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文檔簡介
目錄
實驗室人員進出實驗室
實驗室檢測樣品采集
實驗室檢測樣品包裝和運送
實驗室檢測樣品接收
樣品檢測操作規程
電氣設備操作規程
實驗室消毒劑配制標準操作規程
無菌間使用標準操作規程
實驗室廢棄物處理標準操作規程
實驗室消毒標準操作程序
實驗室意外事故處理
實驗室生物安全標準操作規程(SOP)
檢驗科實驗室人員進出實驗室
1目的
制定檢驗科實驗室人員進出的標準操作程序,保障實驗室生物安全。
2適用范圍
適用于檢驗科實驗室人員進出程序。
3職責
實驗室工作人員執行本程序的規定。實驗室負責人負責監督執行。
4規程要求
4.1進入程序
實驗室人員需將外衣掛入(避免將外衣與工作服混放),穿上工作服,按要求戴手
套、口罩等防護用品方可進入實驗室。
4.2退出程序
工作結束后,實驗室人員在實驗室將一次性口罩、手套、鞋套等放入指定容器。先
用0.5%新潔爾滅對手進行消毒,再用消毒肥皂洗手。在指定區域脫下工作服,必要時
進行紫外消毒。實驗室人員退出實驗室后,必須將實驗室入口門關好,方可離開實驗
室。
實驗室生物安全標準操作規程(SOP)
實驗室檢測樣品采集
1目的
為保障檢測實驗的順利進行,規范采樣程序,防止病原微生物在實驗室采樣過程
中產生污染。
2適用范圍
適用于實驗室內采集、處理動物樣品。
3職責
3.1采集檢測樣品的工作人員在采集過程中應當防止病原擴散,并對樣本的來源、采
集過程和處理方法等作詳細記錄。
3.2檢驗人員必須嚴格按照本操作規程操作,不可擅自做出超出本規程的操作,所有
實驗人員對所從事的工作負相應的責任。
4過程要求
4.1工作條件
4.1.1具有采集、處理樣品所需要的生物安全防護設備;
4.1.2具有掌握相關專業知識和操作技能的工作人員;
4.1.3具有有效的防止病原擴散的措施;
4.1.4具有保證檢測樣品質量的技術方法和手段。
4.2實驗材料
準備滅菌的解剖器械(剪刀、鏡子、手術刀、大刀、斧頭等)、滅菌試管、平皿
或自封袋、載玻片、棉簽、營養肉湯、30%,50%甘油鹽水緩沖液、加抗生素的PBS(病
毒保存液)、50%甘油磷酸鹽緩沖液、酒精燈、滅菌注射器、15mL的離心管、1.5mLEP
管、記號筆、簽字筆、防護服、無粉乳膠手套、防護口罩、鉛筆、空白標簽紙、膠布、
75%酒精棉球、碘酒棉球、冰袋、冷藏容器、消毒藥品、采樣單等。
4.3活畜樣品的采集
4.3.1血清樣品的采集4.3.1.1采血方法
對采血部位的皮膚先剃(拔)毛,碘酊消毒,75%的酒精消毒,待干燥后采血。
采血方法推行生豬站立式前腔靜脈、牛羊站立式頸靜脈、禽類翅靜脈采血,采血過程
嚴格無菌。
4.3.1.2采血數量
單一病種抗體監測的每頭(只)采集2?3mL全血,多病種抗體檢測的每頭(只)
采集5?10mL全血。
4.3.1.3全血保存
采集好的全血轉入盛血試管,斜面存放,室溫凝固后直接放在盛有冰塊的保溫箱,
送實驗室。從全血采出到血清分出的時間不超過10h。
4.3.1.4血清分離
凝固全血在室溫2?4h后,有血清析出時,用無菌針剝離血凝塊,然后放入46
冰箱4?8h后,待大量血清析出時,吸出血清。必要時經離心機3000rpm、30min離
心,吸出血清。分離的血清,一般不加防腐劑。血清若在1?2周內即可檢驗,可放
在4c冰箱內保存;如果保存時間較長,應放在-20C?-80C冰箱內保存。運送血清
時可將血清放在盛有冰塊的保溫箱中運送。
4.3.2全血樣品的采集
全血采集后應直接注入盛有抗凝劑的試管中,立即搖動,充分混合。也可將全血
液注入盛有玻璃珠的滅菌瓶中,立即連續振蕩脫纖維蛋白。
4.4活禽樣品的采集
咽喉拭子的采集:將棉簽插入喉頭口及上顆裂處來回刮3?5次取咽喉分泌液,
泄殖腔拭子的采集:將棉簽插入取泄殖腔轉2?3圈并沾取少量糞便,再將咽喉拭子、
泄殖腔拭子一并放入盛有0.8?1.0mL加有抗生素PBS的EP管中,加蓋,編號。
4.5病死(屠宰)畜禽樣品的采集
4.5.1解剖前檢查
急性死亡的牛、羊、豬、馬等動物,解剖之前應作臨床檢查,疑似炭疽病的應采
血、鏡檢,排除炭疽病時,方可解剖。動物死亡后應在6h內進行剖檢。解剖人員要
做好自我防護工作。
4.5.2肝、脾、腎、淋巴結、肺和牛、馬心臟樣品的采集
在肝、脾、腎、淋巴結、肺和牛、馬心臟有病變的部位各采取2?3cm的小方塊,
分別置于滅菌的試管或平皿中。其他畜禽采集整個心臟,置于自封袋中。細菌分離樣
品的采集可用燒紅的刀片燙烙臟器表面,在燒烙部位刺一孔,用滅菌后的伯金耳伸入
孔內,取少量組織或液體,作涂片鏡檢或劃線接種于適宜的培養基上。
4.5.3腦、脊髓樣品的采集
取腦、脊髓2?3cm3浸入50原甘油鹽水中或將整個頭部(豬、牛、馬除外)害U下,
用消毒紗布包裹,置于不漏水的容器中。
4.5.4腸、腸內容物及糞便樣品的采集
腸樣品的采集:選擇病變最嚴重的部分,將其中的內容物棄去,用滅菌的生理鹽
水輕輕沖洗后,置于試管中。腸內容物樣品的采集:燒烙腸壁表面,用吸管扎穿腸壁,
從腸腔內吸取腸內容物,放入盛有30%甘油鹽水中或者直接將帶有糞便的腸管兩端結
扎,從兩端剪斷。糞便樣品的采集:用棉簽插到直腸黏膜表面采集糞便,然后將拭子
放入盛有30%甘油鹽水中。
4.5.5液體病料樣品的采集
采集膽汁、膿、粘液、關節液、水泡液等樣品時,用藥物或燙烙法消毒采樣部位,
用滅菌吸管(毛細吸管、注射器)經消毒部位插入,吸取內部液體,然后將病料注入
滅菌試管中,加蓋。也可用接種環經消毒部位插入,提取病料直接接種在培養基上。
4.5.6胎兒樣品的采集
取流產后的整個胎兒,裝入自封袋或不透水塑料薄膜中。
4.5.7皮膚樣品的采集
用清水清洗病變皮膚后,取病變皮膚3?5g放入滅菌小瓶中,加適量50%甘油磷
酸鹽緩沖液(PH7.4),加蓋密封。
4.5.8死(屠宰)禽樣品的采集
死(屠宰)禽樣品的采集除按上述方法采集,也可將整個死禽裝入不透水塑料薄
膜袋或自封袋中或其他容器內。
4.6組織樣品采集完后的無害化處理
活畜禽、病死畜禽組織樣品采集完后,應做好樣品外包裝和環境消毒以及病死畜
禽及其產品的無害化處理。
4.7樣品編號、抽樣單填寫
4.7.1樣品編號
每頭動物的不同部位的組織樣品應單獨包裝。包裝好后,在樣品袋或平皿外貼上
標簽,標簽注明樣品名、樣品編號、采樣日期等。采集好不同部位的樣品后,同一動
物的樣品集中包裝。
4.7.2采樣單填寫
可根據具體要求填寫。
實驗室生物安全標準操作規程(SOP)
—
實驗室檢測樣品包裝和運送
1目的
維護檢測樣品的質量,防止病原的泄漏和擴散,保障樣品檢測的順利開展。
2適用范圍
適用于檢測樣品的包裝和運送。
3職責
3.1操作者必須嚴格按照本程序操作,不可擅自做出超出本程序的操作,所有實驗人
員對所從事的工作負相應的責任。
3.2實驗室負責人負有對樣品包裝、運輸的監督和管理職責,并監督檢查相關工作人
員的安全工作程序和行為。
4過程要求
擬運輸的樣品,要求嚴密包裝,外表加以消毒,編號、登記后,貼上“生物危險”
標識,并嚴防標識脫落。樣品必須經三層包裝。
4.1樣品的包裝
4.1.1內包裝
4.1.1.1必須是不透水、防泄漏的主容器,保證完全密封。
4.1.1.2必須是結實、不透水和防泄漏的輔助包裝。
4.1.1.3必須在主容器和輔助包裝之間填充吸附材料。吸附材料必須充足,能夠吸收
所有的內裝物。多個主容器裝入一個輔助包裝時,必須將它們分別包裝。
4.1.1.4主容器的表面貼上標簽,注明樣品類別、編號、名稱、數量等信息。
4.1.1.5相關文件,例如毒種或樣本數量表格、危險性聲明、信件、毒種或樣本鑒定
資料、發送者和接收者的信息等應當放入一個防水袋中,并貼在輔助包裝的外面。
4.1.2外包裝
4.1.2.1外包裝的強度應當充分滿足對于其容器、重量及預期使用方式的要求。
4.1.2.2外包裝應當印上生物危險標識。4.1.3包裝要求
4.1.3.1液體或者固體樣品
在輔助包裝周圍必須放置冰、干冰或者其他冷凍劑,或者按照規定將冷凍劑放在
由一個或者多個完整包裝件組成的合成包裝件中,內部要有支撐物,干冰或者干冰消
耗掉以后,仍可以把輔助包裝固定在原位置上。如果使用冰,包裝必須不透水;如果
使用干冰,外包裝必須能排出二氧化碳氣體;如果使用冷凍劑,主容器和輔助包裝必
須保持良好的性能,在冷凍劑消耗完以后,仍能承受運輸中的溫度和壓力。
4.1.3.2凍干樣品
主容器必須是火焰封口的玻璃安甑或者是用金屬封口的膠塞玻璃瓶。在輔助包裝
周圍還必須放置冰、干冰或者其他冷凍劑。
實驗室生物安全標準操作規程(SOP)
—
實驗室檢測樣品接收
1目的
規范接收檢測樣品,保證生物安全。
2適用范圍
適用于送檢樣品的交接管理。
3職責
專人負責接收樣品和接樣的生物安全。
4過程要求
4.1檢測樣品由專人接收,在接收送檢樣品時應作好樣品登記,填寫《樣品接收登記
表》,并對樣品進行符合性檢查,檢查包括:
(1)樣品包裝、標志及外觀是否完好;
(2)對照抽樣單核查樣品的名稱、采樣地點、樣品數量、性狀等信息;
(3)樣品是否損壞、污染或已過有效期。
4.2接樣人進行樣品登記、保存后,報告實驗室負責人安排檢測工作。
4.3檢驗后的剩余樣品,由樣品保管人負責留存。
實驗室生物安全標準操作規程(SOP)
—
樣品檢測操作規程
1目的
為規范樣品的檢測,特制定本規程。
2適用范圍
適用不同待檢樣品的檢測。
3職責
3.1實驗室工作人員嚴格依照本規程進行樣品的檢測。
3.2實驗室負責人負責監督實驗室工作人員樣品的檢測工作。
4過程要求
樣品的檢測方法應采用《作業指導書-檢測標準》(GTCADC-ZYBZ-2016)規定的方
法。
5.相關文件
《作業指導書-檢測標準》(GTCADC-ZYBZ-2016)
實驗室生物安全標準操作規程(SOP)
—
電氣設備操作規程
1目的
為規范實驗室電氣設備的使用和維護,特制定本規程。
2適用范圍
適用于電氣設備的操作和維護。
3職責
實驗室工作人員嚴格依照本規程進行使用電氣設備。
4過程要求
4.1實驗室工作人員必須熟悉儀器的性能、用途、使用方法,嚴格按照說明書使用,
遵守儀器操作規程。
4.2儀器使用過程中發生故障必須立即停止使用,并報告實驗室負責人,及時查找原
因,盡快排除,并登記。
4.3使用完畢必須對使用過的儀器設備按相關要求去除污染,以減少污染風險。
5相關文件
《作業指導書-儀器設備操作規程》(GTCADC-ZYGC-2016)
實驗室生物安全標準操作規程(SOP)
—
實驗室消毒劑配制標準操作規程
1目的
規范實驗室消毒劑配制,保證消毒液的有效性和實驗室生物安全。
2.適用范圍
適用于檢驗科實驗室常用消毒劑的配制。
3.職責
實驗室工作人員負責常用消毒劑的配制。
4.過程要求
4.1消毒劑配制
4.1.1配制前,實驗室工作人員應洗凈配制容器及量具,自然晾干。按試劑配制的配
方和配質量量取所需藥品。按配制要求的先后順序加入藥品,攪拌均勻配制試劑。
4.3配制過程產熱的試劑待自然冷卻后分裝,并將填寫好品名、濃度、配制時間、有
效期的標簽貼于盛裝容器上。做好配制記錄。常用消毒劑的配方及注意事項見下表lo
實驗室生物安全標準操作規程(SOP)
—
實驗室消毒劑配制標準操作規程
表1常用消毒劑種類和配制方法表
消毒劑名稱用途配制方法備注
手消毒,儀器表面消量取5%新潔爾滅溶液100mL置于配制容器
0.2%新潔爾滅
毒等中,加入2400mL純化水攪拌混勻。
稱取20gNaOH固體,緩慢加入純化水定容到強堿pH值大
2%NaOH溶液原位消毒
1000mLo于13
75%乙醇手表面消毒取750mL無水乙醇加純化水定容到1000mLo
配制好的過
氧乙酸需室
冰醋酸:H2O2:濃H2s04按體積比
溫放置48h后
140.0:60.0:2.1配制。根據需要量分別量取所
15%~18%過氧乙使用。超過
實驗室薰蒸消毒需的過氧化氫、冰醋酸和濃硫酸。置于配制容
酸20%的過氧乙
器中攪拌均勻。使用時可加入催化劑高鋸酸鉀
酸會發生爆
或加熱。
炸。一周內用
一
兀O
實驗室生物安全標準操作規程(SOP)
—
無菌間使用標準操作規程
1目的
確保無菌室環境的無菌狀態。
2適用范圍
適用于無菌間空氣微生物監測。
3職責
實驗室工作人員負責實驗室空氣微生物監測和實施。
4過程要求
4.1實驗室工作人員在進無菌間之前,應先用2%石碳酸或來蘇爾對手進行浸泡消毒。
4.2緩沖間在每次使用前,應先打開紫外燈,紫外照射30min;工作人員在進入無菌
室前,必須于緩沖間內更換消毒過的工作服、工作帽及工作鞋。檢驗用的有關器材(待
檢品除外),搬入無菌室前必須分別進行滅菌消毒。
4.3將無菌間和生物安全柜的紫外燈打開照射30min后,才能進行工作。
4.4實驗完畢后,用0.2%新潔爾滅消毒液擦拭生物安全柜臺面,打開生物安全柜內紫
外燈,照射30min。同時無菌間和緩沖間的紫外燈一并打開,照射30min。
4.5工作人員在緩沖間脫下工作服、工作帽及工作鞋。
4.6適時應對無菌間進行熏蒸消毒。
4.7每月應對無菌間進行一次無菌檢查記錄
4.7.1營養瓊脂平板的制備
按營養瓊脂說明書配制營養瓊脂,120℃15min高壓滅菌后,冷卻到50℃左右傾
倒于9cm的平板。待瓊脂凝固后,放37℃48h培養,無菌生長,方可以使用。
4.7.2沉降菌數測定
先打開無菌室內紫外燈照射30min后,將備妥的營養瓊脂平板5個。以無菌方式移入
操作間,置四個角落和中央各1個,開蓋,暴露30分鐘后將蓋蓋上。在37c培養箱
內倒置培養48h,取出檢查。分別數出5個平板的生長菌落數并得出5個平板的平均
菌落數。
4.7.3結果判定
無菌室內的潔凈級別應達到10000級,即在進行沉降菌數測定時,平均菌落數應
小于或等于3個(690mm,0.5h)。如所測得的平均菌落數小于3個,則證明該無
菌室無菌程度符合要求,否則該無菌室的無菌程度不符合要求,需要對無菌間進行徹
底消毒,直至重復檢查符合要求為止。
實驗室生物安全標準操作規程(SOP)
—
實驗室廢棄物處理標準操作規程
1目的
制定實驗室廢棄物安全處理操作規程,保障實驗室生物安全。
2適用范圍
適用于實驗室廢棄物的處理。
3職責
3.1實驗室工作人員嚴格遵守本規程,并對所從事的工作負有生物安全責任。
3.2實驗室負責人負有監督和管理責任。
4過程要求
4.1實驗室工作人員做好個人防護。穿好工作服、戴好手套、口罩和帽子等。
4.2實驗室廢棄物使用防滲專用包裝容器(袋)或者防銳器穿透密閉容器收集,及
時進行無害化處理,并做好實驗室廢棄物處理記錄。
4.3廢棄物分類處理
4.3.1感染性廢棄物處理
培養基、標本和菌(毒)種保存液、血液、血清、臨床標本等感染性廢棄物須進
行壓力蒸汽滅菌。用過的一次性實驗用品(包括手套、口罩、帽子等)及試管、吸管、
移液器吸頭等感染性廢棄物可進行壓力蒸汽滅菌或消毒液浸泡24h。
4.3.2損傷性廢棄物處理
針頭、縫合針、解剖刀、手術刀、備皮刀、手術鋸,試驗玻片、玻璃試管、玻璃
安甑等能夠刺傷或割傷人體的廢棄的實驗利(銳)器等損傷性廢棄物需放入符合要求
的利器盒里,容器裝滿3/4后封蓋,進行高壓蒸汽滅菌處理。
4.3.3藥物性廢棄物處理
過期、淘汰、變質或者被污染的診斷試劑可采用壓力蒸汽滅菌處理。
4.3.4病理性廢棄物處理
動物組織及動物尸體使用兩層防滲專用包裝容器(袋)包裝好(外包裝進行徹底
的消毒處理),按要求進行焚燒、深埋或送往無害化處理場處理。做好廢棄物處理記
錄。
4.3.5化學品廢棄按組分收集后,倒入專用化學廢棄物收集桶內,集中處理。
實驗室生物安全標準操作規程(SOP)
—
實驗室消毒標準操作規程
1目的
保護實驗室的生物安全,防止病原逃逸。
2適用范圍
實驗室日常清潔,實驗過程中產生的污染廢棄物、使用過的防護裝備及設施設備
等的消毒。
3職責
實驗室工作人員按照本標準進行日常消毒。
4過程要求
4.1儀器設備表面:用0.2%新潔爾或0.1%~0.2%有效氯消毒液擦拭,30min后再用清
潔的濕抹布擦拭2次。
4.2廢棄的病毒材料和操作過程中使用的一次性耗材先置于2%NaOH溶液浸泡2h,按
照廢棄物的處理程序處理。
4.3生物安全柜臺面:用0.5%新潔爾、0.1%~0.2%有效氯等消毒液浸濕的無紡抹布擦
拭,30min后再用清潔的濕抹布擦拭2次。使用生物安全柜前后,要用紫外線照射消
毒30min,,
4.4個人防護裝備:工作鞋、橡膠手套可用0.1%?0.2%有效氯消毒液浸泡2h,工作
衣帽和口罩高溫高壓消毒后清洗。
4.5手消毒:用75%乙醇進行消毒。
4.6地面及墻壁:用
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