅成果、助力鄉村振興具有重要而深遠的意義。三、項目編制過程（一）成立標準編制工作組團體標準《豬流行性腹瀉免疫凈化技術規程》項目任務下達后，由廣西壯族自治區動物疫病預防控制中心牽頭成立了標準編制工作組，具體標準編制工作由起草單位相關人員配合。編制工作組制定了起草編寫方案與進度安排，明確任務職責，確定工作技術路線，開展標準研制工作。（二）收集整理文獻資料標準編制工作組收集了國內有關豬流行性腹瀉免疫凈化技術的相關文獻資料。主要有：GB/T34757-2017豬流行性腹瀉病毒RT-PCR檢測方法GB/T36871-2018豬傳染性胃腸炎病毒、豬流行性腹瀉病毒和豬輪狀病毒多重RT-PCR檢測方法SN/T1699-2017豬流行性腹瀉檢疫技術規范NY/T541-2016獸醫診斷樣品采集、保存與運輸技術規范NY/T544-2015豬流行性腹瀉診斷技術DB45/T2352-2021豬主要病毒性腹瀉防控技術規范DB45/T2731-2023生豬無疫小區生物安全管理技術規范DB22/T3273-2021豬流行性腹瀉防制技術規范DB3302/T131-2021生豬病毒性腹瀉病防制技術規范DB4109/T004-2019豬流行性腹瀉防治技術規范DB62/T2701-2022豬流行性腹瀉防控技術規范《中華人民共和國畜牧法》《中華人民共和國動物防疫法》《病死畜禽和病害畜禽產品無害化處理管理辦法》《動物疫病凈化場評估管理指南》《動物疫病凈化場評估技術規范》（三）研討確定標準主體內容標準編制工作組在對收集的資料進行整理研究之后，召開了標準編制會議，對標準的整體框架結構進行了研究，并對標準的關鍵性內容進行了初步探討。經過研究，標準的主體內容確定為生產管理、生物安全防控、PED管理措施、監測凈化、凈化效果評價、凈化維持、檔案記錄等。（四）調研、形成文本草案、征求意見稿2023年9月～12月，編制工作組深入廣西各大型種豬場進行了廣泛實地調研工作，查閱了大量的文獻資料，結合最新的科研成果和規模化生產實際，對豬流行性腹瀉的免疫、防控、凈化技術進行系統總結。形成了標準的基本構架，對主要內容進行了討論并對項目的工作進行了部署和安排。2024年1月～3月，在前期工作的基礎之上，通過理清邏輯脈絡，整合已有的參考資料中有關豬流行性腹瀉的免疫、防控、凈化技術，在廣西壯族自治區動物疫病預防控制中心、廣西農墾永新畜牧集團西江有限公司、廣西農墾永新畜牧集團金光有限公司、廣西農墾永新畜牧集團有限公司良圻原種豬場等單位多年來持續開展豬流行性腹瀉免疫凈化的研究基礎上，按照簡化、統一等原則編制完成團體標準《豬流行性腹瀉免疫凈化技術規程》（草案）第一稿。2024年3月～4月，標準編制工作組再次深入到區內多個種豬場進行大范圍調研，通過實地調研，廣泛地針對不同地區、不同種豬場開展技術對比和總結，并實際征求意見，通過收集反饋了大量意見，標準編制工作組多次召開會議，通過線上線下結合等會議形式對標準工作組討論稿進行了反復修改和研究討論，形成了團體標準《豬流行性腹瀉免疫凈化技術規程》（征求意見稿）第一稿。2024年5～8月，起草單位邀請了廣西大學、廣西標準技術研究院、廣西壯族自治區農業農村廳獸醫處、廣西壯族自治區獸醫研究所、廣西壯族自治區動物衛生監督所、南寧海關技術中心、廣西揚翔農牧有限責任公司等7個單位及專家針對團體標準《豬流行性腹瀉免疫凈化技術規程》（草案）進行征求意見。結合反饋意見，標準編制工作組再次組織召開會議，逐條分析意見，對標準草案進行了反復修改和研究討論，形成了團體標準《豬流行性腹瀉免疫凈化技術規程》（征求意見稿）（第二稿）和編制說明。四、標準制定原則（一）實用性原則本標準是在充分收集國內外相關資料和文獻、調研分析廣西區內規模豬場養殖現狀，結合起草單位前期研究工作取得的研究成果及積累的生產實踐經驗，并借鑒國內外規模豬場豬流行性腹瀉免疫、防控、凈化的成功經驗進行總結起草的，符合生產實際，有利于規模豬場豬流行性腹瀉免疫凈化技術的實施與推廣，具有較強的實用性和可操作性。（二）協調性原則本標準編寫過程中注意了相關法律法規的協調問題，在內容上與現行法律法規、標準協調一致。（三）規范性原則本標準嚴格按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規則》的要求和規定編寫本標準的內容，保證標準的編寫質量。（四）前瞻性原則本標準在兼顧當前區內規模豬場豬流行性腹瀉免疫防控現實情況的同時，還考慮到了豬流行性腹瀉凈化發展的趨勢和需要，在標準中體現了個別特色性、前瞻性和先進性條款，作為對豬場豬流行性腹瀉免疫凈化技術發展的指導。五、標準主要內容及依據來源當前，完善豬場基礎硬件建設，建立和實施嚴格的生物安全體系，制定和落實科學的免疫程序，持之以恒抓PED的防控與凈化，在部分豬場取得良好的效果。本標準的主要依據是借鑒國內先進標準和技術內容，參考國內外有關文獻資料，結合廣西區內外種豬場豬流行性腹瀉免疫、監測、防控情況，進行實踐研究，并通過實驗室試驗和臨床驗證后提出。本標準編寫主要內容包括術語和定義、縮略語、生產管理、生物安全防控、免疫控制、PED管理措施、監測凈化、凈化效果評價、凈化維持、檔案記錄等方面。適用于獲得《動物防疫條件合格證》《種畜禽生產經營許可證》的規模豬場開展豬流行性腹瀉的免疫與凈化工作。其它豬場可參照執行。術語和定義“豬流行性腹瀉”的界定是綜合SN/T1699-2017和NY/T544-2015中對豬流行腹瀉的概述和定義，通過修改簡化總結提升，更簡潔全面中肯；“疫病凈化”和“免疫凈化”的界定參考中國動物疫病預防控制中心發布的《動物疫病凈化場評估技術規范》（2021版）對動物疫病凈化的定義，免疫凈化是通過采取免疫措施開展的一種疫病凈化，是相對于非免疫凈化的一種定義。來源：SN/T1699-2017豬流行性腹瀉檢疫技術規范來源：NY/T544-2015豬流行性腹瀉診斷技術來源：《動物疫病凈化場評估技術規范》（2021版）縮略語為簡化書寫、貼合閱讀習慣，通俗易懂，參考相關國家、行業和地方標準的縮略語術式，規定了縮略語PED（豬流行性腹瀉）、PEDV（豬流行性腹瀉病毒）、ELISA（酶聯免疫吸附試驗）、RT-PCR（反轉錄聚合酶鏈式反應）。生產管理豬場建立適宜的生產管理制度并嚴格執行，是豬場正常運行以及疫病防控、凈化的前提條件。生產管理包括引種管理、飼養管理（飼養條件）、物資管理、人員管理、運輸管理、消毒管理、廢棄物處置等方面，《NY/T5033無公害食品生豬飼養管理準則》中對生產管理的要求進行了明確規定，只有嚴格按規定執行，才能確保豬場豬流行性腹瀉的免疫與凈化工作能正常開展并取得成效。生物安全防控生物安全防控是豬場疫病防控的主要措辭，豬場想要實現豬流行性腹瀉的凈化，必須建立高等級的生物安全防控措施，包括硬件設施和軟件措施。詳細要求參照《DB?45/T2731生豬無疫小區生物安全管理技術規范》的規定執行。主要包括選址布局、基礎設施條件、生產管理、疫病防控條件、無害化處理等方面。免疫控制疫苗選擇：根據豬場實際選擇與豬場當前?PDEV?流行毒株相匹配的?PED?商品化疫苗(滅活疫苗或弱毒疫苗)。免疫：豬場需根據自身實際建立合適的免疫程序。根據文獻記載以及豬場實踐驗證，發現，PED的免疫凈化需要從后備豬的免疫馴化開始；妊娠母豬產前至少需要免疫PED?疫苗兩次以上，弱毒疫苗和滅活疫苗均需免疫；為了保持豬體內PEDV高水平抗體，有效預防PED的發生，在秋冬季節（腹瀉高發季節）來臨前，全群種豬開展兩次PED?疫苗免疫，弱毒疫苗和滅活疫苗均需免疫。來源：李想.豬場不同流行毒株對豬流行性腹瀉免疫和馴化效果的影響[D].山東農業大學,2022.來源：潘紅麗,馬青蘭,蘇胖.規模化母豬場流行性腹瀉綜合防控[J].現代畜牧科技,2023,(09):114-118.推薦免疫程序來源依據：2021-2022年標準編制工作組在廣西農墾永新畜牧集團西江有限公司下屬豬場開展豬流行性腹瀉免疫監測與抗體消長規律試驗，該公司下屬所有種豬場均采用弱毒苗+滅活苗相結合的免疫方式防控PED，項目組通過監測豬群IgA、IgG抗體水平，優化免疫程序，最終確認出最優免疫程序為：①后備豬：133?日齡免疫?PED?弱毒疫苗?1?次；180?日齡同時免疫?PED?弱毒疫苗和滅活疫苗?1?次，并持續觀察?30d，未發生腹瀉，方可轉群。②妊娠母豬：產前?3?周同時免疫?PED?弱毒疫苗和滅活疫苗?1?次；產前?1?周免疫?PED?滅活疫苗?1?次。③全群種豬：9～10?月份，同時免疫?PED?弱毒疫苗和滅活疫苗?1?次；間隔?30d?后免疫?PED?滅活疫苗?1?次。項目組對該公司下屬豬場連續兩年開展?PEDV監測，未發現PED臨床病例，同時PEDV核酸檢測均為陰性，說明該公司選擇的疫苗和制定的免疫程序，對PEDV防控取得顯著成效。將該程序向廣西農墾永新畜牧集團有限公司良圻原種豬場、廣西農墾永新畜牧集團金光有限公司、廣西農墾永新畜牧集團新利牧業有限公司推廣應用，也獲得了相應豬場的認可。3、免疫控制標準：參照《動物疫病凈化場評估技術規范》（2021版）對豬瘟、藍耳、口蹄疫等一類動物疫病免疫控制標準的規定，考慮PED?疫病特點，結合豬場實踐與征求專家意見，綜合評定認為，豬場連續?1?年及以上無?PED?臨床病例（說明豬場能有效控制PED?的發生），豬群抽檢?PEDVIgG?抗體陽性率達?90％?以上，且?PEDV?核酸抽檢陰性，可視為達到PED?免疫控制標準。來源：《動物疫病凈化場評估技術規范》（2021版）PED管理措施總結最新的科研成果和規模化生產實際，結合PEDV病毒特性，根據豬場多年防控PED的臨床經驗，總結出一套應對腹瀉疫情的防控關鍵點，主要分為以下四個方面：1、分區管理：當豬場某個小單元發生PED?后，應立即做好分區管理，防止腹瀉單元病毒擴散，快速控制疫情，縮小腹瀉范圍。PED?發生單元和未發生單元的清掃工具應分開，腹瀉單元的工具和物資不得流出，人員不得竄棟，PED?發生單元和未發生單元之間不得互相轉群。2、仔豬管理：當豬場某個小單元發生PED?后，整個發病單元豬舍應做好保溫措施，上調溫度?2℃，防止應受涼而加重腹瀉癥狀。停止人工接產，減少應接觸擴散病毒。3?日齡仔豬不做斷尾、補鐵、去勢等常規操作，待仔豬健康狀態穩定再進行操作。PED?對7日齡以內仔豬致病性最重，10日齡以上，沒有被感染的仔豬，可正常進行斷尾、補鐵、去勢。為快速控制疫情，減少損失，可以及時淘汰?7?日齡以下有嚴重腹瀉、脫水虛弱等癥狀的無飼養價值的?腹瀉仔豬。對?10?日齡以上仔豬早斷奶處理，飼喂奶粉飼料（教槽料），前?3d?飲水中添加補液鹽，保證舍內溫度適宜和環境整潔。若?10?日齡以上早斷奶仔豬出現腹瀉，立即采樣檢測?PEDV?核酸，確診為?PED?病豬立即隔離治療，無治療價值病豬淘汰處理。3、母豬管理：當豬場某個小單元發生PED?后，為了防止其他單元感染PEDV，其他單元母豬（含待產母豬）應加強管理。待產母豬進入產房前應清洗消毒，臨產前用過硫酸氫鉀擦拭消毒，清理體表，尤其是乳房、乳頭等部位。母豬擠掉第一把奶水,然后固定乳頭讓仔豬吃初乳，分批哺乳。對擬早斷奶母豬斷奶前?5d?開始飼喂控制同期發情藥物，至分娩后?21d?停止飼喂。不在產房之間移動母豬作為奶媽豬，并執行全進全出的生產模式。進行免疫時，嚴格執行母豬一豬一針頭，仔豬一窩一針頭。4、消毒管理：當豬場某個小單元發生PED?后，一定要做好環境減毒工作，即每日對豬場環境進行大消毒，包括妊娠舍內料道、糞道、走廊、辦公生活區。發生過?PED?的單元，將所有生產工具、能拆卸的物件全部浸泡消毒，將角落縫隙里的糞便全部清理干凈，進行全面消毒，50℃～60℃?烘干?2?h以上（豬場經試驗驗證，只有確保溫度50℃以上、烘干2?h以上才能完全消滅PEDV病毒，此步驟是有效控制PEDV病毒感染擴散的關鍵）。PED?場線內所有死亡豬只用尸體袋打包運輸，防滲漏的同時確保每日對豬只轉運車輛使用后的沖洗消毒。監測凈化抽樣：PEDV免疫抗體、核酸檢測抽樣的頻次，數量主要參照《動物疫病凈化場評估技術規范》（2021版）中關于抽樣比例的設定。腹瀉豬只抽樣方案是參照我國每年動物疫病監測計劃，每個采樣點按30%假定流行率隨機采樣。來源：《動物疫病凈化場評估技術規范》（2021版）2、樣品采集及保存：血清、腸組織、肛門棉拭子樣品的采集及保存方法按《NY/T541?獸醫診斷樣品采集、保存與運輸技術規范》規定執行。主要是確保樣品新鮮、防腐敗、防滲漏。3、檢測方法：經臨床驗證，PEDV?抗體檢測按照?NY/T5446.6?（ELISA方法）進行。PEDV?核酸檢測可按照?SN/T16995.3?（實時熒光RT-PCR方法）進行，或按照?DB45/T2352?附錄?A?（PEDV、TGEV、PDCoV、PoRV多重TaqMan熒光定量RT-PCR檢測方法）進行均可。本標準編制工作組從2018年開始使用?DB45/T2352?附錄?A?（PEDV、TGEV、PDCoV、PoRV多重TaqMan熒光定量RT-PCR檢測方法）在廣西區進行PEDV等腹瀉病毒流行病學調查，評估廣西PEDV感染情況，結果與其他檢測方法符合率高，為廣西PEDV的防控提供技術支撐，可用于PEDV臨床監測。來源：施開創，王睿敏，黎宗強，謝守玉，尹彥文，陸文俊，屈素潔.PEDV、TGEV、PDCoV、PRoV多重TaqMan熒光定量RT-PCR檢測方法的建立及應用[J].\o"紫色刊名為"中國預防獸醫學報，2019，41（6）：595-600。4、結果處置：PED?免疫抗體不合格的豬只，加強免疫，1?個月后再次檢測，免疫抗體仍不合格的豬只，說明其PED?免疫抗體產生不理想，不穩定，有感染發病風險，不適合作為PED?免疫凈化場種豬，應及時淘汰處理。PEDV?核酸抽檢陽性的豬群應暫緩轉群，并持續監測，待?PEDV?核酸轉陰后，說明其不再排毒，感染風險小，可以轉群。凈化效果評價參照中國動物疫病預防控制中心《動物疫病凈化場評估技術規范》（2021版）對相關疫病凈化效果評價的規定，認為，豬場連續?2?年以上無?PED?臨床病例，豬群抽檢?PEDVIgG?抗體陽性率達?90%?以上，且?PEDV?核酸抽檢陰性，視為達到PED?免疫凈化標準。來源：《動物疫病凈化場評估技術規范》（2021版）凈化維持豬場想要維持?PED凈化效果，必須持續嚴格按?NY/T5033、DB45/T2731?的規定做好豬場飼養管理、生物安全管理工作，并按照合適的免疫程序持續開展PED?免疫與疫病監測。檔案記錄依據《畜禽標識和養殖檔案管理辦法》確定，明確了畜禽養殖場應當建立養殖檔案，并載明相關的內容。《動物疫病凈化場評估技術規范》（2021版）也規定了相關凈化措施需要做相應的檔案記錄，并且各種檔案記錄保存期不少于?3?年。來源：《動物疫病凈化場評估技術規范》（2021版）六、國內外同類標準制修訂情況及與法律法規、強制性標準關系經查新，目前國內未見有涉及豬場豬流行性腹瀉免疫與凈化技術的國家標準、行業標準、地方標準或團體標準。僅有《豬傳染性胃腸炎病毒、豬流行性腹瀉病毒和豬輪狀病毒多重RT-PCR檢測方法》（GB/T36871-2018）和《豬流行性腹瀉病毒RT-PCR檢測方法》（GB/T34757-2017）兩個關于診斷技術的國家標準，不涉及本標準的免疫凈化技術；《豬流行性腹瀉檢疫技術規范》（SN/T1699-2017）和《豬流行性腹瀉診斷技術》（NY/T544-2015）兩個關于檢疫診斷的行業標準，不涉及本標準的免疫凈化技