儀器分析模塊四紫外分光光度法項目一

紫外分光光度法原理01項目一紫外分光光度法原理-1·紫外分光光度法法相關術語目標掌握紫外分光光度法的相關術語0102相關標題文字紫外分光光度法相關術語1.生色團

能吸收紫外-可見光的基團叫生色團。主要為具有不飽和鍵和未成對電子的基團。

例：。

紅移

紫外分光光度法相關術語2.助色團

助色團是一種能使生色團的吸收峰向長波方向位移并增強其吸收強度的官能團，一般是含有未共享電子的雜原子基團，如—NH2、—OH、—NR2、—OR、—SH、—SR、—Cl、—Br等。這些基團中的

n電子能與生色團中的π電子相互作用(可能產生p—π共軛)，使π—π*躍遷能量降低，躍遷幾率變大。

3.紅移、藍移吸收峰位置向長波方向的移動，叫紅移。吸收峰位置向短波方向移動，叫藍移4.增色效應和減色效應——波長不變使吸收強度增加的現象稱為增色效應。使吸收強度降低的現象稱為減色效應

5吸收帶（1）R吸收帶：為n→π*躍遷。特點：a.躍遷所需能量較小，吸收峰位于200~400nm；b.吸收強度弱，ε＜102。（2）K吸收帶：為共軛雙鍵中π→π*躍遷。特點：a.躍遷所需能量較R帶大，吸收峰位于210~280nm；b.吸收強度強，ε>104。共軛體系的增長，K吸收帶長移，210~700nm，ε增大。K吸收帶是共軛分子的特征吸收帶，可用于判斷共軛結構。

(3)B吸收帶和E吸收帶—苯環帶B吸收帶：有苯環必有B帶，230-270nm之間有一系列吸收峰，中強吸收，芳香族化合物的特征吸收峰(4)E吸收帶：由苯環結構中三個乙烯的環狀共軛體系的躍遷產生的，π→π*躍遷E1=185nm，強吸收，ε>104；E2=204nm，較強吸收，ε>103。儀器分析模塊四紫外分光光度法項目二紫外分光光度法目標掌握高效液相色譜法中檢測器種類01掌握高效液相色譜中幾種檢測器的原理02相關標題文字01項目一紫外分光光度法原理-1·紫外分光光度法的特點·紫外分光光度法的相關術語紫外-可見分光光度法的原理

物質對光的選擇吸收

當一束光照射到某種物質的固態物或溶液上時，一部分光會被吸收或被反射，不同的物質對于照射它們的光束的吸收程度是不同的，對某個波長的光吸收強烈，對另外波長的光吸收很小或不吸收，我們把這種現象稱為光的選擇吸收。

一切物質都會對可見和不可見光中的某些波長的光進行吸收。

物質呈現各種各樣顏色，就是它們對可見光中某些特定波長的光線選擇吸收的結果。

吸收光

物質顏色

顏色波長(nm)

黃綠紫400~450

黃藍450~480

橙綠藍480~490

紅藍綠490~500

紫紅綠500~560

紫黃綠560~580

藍黃580~600

綠藍綠600~650

藍綠紅650~750物質顏色和吸收光顏色的關系

物質的結構決定了物質在吸收光時只能吸收某些特定波長的光。我們可以利用測量物質對某種波長的光的吸收來了解物質的結構特性。用經過分光后的不同波長的光依次透過該物質，通過測量物質對不同波長的光的吸收程度（吸光度），以波長為橫坐標，吸光度為縱坐標作圖，就可以得到該物質在測量波長范圍內的吸收曲線。這種曲線體現了物質對不同波長的光的吸收能力，稱為吸收光譜。紫外-可見分光光度法的原理

入射光透射光

不同波長光檢測器吸收光譜紫外-可見分光光度法的原理

紫外-可見分光光度法是利用物質對光的吸收光譜，對物質進行定性分析或定量分析的方法。按所吸收光的波長區域不同，分為紫外分光光度法和可見分光光度法，合稱為紫外-可見分光光度法。

0.01nm0.1nm800nm10μm500μm1cm

波長200nm400nm2.5μm25μm1m

光譜可

區域見

γ射線χ射線紫外光光紅外光微波無線電波

分析分光

方法χ射線紫外分

光度核磁共振

γ射線光譜法光譜法光光度法

法紅外光譜法微波光譜法光譜法

05二、液相色譜分離原理及分類根據分離機理可分為：（1）液－固吸附色譜法（2）液－液分配色譜法、（3）離子色譜法和凝膠色譜法。2.分類HPLCHPLCHPLC高效液相色譜法（HPLC）紫外-可見分光光度法的原理-定性分析

不同結構的物質吸收光譜也不同，這是對物質進行定性分析的基礎：通過檢測吸收光譜來比對鑒定分析物質。

波長范圍吸光度利用標準物質定性分析

在相同條件下，測定未知物的吸收光譜，與標準物的吸收光譜進行比較，如果兩吸收光譜的形狀和吸收峰的數目、位置、拐點等完全一致，就可初步判定未知物與標準物是同一種物質。紫外-可見分光光度法的原理-定量分析Lambert–Beer光吸收定律：當一束平行單色光通過均勻的樣品時，其吸光度與吸光組分的濃度、吸收池的厚度乘積成正比.入射光I0透射光ItLC紫外-可見分光光度法的原理-定