受理號：CSZ2300029體外診斷試劑產品注冊技術審評報告產品中文名稱：新型冠狀病毒（2019-nCoV）核酸檢測試劑盒（熒光PCR法）產品管理類別：第三類申請人名稱：卡尤迪生物科技宜興有限公司國家藥品監督管理局醫療器械技術審評中心目錄基本信息.........................................................................................................3一、申請人名稱.............................................................................................3二、申請人住所.............................................................................................3三、生產地址.................................................................................................3技術審評概述.................................................................................................4一、產品概述.................................................................................................4二、臨床前研究概述...................................................................................6三、臨床評價概述.......................................................................................11四、產品受益風險判定...............................................................................12綜合評價意見...............................................................................................15基本信息一、申請人名稱卡尤迪生物科技宜興有限公司二、申請人住所宜興經濟技術開發區杏里路號宜興光電產業園4幢101室、室三、生產地址江蘇省宜興經濟技術開發區杏里路10號宜興光電產業園4幢102-3、102-46幢一層中技術審評概述一、產品概述（一）產品主要組成成分試劑盒組成成分見表。表1試劑盒主要組成成分規格/數量

規格組成組分主要組成成分

1反應8反應24反應2019-nCoVTaq規格檢測盒檢測盒異性引物探針、Tris緩沖液、1個8個24個A（A）EnhancerdNTPsMgCl2BSA、海藻糖等2019-nCoV規格錄Taq檢測盒檢測盒1個8個24個

BTris緩沖EnhancerdNTPs、

(B)MgCl2、BSA、海藻糖等（二）產品預期用途本試劑盒用于體外定性檢測具有新型冠狀病毒感染相關癥狀人群、其他需要進行新型冠狀病毒感染診斷或鑒別診斷者的2019-nCoVORF1ab和N基因。本試劑盒檢測結果應結合流行病學史、臨床表現、其他實驗室檢查等進行綜合分析，作出診斷。該產品在使用上應當遵守新型冠狀病毒感染診療方案等文件的相關要求。開展新型冠狀病毒核酸檢測，應符合新冠病毒樣本采集和檢測技術相關指南的要求，做好生物安全工作。（三）產品包裝規格規格：1反應盒、8反應盒；24反應盒；規格：1反應盒、8反應盒；24反應盒。（四）產品檢驗原理本試劑盒采用方法結合熒光探針檢測技術，分別以2019-nCoV及N基因的高度保守序列為靶區域，設計特異性引物及熒光探針，對2019-nCoV核酸進行檢測。本試劑盒用于檢測新型冠狀病毒2019-nCoV和N基因的探針分別為一寡核苷酸，探針兩端分別標記一個報告熒光基團FAMROXBHQ熒光基團發射的熒光被淬滅基團吸收；擴增時，聚合酶的5-3’外切酶活性將特異性結合在靶序列上的探針進行酶切，使得熒光基團與淬滅熒光基團分離，獨立的熒光基團發出熒光信PCR產物形成完全同步。同時在體系中加入內參基因采集、保存和運輸以及的逆轉錄及反應擴增效率等過程的全程監控。二、臨床前研究概述（一）主要原材料轉錄qPCRqPCR型）由DNA聚合酶、逆轉錄酶、dNTPmix、凍干保護劑等組成。這些原材料均為外購方式獲得。引物為申請人自行設計后由專業的合成公司合成。篩選出最佳原材料和供應商，制定了各主要原材料的質量標準并經檢驗合格。申請產品企業參考品包括企業陽性參考品，企業陰性參考品、企業精密度參考品及企業最低檢測限參考品。其中企業陽性參考品共105個滅活的含有2019-nCoV病毒咽拭子樣5個滅活的含有2019-nCoV病毒鼻拭子樣本構成。企業陰性參考品共15病毒或菌株或假病毒和陰性樣本制備而成。企業精密度參考品共4份，由咽拭子和鼻拭子臨床樣本構成，包含弱陽性在內的兩個濃度水平。企業最低檢測限參考品共2份，由咽拭子和鼻拭子臨床樣本構成，為最低檢測限附近濃度水平。（二）生產工藝及反應體系研究申請人通過企業內部試驗確定最佳的生產工藝及反應體系，定了Mix配方和Mix配液工序；）通過凍干工藝的篩選研究，確定了凍干工藝參數和凍干工序；3）根據優化驗證，PCR樣本滅活方式、不同適用機型基線和閾值循環數、采樣拭子材質及樣本采集時間點等進行了研究。（三）分析性能評估人提交了有效運行的質量管理體系下生產的三批產品在的性能評估資料。1.性參考品和陰性參考品。結果表明陽性符合率和陰性符合率均為100%。2.在精密度研究中，申請人采用三批成品試劑盒，對陰性和中、低兩個不同濃度的咽拭子和鼻拭子臨床樣本進行精密度研/不同儀器間的精密度。結果表明：試劑盒日內/日間、批內/批CV值均小于。3.分析特異性分析特異性研究包括交叉反應研究、內外源干擾和競爭性干擾研究。毒HKU1OC43NL63229ESRAS冠狀病毒、MERS狀病毒、甲型HIN1流感病毒、甲型H3N2病毒、甲型H5N1流感病毒、甲型流感病毒、乙型流感YamagataVictoria、呼吸道合胞病毒A型、呼吸道合胞病毒B型、副流感病毒1型、副流感病毒2型、副流感病毒3型、鼻病毒A組、鼻病毒B組、鼻病毒C組、腺病1型、腺病毒2型、腺病毒3型、腺病毒4型、腺病毒5型、腺病毒7型、腺病毒55型、腸道病毒A組、腸道病毒B組、腸道病毒CDAB型、EB病DNA表明申報產品與以上病原體和人基因組DNA無交叉反應。在內外源干擾研究中，申請人采用三批成品試劑盒，對全進行研究，結果顯示內外源干擾物質不會對產品檢測結果產生干擾。種呼吸道常見的病原體對試劑盒新型冠狀病毒的檢測結果不會產生干擾。4.最低檢測限稀釋的201995%時所對應的濃度水平確定本試劑盒的檢出限為copies/mL同來源的2019的最低檢測限為200copies/mL。5.和區域來源的2019新型冠狀病毒樣本進行重復性和最低檢測限驗證，確定本試劑盒的包容性好。（四）陽性判斷值研究申請人對505曲線法以及ORF1ab和N靶標基因及內參基因陽性判斷值均為42。申請人進一步采用臨床（五）穩定性研究申請人對本產品的實時穩定性、運輸穩定性以及樣本穩定性進行研究，確定了在各種條件下申報產品及樣本的有效保存時間。30±℃和～℃條件下。分別于不同時間點檢測企業參考品，包括陰性符合率、陽性符2～28℃穩定保存7個月。此外，申請人對運輸穩定性以及樣本穩定性分別進行了研究。結果顯示，產品的性能均滿足產品說明書聲稱的要求。三、臨床評價概述申請人在首都醫科大學附屬北京地壇醫院、廣州醫科大學附屬市八醫院、鄭州人民醫院共3家機構完成了臨床試驗。采用試驗用體外診斷試劑分別與已上市同類產品和臨床參考標準型冠狀病毒感染患者的鼻拭子和咽拭子樣本。(一）針對咽拭子的臨床性能針對與對比試劑（已上市同類產品）的比較，共入組565例樣本，陽性樣本例，陰性樣本例。試驗結果顯示，本產品與對比試劑的陽性符合率為99.1%（95%CI96.8%99.9%陰性符合率為98.3%95%CI96.3%99.4%98.6%（95%CI：，99.4%（二）針對鼻拭子的臨床性能例樣本，陽性樣本例，陰性樣本例。試驗結果顯示，本產品與對比試劑的陽性符合率為99.1%（95%CI95.3%99.9%陰性符合率為82.5%95%CI75.3%88.4%89.9%（95%CI85.6%93.3%品鼻拭子檢測陽性的情況進行了充分分析，該部分病例均為確診病例。針對與臨床參考標準的比較，共入組258個病例，確診病例例，排除病例例。試驗結果顯示，本產品與臨床參考標準的臨床靈敏度為97.9%（95%CI93.4%99.6%異度為100%95%CI96.9%100%98.8%（95%CI：96.6%99.8%。了詳細分析；針對鼻拭子和咽拭子樣本，臨床試驗均納入了充分的弱陽性樣本進行了驗證。綜上所述，臨床試驗結果顯示本產品滿足技術審評要求。四、產品受益風險判定本產品根據YY/T0316-2016醫療器械風險管理對醫療器械產品的安全風險分析方式，對本產品進行風險分析。（一）受益評估本試劑盒用于體外定性檢測具有新型冠狀病毒感染相關癥狀人群、其他需要進行新型冠狀病毒感染診斷或鑒別診斷者的2019-nCoVORF1ab和N本試劑盒檢測結果應結合流行病學史、臨床表現、其他實驗室檢查等進行綜合分析，作出診斷。該產品在使用上應當遵守新型冠狀病毒感染診療方案等文件的相關要求。開展新型冠狀病毒核酸檢測，應符合新冠病毒樣本采集和檢測技術相關指南的要求，做好生物安全工作。臨床應用的主要受益在于：產品檢測結果有助于臨床醫生進行診斷或鑒別患者是否感染新型冠狀病毒。（二）風險評估收益分析既判定為不可接受的風險采取控制措施，并對具體措施進行實施驗證，同時重新對采取措施后的風險進行估計，確認其風險水平是否可接受。但為保證用械安全，基于對主要剩余風險的規避，需要在說明書中提示以下信息：1.預期用途：本試劑盒用于體外定性檢測具有新型冠狀病毒感染相關癥狀人群、其他需要進行新型冠狀病毒感染診斷或鑒別診斷者的鼻拭子和咽拭子樣本中，新型冠狀病毒（2019-nCoV）ORF1ab和N基因。室檢查等進行綜合分析，作出診斷。該產品在使用上應當遵守新型冠狀病毒感染診療方案等文件的相關要求。開展新型冠狀病毒核酸檢測，應符合新冠病毒樣本采集和檢測技術相關指南的要求，做好生物安全工作。2.警示及注意事項：該試劑盒說明書中明確了該試劑盒檢測方法的局限性及使用中的注意事項。綜合評價意見73948號）等相關醫療器械法規與配套規章，經對申請人提交的注冊申報資料進行系統評價,申報產品符合安全性、有效性的要求，符合現有認知水平，建議準予注冊。2024年08月15日附件：產品說明書新型冠狀病毒（2019-nCoV）核酸檢測試劑盒（熒光PCR【產品名稱】新型冠狀病毒(2019-nCoV)核酸檢測試劑盒（熒光PCR法）【包裝規格】規格：1反應/盒，8反應/盒，24反應/盒

規格B：1反應/盒，8反應/盒，24反應/盒

【預期用途】本試劑盒用于體外定性檢測具有新型冠狀病毒感染相關癥狀人群、其他需要進行新型冠狀病毒感染診斷或鑒別診斷者的鼻拭子和咽拭子樣本中，新型冠狀病毒（2019-nCoV）ORF1ab和N基因。本試劑盒檢測結果應結合流行病學史、臨床表現、其他實驗室檢查等進行綜合分析，作出診斷。該產品在使用上應當遵守新型冠狀病毒感染診療方案等文件的相關要求。開展新型冠狀病毒核酸檢測，應符合新冠病毒樣本采集和檢測技術相關指南的要求，做好生物安全工作?！緳z測原理】本試劑盒采用PCR2019-nCoVORF1ab及N2019-

nCoV核酸進行檢測。本試劑盒用于檢測新型冠狀病毒2019-nCoVORF1ab和N基因的探針分別為一寡核苷酸，探針兩端分別標記一個報告熒光基團（或ROX）和一

個淬滅熒光基團BHQ。當探針完整時，熒光基團發射的熒光被淬滅基團吸收；PCR擴增時，聚合酶的5’-3’外切酶活性將特異性結合在靶序列上的探針進

DNA了熒光信號的累積與PCR產物形成完全同步。同時在體系中加入內參基因作為內參對照，實現對樣本采集、保存和運輸以及RNA的逆轉錄及PCR

反應擴增效率等過程的全程監控?！局饕M成成分】包裝數量規格組分主要組成成分1反應/盒8反應/盒24反應/盒規格A2019-nCoV檢測盒（）樣本保存液、樣本處理液、逆轉錄酶、酶、特異性引物探針、緩沖液、Enhancer、dNTPs、MgCl2、BSA、海藻糖等1個8個24個樣本處理液、逆轉錄酶、2019-酶、特異性引物探

nCoV檢規格B針、緩沖液、1個8個24個測盒Enhancer、dNTPs、

（B）2、BSA、海藻糖等采樣過程中需要但本產品中不包含的組分：（）（）B時需搭配卡尤迪生物科技宜興有限公司的一次性使用病毒采樣管（蘇錫械備20200181號或蘇錫

械備20220059號）（）新型冠狀病毒2019-nCoVPCR6018027301）【儲存條件及有效期】2～28℃避光保存，有效期7個月。

生產日期和使用期限：見標簽。

在有效期內使用?！緲颖疽蟆?.適用樣本類型：咽拭子與鼻拭子2.樣本采集2.1啊”3后在咽后壁上下擦拭至少3次。將拭子頭浸入規格A檢測盒的樣本腔中或含病毒保存液的采樣管中，棄去尾部，旋緊管蓋。圖1咽拭子采集示意圖2.2鼻拭子：被采集人員先用衛生紙擤去鼻涕，隨后頭部微仰。一手執拭子貼一側鼻孔進入，沿下鼻道的底部向后緩緩深入1-1.5厘米后貼鼻腔旋轉至少4

15A檢測盒的樣本腔中或含病毒保存液的

采樣管中，棄去尾部，旋緊管蓋。圖2鼻拭子采集示意圖3.樣本保存采集的待測樣本可立即進行檢測，規格B卡盒：新鮮采集樣本常溫保存（8~30℃）不超過4小時，2~8℃條件下保存不超過4天，-20±5℃保存不超過

124次，-70A8~3042~8℃條件下保存不超過4天。

樣本在56℃條件下滅活30分鐘不會對本試劑盒的檢測產生影響?！具m用儀器】本試劑盒適用于北京卡尤迪生物科技股份有限公司生產的FlashDetectNano全自動核酸檢測分析儀、Flash10全自動核酸檢測分析儀和FlashDetectRobo-16/32全自動核酸檢測分析儀?！緳z驗方法】1.檢測盒準備1.1規格A檢測盒的使用規格A檢測盒在樣本采集時將采集樣本的拭子頭浸入檢測盒（）的樣本腔，或將保存液倒出，吸取300μL試劑盒配套質控品（2019-nCoV陽性對照1.2規格B檢測盒的準備及加樣1）從包裝中取出檢測盒（B；2B300μL洗脫后的樣本或300μL2019-nCoV2.上機檢測2.1.FlashDetectNano全自動核酸檢測分析儀

1)開機；2)按啟動實驗按鈕，根據提示音掃描二維碼，然后樣本倉門自動打開；

3)根據提示音將檢測盒放入樣本倉；4)根據提示音關閉樣本倉門，檢測開始；

5)顯示屏出現倒計時，倒計時結束，顯示屏自動彈出檢測結果界面;

6)檢測完成后，將樣本倉打開，取出檢測盒。2.2全自動核酸檢測分析儀1)按照儀器說明書描述，打開電源開關；2)軟件彈出登錄界面，使用用戶名和密碼登錄用戶；3)4)將掃碼器對準檢測盒上的二維碼，嘀的一聲，掃碼成功，檢測盒信息自動填充；

5)6)彈出“掃描樣本編號”頁面；7)8)9)將檢測盒放入樣本倉；10)關閉倉門；點擊開始實驗按鈕，開始檢測；12)檢測完成后彈出結果分析界面。2.3FlashDetectRobo-16/32全自動核酸檢測分析儀

1)按照儀器說明書描述，打開電源開關；

2)軟件彈出登錄界面，登錄用戶；3)打開樣本倉倉門；4)將檢測盒放入樣本倉；5)關閉樣本倉門；6)儀器進行檢測。本節僅闡述基本操作步驟，詳細操作說明參見適用儀器說明書。3.質量控制3.1內部質控：本試劑盒內部質控選取人肌動蛋白β-actin序列為靶序列設計引物探針，實現對待檢測樣本取樣、RNA核酸釋放、逆轉錄及PCR反應擴增效率等過程的全程監控。陰性樣本的內部質控應為陽性，陽性樣本的內部質控可為陽性或陰性。3.22019-nCoVPCR號：6018027301）

進行質量控制。其中，檢測2019-nCoV陽性對照品，通道和ROX通道Ct值≤35且有明顯的指數期擴增，HEX通道Ct值顯示為無”且無明顯擴增曲

線。檢測陰性對照品，通道、ROX通道Ct值顯示為無”且無明顯擴增曲線，HEX通道Ct值≤35且有明顯的指數期擴增。

【陽性判斷值】通過對臨床陰性和陽性樣本的試驗，利用ROC曲線法確定本試劑盒的ORF1ab和N靶標基因參考Ct值為42，根據正態分步法確定內標基因參考Ct值為42?！緳z驗結果的解釋】1.FlashDetectNano檢測結果解釋檢測結束后屏幕會自動呈現檢測結果，包括陰性、陽性、復測三種情況：（1）“陽性”表示檢測出新型冠狀病毒2019-nCoV核酸；（2）“陰性”表示沒有檢測出新型冠狀病毒2019-nCoV核酸；（3）“復測”表示不確定樣本中是否含有新型冠狀病毒2019-nCoV，建議復檢或者去指定的專業檢測機構進行確認。2.、FlashDetectRobo-16/32檢測結果的解釋反應結束后軟件自動判讀結果。特殊情況下用戶可在技術人員的協助下結合擴增曲線形狀調整基線和閾值。當、ROX或HEX通道Ct值≤42且擴增曲線有明顯指數增長期時，該通道判讀為陽性結果；當Ct值或顯示為無”，該通道判讀為陰性結果。序號基)內)讀1++2+-3-+ORF1ab基因陽性和（或）N基因陽性陽性新型冠狀病毒2019-nCoV陽性4--+ORF1ab基因陰性N基因陰性基因陽性陰性新型冠狀病毒2019-nCoV陰性5---ORF1ab基因陰性N基因陰性基因陰性異常，建議復檢*/注:“+”代表陽性、-”代表陰性；-”代表可為陽性或陰性。*“+/-”則該檢測結果無效，儀器顯示異常，建議復檢”，應對樣本復檢或重新采樣檢測。陽性結果表示：樣本中檢出新型冠狀病毒核酸，懷疑新型冠狀病毒陽性。陰性結果表示：樣本中沒有檢出新型冠狀病毒核酸，但陰性結果不能完全排除感染的可能?！緳z驗方法的局限性】1.本試劑盒的檢測結果僅供臨床參考，對患者的臨床診治應結合其癥狀/體征、病史、其他實驗室檢查及治療反應等情況綜合考慮。2.有關假陽性結果的可能性分析2.1如果樣本在運輸、處理過程中發生交叉污染，則可能導致假陽性結果；2.2實驗環境有PCR產物等氣溶膠污染，則可能導致假陽性結果；2.3實驗過程中使用的耗材、設備等受污染，則可能導致假陽性結果。3.有關假陰性結果的可能性分析3.1不合理的樣本采集、轉運、儲存及處理、樣本中病原體含量過低均有可能導致假陰性結果；3.2該病原體待測靶序列的變異或其他原因導致的序列改變可能會導致假陰性結果；3.3未經驗證的其他干擾或PCR抑制因子等可能會導致假陰性結果。4.被測物濃度超過1×106copies/mL時，內參檢測不穩定?！井a品性能指標】1.陽性符合率檢測國家陽性參考品P1~P7，P1~P5均為陽性；P6可為陽性或陰性；P7為N基因陽性，其余陰性。檢測企業陽性參考品P1～P10，檢測結果均為陽性，陽性符合率均為100%。2.陰性符合率檢測國家陰性參考品N1~N22，均為陰性。檢測企業陰性對照品N1～N15，檢測結果均為陰性，陰性符合率均為100%。3.精密度檢測國家精密性參考品R（1:2010次檢測結果均為陽性，且Ct值的變異系數（CV，%）不高于5.0%。檢測企業精密度參考品R1~R4，各重復測定10次，R1~R4均為陽性，且對應熒光通道的Ct值的變異系數（）均不大于5.0%。//同操作者、不同適用儀器型號間、同一型號不同儀器間及不同操作地點間檢測結果的CV值均小于10%。4.最低檢出限檢測國家靈敏度參考品，為陽性，S4~S10不作要求。2019-nCoV2019-nCoV的最低檢測限為2×102copies/mL。包容性變異株和變異株的病毒樣本進行最低檢測限和重復性驗證，驗證結果不同時間和地域來源樣本和變異株和變異株樣本不影響本試劑盒的性能。6.分析特異性6.1本試劑盒驗證了下表中54100ng/μL的人類基因組DNA病原體檢測濃度病原體檢測濃度冠狀病毒229E1×105TCID腸道病毒A組1×105TCID冠狀病毒OC431×105TCID腸道病毒B組1×105TCID冠狀病毒NL631×105TCID腸道病毒C組1×107冠狀病毒1×105TCID腸道病毒D組1×105TCIDSARS假病毒1×107人偏肺病毒A型1×105TCIDMERS假病毒1×107人偏肺病毒B型1×107甲型流感病毒H1N11×105TCIDEB病毒1×107甲型H3N2流感病毒1×105CEID麻疹病毒1×105TCID甲型H5N1流感病毒1×105TCID人巨細胞病毒1×105TCID甲型H7N9流感病毒1×105TCID輪狀病毒1×105TCID乙型流感1×105CEID諾如病毒1×107乙型流感1×105TCID腮腺炎病毒1×105TCID呼吸道合胞病毒A型1×105水痘帶狀皰疹病毒1×105TCID呼吸道合胞病毒B型1×105TCID肺炎衣原體1×106副流感病毒1型1×105TCID肺炎支原體1×106副流感病毒2型1×105TCID嗜肺軍團菌1×106副流感病毒3型1×105TCID百日咳桿菌1×106鼻病毒A組1×105流感嗜血桿菌1×106鼻病毒B組1×105金黃色葡萄球菌1×106鼻病毒C組1×107肺炎鏈球菌1×106腺病毒1型1×105TCID化膿性鏈球菌1×106腺病毒2型1×105TCID肺炎克雷伯菌1×106腺病毒3型1×105TCID結核分枝桿菌1×106腺病毒4型1×105TCID煙曲霉1×106腺病毒5型1×105TCID白色念珠菌1×106腺病毒7型1×105TCID光滑念珠菌1×106腺病毒55型1×105TCID新生隱球菌1×1066.2本試劑盒驗證了下表中28種樣本中潛在的內源性、外源性干擾物質，物質名稱及檢測濃度如下表所示，所有物質在該濃度及以下均未對試劑盒的檢測結果造成干擾。全血≤5%純化粘蛋白地塞米松扎那米韋妥布霉素苯福林鹽