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文檔簡介

目錄

實驗室人員進出實驗室

實驗室檢測樣品采集

實驗室檢測樣品包裝和運送

實驗室檢測樣品接收

樣品檢測操作規程

電氣設備操作規程

實驗室消毒劑配制標準操作規程

無菌間使用標準操作規程

實驗室廢棄物處理標準操作規程

實驗室消毒標準操作程序

實驗室意外事故處理

實驗室生物安全標準操作規程(SOP)

檢驗科實驗室人員進出實驗室

1目的

制定檢驗科實驗室人員進出的標準操作程序,保障實驗室生物安全。

2適用范圍

適用于檢驗科實驗室人員進出程序。

3職責

實驗室工作人員執行本程序的規定。實驗室負責人負責監督執行。

4規程要求

4.1進入程序

實驗室人員需將外衣掛入(避免將外衣與工作服混放),穿上工作服,按要求戴手

套、口罩等防護用品方可進入實驗室。

4.2退出程序

工作結束后,實驗室人員在實驗室將一次性口罩、手套、鞋套等放入指定容器。先

用0.5%新潔爾滅對手進行消毒,再用消毒肥皂洗手。在指定區域脫下工作服,必要時

進行紫外消毒。實驗室人員退出實驗室后,必須將實驗室入口門關好,方可離開實驗

室。

實驗室生物安全標準操作規程(SOP)

實驗室檢測樣品采集

1目的

為保障檢測實驗的順利進行,規范采樣程序,防止病原微生物在實驗室采樣過程

中產生污染。

2適用范圍

適用于實驗室內采集、處理動物樣品。

3職責

3.1采集檢測樣品的工作人員在采集過程中應當防止病原擴散,并對樣本的來源、采

集過程和處理方法等作詳細記錄。

3.2檢驗人員必須嚴格按照本操作規程操作,不可擅自做出超出本規程的操作,所有

實驗人員對所從事的工作負相應的責任。

4過程要求

4.1工作條件

4.1.1具有采集、處理樣品所需要的生物安全防護設備;

4.1.2具有掌握相關專業知識和操作技能的工作人員;

4.1.3具有有效的防止病原擴散的措施;

4.1.4具有保證檢測樣品質量的技術方法和手段。

4.2實驗材料

準備滅菌的解剖器械(剪刀、鏡子、手術刀、大刀、斧頭等)、滅菌試管、平皿

或自封袋、載玻片、棉簽、營養肉湯、30%,50%甘油鹽水緩沖液、加抗生素的PBS(病

毒保存液)、50%甘油磷酸鹽緩沖液、酒精燈、滅菌注射器、15mL的離心管、1.5mLEP

管、記號筆、簽字筆、防護服、無粉乳膠手套、防護口罩、鉛筆、空白標簽紙、膠布、

75%酒精棉球、碘酒棉球、冰袋、冷藏容器、消毒藥品、采樣單等。

4.3活畜樣品的采集

4.3.1血清樣品的采集4.3.1.1采血方法

對采血部位的皮膚先剃(拔)毛,碘酊消毒,75%的酒精消毒,待干燥后采血。

采血方法推行生豬站立式前腔靜脈、牛羊站立式頸靜脈、禽類翅靜脈采血,采血過程

嚴格無菌。

4.3.1.2采血數量

單一病種抗體監測的每頭(只)采集2?3mL全血,多病種抗體檢測的每頭(只)

采集5?10mL全血。

4.3.1.3全血保存

采集好的全血轉入盛血試管,斜面存放,室溫凝固后直接放在盛有冰塊的保溫箱,

送實驗室。從全血采出到血清分出的時間不超過10h。

4.3.1.4血清分離

凝固全血在室溫2?4h后,有血清析出時,用無菌針剝離血凝塊,然后放入46

冰箱4?8h后,待大量血清析出時,吸出血清。必要時經離心機3000rpm、30min離

心,吸出血清。分離的血清,一般不加防腐劑。血清若在1?2周內即可檢驗,可放

在4c冰箱內保存;如果保存時間較長,應放在-20C?-80C冰箱內保存。運送血清

時可將血清放在盛有冰塊的保溫箱中運送。

4.3.2全血樣品的采集

全血采集后應直接注入盛有抗凝劑的試管中,立即搖動,充分混合。也可將全血

液注入盛有玻璃珠的滅菌瓶中,立即連續振蕩脫纖維蛋白。

4.4活禽樣品的采集

咽喉拭子的采集:將棉簽插入喉頭口及上顆裂處來回刮3?5次取咽喉分泌液,

泄殖腔拭子的采集:將棉簽插入取泄殖腔轉2?3圈并沾取少量糞便,再將咽喉拭子、

泄殖腔拭子一并放入盛有0.8?1.0mL加有抗生素PBS的EP管中,加蓋,編號。

4.5病死(屠宰)畜禽樣品的采集

4.5.1解剖前檢查

急性死亡的牛、羊、豬、馬等動物,解剖之前應作臨床檢查,疑似炭疽病的應采

血、鏡檢,排除炭疽病時,方可解剖。動物死亡后應在6h內進行剖檢。解剖人員要

做好自我防護工作。

4.5.2肝、脾、腎、淋巴結、肺和牛、馬心臟樣品的采集

在肝、脾、腎、淋巴結、肺和牛、馬心臟有病變的部位各采取2?3cm的小方塊,

分別置于滅菌的試管或平皿中。其他畜禽采集整個心臟,置于自封袋中。細菌分離樣

品的采集可用燒紅的刀片燙烙臟器表面,在燒烙部位刺一孔,用滅菌后的伯金耳伸入

孔內,取少量組織或液體,作涂片鏡檢或劃線接種于適宜的培養基上。

4.5.3腦、脊髓樣品的采集

取腦、脊髓2?3cm3浸入50原甘油鹽水中或將整個頭部(豬、牛、馬除外)害U下,

用消毒紗布包裹,置于不漏水的容器中。

4.5.4腸、腸內容物及糞便樣品的采集

腸樣品的采集:選擇病變最嚴重的部分,將其中的內容物棄去,用滅菌的生理鹽

水輕輕沖洗后,置于試管中。腸內容物樣品的采集:燒烙腸壁表面,用吸管扎穿腸壁,

從腸腔內吸取腸內容物,放入盛有30%甘油鹽水中或者直接將帶有糞便的腸管兩端結

扎,從兩端剪斷。糞便樣品的采集:用棉簽插到直腸黏膜表面采集糞便,然后將拭子

放入盛有30%甘油鹽水中。

4.5.5液體病料樣品的采集

采集膽汁、膿、粘液、關節液、水泡液等樣品時,用藥物或燙烙法消毒采樣部位,

用滅菌吸管(毛細吸管、注射器)經消毒部位插入,吸取內部液體,然后將病料注入

滅菌試管中,加蓋。也可用接種環經消毒部位插入,提取病料直接接種在培養基上。

4.5.6胎兒樣品的采集

取流產后的整個胎兒,裝入自封袋或不透水塑料薄膜中。

4.5.7皮膚樣品的采集

用清水清洗病變皮膚后,取病變皮膚3?5g放入滅菌小瓶中,加適量50%甘油磷

酸鹽緩沖液(PH7.4),加蓋密封。

4.5.8死(屠宰)禽樣品的采集

死(屠宰)禽樣品的采集除按上述方法采集,也可將整個死禽裝入不透水塑料薄

膜袋或自封袋中或其他容器內。

4.6組織樣品采集完后的無害化處理

活畜禽、病死畜禽組織樣品采集完后,應做好樣品外包裝和環境消毒以及病死畜

禽及其產品的無害化處理。

4.7樣品編號、抽樣單填寫

4.7.1樣品編號

每頭動物的不同部位的組織樣品應單獨包裝。包裝好后,在樣品袋或平皿外貼上

標簽,標簽注明樣品名、樣品編號、采樣日期等。采集好不同部位的樣品后,同一動

物的樣品集中包裝。

4.7.2采樣單填寫

可根據具體要求填寫。

實驗室生物安全標準操作規程(SOP)

實驗室檢測樣品包裝和運送

1目的

維護檢測樣品的質量,防止病原的泄漏和擴散,保障樣品檢測的順利開展。

2適用范圍

適用于檢測樣品的包裝和運送。

3職責

3.1操作者必須嚴格按照本程序操作,不可擅自做出超出本程序的操作,所有實驗人

員對所從事的工作負相應的責任。

3.2實驗室負責人負有對樣品包裝、運輸的監督和管理職責,并監督檢查相關工作人

員的安全工作程序和行為。

4過程要求

擬運輸的樣品,要求嚴密包裝,外表加以消毒,編號、登記后,貼上“生物危險”

標識,并嚴防標識脫落。樣品必須經三層包裝。

4.1樣品的包裝

4.1.1內包裝

4.1.1.1必須是不透水、防泄漏的主容器,保證完全密封。

4.1.1.2必須是結實、不透水和防泄漏的輔助包裝。

4.1.1.3必須在主容器和輔助包裝之間填充吸附材料。吸附材料必須充足,能夠吸收

所有的內裝物。多個主容器裝入一個輔助包裝時,必須將它們分別包裝。

4.1.1.4主容器的表面貼上標簽,注明樣品類別、編號、名稱、數量等信息。

4.1.1.5相關文件,例如毒種或樣本數量表格、危險性聲明、信件、毒種或樣本鑒定

資料、發送者和接收者的信息等應當放入一個防水袋中,并貼在輔助包裝的外面。

4.1.2外包裝

4.1.2.1外包裝的強度應當充分滿足對于其容器、重量及預期使用方式的要求。

4.1.2.2外包裝應當印上生物危險標識。4.1.3包裝要求

4.1.3.1液體或者固體樣品

在輔助包裝周圍必須放置冰、干冰或者其他冷凍劑,或者按照規定將冷凍劑放在

由一個或者多個完整包裝件組成的合成包裝件中,內部要有支撐物,干冰或者干冰消

耗掉以后,仍可以把輔助包裝固定在原位置上。如果使用冰,包裝必須不透水;如果

使用干冰,外包裝必須能排出二氧化碳氣體;如果使用冷凍劑,主容器和輔助包裝必

須保持良好的性能,在冷凍劑消耗完以后,仍能承受運輸中的溫度和壓力。

4.1.3.2凍干樣品

主容器必須是火焰封口的玻璃安甑或者是用金屬封口的膠塞玻璃瓶。在輔助包裝

周圍還必須放置冰、干冰或者其他冷凍劑。

實驗室生物安全標準操作規程(SOP)

實驗室檢測樣品接收

1目的

規范接收檢測樣品,保證生物安全。

2適用范圍

適用于送檢樣品的交接管理。

3職責

專人負責接收樣品和接樣的生物安全。

4過程要求

4.1檢測樣品由專人接收,在接收送檢樣品時應作好樣品登記,填寫《樣品接收登記

表》,并對樣品進行符合性檢查,檢查包括:

(1)樣品包裝、標志及外觀是否完好;

(2)對照抽樣單核查樣品的名稱、采樣地點、樣品數量、性狀等信息;

(3)樣品是否損壞、污染或已過有效期。

4.2接樣人進行樣品登記、保存后,報告實驗室負責人安排檢測工作。

4.3檢驗后的剩余樣品,由樣品保管人負責留存。

實驗室生物安全標準操作規程(SOP)

樣品檢測操作規程

1目的

為規范樣品的檢測,特制定本規程。

2適用范圍

適用不同待檢樣品的檢測。

3職責

3.1實驗室工作人員嚴格依照本規程進行樣品的檢測。

3.2實驗室負責人負責監督實驗室工作人員樣品的檢測工作。

4過程要求

樣品的檢測方法應采用《作業指導書-檢測標準》(GTCADC-ZYBZ-2016)規定的方

法。

5.相關文件

《作業指導書-檢測標準》(GTCADC-ZYBZ-2016)

實驗室生物安全標準操作規程(SOP)

電氣設備操作規程

1目的

為規范實驗室電氣設備的使用和維護,特制定本規程。

2適用范圍

適用于電氣設備的操作和維護。

3職責

實驗室工作人員嚴格依照本規程進行使用電氣設備。

4過程要求

4.1實驗室工作人員必須熟悉儀器的性能、用途、使用方法,嚴格按照說明書使用,

遵守儀器操作規程。

4.2儀器使用過程中發生故障必須立即停止使用,并報告實驗室負責人,及時查找原

因,盡快排除,并登記。

4.3使用完畢必須對使用過的儀器設備按相關要求去除污染,以減少污染風險。

5相關文件

《作業指導書-儀器設備操作規程》(GTCADC-ZYGC-2016)

實驗室生物安全標準操作規程(SOP)

實驗室消毒劑配制標準操作規程

1目的

規范實驗室消毒劑配制,保證消毒液的有效性和實驗室生物安全。

2.適用范圍

適用于檢驗科實驗室常用消毒劑的配制。

3.職責

實驗室工作人員負責常用消毒劑的配制。

4.過程要求

4.1消毒劑配制

4.1.1配制前,實驗室工作人員應洗凈配制容器及量具,自然晾干。按試劑配制的配

方和配質量量取所需藥品。按配制要求的先后順序加入藥品,攪拌均勻配制試劑。

4.3配制過程產熱的試劑待自然冷卻后分裝,并將填寫好品名、濃度、配制時間、有

效期的標簽貼于盛裝容器上。做好配制記錄。常用消毒劑的配方及注意事項見下表lo

實驗室生物安全標準操作規程(SOP)

實驗室消毒劑配制標準操作規程

表1常用消毒劑種類和配制方法表

消毒劑名稱用途配制方法備注

手消毒,儀器表面消量取5%新潔爾滅溶液100mL置于配制容器

0.2%新潔爾滅

毒等中,加入2400mL純化水攪拌混勻。

稱取20gNaOH固體,緩慢加入純化水定容到強堿pH值大

2%NaOH溶液原位消毒

1000mLo于13

75%乙醇手表面消毒取750mL無水乙醇加純化水定容到1000mLo

配制好的過

氧乙酸需室

冰醋酸:H2O2:濃H2s04按體積比

溫放置48h后

140.0:60.0:2.1配制。根據需要量分別量取所

15%~18%過氧乙使用。超過

實驗室薰蒸消毒需的過氧化氫、冰醋酸和濃硫酸。置于配制容

酸20%的過氧乙

器中攪拌均勻。使用時可加入催化劑高鋸酸鉀

酸會發生爆

或加熱。

炸。一周內用

兀O

實驗室生物安全標準操作規程(SOP)

無菌間使用標準操作規程

1目的

確保無菌室環境的無菌狀態。

2適用范圍

適用于無菌間空氣微生物監測。

3職責

實驗室工作人員負責實驗室空氣微生物監測和實施。

4過程要求

4.1實驗室工作人員在進無菌間之前,應先用2%石碳酸或來蘇爾對手進行浸泡消毒。

4.2緩沖間在每次使用前,應先打開紫外燈,紫外照射30min;工作人員在進入無菌

室前,必須于緩沖間內更換消毒過的工作服、工作帽及工作鞋。檢驗用的有關器材(待

檢品除外),搬入無菌室前必須分別進行滅菌消毒。

4.3將無菌間和生物安全柜的紫外燈打開照射30min后,才能進行工作。

4.4實驗完畢后,用0.2%新潔爾滅消毒液擦拭生物安全柜臺面,打開生物安全柜內紫

外燈,照射30min。同時無菌間和緩沖間的紫外燈一并打開,照射30min。

4.5工作人員在緩沖間脫下工作服、工作帽及工作鞋。

4.6適時應對無菌間進行熏蒸消毒。

4.7每月應對無菌間進行一次無菌檢查記錄

4.7.1營養瓊脂平板的制備

按營養瓊脂說明書配制營養瓊脂,120℃15min高壓滅菌后,冷卻到50℃左右傾

倒于9cm的平板。待瓊脂凝固后,放37℃48h培養,無菌生長,方可以使用。

4.7.2沉降菌數測定

先打開無菌室內紫外燈照射30min后,將備妥的營養瓊脂平板5個。以無菌方式移入

操作間,置四個角落和中央各1個,開蓋,暴露30分鐘后將蓋蓋上。在37c培養箱

內倒置培養48h,取出檢查。分別數出5個平板的生長菌落數并得出5個平板的平均

菌落數。

4.7.3結果判定

無菌室內的潔凈級別應達到10000級,即在進行沉降菌數測定時,平均菌落數應

小于或等于3個(690mm,0.5h)。如所測得的平均菌落數小于3個,則證明該無

菌室無菌程度符合要求,否則該無菌室的無菌程度不符合要求,需要對無菌間進行徹

底消毒,直至重復檢查符合要求為止。

實驗室生物安全標準操作規程(SOP)

實驗室廢棄物處理標準操作規程

1目的

制定實驗室廢棄物安全處理操作規程,保障實驗室生物安全。

2適用范圍

適用于實驗室廢棄物的處理。

3職責

3.1實驗室工作人員嚴格遵守本規程,并對所從事的工作負有生物安全責任。

3.2實驗室負責人負有監督和管理責任。

4過程要求

4.1實驗室工作人員做好個人防護。穿好工作服、戴好手套、口罩和帽子等。

4.2實驗室廢棄物使用防滲專用包裝容器(袋)或者防銳器穿透密閉容器收集,及

時進行無害化處理,并做好實驗室廢棄物處理記錄。

4.3廢棄物分類處理

4.3.1感染性廢棄物處理

培養基、標本和菌(毒)種保存液、血液、血清、臨床標本等感染性廢棄物須進

行壓力蒸汽滅菌。用過的一次性實驗用品(包括手套、口罩、帽子等)及試管、吸管、

移液器吸頭等感染性廢棄物可進行壓力蒸汽滅菌或消毒液浸泡24h。

4.3.2損傷性廢棄物處理

針頭、縫合針、解剖刀、手術刀、備皮刀、手術鋸,試驗玻片、玻璃試管、玻璃

安甑等能夠刺傷或割傷人體的廢棄的實驗利(銳)器等損傷性廢棄物需放入符合要求

的利器盒里,容器裝滿3/4后封蓋,進行高壓蒸汽滅菌處理。

4.3.3藥物性廢棄物處理

過期、淘汰、變質或者被污染的診斷試劑可采用壓力蒸汽滅菌處理。

4.3.4病理性廢棄物處理

動物組織及動物尸體使用兩層防滲專用包裝容器(袋)包裝好(外包裝進行徹底

的消毒處理),按要求進行焚燒、深埋或送往無害化處理場處理。做好廢棄物處理記

錄。

4.3.5化學品廢棄按組分收集后,倒入專用化學廢棄物收集桶內,集中處理。

實驗室生物安全標準操作規程(SOP)

實驗室消毒標準操作規程

1目的

保護實驗室的生物安全,防止病原逃逸。

2適用范圍

實驗室日常清潔,實驗過程中產生的污染廢棄物、使用過的防護裝備及設施設備

等的消毒。

3職責

實驗室工作人員按照本標準進行日常消毒。

4過程要求

4.1儀器設備表面:用0.2%新潔爾或0.1%~0.2%有效氯消毒液擦拭,30min后再用清

潔的濕抹布擦拭2次。

4.2廢棄的病毒材料和操作過程中使用的一次性耗材先置于2%NaOH溶液浸泡2h,按

照廢棄物的處理程序處理。

4.3生物安全柜臺面:用0.5%新潔爾、0.1%~0.2%有效氯等消毒液浸濕的無紡抹布擦

拭,30min后再用清潔的濕抹布擦拭2次。使用生物安全柜前后,要用紫外線照射消

毒30min,,

4.4個人防護裝備:工作鞋、橡膠手套可用0.1%?0.2%有效氯消毒液浸泡2h,工作

衣帽和口罩高溫高壓消毒后清洗。

4.5手消毒:用75%乙醇進行消毒。

4.6地面及墻壁:用

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