遺傳學第六章病毒的遺傳分析

第六章病毒的遺傳分析一、病毒的形態結構與基因組P184二、噬菌體的增殖與突變型（一）噬菌體的增殖P186（二）噬菌體的突變型1、條件致死突變在某些條件下，導致某些突變型致死，而另外一些條件下仍能增殖。致死條件為限制條件（restrictivecondition)。增殖條件為許可條件（permissivecondition)。遺傳學第六章病毒的遺傳分析（1）溫度敏感突變熱敏感突變冷敏感突變（2）抑制因子敏感突變（sus突變）

sus突變

su+突變：宿主菌含有抑制基因su+，sus突變噬菌體感染此類菌時能產生后代。遺傳學第六章病毒的遺傳分析2、噬菌斑形態突變（1）T4噬菌體簡介

T4噬菌體為T-偶列噬菌體之一，基因組為165Kb的雙鏈DNA分子，包括160個基因，宿主為E.coli。形態特征環狀遺傳學圖遺傳學第六章病毒的遺傳分析遺傳學第六章病毒的遺傳分析遺傳學第六章病毒的遺傳分析（2）T4野生型和突變型侵染E.coliB

和E.coliK(λ）噬菌斑的變化◆快速裂解（rapidlysis，r）突變：r-，形成大噬菌斑；r+，緩慢裂解，形成小噬菌斑。

P191表8-4T4野生型和突變型的區別類型表型

BK(λ）

野生型小噬菌斑小噬菌斑

rⅡ大噬菌斑無噬菌斑遺傳學第六章病毒的遺傳分析3、宿主范圍突變型◆宿主范圍(hostrange，h)：h-表示可同時感染兩種不同的E.coli菌株B，B-2，噬菌斑透明。h+表示只感染菌株B，噬菌斑半透明。遺傳學第六章病毒的遺傳分析三、噬菌體突變型的重組測驗（一）Benzer的重組測驗和基因的精細結構分析實驗：T4rⅡ區兩種突變型rⅡ63，rⅡ12同時侵

染E.coliB和E.coliK(λ），結果如下：遺傳學第六章病毒的遺傳分析遺傳學第六章病毒的遺傳分析重組率=2×野生型噬菌斑數×100%

噬菌斑總數重組測驗：確定突變基因間的空間關系。遺傳學第六章病毒的遺傳分析（二）T2突變型的兩點測交與作圖遺傳學第六章病毒的遺傳分析（三）λ噬菌體的基因重組與作圖（四）T4突變型的三點測交與作圖遺傳學第六章病毒的遺傳分析四、噬菌體突變型的互補測驗（一）互補測驗與順反子互補測驗：確定突變基因間的功能關系。判斷兩個突變是位于同一個基因內的突變，還是兩個基因間的突變。互補：一種突變型能彌補另一種突變型不具有的功能。這兩種突變就稱為彼此互補。順式排列，反式排列。遺傳學第六章病毒的遺傳分析斑點測試法（spottest)P196

用一種rⅡ突變型以0.1的感染比（噬菌體1:細菌10）感染大腸桿菌K(λ），噬菌體和細菌在溫熱的瓊脂中混合，涂布在營養平板上，瓊脂凝固后，在平板上劃出一定位置，再在上面滴加含另一種rⅡ突變型的培養基。在這一滴培養基范圍內，一些菌被兩種噬菌體感染，如這范圍內形成噬菌斑，就證明這兩種突變型互補，相反則不互補。在一個培養基上可做6—8個斑點試驗。遺傳學第六章病毒的遺傳分析遺傳學第六章病毒的遺傳分析遺傳學第六章病毒的遺傳分析

在反式測驗中，如兩個突變之間能互補，則表明兩個突變是位于兩個基因（順反子）內的突變。如兩個突變之間不能互補，則表明兩個突變是位于同一個基因內的突變。遺傳學第六章病毒的遺傳分析順反子：一個不同突變之間沒有互補的功能區稱為順反子（cistron)。遺傳學第六章病毒的遺傳分析（二）基因內互補例外情況。如：沙門氏桿菌甘油磷酸脫氫酶基因；大腸桿菌和脈孢菌色氨酸合成酶基因；脈孢菌谷氨酸脫氫酶基因。1、基因內互補和基因間互補的區別P2002、基因內互補的作用機制P202圖8-14遺傳學第六章病毒的遺傳分析五、噬菌體T4rⅡ缺失突變與作圖（一）缺失作圖的原理

缺失突變（deletionmutation）：一個順反子內缺失一段核苷酸的突變。

點突變（pointmutation）：一個順反子內單個核苷酸發生的改變。

當同一順反子內的缺失突變和點突變重疊時，不能產生基因內重組,因此無野生型噬菌體。遺傳學第六章病毒的遺傳分析遺傳學第六章病毒的遺傳分析（二）缺失作圖的方法

利用重疊缺失定位未知的rⅡ突變：

根據是否產生野生型噬菌體，系列Ⅰ將rⅡ突變定于A5片段；系列Ⅱ將rⅡ突變定于A5c區；系列Ⅲ將其定于A5c3區。

遺傳學第六章病毒的遺傳分析遺傳學第六章病毒的遺傳分析rⅡ基因座A、B順反子的部分突變圖，每個正方形代表一個獨立分離的突變遺傳學第六章病毒的遺傳分析六、λ噬菌體的基因組與位點專一性重組（一）λ噬菌體的基因組遺傳學第六章病毒的遺傳分析(二）位點專一性重組的分子機制遺傳學第六章病毒的遺傳分析遺傳學第六章病毒