山東省日照農業學校2025屆生物高三第一學期期末考試模擬試題考生須知：1．全卷分選擇題和非選擇題兩部分，全部在答題紙上作答。選擇題必須用2B鉛筆填涂；非選擇題的答案必須用黑色字跡的鋼筆或答字筆寫在“答題紙”相應位置上。2．請用黑色字跡的鋼筆或答字筆在“答題紙”上先填寫姓名和準考證號。3．保持卡面清潔，不要折疊，不要弄破、弄皺，在草稿紙、試題卷上答題無效。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．下列有關核酸的敘述正確的是（）A．發菜的遺傳物質有DNA和RNA兩種B．人體細胞內的DNA和轉運RNA中均含有堿基對C．洋蔥根尖細胞的葉綠體和線粒體中均含有少量DNAD．RNA合成時，RNA聚合酶與基因的起始密碼子相結合2．植物光合作用的作用光譜是通過測量光合作用對不同波長光的反應（如O2的釋放）來繪制的。下列敘述錯誤的是（）A．類胡蘿卜素在紅光區吸收的光能可用于光反應中ATP的合成B．葉綠素的吸收光譜可通過測量其對不同波長光的吸收值來繪制C．光合作用的作用光譜也可用CO2的吸收速率隨光波長的變化來表示D．葉片在640～660nm波長光下釋放O2是由葉綠素參與光合作用引起的3．將人的紅細胞移入低滲溶液后，很快吸水膨脹而溶血，而水生動物的卵母細胞在低滲溶液中不膨脹。后來科學家從人的紅細胞的細胞膜上成功分離出一種具有通道作用的蛋白質——水通道蛋白，下列相關敘述正確的是（）A．水分子從低滲溶液單方向進入高滲溶液中B．人的紅細胞與水生動物的卵母細胞的吸水方式相同C．人的紅細胞通過水通道蛋白吸收水的速率大于自由擴散吸收水的速率D．紅細胞吸水膨脹是因為組成細胞膜的磷脂和蛋白質分子都具有流動性4．下為能量流經某生態系統中第二營養級的示意圖（單位J/cm2·a），下列說法正確的是（）A．圖中B表示用于生長、發育和繁殖的能量是80B．該生態系統第一營養級同化的能量至少為400C．能量由第二營養級到第三營養級的傳遞效率是20%D．畜牧業中，放養與圈養相比，可提高圖中C/B的比值5．種粒少而小的狗尾巴草經過人類長時間的馴化，逐漸轉變為穗大、籽粒飽滿的小米，小米具有很高的營養價值。下列有關說法正確的是A．沒有人工馴化，狗尾巴草種群中不會出現穗大基因B．小米和狗尾巴草性狀差異較大，故二者不屬于同一物種C．人工馴化過程中，直接受選擇的是狗尾巴草的基因型D．人工馴化會使狗尾巴草的種群基因頻率發生定向改變6．下列關于細胞工程和胚胎工程的敘述，正確的是（）A．動物細胞培養中，需定期更換培養液，以防止培養過程中的雜菌污染B．人工種子制備中，需向人工薄膜內添加植物激素，以促進愈傷組織發育C．胚胎移植中，需向受體注射免疫抑制劑，以避免受體對植入胚胎產生排斥反應D．胚胎干細胞可在飼養層細胞上進行培養，從而維持其分裂而不分化的狀態二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）回答下列（一）、（二）小題：（一）開發山楂果醋恰好讓山楂中的有機酸豐富了果醋的酸味，同時也彌補生食山楂酸味大的缺陷，具體釀制山楂果醋分為以下三個階段，請將具體過程補充完整。（1）制備山楂果原汁：選成熟的山楂果，在清水沖洗山楂果_______（填“之前”或“之后”）去梗。將山楂果切片并去籽，再添加_______，酶解適宜時間后壓榨取果汁。（2）乙醇發酵：由于山楂果原汁_______，故發酵液中添加適量蔗糖，以獲得酒精含量較高的果酒。果汁中加入活化的________后，在適宜環境下發酵一段時間，當發酵液中停止_______，發酵完畢待過濾，或發酵至_______，上清液即為果酒，用虹吸法取出。（3）醋酸發酵：將醋化醋桿菌進行擴大培養后，經檢查菌體生長正常并無雜菌污染后接種于山楂酒-水中進行發酵，整個發酵過程需要通入_______。在發酵后期加入1．3~1．4%的食鹽，其目的是調味和_______，以防止果醋被發酵分解。（二）下圖為轉基因抗蟲煙草的培育流程，①②③④表示過程，其中②表示利用農桿菌轉入受體細胞。回答下列相關問題：（1）在①過程構建重組質粒時，若用同一種限制性核酸內切酶處理Ti質粒和含目的基因的DNA片段，使兩者形成粘性末端用于拼接，這種方法的明顯缺點是目的基因和質粒________（答出2點即可）。另外，影響拼接效率的主要因素，除以上缺點和鹽離子濃度、滲透壓、溫度等環境因素外，還有_______（答出2點即可）。（2）在②過程中，將圖示重組Ti質粒導入農桿菌時可用______處理農桿菌，以提高轉化效率。操作之后，需要特定的培養基對農桿菌進行篩選，其原因是_______，最終篩選到的對象在相應選擇培養基上的存活情況是________。（3）在③過程常通過調節_______的適當配比，從愈傷組織誘導出芽和根的_____，并由此再生出新植株。獲得轉基因煙草后，再通過[④]_______過程實現多個世代組織培養。8．（10分）回答下列（一）（二）小題（一）回答下列與果酒和果醋的制作的有關問題：（1）葡萄酒是酵母菌在無氧條件下的發酵產物，即將__________氧化成乙醇，當培養液中乙醇的濃度超過_________時，酵母菌就會死亡。果醋則是醋桿菌在有氧條件下將____________氧化而來的。如能獲得醋化醋桿菌的菌種，可先在液體培養基中培養繁殖。用300mL的錐形瓶并用___________振蕩培養48小時后，再接種到發酵瓶中。（2）用葡萄汁制葡萄酒：發酵瓶裝量不能超過________。開始時，酵母菌的____________會使發酵瓶出現負壓，若這種負壓情況持續3天以上，必須加入___________，使發酵盡快發生。（二）某研究小組欲利用抗病毒基因，通過農桿菌轉化法培育抗病毒玫瑰。圖1和圖2分別表示出了抗病毒基因和農桿菌Ti質粒的限制性核酸內切酶的識別位點和抗生素抗性基因（PstⅠ、SmaⅠ、AluⅠ表示限制性核酸內切酶切割位點；amp為氨芐青霉素抗性基因，tet為四環素抗性基因）。請回答：（1）為獲得大量抗病毒基因，且保證形成重組質粒時，目的基因以唯一方向接入，可選用________________________________分別切割目的基因和Ti質粒，再用DNA連接酶連接，形成重組DNA分子，再與經過______________處理的_________（A．有amp和tetB．有amp，無tetC．無amp，有tetD．無amp和tet）農桿菌液混合，使重組DNA進入農桿菌。再利用農桿菌轉入培養的玫瑰細胞，使目的基因導入玫瑰細胞中。（2）將含有導入了目的基因的玫瑰細胞的試管放在搖床上，進行____________________獲得胚性細胞，進而培育成抗蟲玫瑰。（3）這種借助基因工程方法，將外源基因導入受體細胞，再通過這些轉基因細胞進行培養，獲得具有特定性狀的新植株的技術就是______________。（4）當前多地過度開發旅游造成生態環境的破壞，為減緩生態環境的破壞，可發展_______工程，并在旅游區種植抗蟲玫瑰，可有效降低農藥對環境的污染，并獲得較佳的經濟效益、社會效益和________________。9．（10分）近年來，在處理富營養化水體的污水過程中，與化學、物理除氮方法比較，目前認為微生物反硝化去除氮素污染更為經濟有效。科研工作者采用基因工程技術構建具有定向高效降解含氮化合物能力的工程菌，進行了相關研究。請回答問題。（1）微生物的反硝化作用，是氮循環中一個重要的生物過程。亞硝酸鹽還原酶（Nir）是該過程的關鍵酶，是由野生菌株YP4的反硝化基因（nirS）轉錄后，再翻譯出具有___________作用的蛋白質。（1）工程菌的構建①研究者利用NCBI數據庫查到nirS基因的堿基序列，設計引物，利用PCR技術擴增nirS基因。PCR技術利用了___________的原理，使用耐高溫Taq酶而未使用普通DNA聚合酶的主要原因是______________________。②研究者用HindⅢ和BamHI兩種限制酶處理nirS基因與p質粒，在_______________酶的作用下進行體外連接，用連接產物轉化大腸桿菌DH5，在含慶大霉素的培養基中進行培養并提取質粒，如果用HindⅢ和BamHI雙酶切，得到兩個片斷電泳結果分別與_______________電泳結果基本一致，說明獲得重組質粒pYP4S。③將pYP4S轉化到野生菌株YP4中形成工程菌YP4S，培養后進行PCR鑒定。為鑒定篩選出的菌落中是否含有正確插入目的基因的重組質粒，擬設計引物進行PCR鑒定。圖1所示為甲、乙、丙3條引物在正確重組質粒中的相應位置，PCR鑒定時應選擇的最佳一對引物組合是_________。某學生錯選了圖中的另外一對引物組合，擴增出長度為1．1kb的片段，原因是_______________。（3）檢測工程菌YP4S除氮的效能①工程菌株YP4S在已滅菌的模擬污水中培養36h后，檢測結果如圖1。結果表明___________________。②要進一步證明工程菌對含氮污水治理更有效，應___________________________。10．（10分）菊花很美，但其害蟲較多，利用基因工程培育抗蟲菊花是害蟲防治的有效手段。胰蛋白酶抑制劑能干擾昆蟲的代謝，引起昆蟲死亡，但對人體無害。科學家將馬鈴薯胰蛋白酶抑制劑基因（Pin﹣Ⅱ）通過農桿菌導入菊花細胞，培育成了抗蟲菊花。圖1表示含目的基因的DNA分子，圖2表示質粒，圖中Ampr表示氨芐青霉素抗性基因，Neor表示新霉素抗性基因，復制原點是質粒DNA復制的起點，使其能在受體細胞中存在和遺傳。箭頭表示識別序列完全不同的4種限制酶的酶切位點。請回答下列有關問題：（1）上述基因工程中，受體細胞是______________，屬于__________（填“動物”“植物”或“微生物”）基因工程。（2）為使目的基因與質粒高效重組，最好選用_______________（限制酶）作用于含目的基因的DNA和質粒，然后在___________的作用下形成重組質粒。（3）用農桿菌感染時，應優先選用菊花___________（填“受傷的”或“完好的”）葉片與含重組質粒的農桿菌共培養，選用這種葉片的理由是_________________________________。成功導入重組質粒的細胞會表現為______________________________。（4）用轉基因菊花葉片喂養某種菊花害蟲，發現害蟲死亡率顯著增加。試從分子水平寫出轉基因和非轉基因菊花的葉片細胞的不同點：___________________________________。11．（15分）如圖甲表示某豆科植物種子萌發過程中CO2釋放和O2吸收速率的變化趨勢；圖乙表示該豆科植物葉肉細胞中C3的相對含量在夏季某天24h內（有一段時間烏云遮蔽）的變化趨勢；請據圖回答：（1）圖甲中，在12-24h期間，萌發種子的呼吸方式主要是_________________，判斷的依據是___________________；第48h后，萌發種子O2吸收速率超過CO2釋放速率，其原因是細胞呼吸的底物中可能還有___________等物質。（2）圖乙中，葉肉細胞進行光合作用的區間是曲線_________段對應的時間，烏云消失的時間可能是曲線上_______點對應的時刻。與F點相比，G點葉綠體中NADPH的含量較____（填“高”或“低”）。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、B【解析】

1、除少數病毒外，生物的遺傳物質是DNA。2、發菜為原核生物。【詳解】A、發菜的遺傳物質是DNA，A錯誤；B、人體細胞內的DNA分子中堿基成對存在，轉運RNA中含有部分堿基對，B正確；C、洋蔥根尖細胞中無葉綠體，C錯誤；D、轉錄時RNA聚合酶與基因的某一部位相結合，起始密碼子位于mRNA上，D錯誤。故選B。【點睛】本題考查DNA和RNA在生物體內的存在部位、結構以及RNA的合成，考查對基礎知識的理解和歸納。2、A【解析】

葉綠體中的色素主要有葉綠素和類胡蘿卜素，葉綠體又分為葉綠素a和葉綠素b，類胡蘿卜素又分為胡蘿卜素和葉黃素。光合作用中葉綠素主要吸收紅光和藍紫光；類胡蘿卜素主要吸收藍紫光。【詳解】A、類胡蘿卜素只吸收藍紫光，基本不吸收紅光，所以不能利用紅光的能量合成ATP，A錯誤；B、葉綠素主要吸收紅光和藍紫光，其吸收光譜可通過測量其對不同波長光的吸收值來繪制，B正確；C、由于光反應產生的[H]和ATP能用于暗反應，暗反應要吸收CO2，所以光合作用的作用光譜也可用CO2的吸收速率隨光波長的變化來表示，C正確；D、根據吸收光譜可知，葉片在640～660nm波長（紅光區域）光下釋放O2是由葉綠素參與光合作用引起的，D正確。故選A。【點睛】本題考查葉綠體色素種類和作用、光合作用的相關知識，識記光反應的過程和各種色素對不同光的吸收是解答該題的關鍵。3、C【解析】

據題意可知，水生動物的卵母細胞在低滲溶液不膨脹。而紅細胞細胞膜上有一種水通道蛋白，在低滲溶液中，很快吸水膨脹而溶血，說明水的吸收與水通道蛋白有關。【詳解】A、水分子的進出是雙方向的，但總體是低滲溶液進入高滲溶液中，A錯誤；B、人的紅細胞吸水與水生動物的卵母細胞的吸水方式不同，B錯誤；C、人的紅細胞存在水通道蛋白介導的協助擴散，在低滲溶液中很快就吸水漲破，可知人的紅細胞通過水通道蛋白吸收水的速率大于自由擴散吸收水的速率，C正確；D、紅細胞吸水膨脹是因為存在水通道蛋白介導的協助擴散，D錯誤。故選C。4、B【解析】

分析題圖：圖示表示能量流經某生態系統第二營養級的示意圖，其中A表示該營養級攝入的能量；B表示該營養級同化的能量；C表示用于生長、發育和繁殖的能量；D表示呼吸作用中以熱能的形式散失的能量；E表示糞便中的能量。【詳解】A、圖中B表示該營養級同化的能量，即第二營養級同化的能量是80J/cm2?a，A錯誤；

B、圖中B表示該營養級同化的能量，即第二營養級同化的能量是80J/cm2?a，按能量最高傳遞效率20%計算，第一營養級同化的能量至少為80÷20%=400J/cm2?a，B正確；

C、由于第三營養級能量只知道攝入量，不知道同化量，不能計算能量由第二營養級到第三營養級的傳遞效率，C錯誤；

D、B表示該營養級同化的能量，C表示用于生長、發育和繁殖的能量，放養自身呼吸消耗較多，畜牧業中，圈養與放養相比，可提高圖中C/B的比值，D錯誤。

故選B。5、D【解析】

現代生物進化理論的基本觀點：種群是生物進化的基本單位，生物進化的實質在于種群基因頻率的改變；突變和基因重組產生生物進化的原材料；自然選擇使種群的基因頻率發生定向的改變并決定生物進化的方向；隔離是新物種形成的必要條件。【詳解】A、若不經人工馴養，狗尾巴草種群中也可能會出現穗大基因，A錯誤；B、小米和狗尾巴草性狀差異較大，但不存在生殖隔離，故二者屬于同一物種，B錯誤；C、人工馴化過程中，直接受選擇的是狗尾巴草的表現型，C錯誤；D、人工馴化會使狗尾巴草的種群基因頻率發生定向改變，D正確。故選D。6、D【解析】

1、動物培養條件：（1）無菌、無毒的環境：①消毒、滅菌②添加一定量的抗生素③定期更換培養液，以清除代謝廢物；（2）營養物質：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質；（3）適宜的溫度和PH；（4）氣體環境：95%空氣（細胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養液的PH）。2、胚胎干細胞的特點：具有胚胎細胞的特性，在形態上表現為體積小，細胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發育的全能性，可分化為成年動物體內任何一種組織細胞。另外，在體外培養的條件下，可以增殖而不發生分化，可進行冷凍保存，也可進行遺傳改造。【詳解】A、動物細胞培養中，需定期更換培養液，以清除代謝廢物，A錯誤；B、人工種子是以胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等為材料，經過人工薄膜包裝得到的種子，在適宜條件下能夠萌發長成幼苗，不需要添加植物激素，B錯誤；C、受體對移入子宮的外來胚胎，基本上不發生免疫排斥反應，不需要向受體注射免疫抑制劑，C錯誤；D、胚胎干細胞在飼養層細胞上，或在添加抑制因子的培養液中，能夠維持不分化的狀態，D正確。故選D。【點睛】本題考查了細胞工程、胚胎工程的有關知識，要求考生能夠識記動物細胞培養的條件，識記胚胎干細胞的特點，掌握胚胎移植的生理基礎，并結合所學知識準確答題。二、綜合題：本大題共4小題7、之后果膠酶（和果膠甲酯酶）含糖量較低干酵母（懸液）出現氣泡酵母下沉無菌空氣/氧氣抑制雜菌反向拼接/倒接、（自身）環化且的基因的濃度、質粒的濃度、反應時間氯化鈣CaCl2不是所有的農桿菌都接納了重組質粒在含四環素培養基上存活，在含青霉素培養基上死亡營養物質和生長調節劑/植物激素項端分生組織繼代培養【解析】

1.釀酒和制醋是最古老的生物技術。與酒和醋的生產有關的微生物分別是酵母菌和醋桿菌，它們各有不同的菌種。菌種的不同，所產生的酒和醋的風味也不同。本實驗的內容是制作果酒和果醋，所用的原料是葡萄或其他果汁。葡萄酒是酵母利用葡萄糖進行酒精發酵(乙醇發酵)的產物。酵母菌只有在無氧條件下才能進行酒精發酵，即將葡萄糖氧化成乙醇，而且當培養液中乙醇的濃度超過16%時，酵母菌就會死亡。葡萄糖氧化成乙醇的反應式如下。醋桿菌在有氧條件下才能將乙醇氧化為醋酸，醋桿菌所產生的醋酸可使培養液中醋酸的含量高達13%。2.基因工程技術的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法．（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．【詳解】（一）（1）制備山楂果原汁通常選成熟的山楂果，為了避免雜菌污染，通常在用清水沖洗山楂果之后去梗。將山楂果切片并去籽，為了提高出汁率和澄清度，通常需要添加果膠酶（和果膠甲酯酶）處理，酶解適宜時間后壓榨取果汁。（2）乙醇發酵時通常需要在發酵液中添加適量蔗糖，以彌補山楂果原汁含糖量較低的不足，同時也是為了滿足酵母菌發酵需要的底物量，從而獲得酒精含量較高的果酒。然后在果汁中加入活化的干酵母（懸液）后，置于適宜環境下進行發酵，由于酵母菌無氧呼吸的產物是酒精和二氧化碳，所以在發酵過程中會有氣泡產生，當發酵液中不再出現氣泡時，意味著發酵完成，然后過濾獲得果酒；也可發酵至酵母下沉后，用虹吸法取出上清液即為果酒。（3）醋酸發酵中，由于醋化醋桿菌在有氧氣的條件下將酒精變為為乙醛，進而變為乙醇，所以整個發酵過程需要通入無菌空氣/氧氣。在發酵后期加入1．3~1．4%的食鹽，食鹽起到了調味和抑制雜菌的作用，進而防止果醋被其他微生物發酵分解。（二）（1）①為構建基因表達載體的過程，若用同一種限制性核酸內切酶處理Ti質粒和含目的基因的DNA片段，則兩者會出現相同的粘性末端從而使得拼接變得容易，但這種方法存在明顯的缺點是在拼接時會出現反向拼接/倒接、（自身）環化等情況。影響拼接效率的因素主要有鹽離子濃度、滲透壓、溫度等環境因素，除此外，還有且的基因的濃度、質粒的濃度和反應時間也會影響拼接的效率。（2）②過程為將目的基因導入受體細胞的過程，將圖示重組Ti質粒導入農桿菌時，為了提高導入的成功率，可用氯化鈣CaCl2處理農桿菌，以提高轉化效率。因為導入的成功率較低，也就是說，并不是所有的農桿菌都接納了重組質粒，可能有的導入的是普通質粒，或者沒有導入成功，所以需要在特定的培養基對農桿菌進行篩選，由于圖中重組質粒上含有標記基因四環素抗性基因，而抗青霉素的基因被破壞，為了篩選出成功導入重組質粒的農桿菌，需要將待篩選的農桿菌分別接種在含有四環素的培養基和含青霉素的培養基上進行篩選，最終篩選到成功導入重組質粒的農桿菌在相應選擇培養基上的存活情況是在含四環素培養基上存活，在含青霉素培養基上死亡。（3）③過程為再分化成植株的過程，該過程中需要通過調節營養物質和生長調節劑/植物激素的適當配比，從而實現由愈傷組織誘導出芽和根的項端分生組織的目的，并由此再生出新植株。獲得轉基因煙草后，再通過[④]繼代培養過程實現多個世代組織培養，從而實現了轉基因煙草的擴大培養。【點睛】熟知果酒、果醋的制作原理以及基因工程的基本原理和操作要點是解答本題的關鍵，辨圖分析能力是本題考查的主要能力。8、葡萄糖16%乙醇搖床2/3需氧呼吸（或有氧呼吸）酵母SmaI和PstICaCl2D液體懸浮培養植物細胞工程生態（旅游）生態效益【解析】

釀酒和制醋是最古老的生物技術，至今已經有五六千年的歷史。與酒與醋的生產有關的微生物，分別是酵母菌（真菌）和醋桿菌（細菌），它們各有不同的菌種，菌種的不同，所產生的酒和醋的風味也不同。釀酒所用的原料是葡萄或其它果汁，酵母菌在無氧條件下利用葡萄糖進行酒精發酵，當培養液中乙醇的濃度超過16%時，酵母菌就會死亡。果醋的制作是以果酒為原料，利用醋化醋桿菌，將酒精氧化成醋酸的過程。基因工程是狹義的遺傳工程，基因工程的基本原理是讓人們感興趣的基因（即目的基因）在宿主細胞中穩定高效地表達。為了實現基因工程的目標，通常要有多種工具酶、目的基因、載體和宿主細胞等基本要素，并按照一定的程序進行操作，它包括目的基因的獲得、重組DNA的形成，重組DNA導入受體細胞也稱（宿主）細胞、篩選含有目的基因的受體細胞和目的基因的表達等幾個方面。【詳解】（一）（1）酵母菌是兼性厭氧型生物，在無氧條件下可將葡萄糖氧化成乙醇。乙醇對酵母菌的生長不利，當培養液中乙醇的濃度超過16%時，酵母菌就會死亡。醋桿菌是好氧型生物，在有氧條件下將乙醇氧化成醋酸。液體培養可擴增菌種，常用搖床振蕩提高溶氧量以及菌和營養物質的接觸。（2）用葡萄汁制葡萄酒：發酵瓶裝量不能超過2/3，否則溢出易染菌。酵母菌的需氧呼吸（或有氧呼吸）會消耗瓶內的O2，而CO2易溶于水，因此發酵瓶出現負壓。使發酵盡快發生，必須增加菌種的量，使酵母菌快速進行厭氧呼吸。（二）（1）AluI會破壞目的基因，使用兩種不同的限制性核酸內切酶（Sma和Pst）可防止質粒自連，且能保證目的基因接入方向唯一。重組DNA分子中的標記基因為ampr，再與經過CaCl2處理(使其成為感受態細胞)的無ampr和tet的農桿菌液混合，使重組DNA進入農桿菌。（2）將含有導入了目的基因的玫瑰細胞的試管放在搖床上，這種培養稱為液體懸浮培養。（3）從細胞和基因的角度，將外源基因導入受體細胞，再通過將這些轉基因細胞進行培養，獲得具有特定性狀的新植株的技術就是植物細胞工程技術。（4）生態旅游工程生態（旅游）工程是指不消耗、不破壞當地自然旅游資源，旅游設施盡量生態化，促進地方經濟發展。的可以減緩生態環境的破壞。發展生態旅游工程，可減緩生態環境的破壞。在旅游區種植抗蟲玫瑰，可有效降低農藥對環境的污染，并獲得較佳的經濟效益、社會效益和生態效益。【點睛】熟悉微生物的培養以及基因工程的原理及過程是解答本題的關鍵。9、催化DNA復制PCR過程中DNA在高溫下解鏈，這樣的高溫下，普通的DNA聚合酶的生物活性喪失DNA連接p質粒和插入片段（目的基因）乙和丙目的基因反向連接工程菌株除氮效果優于野生菌Ⅰ．工程菌YP4S與野生菌分別處理實際污水36hⅡ．檢測除氮率【解析】

分析題干可知：目前認為微生物反硝化去除氮素污染更為經濟有效，科研工作者采用基因工程技術構建具有定向高效降解含氮化合物能力的工程菌，故需依據基因工程的相關原理進行分析作答。【詳解】（1）亞硝酸鹽還原酶（Nir）是該過程的關鍵酶，酶是經基因的轉錄和翻譯過程形成的有催化作用的蛋白質。（1）①PCR技術依據的原理是DNA分子的復制；因PCR過程中DNA解旋是在在高溫下進行的（90-95℃），這樣的高溫下，普通的DNA聚合酶的生物活性喪失，故在PCR技術中應采用使用耐高溫的Taq酶。②連接兩個DNA片段所用的酶是DNA連接酶；因實驗中nirS基因與p質粒是分別用HindⅢ和BamHI兩種限制酶處理的，故若再用HindⅢ和BamHI雙酶切之后，得到兩個片斷電泳結果分別與p質粒和插入片段（nirS基因）電泳結果基本一致，可說明獲得重組質粒pYP4S。③PCR技術要求兩種引物分別和目的基因的兩條單鏈結合，沿相反方向合成子鏈，結合目的基因的插入位置可知，PCR鑒定時應選擇的最佳一對引物組合是乙和丙；若某學生錯選了圖中的另外一對引物組合（甲和乙），只有反向連接后才能擴增出長度為1．1kb的片段（1＋0.1kb）。（3）①圖1結果表明，無論是總氮還是NH4＋、NO3—的去除率，工程菌株除氮效果優于野生菌。②因圖1是工程菌株YP4S在已滅菌的模擬污水中的處理結果，故要進一步證明工程菌對含氮污水治理更有效，應用工程菌YP4S與野生菌分別處理實際污水36h，檢測除氮率。【點睛】解答本題需要透徹理解基因工程的基本工具、PCR技術的原理，并能讀懂實驗結果的數據分析，進而分析作答。10、菊花細胞植物EcoRI和PstIDNA連接酶受傷的葉片傷口處的細胞釋放出大量酚類物質，可吸引農桿菌移向這些細胞不抗氨芐青霉素，抗新霉素比較轉基因和非轉基因兩種菊花的葉片細胞，轉基因菊花細胞中含有胰蛋白酶抑制劑基因、胰蛋白酶抑制劑的mRNA、胰蛋白酶抑制劑【解析】

基因工程技術的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成；（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等；（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法；（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳解】（1）該基因工程需要將胰蛋白酶抑制劑基因導入菊花細胞，使菊花具有抗蟲性，所以受體細胞是菊花細胞，屬于植物基因工程。（2）目的基因的兩端含有EcoRI、TthIIII、PstI三種限制酶的酶切位點，為了避免目的基因自身環化，不能只用EcoRI這一種限制酶進行切割，若用EcoRI和TthIIII切割目的基因，相應的在對質粒進行切割時會將復制原點切去，因此、為使目的基因與質粒高效重組，最好選用EcoRI和PstI作用于含目的基因的DNA和質粒，然后在DNA連接酶的作用下形成重組質粒。（3）用農桿菌感染時，應優先選