ICS11.220

B41

DB41

河南省地方標準

DB41/T1703—2018

雞血樣與組織樣品采集技能操作規范

2018-09-29發布2018-12-29實施

河南省質量技術監督局發布

DB41/T1703—2018

前言

本標準按照GB/T1.1—2009給出的規則起草。

本標準由河南省畜牧局提出并歸口。

本標準起草單位：駐馬店市動物疫病預防控制中心、駐馬店市獸藥飼料（動物產品）質量檢驗監測

中心、西平縣動物疫病預防控制中心、西平縣獸醫院、遂平縣動物疫病預防控制中心、平輿縣動物衛生

監督所、正陽縣動物疫病預防控制中心。

本標準主要起草人：付顯東、楊晴、薛雙、朱鳳霞、劉萌、陳奎、路方、陶順啟、郭小玲、王艷、

羅志忠、楊洋、王學敏、趙新建、王德清、孫國松、馬萌萌。

I

DB41/T1703—2018

雞血樣與組織樣品采集技能操作規范

1范圍

本標準規定了雞翅靜脈采血、心臟采血、咽喉/泄殖腔拭子采樣、解剖與采樣的技術與操作規范。

本標準適用于雞病診斷、流行病學調查、疫情監測、疫苗免疫效果評估、活雞調運、評估認證等雞

血樣和組織樣品的采集。

2規范性引用文件

下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。

NY/T541獸醫診斷樣品采集、保存與運輸技術規范

3術語和定義

該標準界定的下列術語和定義適用于本文件。為了便于使用，以下重復列出了NY/T541中的某些

術語和定義。

3.1

樣品

取自動物或環境，擬通過檢驗反映動物個體、群體或環境有關狀況的材料或物品。

3.2

采樣

按照規定的程序和要求，從動物或環境取得一定量的樣本，并經過適當的處理，留作待檢樣品的過

程。

4個人防護

采樣人員應做好個人安全防護，穿戴口罩、工作帽、防護服、防護靴、雙層手套，必要時戴防護眼

鏡、面罩。

5采樣原則

5.1先排除后采樣

凡發現急性死亡的動物，懷疑患有炭疽時，不得解剖。應先采集血樣，進行血液抹片鏡檢，確定不

是炭疽后，方可解剖采樣。

5.2合理選擇采樣方法

5.2.1應根據采樣的目的，內容和要求合理選擇樣品采集的種類、數量、部位與抽樣方法。樣品數量

應滿足流行病學調查和生物統計學的要求。

1

DB41/T1703—2018

5.2.2診斷或被動監測時，應選擇癥狀典型成病變明顯或有患病征兆的畜禽，疑似污染物；在無法確

定病因時，采樣種類應盡量全面。

5.2.3主動監測時，應根據畜禽日齡，季節、周邊疫情情況估計其流行率，確定抽樣單元。在抽樣單

元內，應遵循隨機取樣原則。

5.3采樣時限

采集亡動物的病料，應于動物死亡后2h內采集，無法完成時，夏天不得超過6h，冬天不得超過24h

5.4無菌操作

采樣過程應注意無菌操作，刀，剪、攝子，器皿，注射器，針頭等采樣用具應事先嚴格滅菌，每種

樣品應單獨采集。

5.5盡量減少應激和損害

活體動物采樣時，應避免過度刺激或害動物；也應避免對采樣者造成危害。

5.6生物安全防護

采樣人員應加強個人防護，嚴格遵守生物安全操作的相關規定，嚴防人獸共患病感染：同時，應做

好環境消毒以及動物或組織的無害化處理，而免污染環境，防止疫病傳播。

6翅靜脈采血

6.1采樣準備

采樣箱、保溫箱或保溫瓶、酒精棉、干棉球、碘伏、鑷子、采血器、離心管及自封袋、簽字筆、記

號筆、樣品采集登記表、垃圾袋和防護用品。

6.2保定及消毒

側臥保定，展開翅膀，露出腋窩部，拔掉羽毛，在翅下靜脈處用碘伏棉球由里向外做點狀螺旋式消

毒。

6.3采樣

6.3.1拇指壓迫近心端，待血管怒張后，用采血器，平行刺入翅靜脈，放松對近心端的按壓，把針芯

向外緩慢拉，使血液流入采血器；

6.3.2拔出針頭后用干棉球壓迫止血；

6.3.3采血后，將采血器活塞外拉預留血清析出空間。將采血器套上護針帽，去除推桿；

6.3.4對所采樣品進行編號并放入保溫箱或保溫瓶；

6.3.5填寫樣品采集登記表（見附錄A）。

7心臟采血

7.1采樣準備

采樣箱、保溫箱或保溫瓶、酒精棉、碘酒棉、鑷子、采血器、離心管及自封袋、簽字筆、記號筆、

樣品采集登記表、垃圾袋和防護用品等。

2

DB41/T1703—2018

7.2消毒

選定采血部位，用碘伏棉球由里向外做點狀螺旋式消毒。

7.3采樣

7.3.1側臥保定采血

抓住兩翅及雙腿，右側臥保定，在觸及心搏動明顯處，或胸骨脊前端至背部下凹處連線的1/2處垂

直或稍向前方刺入2cm～3cm處插入，回抽見有回血時，順著心臟的跳動頻率把針芯向外緩慢拉，使血

液流入采血器。

7.3.2仰臥保定采血

將雞仰臥保定，使雞胸骨朝上，用手指壓迫嗉囊，露出胸前口，用裝有長針頭的采血器，將針頭沿

其鎖骨俯角刺入，順著體中線方向水平刺入心臟，回抽見有回血時，順著心臟的跳動頻率把針芯向外緩

慢拉使血液流入采血器。

7.3.3拔出針頭后用干棉球壓迫止血；

7.3.4采血后，將采血器活塞外拉預留血清析出空間。將采血器套上護針帽，去除推桿；

7.3.5在采血器上標明樣品編號并將樣品保存至保溫箱或保溫瓶；

7.3.6填寫樣品采集登記表（見附錄A）。

8咽喉/泄殖腔拭子采樣

8.1采樣準備

棉拭子、離心管及自封袋、PBS（見附錄B）、保溫箱或保溫瓶、樣品采集登記表、記號筆、簽字筆、

垃圾袋等。

8.2采樣

8.2.1無菌棉拭子插入咽喉及上顎裂處來回刮3～5次取咽喉分泌物。

8.2.2無菌棉拭子插入泄殖腔約1.5cm～2.0cm，旋轉2～3圈后粘上糞便。

8.2.3將棉拭子放入含有PBS的1.5mL塑料離心管中，蓋上管蓋。

8.2.4對所采樣品進行編號并放入保溫箱或保溫瓶。

8.2.5填寫樣品采集登記表（見附錄A）。

9解剖與采樣

9.1采樣準備

注射器、普通剪刀、手術剪、酒精棉球、酒精燈、火柴、托盤、鑷子、自封袋、尸體袋、保溫箱或

保溫瓶、消毒液桶、樣品采集登記表、記號筆、垃圾袋等。

活雞，無放血致死。

9.2消毒

9.2.1解剖前將雞放在消毒液中完全浸濕。

9.2.2暴露皮下組織和肌肉后用酒精棉球沿切口方向擦拭消毒雞體。

3

DB41/T1703—2018

9.2.3每剪開一個部位或采集完一種組織均用酒精棉球擦拭、火焰消毒剪刀兩面和鑷子。

9.3采樣

9.3.1雞放入托盤，先將腹壁和大腿內側的皮膚切開，用力將大腿按下，使髖關節脫臼，將兩大腿向

外展開，從而固定雞體；

9.3.2于胸骨末端后方將皮膚橫切，與兩側大腿的豎切口連接，然后將胸骨末端后方的皮膚拉起，向

前分離到頭部，使整個胸腹及頸部的皮下組織和肌肉充分暴露；

9.3.3在胸骨后腹部橫切穿透腹壁，從胸骨兩側向前方剪斷肋骨和烏喙骨，然后將胸骨用力向上向前

翻轉，暴露體腔；

9.3.4無菌采集各種組織，采樣順序一般是先采集肝臟，然后依次采集脾臟、腎臟、肺臟等組織，每

種樣品均不能夾帶毛、膽囊或其他雜質；

9.3.5沿口腔向下剪開頸部皮膚肌肉，使喉頭暴露，采集喉頭氣管；

9.3.6剪開頭部皮膚，打開頭骨，采集腦組織；

9.3.7每種樣品分別裝入自封袋密封，采樣完畢后將尸體裝入尸體袋；

9.3.8對所采樣品進行編號并放入保溫箱或保溫瓶；

9.3.9填寫樣品采集登記表（見附錄A）。

4

DB41/T1703—2018

附錄A

（規范性附錄）

樣品采集登記表

樣品采集登記表見表A.1。

表A.1樣品采集登記表

被采樣單位名稱

采樣地點

聯系人聯系電話郵編

動物類別樣品類型采樣日期

動物種類日齡存欄量樣品數量樣品編號

動物臨床情況

末次免疫

免疫末次

疫苗類型疫苗廠家疫苗批號免疫次數至采樣

病種免疫劑量

的間隔天數

動物免

疫情況

檢測目的

被采樣單位蓋章或簽名采樣單位蓋章采樣人簽名

年月日年月日

備注

注1：樣品類型指全血、咽喉/泄殖腔拭子、組織樣品等。

注2：動物種類指種雞、蛋雞、肉雞等。

注3：此單一式三份，第一聯由采樣單位保存、第二聯隨樣品、第三聯由被采樣單位留存。

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附錄B

（規范性附錄）

PH7.2、0.01mol/LPBS的配制

（1）配制25×PBS：稱量2.74g磷酸氫二鈉和0.79g磷酸二氫鈉加蒸餾水至100mL。

（2）配制1×PBS：稱量40mL25×PBS，加入8.5g氯化鈉，加蒸餾水至1000mL。

（3）用氫氧化鈉或鹽酸調PH至7.2.

（4）滅菌或過濾。

（5）PBS一經使用，于4℃保存不超過3周。

_______________________________

6

DB41/T1703—2018

前言

本標準按照GB/T1.1—2009給出的規則起草。

本標準由河南省畜牧局提出并歸口。

本標準起草單位：駐馬店市動物疫病預防控制中心、駐馬店市獸藥飼料（動物產品）質量檢驗監測

中心、西平縣動物疫病預防控制中心、西平縣獸醫院、遂平縣動物疫病預防控制中心、平輿縣動物衛生

監督所、正陽縣動物疫病預防控制中心。

本標準主要起草人：付顯東、楊晴、薛雙、朱鳳霞、劉萌、陳奎、路方、陶順啟、郭小玲、王艷、

羅志忠、楊洋、王學敏、趙新建、王德清、孫國松、馬萌萌。

I

DB41/T1703—2018

雞血樣與組織樣品采集技能操作規范

1范圍

本標準規定了雞翅靜脈采血、心臟采血、咽喉/泄殖腔拭子采樣、解剖與采樣的技術與操作規范。

本標準適用于雞病診斷、流行病學調查、疫情監測、疫苗免疫效果評估、活雞調運、評估認證等雞

血樣和組織樣品的采集。

2規范性引用文件

下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。

NY/T541獸醫診斷樣品采集、保存與運輸技術規范

3術語和定義

該標準界定的下列術語和定義適用于本文件。為了便于使用，以下重復列出了NY/T541中的某些

術語和定義。

3.1

樣品

取自動物或環境，擬通過檢驗反映動物個體、群體或環境有關狀況的材料或物品。

3.2

采樣

按照規定的程序和要求，從動物或環境取得一定量的樣本，并經過適當的處理，留作待檢樣品的過

程。

4個人防護

采樣人員應做好個人安全防護，穿戴口罩、工作帽、防護服、防護靴、雙層手套，必要時戴防護眼

鏡、面罩。

5采樣原則

5.1先排除后采樣

凡發現急性死亡的動物，懷疑患有炭疽時，不得解剖。應先采集血樣，進行血液抹片鏡檢，確定不

是炭疽后，方可解剖采樣。

5.2合理選擇采樣方法

5.2.1應根據采樣的目的，內容和要求合理選擇樣品采集的種類、數量、部位與抽樣方法。樣品數量

應